Potential of in vivo gene editing using CRISPR/Cas for the treatment and modeling of Primary Hiperoxaluria. (Q3202009)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3202009 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Potential of in vivo gene editing using CRISPR/Cas for the treatment and modeling of Primary Hiperoxaluria. |
Project Q3202009 in Spain |
Statements
36,209.25 Euro
0 references
66,500.0 Euro
0 references
54.45 percent
0 references
1 January 2017
0 references
31 March 2020
0 references
FUNDACION PARA LA INVESTIGACION MEDICA APLICADA
0 references
La hiperoxaluria primaria de tipo I (PH1) es un trastorno poco frecuente del metabolismo del glioxilato, causado por mutaciones en la enzima AGT, que resulta en una síntesis excesiva de oxalato. La finalidad de este proyecto es evaluar el potencial de la edición génica mediante CRISPR/Cas para el desarrollo de estrategias terapéuticas innovadoras frente a PH1, y la generación de modelos celulares relevantes que cubran las deficiencias que presentan los actuales. Los objetivos concretos son: 1) Generar modelos de PH1 in vitro mediante edición génica. Para ello proponemos utilizar células hepáticas quasi-primarias (hepatocitos upcyte®) para introducir mutaciones representativas de cada fenotipo de PH1 mediante edición génica con CRISPR/Cas. Estas células pueden ser una herramienta útil para evaluar pequeñas moléculas como nuevos tratamientos frente a PH1. 2) Demostrar la eficacia de la edición génica in vivo como tratamiento de PH1 en un modelo animal. Proponemos dos aproximaciones: La primera basada en inhibir mediante CRISPR/Cas las principales fuentes de glioxilato y así reducir la producción de oxalato (reducción de sustrato). La segunda basada en recuperar la actividad del enzima AGT mediante edición génica in vivo (reemplazo enzimático). 3) Evaluar la eficacia del trasplante de hepatocitos upcyte® corregidos en un modelo animal de PH1. Proponemos generar mediante edición génica in vivo un modelo de PH1 en un background inmuno-deficiente que nos permita evaluar la eficacia de estrategias de terapia celular utilizando células humanas editadas. Este proyecto puede suponer un avance en el tratamiento de esta enfermedad, donde los tratamientos disponibles actualmente son escasos. (Spanish)
0 references
Primary hyperoxaluria type I (PH1) is a rare disorder of glycoxylate metabolism, caused by mutations in the TFA enzyme, resulting in excessive oxalate synthesis. The purpose of this project is to evaluate the potential of gene editing using CRISPR/Cas for the development of innovative therapeutic strategies against PH1, and the generation of relevant cell models that cover the deficiencies present in current ones. The specific objectives are to: 1) Generate in vitro PH1 models by gene editing. For this we propose using quasi-primary liver cells (upcyte hepatocytes) to introduce representative mutations of each PH1 phenotype by gene editing with CRISPR/Cas. These cells can be a useful tool for evaluating small molecules as new treatments versus PH1. 2) Demonstrate the efficacy of in vivo gene editing as PH1 treatment in an animal model. We propose two approaches: The first is based on inhibiting the main sources of glycoxylate by CRISPR/Cas and thus reducing the production of oxalate (substrate reduction). The second is based on recovering the activity of the TFA enzyme by in vivo gene editing (enzymatic replacement). 3) Assess the effectiveness of corrected upcyte® hepatocyte transplantation in an animal model of PH1. We propose to generate through in vivo gene editing a PH1 model in an immuno-efficient background that allows us to evaluate the effectiveness of cell therapy strategies using edited human cells. This project may be an advance in the treatment of this disease, where currently available treatments are scarce. (English)
13 October 2021
0.3578092301835014
0 references
L’hyperoxalurie primaire de type I (PH1) est un trouble rare du métabolisme du glycoxylate, causé par des mutations dans l’enzyme TFA, entraînant une synthèse excessive de l’oxalate. Le but de ce projet est d’évaluer le potentiel de l’édition génétique à l’aide de CRISPR/Cas pour le développement de stratégies thérapeutiques innovantes contre la PH1 et la génération de modèles cellulaires pertinents qui couvrent les déficiences présentes dans les cas actuels. Les objectifs spécifiques sont les suivants: 1) Générer des modèles PH1 in vitro par l’édition de gènes. Pour cela, nous proposons d’utiliser des cellules hépatiques quasi primaires (hépatocytes d’upcytes) pour introduire des mutations représentatives de chaque phénotype PH1 par l’édition génique avec CRISPR/Cas. Ces cellules peuvent être un outil utile pour évaluer les petites molécules en tant que nouveaux traitements par rapport à PH1. 