Validation of miRNAs 15-b-5p, 155-5p and 195-3p as effectors of inflammation and angiogenesis in the diabetic retina: Identification of biomarkers and new therapies (Q3203295)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3203295 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Validation of miRNAs 15-b-5p, 155-5p and 195-3p as effectors of inflammation and angiogenesis in the diabetic retina: Identification of biomarkers and new therapies |
Project Q3203295 in Spain |
Statements
33,486.75 Euro
0 references
61,500.0 Euro
0 references
54.45 percent
0 references
1 January 2017
0 references
31 March 2020
0 references
FUNDACION PARA EL FOMENTO DE LA INV. SANITARIA Y BIOMEDICA DE LA COMUNIDAD VALENCIANA (FISABIO)
0 references
Encontrar nuevos biomarcadores preclínicos y de progresión de la retinopatía en diabéticos tipo 2 (DM2) y diseñar nuevas dianas terapeúticas para prevenir la pérdida de visión y ceguera diabética. Proponemos validar los miRNAs implicados en inflamación y angiogénesis que han sido identificados en las lágrimas de pacientes diabéticos tipo 2 (DM2) con retinopatía (RD) frente a DM2 sin RD y controles, mediante extraccíón optimizada de RNA, creación de librerias, obtención de miRNAs y piRNAs y secuenciación de próxima generación (NGS). Hemos diseñado un proyecto multicéntrico observacional analítico de casos-controles para continuar los proyectos anteriores (FIS/FEDER PI13/00480 y FISABIO 2014) en 450 participantes seleccionados según los criterios de inclusión/exclusión, divididos en: 1) pacientes DM2 sin RD (n=75); 2) DM2 con RD no proliferante (RDNP) en estadio leve-moderado (n=75); 2) DM2 con RD proliferante (RDP) en estadio leve-moderado (n=75) y 4) controles (GCM; n=75). Se realizará entrevista inicial, examen oftalmológico (incluyendo agudeza visual mejor corregida (AVMC), exploración y fotografías de fondo de ojo y examen mediante tomografia optica de coherencia de dominio espectral (SD-OCT) y recolección de 30-40 microL de lágrimas del menisco lagrimal inferior mediante micropipeta que se congelará a -80ºC hasta su procesamiento. El protocolo incluye extracción de RNA, cuantificación de microRNAs mediante qRT-PCR, analisis de la expresión genética mediante qRT-PCR, y cuantificación de proteínas mediante ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA). Esperamos identificar los genes diana de los miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 y BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB y IL36G) y 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), y mediante un array de anticuerpos se cuantificarán las proteínas TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14, y VEGFC. (Spanish)
0 references
Find new preclinical biomarkers and progression of retinopathy in type 2 diabetics (DM2) and design new therapeutic targets to prevent loss of vision and diabetic blindness. We propose to validate the miRNAs involved in inflammation and angiogenesis that have been identified in tears in diabetic patients type 2 (DM2) with retinopathy (RD) versus DM2 without RD and controls, using optimised RNA extraccyon, creation of libraries, obtaining miRNAs and piRNAs and next generation sequencing (NGS). We have designed a multicenter observational analytical case-control project to continue the previous projects (FIS/FEDER PI13/00480 and FISABIO 2014) in 450 participants selected according to the inclusion/exclusion criteria, divided into: 1) DM2 patients without RD (n=75); 2) DM2 with non-proliferant RD (NPRD) in mild-moderate stage (n=75); 2) DM2 with proliferant RD (RDP) in mild-moderate stage (n=75) and 4) controls (GCM; N=75). Initial interview, ophthalmological examination (including better-corrected visual acuity (AVMC), eye background scan and photographs, and examination by spectral domain coherence optic tomografia (SD-OCT) and collection of 30-40 microL of lower lacrimal meniscus tears using micropipeta that will be frozen at -80 °C until processing will be performed. The protocol includes RNA extraction, quantification of microRNAs using qRT-PCR, analysis of genetic expression using qRT-PCR, and quantification of proteins by enzyme-linked immunoabsorption assay (ELISA). We expect to identify the target genes of miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 and BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB and IL36G) and 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), and by an array of antibodies, the proteins TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14, and VEGFC will be quantified. (English)
13 October 2021
0.762547975619423
0 references
Trouver de nouveaux biomarqueurs précliniques et la progression de la rétinopathie chez les diabétiques de type 2 (DM2) et concevoir de nouvelles cibles thérapeutiques pour prévenir la perte de vision et la cécité diabétique. Nous proposons de valider les miARN impliqués dans l’inflammation et l’angiogenèse qui ont été identifiés dans les déchirures chez les patients diabétiques de type 2 (DM2) avec rétinopathie (RD) versus DM2 sans RD et témoins, en utilisant l’extraccyon d’ARN optimisé, la création de bibliothèques, l’obtention de miRNA et piRNAs et le séquençage de nouvelle génération (NGS). Nous avons conçu un projet d’analyse de cas d’observation multicentrique pour poursuivre les projets précédents (FIS/FEDER PI13/00480 et FISABIO 2014) auprès de 450 participants sélectionnés selon les critères d’inclusion/d’exclusion, répartis en: 1) patients DM2 sans RD (n=75); 2) DM2 avec RD non proliférant (NPRD) en phase légère-modérée (n=75); 2) DM2 avec RD proliférant (RDP) en phase légère-modérée (n=75) et 4) témoins (GCM; N=75). Entrevue initiale, examen ophtalmologique (y compris l’acuité visuelle mieux corrigée (avmc), analyse de fond oculaire et photographies, et examen par tomografie optique de cohérence du domaine spectral (SD-OCT) et collecte de 30 à 40 microl de déchirures du ménisque lacrimal inférieur à l’aide d’un micropipeta qui sera congelé à -80 °C jusqu’à ce que le traitement soit effectué. Le protocole comprend l’extraction de l’ARN, la quantification des microARN à l’aide de qRT-PCR, l’analyse de l’expression génétique à l’aide du qRT-PCR et la quantification des protéines par immunoabsorption enzymatique (ELISA). Nous prévoyons identifier les gènes cibles des miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 et BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB et IL36G) et 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), et par un ensemble d’anticorps, les protéines TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 et VEGFC seront quantifiées. (French)