2) Démontrer l’efficacité de l’édition in vivo des gènes en tant que traitement PH1 dans un modèle animal. Nous proposons deux approches: La première est basée sur l’inhibition des principales sources de glycoxylate par CRISPR/Cas et donc sur la réduction de la production d’oxalate (réduction des sous-strats). La seconde est basée sur la récupération de l’activité de l’enzyme TFA par l’édition in vivo du gène (remplaçant enzymatique). 3) Évaluer l’efficacité de la transplantation d’hépatocytes d’upcyte® corrigée dans un modèle animal de PH1. Nous proposons de générer par l’édition in vivo d’un gène PH1 dans un contexte immuno-efficace qui nous permet d’évaluer l’efficacité des stratégies de thérapie cellulaire à l’aide de cellules humaines modifiées. Ce projet peut constituer une avancée dans le traitement de cette maladie, lorsque les traitements actuellement disponibles sont rares. (French)
5 December 2021
0 references
Primäre Hyperoxaluria Typ I (PH1) ist eine seltene Störung des Glykoxoxylatstoffwechsels, die durch Mutationen im TFA-Enzym verursacht wird, was zu einer übermäßigen Oxalatsynthese führt. Ziel dieses Projekts ist es, das Potenzial der Genbearbeitung mithilfe von CRISPR/Cas für die Entwicklung innovativer therapeutischer Strategien gegen PH1 und die Generierung relevanter Zellmodelle zu bewerten, die die in den aktuellen Mängeln vorhandenen Mängel abdecken. Die spezifischen Ziele sind: 1) Generieren Sie in vitro PH1-Modelle durch Genbearbeitung. Dazu schlagen wir vor, quasi-primäre Leberzellen (upcyte Hepatozyten) zu verwenden, um repräsentative Mutationen jedes PH1-Phänotyps durch Genbearbeitung mit CRISPR/Cas einzuführen. Diese Zellen können ein nützliches Werkzeug sein, um kleine Moleküle als neue Behandlungen gegen PH1 zu bewerten. 2) Demonstrieren Sie die Wirksamkeit der in vivo Genbearbeitung als PH1-Behandlung in einem Tiermodell. Wir schlagen zwei Ansätze vor: Die erste basiert auf der Hemmung der Hauptquellen von Glykoxylat durch CRISPR/Cas und reduziert so die Produktion von Oxalat (Substratreduzierung). Die zweite basiert auf der Wiederherstellung der Aktivität des TFA-Enzyms durch in vivo Genbearbeitung (enzymatischer Ersatz). 3) Bewertung der Wirksamkeit der korrigierten upcyte® Hepatozytentransplantation in einem Tiermodell von PH1. Wir schlagen vor, durch In-vivo-Genbearbeitung ein PH1-Modell in einem immuneffizienten Hintergrund zu erzeugen, mit dem wir die Wirksamkeit von Zelltherapiestrategien anhand bearbeiteter menschlicher Zellen bewerten können. Dieses Projekt kann ein Fortschritt bei der Behandlung dieser Krankheit sein, wo derzeit verfügbare Behandlungen knapp sind. (German)
9 December 2021
0 references
Primaire hyperoxaluria type I (PH1) is een zeldzame aandoening van het glycoxylaatmetabolisme, veroorzaakt door mutaties in het TFA-enzym, wat resulteert in overmatige oxalaatsynthese. Het doel van dit project is het evalueren van het potentieel van genbewerking met behulp van CRISPR/Cas voor de ontwikkeling van innovatieve therapeutische strategieën tegen PH1, en de generatie van relevante celmodellen die de huidige tekortkomingen dekken. De specifieke doelstellingen zijn: 1) Genereer in vitro PH1-modellen door genbewerking. Hiervoor stellen we voor quasi-primaire levercellen (upcyte hepatocyten) te gebruiken om representatieve mutaties van elk PH1-fenotype te introduceren door genbewerking met CRISPR/Cas. Deze cellen kunnen een nuttig hulpmiddel zijn voor het evalueren van kleine moleculen als nieuwe behandelingen versus PH1. 2) demonstreer de werkzaamheid van in vivo genbewerking als PH1-behandeling in een diermodel. Wij stellen twee benaderingen voor: De eerste is gebaseerd op het remmen van de belangrijkste bronnen van glycoxylaat door CRISPR/Cas en zo de productie van oxalaat (substraatreductie) te verminderen. De tweede is gebaseerd op het herstellen van de activiteit van het TFA-enzym door in vivo genbewerking (enzymatische vervanging). 3) Beoordeelt de effectiviteit van gecorrigeerde upcyte® hepatocytentransplantatie in een diermodel van PH1. Wij stellen voor om door middel van in vivo gen het bewerken van een PH1 model in een immuno-efficiënte achtergrond te genereren die ons in staat stelt om de effectiviteit van celtherapiestrategieën met behulp van bewerkte menselijke cellen te evalueren. Dit project kan een vooruitgang zijn in de behandeling van deze ziekte, waar momenteel beschikbare behandelingen schaars zijn. (Dutch)
17 December 2021
0 references