5 December 2021
0 references
Finden Sie neue präklinische Biomarker und Progression der Retinopathie in Typ 2 Diabetiker (DM2) und entwerfen Sie neue therapeutische Ziele, um Sehverlust und diabetische Blindheit zu verhindern. Wir schlagen vor, die miRNAs zu validieren, die an Entzündungen und Angiogenese beteiligt sind, die in Tränen bei diabetischen Patienten Typ 2 (DM2) mit Retinopathie (RD) gegen DM2 ohne RD und Kontrollen identifiziert wurden, unter Verwendung optimierter RNA Extraccyon, Erstellung von Bibliotheken, Erlangung von miRNAs und piRNAs und Sequenzierung der nächsten Generation (NGS). Zur Fortsetzung der bisherigen Projekte (FIS/FEDER PI13/00480 und FISABIO 2014) haben wir ein multizentrisches analytisches Case-Control-Projekt entwickelt, das nach den Kriterien für die Einbeziehung/Ausschluss ausgewählt wurde, unterteilt in: 1) DM2 Patienten ohne RD (n=75); 2) DM2 mit nichtproliferanter RD (NPRD) in mild-moderater Stufe (n=75); 2) DM2 mit proliferanten RD (RDP) in mild-moderater Stufe (n=75) und 4) Kontrollen (GCM; N=75). Erstes Interview, ophthalmologische Untersuchung (einschließlich besser korrigierter Sehschärfe (avmc), Augenhintergrundscan und Fotografien sowie Untersuchung durch spektrale Domänenkohärenzoptiktomografie (SD-OCT) und Sammlung von 30-40 Mikrol niedrigeren lacrimalen Meniskusrissen mit Mikropipeta, die bis zur Verarbeitung bei -80 °C eingefroren werden. Das Protokoll umfasst die RNA-Extraktion, die Quantifizierung von microRNAs mittels qRT-PCR, die Analyse der genetischen Expression mit qRT-PCR und die Quantifizierung von Proteinen durch Enzym-verbundene Immunoabsorptions-Assay (ELISA). Wir erwarten, dass die Zielgene von miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 und BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB und IL36G) und 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC) und durch eine Reihe von Antikörpern TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2L2, FGF2R, IL6R, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 und VEGFC quantifiziert werden. (German)
9 December 2021
0 references
Vind nieuwe preklinische biomarkers en progressie van retinopathie in type 2 diabetici (DM2) en ontwerp nieuwe therapeutische doelen om verlies van gezichtsvermogen en diabetische blindheid te voorkomen. We stellen voor om de miRNAs die betrokken zijn bij ontsteking en angiogenese te valideren die zijn geïdentificeerd in tranen bij diabetische patiënten type 2 (DM2) met retinopathie (RD) versus DM2 zonder RD en controles, met behulp van geoptimaliseerde RNA extraccyon, het creëren van bibliotheken, het verkrijgen van miRNAs en piRNAs en volgende generatie sequencing (NGS). We hebben een multicenter observationele analytische case-control project ontworpen om de vorige projecten voort te zetten (FIS/FEDER PI13/00480 en FISABIO 2014) bij 450 deelnemers geselecteerd volgens de inclusie/uitsluitingscriteria, verdeeld in: 1) DM2 patiënten zonder RD (n=75); 2) DM2 met non-proliferatieve RD (NPRD) in mild-matig stadium (n=75); 2) DM2 met proliferant RD (RDP) in mild-gematigde fase (n=75) en 4) controles (GCM; N=75). Eerste interview, oogheelkundig onderzoek (met inbegrip van beter gecorrigeerde gezichtsscherpte (avmc), oogachtergrondscan en foto’s, en onderzoek door spectrale domeincoherentie optische tomografia (SD-OCT) en verzameling van 30-40 microl lagere lacrimale meniscus tranen met behulp van micropipeta die zal worden bevroren bij -80 °C totdat de verwerking zal worden uitgevoerd. Het protocol omvat RNA-extractie, kwantificering van microRNA’s met behulp van qRT-PCR, analyse van genetische expressie met behulp van qRT-PCR, en kwantificering van eiwitten door enzym-gekoppelde immunoabsorptietest (ELISA). Wij verwachten om de doelgenen van miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 en BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB en IL36G) en 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC) en door een reeks antilichamen te identificeren, zullen de eiwitten TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14, en VEGFC worden gekwantificeerd. (Dutch)
17 December 2021
0 references
Trovare nuovi biomarcatori preclinici e progressione della retinopatia nei diabetici di tipo 2 (DM2) e progettare nuovi obiettivi terapeutici per prevenire la perdita della vista e la cecità diabetica. Proponiamo di convalidare i miRNA coinvolti nell'infiammazione e nell'angiogenesi che sono stati identificati nelle lacrime in pazienti diabetici di tipo 2 (DM2) con retinopatia (RD) contro DM2 senza RD e controlli, utilizzando l'estraccyon ottimizzato di RNA, la creazione di librerie, l'ottenimento di miRNAs e piRNAs e il sequenziamento di nuova generazione (NGS). Per proseguire i progetti precedenti (FIS/FEDER PI13/00480 e FISABIO 2014) abbiamo progettato un progetto analitico multicentrico di controllo dei casi per 450 partecipanti selezionati in base ai criteri di inclusione/esclusione, suddivisi in: 1) pazienti DM2 senza RD (n=75); 2) DM2 con RD non proliferazione (NPRD) in stadio lievemente moderato (n=75); 2) DM2 con proliferante RD (RDP) in fase lieve-moderata (n=75) e 4) controlli (GCM; N=75). Intervista iniziale, esame