L'iperossaluria primaria di tipo I (PH1) è un raro disturbo del metabolismo del glicossilato, causato da mutazioni nell'enzima TFA, con conseguente eccessiva sintesi di ossalato. Lo scopo di questo progetto è quello di valutare il potenziale dell'editing genico utilizzando CRISPR/Cas per lo sviluppo di strategie terapeutiche innovative contro la PH1, e la generazione di modelli cellulari pertinenti che coprano le carenze presenti in quelli attuali. Gli obiettivi specifici sono i seguenti: 1) Generare modelli PH1 in vitro mediante modificazione genica. Per questo proponiamo di utilizzare cellule epatiche quasi primarie (epatociti degliupciti) per introdurre mutazioni rappresentative di ciascun fenotipo PH1 mediante modificazione genica con CRISPR/Cas. Queste cellule possono essere uno strumento utile per valutare le piccole molecole come nuovi trattamenti rispetto al PH1. 2) Dimostrare l'efficacia dell'editing genico in vivo come trattamento PH1 in un modello animale. Proponiamo due approcci: Il primo è basato sull'inibizione delle principali fonti di glicossilato da parte del CRISPR/Cas e quindi sulla riduzione della produzione di ossalato (riduzione dei substrati). Il secondo è basato sul recupero dell'attività dell'enzima TFA mediante modificazione genica in vivo (sostituzione enzimatica). 3) Valutare l'efficacia del trapianto di epatociti upcyte® corretto in un modello animale di PH1. Proponiamo di generare attraverso l'editing genico in vivo un modello PH1 in uno sfondo immunoefficiente che ci permette di valutare l'efficacia delle strategie di terapia cellulare utilizzando cellule umane modificate. Questo progetto può essere un anticipo nel trattamento di questa malattia, dove i trattamenti attualmente disponibili sono scarsi. (Italian)
16 January 2022
0 references
Esmane I tüüpi hüperoksaluuria (PH1) on harvaesinev glükoksülaadi metabolismi häire, mida põhjustavad transrasvhappe ensüümi mutatsioonid, mille tulemuseks on liigne oksülaatide süntees. Projekti eesmärk on hinnata CRISPR/Cas abil geenide redigeerimise potentsiaali, et töötada välja PH1 vastased uuenduslikud ravistrateegiad ning luua asjakohased rakumudelid, mis hõlmavad praegustes puudustes esinevaid puudusi. Erieesmärgid on järgmised: 1) luua in vitro PH1 mudelid geeni redigeerimise teel. Selleks teeme ettepaneku kasutada kvaasiprimaarseid maksarakke (upcyte hepatotsüüdid) iga PH1 fenotüübi tüüpiliste mutatsioonide lisamiseks geeni redigeerimise teel CRISPR/Cas’iga. Need rakud võivad olla kasulik vahend väikeste molekulide hindamiseks uute ravimeetoditena võrreldes PH1-ga. 2) näidata in vivo geeni redigeerimise efektiivsust PH1 ravina loommudelis. Pakume välja kaks lähenemisviisi: Esimene põhineb glükoksülaadi peamiste allikate inhibeerimisel CRISPR/Cas’i poolt ja seega oksalaadi tootmise vähendamisel (põhimiku vähendamine). Teine põhineb transrasvhapete ensüümi aktiivsuse taastumisel in vivo geenitöötluse (ensümaatilise asenduse) abil. 3) Hinnake korrigeeritud upcyte® hepatotsüütide siirdamise efektiivsust PH1 loommudelis. Teeme ettepaneku luua läbi in vivo geeni redigeerimise PH1 mudeli immunotõhus taust, mis võimaldab meil hinnata efektiivsust rakuteraapia strateegiad kasutades redigeeritud inimese rakke. See projekt võib olla edasiminek selle haiguse ravis, kus praegu saadaolevaid ravivõimalusi napib. (Estonian)
4 August 2022
0 references
Pirminė I tipo hiperoksalurija (PH1) yra retas glikoksilato metabolizmo sutrikimas, kurį sukelia TFA fermento mutacijos, sukeliantis per didelę oksalato sintezę. Šio projekto tikslas – įvertinti genų redagavimo naudojant CRISPR/Cas potencialą kuriant novatoriškas terapines strategijas prieš PH1 ir kuriant atitinkamus ląstelių modelius, apimančius esamus trūkumus. Konkretūs tikslai yra: 1) generuoti in vitro PH1 modelius genų redagavimo būdu. Tam mes siūlome naudoti kvazi-pirmines kepenų ląsteles (upcitų hepatocitus) kiekvieno PH1 fenotipo tipinėms mutacijoms įvesti genų redagavimo su CRISPR/Cas būdu. Šios ląstelės gali būti naudinga priemonė vertinant mažas molekules kaip naujas gydymo priemones, palyginti su PH1. 2) Pademonstruokite in vivo genų redagavimo veiksmingumą kaip PH1 gydymą gyvūnų modelyje. Siūlome du metodus: Pirmasis yra pagrįstas pagrindinių glikoksilato šaltinių slopinimu, kurį sukelia CRISPR/Cas, ir tokiu būdu sumažinant oksalato gamybą (padėklų mažinimas). Antrasis yra pagrįstas TFA fermento veiklos atkūrimu in vivo genų redagavimo (fermentinio pakeitimo) būdu. 3) įvertina koreguoto upcyte® hepatocitų transplantacijos veiksmingumą gyvūno PH1 modelyje. Siūlome generuoti in vivo genų redagavimą PH1 modelį imunoefektyviame fone, kuris leidžia mums įvertinti ląstelių terapijos strategijų veiksmingumą naudojant redaguotas žmogaus ląsteles. Šis projektas gali būti šios ligos gydymo pažanga, kai šiuo metu turimų gydymo būdų yra mažai. (Lithuanian)
4 August 2022
0 references
Primarna hiperoksalurija tipa I (PH1) je rijedak poremećaj metabolizma glikoksilata uzrokovan mutacijama TFA enzima, što rezultira prekomjernom sintezom oksalata. Svrha ovog projekta je procijeniti potencijal uređivanja gena pomoću CRISPR/Cas za razvoj inovativnih terapijskih strategija protiv PH1 i generiranje relevantnih modela stanica koji pokrivaju nedostatke prisutne u sadašnjim. Posebni su ciljevi sljedeći: 1) Generirati in vitro PH1 modele uređivanjem gena. Za to predlažemo korištenje kvazi-primarnih jetrenih stanica (upcitni hepatociti) za uvođenje reprezentativnih mutacija svakog PH1 fenotipa uređivanjem gena pomoću CRISPR/Cas. Ove stanice mogu biti koristan alat za procjenu malih molekula kao novih tretmana naspram PH1. 2) Demonstratirajte djelotvornost in vivo genskog uređivanja kao PH1 liječenja u životinjskom modelu. Predlažemo dva pristupa: Prvi se temelji na inhibiciji glavnih izvora glikoksilata pomoću CRISPR/Cas i time smanjuje proizvodnju oksalata (smanjenje substrata). Drugi se temelji na oporavku aktivnosti TFA enzima in vivo uređivanjem gena (enzimska zamjena). 3) Procjenjuje učinkovitost ispravljene upcyte® transplantacije hepatocita u životinjskom modelu PH1. Predlažemo generiranje putem in vivo gena uređivanja PH1 modela u imuno-učinkovitoj pozadini koja nam omogućuje da procijenimo učinkovitost strategija stanične terapije pomoću uređivanih ljudskih stanica. Ovaj projekt može biti napredak u liječenju ove bolesti, gdje su trenutno dostupni tretmani oskudni. (Croatian)
4 August 2022
0 references
Η πρωτογενής υπεροξαλουρία τύπου I (PH1) είναι μια σπάνια διαταραχή του μεταβολισμού γλυκοξυλικών, που προκαλείται από μεταλλάξεις στο ένζυμο TFA, με αποτέλεσμα την υπερβολική σύνθεση οξαλικών. Σκοπός αυτού του έργου είναι η αξιολόγηση του δυναμικού της γονιδιακής επεξεργασίας με χρήση του CRISPR/Cas για την ανάπτυξη καινοτόμων θεραπευτικών στρατηγικών κατά της PH1, καθώς και η δημιουργία σχετικών κυτταρικών μοντέλων που καλύπτουν τις ελλείψεις που υπάρχουν στα σημερινά. Οι ειδικοί στόχοι είναι: 1) Δημιουργήστε in vitro μοντέλα PH1 με γονιδιακή επεξεργασία. Για το σκοπό αυτό προτείνουμε τη χρήση οιονεί πρωτογενών ηπατικών κυττάρων (ηπατοκύτταρα υπερκυττάρων) για την εισαγωγή αντιπροσωπευτικών μεταλλάξεων κάθε φαινότυπου PH1 με γονιδιακή επεξεργασία με CRISPR/Cas. Αυτά τα κύτταρα μπορεί να είναι ένα χρήσιμο εργαλείο για την αξιολόγηση των μικρών μορίων ως νέες θεραπείες έναντι PH1. 2) Δηλώστε την αποτελεσματικότητα της in vivo γονιδιακής επεξεργασίας ως θεραπεία PH1 σε ένα ζωικό μοντέλο. Προτείνουμε δύο προσεγγίσεις: Η πρώτη βασίζεται στην αναστολή των κύριων πηγών γλυκοξυλικών από το CRISPR/Cas και, ως εκ τούτου, στη μείωση της παραγωγής οξαλικών (αναγωγή υποστρωμάτων). Το δεύτερο βασίζεται στην ανάκτηση της δραστηριότητας του ενζύμου TFA με in vivo γονιδιακή επεξεργασία (ενζυμική υποκατάσταση). 3) Αξιολογεί την αποτελεσματικότητα της διορθωμένης μεταμόσχευσης ηπατοκυττάρων upcyte® σε ένα ζωικό μοντέλο PH1. Προτείνουμε να δημιουργήσουμε μέσω in vivo γονιδίου επεξεργασία ενός μοντέλου PH1 σε ένα ανοσοαποτελεσματικό υπόβαθρο που μας επιτρέπει να αξιολογήσουμε την αποτελεσματικότητα των στρατηγικών κυτταρικής θεραπείας χρησιμοποιώντας επεξεργασμένα ανθρώπινα κύτταρα. Αυτό το έργο μπορεί να είναι μια πρόοδος στη θεραπεία αυτής της νόσου, όπου επί του παρόντος διαθέσιμες θεραπείες είναι σπάνιες. (Greek)
4 August 2022
0 references
Primárna hyperoxalúria typu I (PH1) je zriedkavá porucha metabolizmu glykoxylátu spôsobená mutáciami v enzýme TFA, čo vedie k nadmernej syntéze oxalátov. Účelom tohto projektu je vyhodnotiť potenciál úpravy génov pomocou CRISPR/Cas pre vývoj inovatívnych terapeutických stratégií proti PH1 a generovanie relevantných bunkových modelov, ktoré pokrývajú nedostatky prítomné v súčasných. Konkrétne ciele sú: 1) Generujte in vitro modely PH1 úpravou génov. Na tento účel navrhujeme použiť kvázi primárne pečeňové bunky (upcyt hepatocyty) na zavedenie reprezentatívnych mutácií každého fenotypu PH1 úpravou génov pomocou CRISPR/Cas. Tieto bunky môžu byť užitočným nástrojom na hodnotenie malých molekúl ako novej liečby verzus PH1. 2) Preukážte účinnosť úpravy génov in vivo ako liečbu PH1 v zvieracom modeli. Navrhujeme dva prístupy: Prvý je založený na inhibícii hlavných zdrojov glykoxylátu prostredníctvom CRISPR/Cas, čím sa znižuje produkcia oxalátu (zníženie substrátu). Druhá je založená na obnovení aktivity enzýmu TFA úpravou génov in vivo (enzymatická náhrada). 3) Posúdiť účinnosť korigovanej transplantácie upcyte® hepatocytov v zvieracom modeli PH1. Navrhujeme generovať prostredníctvom úpravy génov in vivo model PH1 v imunoefektívnom pozadí, ktoré nám umožňuje vyhodnotiť účinnosť stratégií bunkovej terapie pomocou upravených ľudských buniek. Tento projekt môže byť pokrokom v liečbe tohto ochorenia, kde sú v súčasnosti dostupné liečby zriedkavé. (Slovak)
4 August 2022
0 references