oftalmologico (inclusa una migliore correzione dell'acuità visiva (avmc), scansione oculare e fotografie, esame mediante tomografia ottica a coerenza di dominio spettrale (SD-OCT) e raccolta di 30-40 microl di lacrime di menisco lacrimale inferiori utilizzando micropipeta che sarà congelato a -80ºC fino all'esecuzione della lavorazione. Il protocollo comprende l'estrazione dell'RNA, la quantificazione di microRNA utilizzando qRT-PCR, l'analisi dell'espressione genetica con qRT-PCR e la quantificazione delle proteine mediante test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). Ci aspettiamo di identificare i geni bersaglio dei miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 e BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB e IL36G) e 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), e da una serie di anticorpi, le proteine TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 e VEGFC saranno quantificate. (Italian)
16 January 2022
0 references
Βρείτε νέους προκλινικούς βιοδείκτες και εξέλιξη της αμφιβληστροειδοπάθειας σε διαβητικούς τύπου 2 (DM2) και σχεδιάστε νέους θεραπευτικούς στόχους για την πρόληψη απώλειας όρασης και διαβητικής τύφλωσης. Προτείνουμε την επικύρωση των miRNA που εμπλέκονται σε φλεγμονή και αγγειογένεση που έχουν εντοπιστεί σε δάκρυα σε διαβητικούς ασθενείς τύπου 2 (DM2) με αμφιβληστροειδοπάθεια (RD) έναντι DM2 χωρίς RD και μάρτυρες, με τη χρήση βελτιστοποιημένου RNA extraccyon, δημιουργία βιβλιοθηκών, λήψη miRNA και piRNA και προσδιορισμό αλληλουχίας επόμενης γενιάς (NGS). Έχουμε σχεδιάσει ένα πολυκεντρικό έργο ανάλυσης παρατηρήσεων-ελέγχου περιπτώσεων για τη συνέχιση των προηγούμενων έργων (FIS/FEDER PI13/00480 και FISABIO 2014) σε 450 συμμετέχοντες που επιλέχθηκαν σύμφωνα με τα κριτήρια ένταξης/αποκλεισμού, χωρισμένα σε: 1) DM2 ασθενείς χωρίς RD (n=75) 2) DM2 με μη διαδεδομένο RD (NPRD) σε ήπιο-μέτρια στάδιο (n=75) 2) DM2 με πολλαπλασιαστικό RD (RDP) σε ήπιο-μέτρια στάδιο (n=75) και 4) ελέγχους (GCM? N=75). Αρχική συνέντευξη, οφθαλμολογική εξέταση (συμπεριλαμβανομένης της καλύτερης διόρθωσης της οπτικής οξύτητας (avmc), σάρωση και φωτογραφίες του φόντου των ματιών και εξέταση ανά φασματική συνοχή οπτικής τομογραφίας (SD-OCT) και συλλογή 30-40 μικρολίτρων κάτω δακρυϊκού μηνίσκου με τη χρήση μικροπιπέτας που θα παγώσει στους -80 °C έως ότου πραγματοποιηθεί η επεξεργασία. Το πρωτόκολλο περιλαμβάνει την εκχύλιση RNA, τον ποσοτικό προσδιορισμό των μικροRNA με τη χρήση qRT-PCR, την ανάλυση της γενετικής έκφρασης με τη χρήση qRT-PCR και τον ποσοτικό προσδιορισμό των πρωτεϊνών με ενζυμική δοκιμασία ανοσοαπορρόφησης (ELISA). Αναμένουμε να προσδιορίσουμε τα γονίδια στόχων των miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 και BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB και IL36G) και 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), και από μια σειρά αντισωμάτων, οι πρωτεΐνες TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14, και VEGFC θα ποσοτικοποιηθούν. (Greek)
18 August 2022
0 references
Find nye prækliniske biomarkører og progression af retinopati hos type 2-diabetikere (DM2) og design nye terapeutiske mål for at forhindre tab af syn og diabetisk blindhed. Vi foreslår at validere de miRNA'er, der er involveret i inflammation og angiogenese, der er blevet identificeret i tårer hos diabetiske patienter type 2 (DM2) med retinopati (RD) versus DM2 uden RD og kontrol, ved hjælp af optimeret RNA extraccyon, oprettelse af biblioteker, opnåelse af miRNA'er og piRNA'er og næste generation sekventering (NGS). Vi har designet et multicenter observationsbaseret analytisk case-kontrolprojekt til at fortsætte de tidligere projekter (FIS/FEDER PI13/00480 og FISABIO 2014) med 450 deltagere udvalgt efter inklusions-/udelukkelseskriterierne, opdelt i: 1) DM2 patienter uden RD (n=75); 2) DM2 med ikke-proliferant RD (NPRD) i mild-moderat fase (n=75); 2) DM2 med proliferant RD (RDP) i mild-moderat fase (n=75) og 4) kontroller (GCM; N=75). Indledende interview, oftalmologisk undersøgelse (herunder bedre korrigeret synsstyrke (avmc), øjenbaggrundsscanning og fotografier og undersøgelse ved hjælp af spektral domæne kohærens optisk tomografi (SD-OCT) og indsamling af 30-40 mikrol af lavere lacrimal meniscus tårer ved hjælp af mikropipeta, der vil blive frosset ved -80 °C, indtil behandlingen vil blive udført. Protokollen omfatter RNA-ekstraktion, kvantificering af mikroRNA'er ved hjælp af qRT-PCR, analyse af genetisk ekspression ved hjælp af qRT-PCR og kvantificering af proteiner ved hjælp af enzymforbundet immunabsorptionsassay (ELISA). Vi forventer at identificere målgener for miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 og BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB og IL36G) og 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC) og ved en række antistoffer, proteinerne TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 og VEGFC vil blive kvantificeret. (Danish)
18 August 2022
0 references
Etsi uusia prekliinisiä biomarkkereita ja retinopatian etenemistä tyypin 2 diabeetikoilla (DM2) ja suunnittele uusia terapeuttisia kohteita näön menetyksen ja diabeettisen sokeuden estämiseksi. Ehdotamme, että validoidaan tulehdukseen ja angiogeneesiin liittyvät miRNA:t, jotka on tunnistettu tyypin 2 diabeetikoilla (DM2) retinopatialla (RD) ja DM2: lla ilman RD:tä ja kontrollilla, käyttämällä optimoitua RNA- extraccyonia, kirjastojen luomista, miRNA- ja piRNA-arvojen saamista ja seuraavan sukupolven sekvensointia (NGS). Olemme suunnitelleet havainnointia koskevan monikeskusanalyysihankkeen aiempien hankkeiden (FIS/FEDER PI13/00480 ja FISABIO 2014) jatkamiseksi 450 osallistujassa, jotka on valittu sisällyttämis-/poissulkemisperusteiden mukaisesti ja jotka on jaettu seuraavasti: 1) DM2-potilaat, joilla ei ole RD:tä (n = 75); 2) DM2 ja non-liferant RD (NPRD) lievässä tai kohtalaisessa vaiheessa (n = 75); 2) DM2, jossa on proliferantti RD (RDP) lievässä kohtalaisessa vaiheessa (n = 75) ja 4) (GCM); N = 75). Alustava haastattelu, silmätutkimus (mukaan lukien paremmin korjattu näöntarkkuus (avmc), silmätaustan skannaus ja valokuvat sekä spektrisen verkkotunnuksen johdonmukaisuuden optisen tomografian (SD-OCT) tutkiminen) ja 30–40 mikrolinnun kerääminen alemman lacrimal meniscus -kynnelän avulla mikropipeetalla, joka jäädytetään -80 °C: ssa, kunnes käsittely suoritetaan. Protokollaan sisältyy RNA-uutto, mikroRNA:iden kvantifiointi qRT-PCR-menetelmällä, geneettisen ilmentymän analysointi qRT-PCR:n avulla ja proteiinien kvantifiointi entsyymivälitteisellä immunoabsorptiomäärityksellä (ELISA). MRNA:n 15-b-5p:n (TGFBR3, SOCS6 ja BCL2L2), 155–5p:n (FGF2, IL6R, IL17RB ja IL36G) ja 195–3p:n (GFG9, GFG14, VEGFC) kohdegeenit sekä vasta-aineiden valikoima, proteiinit TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 ja VEGFC määritetään määrällisesti. (Finnish)
18 August 2022
0 references
Sib bijomarkaturi ġodda ta’ qabel l-użu kliniku u progressjoni ta’ retinopatija f’dijabetiċi ta’ tip 2 (DM2) u disinn ta’ miri terapewtiċi ġodda biex jiġi evitat it-telf tal-vista u għama dijabetika. Aħna nipproponu li tivvalida l-miRNAs involuti fl-infjammazzjoni u l-anġjoġenesi li ġew identifikati fid-dmugħ f’pazjenti dijabetiċi tat-tip 2 (DM2) bir-retinopatija (RD) kontra DM2 mingħajr RD u kontrolli, bl-użu ta’ extraccyon tal-RNA ottimizzat, il-ħolqien ta’ libreriji, il-kisba ta’ miRNAs u piRNAs u s-sekwenzar tal-ġenerazzjoni li jmiss (NGS). Aħna ddisinjajna proġett ta’ kontroll tal-każijiet analitiku ta’ osservazzjoni multiċentriku biex inkomplu l-proġetti preċedenti (FIS/FEDER PI13/00480 u FISABIO 2014) f’450 parteċipant magħżula skont il-kriterji ta’ inklużjoni/esklużjoni, maqsuma fi: 1) pazjenti b’DM2 mingħajr RD (n=75); 2) DM2 b’RD mhux proliferant (NPRD) fi stadju ħafif moderat (n=75); 2) DM2 b’RD proliferant (RDP) fi stadju ħafif moderat (n=75) u 4) kontrolli (GCM; N=75). Intervista inizjali, eżami oftalmoloġiku (inkluż akutezza viżiva kkoreġuta aħjar (avmc), skan tal-isfond tal-għajnejn u ritratti, u eżami minn tomografia ottika koerenza tad-dominju spettrali (SD-OCT) u ġbir ta’ 30–40 mikrol ta’ tiċrit lacrimal meniscus aktar baxx bl-użu ta’ mikropipeta li se tiġi ffriżata f’temperatura ta’ -80 °C sakemm isir l-ipproċessar. Il-protokoll jinkludi l-estrazzjoni tal-RNA, il-kwantifikazzjoni tal-mikroRNAs bl-użu ta’ qRT-PCR, l-analiżi tal-espressjoni ġenetika bl-użu ta’ qRT-PCR, u l-kwantifikazzjoni tal-proteini permezz tal-assaġġ tal-immunoassorbiment marbut mal-enzima (ELISA). Aħna nistennew li nidentifikaw il-ġeni fil-mira ta’ miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 u BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB u IL36G) u 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC), u minn firxa ta’ antikorpi, il-proteini TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14, u VEGFC se jiġu kkwantifikati. (Maltese)
18 August 2022
0 references
Atrodiet jaunus preklīniskos biomarķierus un retinopātijas progresēšanu 2. tipa diabēta slimniekiem (DM2) un izstrādājiet jaunus terapeitiskos mērķus, lai novērstu redzes zudumu un diabēta aklumu. Mēs ierosinām validēt miRNS, kas iesaistītas iekaisuma un angioģenēzes procesā un kas konstatētas asarās 2. tipa diabēta pacientiem (DM2) ar retinopātiju (RD) pret DM2 bez RD un kontroles, izmantojot optimizētu RNS ekstrakjonu, bibliotēku izveidi, miRNS un piRNS iegūšanu un nākamās paaudzes sekvencēšanu (NGS). Esam izstrādājuši daudzcentru novērošanas analītisko gadījumu kontroles projektu, lai turpinātu iepriekšējos projektus (FIS/FEDER PI13/00480 un FISABIO 2014) 450 dalībniekiem, kas atlasīti pēc iekļaušanas/izslēgšanas kritērijiem un iedalīti: 1) DM2 pacientiem bez RD (n=75); 2) DM2 ar neproliferējošu RD (NPRD) mērenā posmā (n=75); 2) DM2 ar proliferējošu RD (RDP) vieglas un mērenas stadijas (n=75) un 4) kontrolē (GCM; N=75). Sākotnējā intervija, oftalmoloģiskā izmeklēšana (ieskaitot labāk koriģētu redzes asumu (avmc), acu fona skenēšana un fotogrāfijas, kā arī spektrālā domēna koherence optiskā tomografija (SD-OCT)) un 30–40 mikrol apakšējo asaru asaru savākšana, izmantojot mikropipetu, ko sasaldēs -80 °C temperatūrā, līdz tiks veikta apstrāde. Protokolā iekļauta RNS ekstrakcija, mikroRNS noteikšana, izmantojot qRT-PCR, ģenētiskās ekspresijas analīze, izmantojot qRT-PCR, un olbaltumvielu kvantitatīva noteikšana ar enzīmu imūnabsorbcijas testu (ELISA). Mēs plānojam noteikt mērķa gēnus miRNS 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 un BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB un IL36G) un 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC), kā arī, izmantojot antivielu kopumu, tiks kvantitatīvi noteiktas olbaltumvielas TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 un VEGFC. (Latvian)
18 August 2022
0 references
Nájdite nové predklinické biomarkery a progresiu retinopatie u diabetikov 2. typu (DM2) a navrhnite nové terapeutické ciele na prevenciu straty zraku a diabetickej slepoty. Navrhujeme validovať miRNA podieľajúce sa na zápale a angiogenéze, ktoré boli identifikované v slzách u diabetických pacientov typu 2 (DM2) s retinopatiou (RD) verzus DM2 bez RD a kontrol, pomocou optimalizovaného extrakcyónu RNA, vytvárania knižníc, získavania miRNA a piRNA a sekvenovania ďalšej generácie (NGS). Navrhli sme multicentrický pozorovací analytický projekt kontroly prípadov s cieľom pokračovať v predchádzajúcich projektoch (FIS/FEDER PI13/00480 a FISABIO 2014) u 450 účastníkov vybraných podľa kritérií začlenenia/vylúčenia, rozdelených na: 1) pacienti s DM2 bez RD (n = 75); 2) DM2 s neproliferantnou RD (NPRD) v miernom a strednom štádiu (n = 75); 2) DM2 s proliferantným RD (PRV) v miernom a strednom štádiu (n = 75) a 4) kontroly (GCM; N = 75). Úvodný rozhovor, oftalmologické vyšetrenie (vrátane lepšie korigovanej zrakovej ostrosti (avmc), skenovanie oka na pozadí a fotografie a vyšetrenie spektrálnou doménou koherentnosti optic tomografia (SD-OCT) a zber 30 – 40 mikrol nižších slz slzného laku pomocou mikropipety, ktoré budú zmrazené pri teplote -80 °C až do spracovania. Protokol zahŕňa extrakciu RNA, kvantifikáciu mikroRNA pomocou qRT-PCR, analýzu genetickej expresie pomocou qRT-PCR a kvantifikáciu proteínov enzýmovým imunoabsorpčným testom (ELISA). Očakávame identifikáciu cieľových génov miRNA 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 a BCL2L2), 155 – 5p (FGF2, IL6R, IL17RB a IL36G) a 195 – 3p (GFG9, GFG14, VEGFC) a pomocou súboru protilátok sa vyčíslia proteíny TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 a VEGFC. (Slovak)