Tyypin I primaarinen hyperoksaliuria (PH1) on harvinainen glykoksylaatin metabolian häiriö, joka johtuu TFA-entsyymin mutaatioista, mikä johtaa liialliseen oksalaattisynteesiin. Hankkeen tarkoituksena on arvioida CRISPR:n/Cas:n avulla tapahtuvan geenimuokkauksen mahdollisuuksia kehittää innovatiivisia terapeuttisia strategioita PH1:tä vastaan sekä sellaisten asiaankuuluvien solumallien tuottamista, jotka kattavat nykyisten puutteet. Erityistavoitteena on 1) Luo in vitro PH1-malleja geenimuokkauksella. Tätä varten ehdotamme, että käytetään kvasiprimaarisia maksasoluja (upcyte hepatosyytit) kunkin PH1-fenotyypin edustavia mutaatioita geenimuokkauksella CRISPR/Cas. Nämä solut voivat olla hyödyllinen väline pienten molekyylien arvioinnissa uusina hoitoina verrattuna PH1:een. 2) Osoittaa in vivo geenin editoinnin teho PH1-hoitona eläinmallissa. Ehdotamme kahta lähestymistapaa: Ensimmäinen perustuu siihen, että CRISPR/Cas estää glykoksylaatin tärkeimmät lähteet ja vähentää siten oksalaatin tuotantoa (substraatin väheneminen). Toinen perustuu TFA-entsyymin aktiivisuuden palautumiseen in vivo geenimuokkaus (entsyymikorvaus). 3) Arvioi korjatun upcyte®-hepatosyyttien siirron tehokkuutta eläinmallissa PH1. Ehdotamme tuottaa in vivo geeni editointi PH1 malli immuno-tehokas tausta, jonka avulla voimme arvioida tehokkuutta soluterapia strategioita käyttäen muokattuja ihmissoluja. Tämä hanke voi olla edistysaskel tämän taudin hoidossa, jos tällä hetkellä saatavilla olevia hoitoja on niukasti. (Finnish)
4 August 2022
0 references
Pierwotna hiperoksaluria typu I (PH1) jest rzadkim zaburzeniem metabolizmu glikoksylanów, spowodowanym mutacjami w enzymie TFA, co prowadzi do nadmiernej syntezy szczawianu. Celem tego projektu jest ocena potencjału edycji genów przy użyciu CRISPR/Cas do opracowania innowacyjnych strategii terapeutycznych przeciwko PH1 oraz tworzenia odpowiednich modeli komórkowych, które pokrywają niedobory obecne w obecnych. Cele szczegółowe to: 1) Generuj modele in vitro PH1 poprzez edycję genów. W tym celu proponujemy zastosowanie quasi-pierwotnych komórek wątroby (hepatocytów upcytowanych) w celu wprowadzenia reprezentatywnych mutacji każdego fenotypu PH1 poprzez edycję genów za pomocą CRISPR/Cas. Komórki te mogą być użytecznym narzędziem do oceny małych cząsteczek jako nowych zabiegów w porównaniu z PH1. 2) Wykaż skuteczność edycji genu in vivo jako leczenia PH1 w modelu zwierzęcym. Proponujemy dwa podejścia: Pierwszy z nich opiera się na hamowaniu głównych źródeł glikoksylanu przez CRISPR/Cas, a tym samym na ograniczaniu produkcji szczawianu (zmniejszenie podłoża). Drugi opiera się na odzyskaniu aktywności enzymu TFA poprzez edycję genu in vivo (zamiennik enzymu). 3) Ocena skuteczności skorygowanego przeszczepu hepatocytów upcyte® w zwierzęcym modelu PH1. Proponujemy generowanie za pomocą genu in vivo edycji modelu PH1 w immunoefektywnym tle, który pozwala nam ocenić skuteczność strategii terapii komórkowej z wykorzystaniem edytowanych ludzkich komórek. Projekt ten może być postępem w leczeniu tej choroby, w przypadku gdy obecnie dostępne metody leczenia są ograniczone. (Polish)
4 August 2022
0 references
Az elsődleges I. típusú hyperoxaluria (PH1) a glikoxilát metabolizmusának ritka betegsége, amelyet a TFA enzim mutációi okoznak, ami túlzott oxalátszintézist eredményez. A projekt célja a génszerkesztésben rejlő lehetőségek értékelése a CRISPR/Cas alkalmazásával a PH1 elleni innovatív terápiás stratégiák kidolgozása, valamint a jelenlegi hiányosságokra kiterjedő releváns sejtmodellek létrehozása érdekében. A konkrét célkitűzések a következők: 1) Az in vitro PH1 modellek generálása génszerkesztéssel. Ehhez kvázi elsődleges májsejtek (upcyta hepatocyták) használatát javasoljuk az egyes PH1 fenotípusok reprezentatív mutációinak a CRISPR/Cas génszerkesztéssel történő bevezetésére. Ezek a sejtek hasznos eszköz lehet a kis molekulák értékelésére, mint új kezelések PH1 ellen. 2) demonstrálja az in vivo génszerkesztés hatásosságát PH1 kezelésként egy állatmodellben. Két megközelítést javasolunk: Az első a glikoxilát fő forrásainak CRISPR/Cas általi gátlásán és ezáltal az oxalát termelésének csökkentésén (szubsztrát-redukció) alapul. A második a TFA enzim aktivitásának in vivo génszerkesztéssel (enzimatikus pótlás) történő helyreállításán alapul. 3) A korrigált upcyte® hepatocyta transzplantáció hatékonyságának értékelése a PH1 állatmodellben. Javasoljuk, hogy az in vivo gén szerkesztésével egy PH1 modell immun-hatékony háttérrel generáljon, amely lehetővé teszi számunkra, hogy a szerkesztett emberi sejtek segítségével értékeljük a sejtterápiás stratégiák hatékonyságát. Ez a projekt előrelépést jelenthet a betegség kezelésében, amennyiben a jelenleg rendelkezésre álló kezelések szűkösek. (Hungarian)
4 August 2022
0 references