18 August 2022
0 references
Faigh bithmharcóirí réamhchliniciúla nua agus dul chun cinn retinopathy i gcineál 2 diaibéitis (DM2) agus spriocanna teiripeacha nua a dhearadh chun cailliúint radhairc agus daille diaibéitis a chosc. Molaimid bailíochtú a dhéanamh ar na miRNAs a bhaineann le hathlasadh agus angiogenesis a sainaithníodh i ndeora i gcineálacha othar diaibéitis 2 (DM2) le retinopathy (RD) i gcoinne DM2 gan RD agus rialuithe, ag baint úsáide as extraccyon RNA optamaithe, leabharlanna a chruthú, miRNAs agus piRNAs a fháil agus seicheamhú na chéad ghlúine eile (NGS). Tá tionscadal anailíseach anailíseach anailíseach il-fhaireach ceaptha againn chun leanúint leis na tionscadail a bhí ann roimhe seo (FIS/FEDER PI13/00480 agus FISABIO 2014) in 450 rannpháirtí a roghnaíodh de réir na gcritéar maidir le cuimsiú/eisiamh, agus iad roinnte sna critéir seo a leanas: 1) DM2 othair gan RD (n = 75); 2) DM2 le RD neamh-proliferant (NPRD) i gcéim éadrom measartha (n=75); 2) DM2 ag a bhfuil rialuithe RD proliferant (RDP) i gcéimeanna measartha éadrom (n=75) agus 4) (GCM; N=75). Agallamh tosaigh, scrúdú otailmeolaíoch (lena n-áirítear géire radhairc níos ceartaithe (avmc), scanadh súl agus grianghraif, agus scrúdú trí thomógrafaíocht optach an fhearainn speictrigh (SD-OCT) agus trí bhailiú 30-40 micreal deora meniscus lacrimal níos ísle ag baint úsáide as micreaphaipéa a reoitear ag -80 °C go dtí go ndéanfar an phróiseáil. Áirítear sa phrótacal eastóscadh RNA, cainníochtú micreaRNAnna a úsáideann qRT-PCR, anailís ar léiriú géiniteach ag baint úsáide as qRT-PCR, agus cainníochtú próitéiní trí mheasúnacht imdhíon-ionsaithe atá nasctha le heinsímí (ELISA). Táimid ag súil go n-aithneofar spriocghéinte miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 agus BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB agus IL36G) agus 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), agus trí réimse antasubstaintí, déanfar na próitéiní TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14, agus VEGFC a chainníochtú. (Irish)
18 August 2022
0 references
Najděte nové preklinické biomarkery a progresi retinopatie u diabetiků typu 2 (DM2) a navrhněte nové terapeutické cíle, aby se zabránilo ztrátě zraku a diabetické slepotě. Navrhujeme validaci miRNA zapojených do zánětu a angiogeneze, které byly identifikovány v slzách u diabetických pacientů typu 2 (DM2) s retinopatie (RD) versus DM2 bez RD a kontrol, pomocí optimalizovaného extraccyonu RNA, vytváření knihoven, získávání miRNA a piRNA a sekvenování nové generace (NGS). Navrhli jsme multicentrický pozorovací analytický případový projekt pro pokračování předchozích projektů (FIS/FEDER PI13/00480 a FISABIO 2014) u 450 účastníků vybraných podle kritérií zařazení/vyloučení, rozdělených na: 1) DM2 pacienti bez RD (n=75); 2) DM2 s proliferant RD (NPRD) v mírném středním stádiu (n=75); 2) DM2 s proliferant RD (RDP) v mírně střední fázi (n=75) a 4) kontrol (GCM; N=75). Úvodní rozhovor, oftalmologické vyšetření (včetně lépe korigované zrakové ostrosti (avmc), oční pozadí a fotografie a vyšetření pomocí spektrální domény koherentní optická tomografia (SD-OCT) a sbírka 30–40 mikrol dolní slzy slz slzného slzného meniskusu pomocí mikropipety, která bude zmrazena při teplotě -80 °C až do provedení zpracování. Protokol zahrnuje extrakci RNA, kvantifikaci mikroRNA pomocí qRT-PCR, analýzu genetické exprese pomocí qRT-PCR a kvantifikaci proteinů enzymově vázaným imunoabsorpčním testem (ELISA). Očekáváme, že identifikujeme cílové geny miRNA 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 a BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB a IL36G) a 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC) a pomocí řady protilátek budou kvantifikovány proteiny TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 a VEGFC. (Czech)
18 August 2022
0 references
Encontrar novos biomarcadores pré-clínicos e progressão da retinopatia em diabéticos tipo 2 (DM2) e desenhar novos alvos terapêuticos para prevenir a perda de visão e cegueira diabética. Propomo-nos a validar os miRNAs envolvidos na inflamação e angiogénese que foram identificados em lágrimas em pacientes diabéticos tipo 2 (DM2) com retinopatia (RD) versus DM2 sem RD e controles, usando extraccyon RNA otimizado, criação de bibliotecas, obtenção de miRNAs e piRNAs e sequenciamento de próxima geração (NGS). Concebemos um projeto de análise de caso-controlo observacional multicêntrico para dar continuidade aos projetos anteriores (FIS/FEDER PI13/00480 e FISABIO 2014) em 450 participantes selecionados de acordo com os critérios de inclusão/exclusão, divididos em: 1) Doentes DM2 sem DR (n=75); 2) DM2 com DR não-proliferante (DRNP) em estádio ligeiro-moderado (n=75); 2) DM2 com proliferant RD (RDP) em fase leve-moderada (n=75) e 4) controlos (GCM; N=75). Entrevista inicial, exame oftalmológico (incluindo melhor correção da acuidade visual (AVMC), exame de fundo ocular e fotografias, exame por tomografia ótica de coerência de domínio espetral (SD-OCT) e recolha de 30-40 microL de lágrimas de menisco lacrimal inferior utilizando micropipetas que serão congeladas a -80 °C até à realização do processamento. O protocolo inclui a extracção do RNA, a quantificação de microRNAs usando qRT-PCR, a análise da expressão genética usando qRT-PCR, e a quantificação das proteínas pelo ensaio enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA). Espera-se identificar os genes-alvo dos miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 e BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB e IL36G) e 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), e por uma série de anticorpos, serão quantificadas as proteínas TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 e VEGFC. (Portuguese)
18 August 2022
0 references
Leidke uued prekliinilised biomarkerid ja retinopaatia progresseerumine 2. tüüpi diabeetikutes (DM2) ning kavandage uued ravieesmärgid, et vältida nägemise kadu ja diabeetilist pimedust. Teeme ettepaneku valideerida põletikus ja angiogeneesis osalevad miRNA-d, mis on tuvastatud retinopaatiaga diabeediga patsientidel (DM2) retinopaatiaga (RD) võrreldes DM2-ga, kasutades optimeeritud RNA ekstraktsüooni, raamatukogude loomist, miRNA-de ja piRNAde saamist ning järgmise põlvkonna sekveneerimist (NGS). Oleme kavandanud mitmekeskuselise analüütilise juhtumikontrolli projekti, et jätkata varasemaid projekte (FIS/FEDER PI13/00480 ja FISABIO 2014) 450 osalejas, kes on valitud vastavalt kaasamise/kõrvaldamise kriteeriumidele, jagatuna järgmiselt: 1) DM2-patsientidel, kellel puudus harvikhaigus (n=75); 2) DM2 koos mitteproliferantsete harvikhaigustega (NPRD) kerges mõõdukas staadiumis (n=75); 2) DM2 koos proliferant RD (RDP) kerge mõõdukas staadiumis (n = 75) ja 4) kontrollid (GCM; N = 75). Esialgne intervjuu, oftalmoloogiline uuring (sh paremini korrigeeritud nägemisteravus (avmc), silmade taustauuring ja fotod, spektraalse domeeni sidususe optiline tomografia (SD-OCT) ja 30–40 mikroliitri alumine pisaraid, kasutades mikropipetat, mis külmutatakse temperatuuril -80 °C, kuni töötlemine toimub. Uuringuplaan hõlmab RNA ekstraheerimist, mikroRNAde kvantifitseerimist qRT-PCRi abil, geneetilise ekspressiooni analüüsi qRT-PCRi abil ja valkude kvantifitseerimist ensüümiga seotud immunoabsorptsioonikatse (ELISA) abil. Me eeldame miRNAde 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 ja BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB ja IL36G) ja 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC) sihtgeene ning antikehade hulga abil kvantifitseeritakse valke TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 ja VEGFC. (Estonian)
18 August 2022
0 references
Keresse meg az új preklinikai biomarkereket és a retinopátia progresszióját a 2-es típusú cukorbetegeknél (DM2) és új terápiás célokat tervezzen a látásvesztés és a diabéteszes vakság megelőzése érdekében. Javasoljuk a gyulladásban és angiogenezisben részt vevő miRNS-ek validálását, amelyeket 2-es típusú diabéteszes betegeknél (DM2) azonosítottak retinopátiával (RD) és DM2-vel szemben RD és kontrollok nélkül, optimalizált RNS extraccyon alkalmazásával, könyvtárak létrehozásával, miRNS-ek és piRNS-ek begyűjtésével és következő generációs szekvenálással (NGS). A korábbi projektek (FIS/FEDER PI13/00480 és FISABIO 2014) folytatásához egy többközpontú megfigyelési eset-ellenőrzési projektet terveztünk 450 résztvevőnél, akiket a befogadási/kizárási kritériumok alapján választottak ki, az alábbiak szerint: 1) DM2 betegek RD nélkül (n=75); 2) DM2 nem proliferatív RD-vel (NPRD) enyhe mérsékelt stádiumban (n=75); 2) DM2 proliferatív RD (RDP) enyhe közepes fokozatú (n=75) és 4) kontrollokkal (GCM; N=75). Első interjú, szemészeti vizsgálat (beleértve a látásélességet (avmc), a szem háttérképét és a fényképeket, valamint a spektrális tartományi koherencia optikus tomografiával (SD-OCT) végzett vizsgálatot és 30–40 mikrol alsó lacrimális meniszkusz könnyek gyűjtését mikropipetával, amelyet -80 °C-on fagyasztanak a feldolgozásig. A protokoll magában foglalja az RNS extrakciót, a mikroRNS-ek mennyiségi meghatározását qRT-PCR alkalmazásával, a genetikai expresszió elemzését qRT-PCR-rel, valamint a fehérjék mennyiségi meghatározását enzimhez kötött immunabszorpciós vizsgálattal (ELISA). Arra számítunk, hogy azonosítjuk a miRNS 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 és BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB és IL36G) és 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC) célgénjeit, és egy sor antitest, a TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 és VEGFC fehérjéket számszerűsítjük. (Hungarian)
18 August 2022
0 references
Намерете нови предклинични биомаркери и прогресия на ретинопатия при диабет тип 2 (DM2) и проектирайте нови терапевтични цели, за да предотвратите загуба на зрение и диабетна слепота. Предлагаме да се валидират miRNAs, участващи във възпаление и ангиогенеза, които са били идентифицирани в сълзи при пациенти с диабет тип 2 (DM2) с ретинопатия (RD) срещу DM2 без РЗ и контроли, като се използва оптимизиран екстракцион на РНК, създаване на библиотеки, получаване на miRNAs и piRNAs и следващо поколение секвениране (NGS). Разработихме многоцентров аналитичен проект за контрол на случаите с цел продължаване на предишните проекти (FIS/FEDER PI13/00480 и FISABIO 2014) в 450 участници, избрани по критериите за включване/изключване, разделени на: 1) DM2 пациенти без РЗ (n=75); 2) DM2 с непролиферантни РЗ (NPRD) в умерено-умерен стадий (n=75); 2) DM2 с пролифериращи РЗ (ПРСР) в умерено-умерен етап (n=75) и 4) контроли (GCM; N=75). Първоначално интервю, офталмологичен преглед (включително по-добре коригирана зрителна острота (avmc), сканиране на фона на очите и снимки, изследване чрез спектрална област кохерентна томография (SD-OCT) и събиране на 30—40 микролитра долни слъзнични менискусни сълзи с помощта на микропипета, която ще бъде замразена при -80 °C до извършването на обработката. Протоколът включва екстракция на РНК, количествено определяне на микроРНК чрез използване на qRT-PCR, анализ на генетичната експресия с използване на qRT-PCR и количествено определяне на протеините чрез ензимно-свързан имуноабсорбционен анализ (ELISA). Очакваме да бъдат определени целевите гени на miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 и BCL2L2), 155—5p (FGF2, IL6R, IL17RB и IL36G) и 195—3p (GFG9, GFG14, VEGFC), както и чрез редица антитела, протеините TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 и VEGFC ще бъдат количествено определени. (Bulgarian)