Primární hyperoxalurie typu I (PH1) je vzácná porucha metabolismu glyoxylátu způsobená mutacemi v TFA enzymu, což vede k nadměrné syntéze oxylátu. Účelem tohoto projektu je zhodnotit potenciál editace genů pomocí CRISPR/Cas pro vývoj inovativních terapeutických strategií proti PH1 a vytváření příslušných buněčných modelů, které pokrývají nedostatky vyskytující se v současných. Konkrétními cíli jsou: 1) Generovat in vitro modely PH1 editací genů. K tomu navrhujeme použití kvaziprimárních jaterních buněk (upcyte hepatocytů) k zavedení reprezentativních mutací každého fenotypu PH1 úpravou genů s CRISPR/Cas. Tyto buňky mohou být užitečným nástrojem pro hodnocení malých molekul jako nové léčby oproti PH1. 2) Prokažte účinnost editace genů in vivo při léčbě PH1 u zvířecího modelu. Navrhujeme dva přístupy: První je založen na inhibici hlavních zdrojů glykoloxylátu pomocí CRISPR/Cas, a tím na snížení produkce šťavelátu (redukce substrátu). Druhý je založen na obnovení aktivity enzymu TFA úpravou genu in vivo (enzymatická náhrada). 3) Posuzuje účinnost korigované transplantace upcyte® hepatocytů ve zvířecím modelu PH1. Navrhujeme generovat pomocí genu in vivo editaci PH1 modelu na imuno-efektivním pozadí, které nám umožní vyhodnotit účinnost strategií buněčné terapie pomocí upravených lidských buněk. Tento projekt může být pokrokem v léčbě tohoto onemocnění, kde jsou v současné době dostupné léčby vzácné. (Czech)
4 August 2022
0 references
Primārā I tipa hiperoksalūrija (PH1) ir reta glikoksilāta metabolisma slimība, ko izraisa TFA enzīma mutācijas, kas izraisa pārmērīgu oksalāta sintēzi. Šā projekta mērķis ir novērtēt gēnu rediģēšanas potenciālu, izmantojot CRISPR/Cas, lai izstrādātu inovatīvas terapeitiskās stratēģijas pret PH1 un radītu attiecīgus šūnu modeļus, kas novērš pašreizējos trūkumus. Konkrētie mērķi ir šādi: 1) Izveidot in vitro PH1 modeļus, rediģējot gēnus. Šim nolūkam mēs ierosinām izmantot kvaziprimārās aknu šūnas (upcītu hepatocītus), lai ieviestu katra PH1 fenotipa reprezentatīvas mutācijas, veicot gēnu rediģēšanu ar CRISPR/Cas. Šīs šūnas var būt noderīgs instruments mazu molekulu novērtēšanai kā jaunas ārstēšanas metodes salīdzinājumā ar PH1. 2) Norādiet in vivo gēnu rediģēšanas efektivitāti kā PH1 terapiju dzīvnieku modelī. Mēs ierosinām divas pieejas: Pirmais ir balstīts uz to, ka CRISPR/Cas inhibē galvenos glikoksilāta avotus un tādējādi samazina oksalāta ražošanu (substrātu samazināšana). Otrais ir balstīts uz TFA enzīma aktivitātes atgūšanu, veicot gēnu rediģēšanu in vivo (fermentatīvā aizvietošana). 3) Novērtēt koriģētās upcyte® hepatocītu transplantācijas efektivitāti PH1 dzīvnieku modelī. Mēs ierosinām, izmantojot in vivo gēnu rediģējot PH1 modeli imūnefektīvā fonā, kas ļauj mums novērtēt šūnu terapijas stratēģiju efektivitāti, izmantojot rediģētās cilvēka šūnas. Šis projekts var būt avanss šīs slimības ārstēšanā, ja pašlaik pieejamie ārstēšanas veidi ir ierobežoti. (Latvian)
4 August 2022
0 references
Is neamhord annamh de mheitibileacht glycoxylate é príomhchineál hyperoxaluria I (PH1), de bharr sócháin san einsím TFA, rud a fhágann go bhfuil sintéis oxalate iomarcach ann. Is é cuspóir an tionscadail seo meastóireacht a dhéanamh ar an acmhainneacht a bhaineann le eagarthóireacht ghéinte trí úsáid a bhaint as CRISPR/Cas chun straitéisí teiripeacha nuálacha a fhorbairt i gcoinne PH1, agus samhlacha ábhartha ceall a ghiniúint lena gcumhdaítear na heasnaimh atá ann faoi láthair. Is iad seo a leanas na cuspóirí sonracha: 1) Gin samhlacha PH1 in vitro trí eagarthóireacht géine. Chuige sin, molaimid úsáid a bhaint as cealla ae gar-phríomhúla (hepatocytesupcyte) chun sócháin ionadaíocha de gach feinitíopa PH1 a thabhairt isteach trí eagarthóireacht ghéinte le CRISPR/Cas. Is féidir leis na cealla seo a bheith ina uirlis úsáideach chun meastóireacht a dhéanamh ar mhóilíní beaga mar chóireálacha nua i gcoinne PH1. 2) Léiriú éifeachtúlacht eagarthóireacht géine in vivo mar chóireáil PH1 i samhail ainmhí. Molaimid dhá chur chuige: Tá an chéad cheann bunaithe ar chosc a chur ar phríomhfhoinsí glycoxylate ag CRISPR/Cas agus dá bhrí sin ag laghdú táirgeadh oxalate (laghdú foshraithe). Tá an dara ceann bunaithe ar ghníomhaíocht einsím TFA a aisghabháil trí eagarthóireacht ghéin in vivo (athsholáthar einsímeach). 3) Measann sé éifeachtacht trasphlandú hepatocyte ® ceartaithe i samhail ainmhí de PH1. Molaimid samhail PH1 a ghiniúint trí eagarthóireacht ghéin in vivo i gcúlra imdhíon-éifeachtach a ligeann dúinn meastóireacht a dhéanamh ar éifeachtacht straitéisí teiripe cille ag baint úsáide as cealla daonna curtha in eagar. D’fhéadfadh an tionscadal seo a bheith ina dhul chun cinn i gcóireáil an ghalair seo, áit a bhfuil cóireálacha atá ar fáil faoi láthair gann. (Irish)
4 August 2022
0 references
Primarna hiperoksalija tipa I (PH1) je redka motnja presnove glioksilata, ki jo povzročajo mutacije v encimu TFA, kar povzroči prekomerno sintezo oksalata. Namen tega projekta je oceniti potencial genskega urejanja z uporabo CRISPR/Cas za razvoj inovativnih terapevtskih strategij proti PH1 in oblikovanje ustreznih celičnih modelov, ki pokrivajo pomanjkljivosti, ki so prisotne v sedanjih. Posebni cilji so: 1) Ustvarite modele PH1 in vitro z urejanjem genov. Za to predlagamo uporabo kvazi-primarnih jetrnih celic (upcitnih hepatocitov) za uvedbo reprezentativnih mutacij vsakega fenotipa PH1 z urejanjem genov s CRISPR/Cas. Te celice so lahko koristno orodje za ocenjevanje majhnih molekul kot novih zdravljenj v primerjavi s PH1. 2) Ugotovite učinkovitost urejanja genov in vivo kot zdravljenje s PH1 v živalskem modelu. Predlagamo dva pristopa: Prvi temelji na zaviranju glavnih virov glioksilata s CRISPR/Cas in s tem na zmanjšanju proizvodnje oksalata (zmanjšanje substratov). Drugi temelji na okrevanju aktivnosti encima TFA z urejanjem genov in vivo (encimatska zamenjava). 3) Ocenjuje učinkovitost korigirane presaditve upcyte® hepatocitov v živalskem modelu PH1. Predlagamo, da s pomočjo in vivo gena uredimo model PH1 v imunsko učinkovitem ozadju, ki nam omogoča, da ocenimo učinkovitost strategij celične terapije z uporabo urejenih človeških celic. Ta projekt je lahko napredek pri zdravljenju te bolezni, kjer je trenutno na voljo malo zdravljenj. (Slovenian)
4 August 2022
0 references
Първичната хипероксалурия тип I (PH1) е рядко нарушение на метаболизма на гликоксилат, причинено от мутации в ензима ТМК, което води до прекомерен синтез на оксалат. Целта на този проект е да се оцени потенциалът за редактиране на гени с използване на CRISPR/Cas за разработването на иновативни терапевтични стратегии срещу PH1 и генерирането на съответните клетъчни модели, които покриват недостатъците, съществуващи в настоящите. Конкретните цели са: 1) Генерирайте in vitro PH1 модели чрез редактиране на гени. За тази цел предлагаме да се използват квазиосновни чернодробни клетки (upcyte hepatocytes) за въвеждане на представителни мутации за всеки фенотип PH1 чрез редактиране на гени с CRISPR/Cas. Тези клетки могат да бъдат полезен инструмент за оценка на малките молекули като нови лечения спрямо PH1. 2) Демонстрирайте ефикасността на редактирането на гени in vivo като лечение с PH1 в животински модел. Предлагаме два подхода: Първият се основава на инхибиране на основните източници на гликоксилат чрез CRISPR/Cas и по този начин намаляване на производството на оксалат (намаляване на субстрата). Втората се основава на възстановяване на активността на трансмастния ензим чрез редактиране на гени in vivo (ензиматична замяна). 3) Оценява ефективността на коригираната трансплантация на хепатоцити на upcyte® в животински модел на PH1. Предлагаме да се генерира чрез in vivo редактиране на PH1 модел в имуноефективен фон, който ни позволява да оценим ефективността на стратегиите за клетъчна терапия, като използваме редактирани човешки клетки. Този проект може да бъде напредък в лечението на това заболяване, когато наличните понастоящем лечения са оскъдни. (Bulgarian)
4 August 2022
0 references
Iperossalurja primarja tat-tip I (PH1) hija disturb rari tal-metaboliżmu ta’ glycoxylate, ikkawżata minn mutazzjonijiet fl-enzima TFA, li tirriżulta f’sintesi eċċessiva ta’ ossalat. L-għan ta’ dan il-proġett huwa li jevalwa l-potenzjal ta’ editjar tal-ġeni bl-użu ta’ CRISPR/Cas għall-iżvilupp ta’ strateġiji terapewtiċi innovattivi kontra l-PH1, u l-ġenerazzjoni ta’ mudelli ta’ ċelloli rilevanti li jkopru n-nuqqasijiet preżenti f’dawk attwali. L-għanijiet speċifiċi huma li: 1) Iġġenera mudelli PH1 in vitro permezz ta ‘editjar tal-ġeni. Għal dan aħna nipproponu l-użu ta’ ċelluli tal-fwied kważi primarji (epatoċiti upcyte) biex jiġu introdotti mutazzjonijiet rappreżentattivi ta’ kull fenotip PH1 permezz ta’ editjar tal-ġeni b’CRISPR/Cas. Dawn iċ-ċelloli jistgħu jkunu għodda utli għall-evalwazzjoni ta ‘molekuli żgħar bħala trattamenti ġodda kontra PH1. 2) Turi l-effikaċja ta’ l-editjar tal-ġeni in vivo bħala trattament PH1 f’mudell ta’ annimal. Aħna nipproponu żewġ approċċi: L-ewwel wieħed huwa bbażat fuq l-inibizzjoni tas-sorsi ewlenin ta’ glycoxylate minn CRISPR/Cas u b’hekk titnaqqas il-produzzjoni tal-ossalat (tnaqqis fis-substrat). It-tieni wieħed huwa bbażat fuq l-irkupru tal-attività tal-enzima TFA permezz ta’ editjar tal-ġeni in vivo (sostituzzjoni enzimatika). 3) Valutazzjoni tal-effikaċja tat-trapjant tal-epatoċiti upcyte® kkoreġut f’mudell ta’ annimal ta’ PH1. Aħna nipproponu li niġġeneraw permezz ta ‘l-editjar tal-ġeni in vivo mudell PH1 fi sfond immuno-effiċjenti li jippermettilna nevalwaw l-effettività ta’ strateġiji ta ‘terapija taċ-ċelloli bl-użu ta’ ċelloli umani editjati. Dan il-proġett jista’ jkun avvanz fit-trattament ta’ din il-marda, fejn it-trattamenti disponibbli bħalissa huma skarsi. (Maltese)