18 August 2022
0 references
Raskite naujus ikiklinikinius biologinius žymenis ir retinopatijos progresavimą 2 tipo diabetu sergantiems pacientams (DM2) ir sukurkite naujus terapinius tikslus, kad išvengtumėte regėjimo praradimo ir diabetinio aklumo. Siūlome patvirtinti uždegimą ir angiogenezę sergančius miRNR, kurie buvo nustatyti 2 tipo cukriniu diabetu sergantiems pacientams, sergantiems retinopatija (RD), palyginti su DM2 be RL ir kontrolės, naudojant optimizuotą RNR ekstrakciją, bibliotekų kūrimą, miRNR ir piRNR gavimą ir naujos kartos seką (NGS). Mes sukūrėme daugiacentrį stebėjimo analitinį atvejų kontrolės projektą, kad galėtume tęsti ankstesnius projektus (FIS/FEDER PI13/00480 ir FISABIO 2014) 450 dalyvių, atrinktų pagal įtraukimo/neįtraukimo kriterijus, suskirstyti į: 1) DM2 pacientai be RL (n = 75); 2) DM2 su neproliferantine RD (NPRD) lengvo vidutinio sunkumo stadijos (n = 75); 2) DM2 su proliferantine RL (RDP) lengvo vidutinio sunkumo stadijos (n = 75) ir 4) kontroliniais (GCM; N = 75). Pradinis pokalbis, oftalmologinis tyrimas (įskaitant geriau pakoreguotą regos aštrumą (avmc), akių fono skenavimą ir nuotraukas, spektrinės srities optinės tomografijos (SD-OCT) tyrimas ir 30–40 mikrol ašarinių menisko ašarų rinkimas naudojant mikropipetą, kuris bus užšaldytas -80 °C temperatūroje, kol bus atliktas apdorojimas. Protokolas apima RNR ekstrahavimą, mikroRNR kiekybinį nustatymą naudojant qRT-PGR, genetinės ekspresijos analizę naudojant qRT-PGR ir baltymų kiekybinį nustatymą fermentais susietu imunoabsorbcijos tyrimu (ELISA). Mes tikimės nustatyti tikslinius genus miRNRs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 ir BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB ir IL36G) ir 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC) ir įvairių antikūnų, baltymai TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 ir VEGFC bus kiekybiškai įvertinti. (Lithuanian)
18 August 2022
0 references
Pronađite nove pretkliničke biomarkere i progresiju retinopatije kod dijabetičara tipa 2 (DM2) i osmislite nove terapijske ciljeve kako bi se spriječio gubitak vida i dijabetička sljepoća. Predlažemo da se potvrde miRNA-ovi uključeni u upalu i angiogenezu koji su identificirani u suzama kod dijabetičara tipa 2 (DM2) s retinopatijom (RD) naspram DM2 bez RD-a i kontrola, koristeći optimizirani RNK ekstraccyon, stvaranje knjižnica, dobivanje miRNA-a i piRNA-a te sekvenciranje sljedeće generacije (NGS). Osmislili smo multicentrični opservacijski analitički analitički projekt kontrole slučaja kako bismo nastavili prethodne projekte (FIS/FEDER PI13/00480 i FISABIO 2014) u 450 sudionika odabranih prema kriterijima uključivanja/isključivanja, podijeljenih na: 1) DM2 bolesnika bez RD-a (n=75); 2) DM2 s neproliferantskim RD-om (NPRD) u blago umjerenoj fazi (n=75); 2) DM2 s proliferantnim RD-om (RDP) u blago umjerenoj fazi (n=75) i 4) kontrolama (GCM; N = 75). Inicijalni intervju, oftalmološki pregled (uključujući bolje korigiranu oštrinu vida (avmc), skeniranje i fotografije pozadine očiju te pregled optičke tomografije spektralne domene (SD-OCT) i prikupljanje 30 – 40 mikrol suza donjih suza lakih meniskusa pomoću mikropipete koje će biti zamrznute na -80 °C do obrade. Protokol uključuje ekstrakciju RNK, kvantifikaciju mikroRNA primjenom qRT-PCR-a, analizu genetske ekspresije primjenom qRT-PCR-a i kvantifikaciju proteina pomoću enzimskog imunoapsorpcijskog testa (ELISA). Očekujemo da ćemo identificirati ciljne gene miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 i BCL2L2), 155 – 5p (FGF2, IL6R, IL17RB i IL36G) i 195 – 3p (GFG9, GFG14, VEGFC), te nizom protutijela, proteini TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 i VEGFC bit će kvantificirani. (Croatian)
18 August 2022
0 references
Hitta nya prekliniska biomarkörer och progression av retinopati i typ 2-diabetiker (DM2) och utforma nya terapeutiska mål för att förhindra synförlust och diabetisk blindhet. Vi föreslår att man validerar de miRNA som är involverade i inflammation och angiogenes som har identifierats i tårar hos diabetespatienter typ 2 (DM2) med retinopati (RD) jämfört med DM2 utan RD och kontroller, med hjälp av optimerad RNA extraccyon, skapande av bibliotek, erhållande av miRNAs och piRNAs och nästa generations sekvensering (NGS). Vi har utformat ett flercenterprojekt för observationsanalys för att fortsätta de tidigare projekten (FIS/FEDER PI13/00480 och FISABIO 2014) på 450 deltagare som valts ut enligt kriterierna för inkludering/uteslutning, indelade i: 1) DM2 patienter utan RD (n=75); 2) DM2 med icke-proliferant RD (NPRD) i milt måttligt stadium (n=75). 2) DM2 med proliferant RD (RDP) i milt måttligt stadium (n=75) och 4) kontroller (GCM; N=75). Inledande intervju, oftalmologisk undersökning (inklusive bättre korrigerad synskärpa (avmc), ögonbakgrundsskanning och fotografier, och undersökning av spektral domänkoherensoptisk tomografia (SD-OCT) och insamling av 30–40 mikrol lägre lacrimal meniscus tårar med hjälp av mikropipeta som kommer att frysas vid -80 °C tills bearbetningen kommer att utföras. Protokollet omfattar RNA-extraktion, kvantifiering av mikroRNA med hjälp av qRT-PCR, analys av genetiskt uttryck med hjälp av qRT-PCR och kvantifiering av proteiner genom enzymkopplat immunoabsorptionstest (ELISA). Vi förväntar oss att identifiera målgeneren för miRNA 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 och BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB och IL36G) och 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC), och genom en matris av antikroppar kommer proteinerna TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 och VEGFC att kvantifieras. (Swedish)
18 August 2022
0 references
Găsiți noi biomarkeri preclinici și progresia retinopatiei la diabetici de tip 2 (DM2) și proiectați noi ținte terapeutice pentru a preveni pierderea vederii și orbirea diabetică. Propunem validarea miRNA implicate în inflamație și angiogeneză care au fost identificate în lacrimi la pacienții diabetici de tip 2 (DM2) cu retinopatie (RD) față de DM2 fără RD și controale, folosind extraccyon ARN optimizat, crearea de biblioteci, obținerea miRNA și piRNA și secvențierea de generație următoare (NGS). Am conceput un proiect de analiză a cazurilor de observație multicentric pentru a continua proiectele anterioare (FIS/FEDER PI13/00480 și FISABIO 2014) în 450 de participanți selectați în conformitate cu criteriile de includere/excludere, împărțite în: 1) pacienți cu DM2 fără RD (n=75); 2) DM2 cu BR non-proliferant (NPRD) în stadiu moderat-moderat (n=75); 2) DM2 cu RD proliferant (RDP) în stadii ușoare-moderate (n=75) și 4) martori (GCM; N=75). Interviu inițial, examen oftalmologic [inclusiv acuitate vizuală mai bine corectată (avmc), scanarea fundalului ochilor și fotografii, precum și examinarea prin tomografia optică de coerență a domeniului spectral (SD-OCT) și colectarea a 30-40 microl de lacrimi de menisc lacrimal inferior utilizând micropipeta care va fi congelată la -80 °C până la efectuarea prelucrării. Protocolul include extracția ARN, cuantificarea microRNA utilizând qRT-PCR, analiza expresiei genetice utilizând qRT-PCR și cuantificarea proteinelor prin testul imunoabsorbției enzimatice (ELISA). Ne așteptăm să identificăm genele țintă ale miRNA 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 și BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB și IL36G) și 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC) și printr-o serie de anticorpi, proteinele TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 și VEGFC vor fi cuantificate. (Romanian)
18 August 2022
0 references
Poiščite nove predklinične biomarkerje in napredovanje retinopatije pri diabetiki tipa 2 (DM2) ter oblikujete nove terapevtske cilje za preprečevanje izgube vida in diabetične slepote. Predlagamo potrditev miRNA, ki sodelujejo pri vnetju in angiogenezi, ki so bile ugotovljene v solzah pri bolnikih s sladkorno boleznijo tipa 2 (DM2) z retinopatijo (RD) v primerjavi z DM2 brez RD in kontrol, uporabo optimizirane RNK ekstraccyon, ustvarjanje knjižnic, pridobivanje miRNAs in piRNAs in naslednjo generacijo zaporedja (NGS). Za nadaljevanje prejšnjih projektov (FIS/FEDER PI13/00480 in FISABIO 2014) smo zasnovali multicentrični analitični projekt za analizo primerov opazovanja (FIS/FEDER PI13/00480 in FISABIO 2014) s 450 udeleženci, izbranimi v skladu z merili za vključitev/izključitev, razdeljeni na: 1) bolniki z DM2 brez RD (n = 75); 2) DM2 z neproliferantnim RD (NPRD) v blagi fazi (n = 75); 2) DM2 s proliferantom RD (RDP) v blagem zmernem stadiju (n = 75) in 4) kontrolami (GCM; N = 75). Začetni intervju, oftalmološki pregled (vključno z boljšo korigirano ostrino vida (avmc), skeniranje ozadja oči in fotografije ter pregled optične tomografije spektralne domene (SD-OCT) in zbiranje 30–40 mikrol spodnjih solz lakrimalnega meniskusa z uporabo mikropipete, ki se bo zamrznila pri -80 °C, dokler ne bo opravljena obdelava. Protokol vključuje ekstrakcijo RNK, količinsko opredelitev mikroRNA z uporabo qRT-PCR, analizo genskega izražanja z uporabo qRT-PCR in kvantifikacijo beljakovin z encimskim imunoabsorpcijskim testom (ELISA). Pričakujemo, da bomo identificirali ciljne gene miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 in BCL2L2), 155–5p (FGF2, IL6R, IL17RB in IL36G) in 195–3p (GFG9, GFG14, VEGFC) in s paleto protiteles, beljakovine TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 in VEGFC bodo količinsko opredeljene. (Slovenian)
18 August 2022
0 references
Znajdź nowe przedkliniczne biomarkery i postęp retinopatii u diabetyków typu 2 (DM2) i zaprojektuj nowe cele terapeutyczne, aby zapobiec utracie wzroku i ślepoty cukrzycowej. Proponujemy walidację miRNA zaangażowanych w stan zapalny i angiogenezę, które zostały zidentyfikowane we łzach u pacjentów z cukrzycą typu 2 (DM2) z retinopatią (RD) w porównaniu z DM2 bez RD i kontroli, przy użyciu zoptymalizowanego ekstrakcyonu RNA, tworzenia bibliotek, uzyskiwania miRNA i piRNA oraz sekwencjonowania nowej generacji (NGS). W celu kontynuacji poprzednich projektów (FIS/FEDER PI13/00480 i FISABIO 2014) zaprojektowaliśmy wieloośrodkowy projekt analityczny-kontrola przypadku w 450 wybranych według kryteriów włączenia/wykluczenia, podzielonych na: 1) Pacjenci DM2 bez RD (n=75); 2) DM2 z niezabezpieczonymi RD (NPRD) w fazie łagodnej i umiarkowanej (n=75); 2) DM2 z rozmnożeniowym RD (RDP) w fazie łagodnej i umiarkowanej (n=75) i 4) kontroli (GCM; N=75). Wywiad wstępny, badanie okulistyczne (w tym lepiej skorygowana ostrość widzenia (avmc), skanowanie tła oczu i zdjęcia oraz badanie metodą tomografii optycznej widmowej domeny (SD-OCT) oraz zbieranie 30-40 mikrol łzowych łz łzowych łzowych łzowych łzawiących łza przy użyciu mikropipety, które będą zamrożone w temperaturze -80 °C do czasu przeprowadzenia przetwarzania. Protokół obejmuje ekstrakcję RNA, oznaczanie ilościowe mikroRNA przy użyciu qRT-PCR, analizę ekspresji genetycznej przy użyciu qRT-PCR oraz oznaczanie ilościowe białek za pomocą testu immunoabsorpcji połączonego enzymem (ELISA). Oczekujemy identyfikacji genów docelowych miRNAs 15-b-5p (TGFBR3, SOCS6 i BCL2L2), 155-5p (FGF2, IL6R, IL17RB i IL36G) i 195-3p (GFG9, GFG14, VEGFC), a także przez tablicę przeciwciał, białka TGFBR3, SOCS6, BCL2L2, FGF2, IL6R, IL17RB, IL17RB, IL36G, FGF9, FGF14 i VEGFC. (Polish)
18 August 2022
0 references
Valencia
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
PI16_00797
0 references