4 August 2022
0 references
A hiperoxalúria primária tipo I (PH1) é uma doença rara do metabolismo do glicoxilato, causada por mutações na enzima TFA, resultando numa síntese excessiva de oxalato. O objetivo deste projeto é avaliar o potencial da edição genética utilizando o CRISPR/Cas para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas inovadoras contra a PH1 e a geração de modelos celulares relevantes que cubram as deficiências presentes nos atuais. Os objetivos específicos são os seguintes: 1) Gerar modelos PH1 in vitro através da edição de genes. Para isso, propomos a utilização de células hepáticas quase primárias (hepatócitos apócitos) para introduzir mutações representativas de cada fenótipo PH1 por edição genética com CRISPR/Cas. Estas pilhas podem ser uma ferramenta útil para avaliar moléculas pequenas como tratamentos novos contra PH1. 2) Demonstrar a eficácia da edição de genes in vivo como tratamento com PH1 em um modelo animal. Propomos duas abordagens: O primeiro baseia-se na inibição das principais fontes de glicoxilato pelo CRISPR/Cas e, assim, na redução da produção de oxalato (redução do substrato). O segundo baseia-se na recuperação da atividade da enzima TFA por edição genética in vivo (substituição enzimática). 3) Avaliar a eficácia do transplante de hepatócitos upcyte® corrigido em um modelo animal de PH1. Propomo-nos a gerar através da edição de genes in vivo um modelo PH1 em um fundo imunoeficiente que nos permite avaliar a eficácia das estratégias de terapia celular usando células humanas editadas. Este projeto pode ser um avanço no tratamento desta doença, onde os tratamentos atualmente disponíveis são escassos. (Portuguese)
4 August 2022
0 references
Primær hyperoxaluria type I (PH1) er en sjælden sygdom i glycoxylatmetabolismen forårsaget af mutationer i TFA-enzymet, hvilket resulterer i overdreven oxalatsyntese. Formålet med dette projekt er at evaluere potentialet i genredigering ved hjælp af CRISPR/Cas til udvikling af innovative terapeutiske strategier mod PH1 og generering af relevante cellemodeller, der dækker de nuværende mangler. De specifikke mål er at: 1) Generer in vitro PH1-modeller ved genredigering. Til dette foreslår vi at bruge kvasiprimære leverceller (upcyte hepatocytter) til at indføre repræsentative mutationer af hver PH1-fænotype ved genredigering med CRISPR/Cas. Disse celler kan være et nyttigt værktøj til evaluering af små molekyler som nye behandlinger versus PH1. 2) Demonstrere effekten af in vivo-genredigering som PH1-behandling i en dyremodel. Vi foreslår to tilgange: Den første er baseret på at hæmme de vigtigste kilder til glycoxylat ved CRISPR/Cas og dermed reducere produktionen af oxalat (substratreduktion). Den anden er baseret på genoprettelse af TFA-enzymets aktivitet ved in vivo-genredigering (enzymatisk erstatning). 3) Vurder effektiviteten af korrigeret upcyte® hepatocyttransplantation i en dyremodel af PH1. Vi foreslår at generere gennem in vivo genredigering en PH1-model i en immun-effektiv baggrund, der giver os mulighed for at evaluere effektiviteten af celleterapi strategier ved hjælp af redigerede humane celler. Dette projekt kan være et fremskridt i behandlingen af denne sygdom, hvor der i øjeblikket kun findes få behandlinger. (Danish)
4 August 2022
0 references
Hiperoxaluria primară de tip I (PH1) este o afecțiune rară a metabolizării glicoxilatului, cauzată de mutații ale enzimei AGT, care determină sinteza excesivă a oxalatului. Scopul acestui proiect este de a evalua potențialul de editare genetică folosind CRISPR/Cas pentru dezvoltarea de strategii terapeutice inovatoare împotriva PH1, precum și generarea de modele de celule relevante care să acopere deficiențele prezente în cele actuale. Obiectivele specifice sunt: 1) Generați modelele PH1 in vitro prin editarea genelor. Pentru aceasta propunem utilizarea celulelor hepatice cvasiprimare (hepatocite de upcyte) pentru a introduce mutații reprezentative ale fiecărui fenotip PH1 prin editare genică cu CRISPR/Cas. Aceste celule pot fi un instrument util pentru evaluarea moleculelor mici ca tratamente noi comparativ cu PH1. 2) Demonstrați eficacitatea editării in vivo a genelor ca tratament cu PH1 într-un model animal. Propunem două abordări: Prima se bazează pe inhibarea principalelor surse de glicoxilat de către CRISPR/Cas, reducând astfel producția de oxalat (reducerea substratului). Al doilea se bazează pe recuperarea activității enzimei AGT prin editarea in vivo a genelor (substituție enzimatică). 3) Evaluarea eficacității transplantului corectat de hepatocite upcyte® într-un model animal de PH1. Ne propunem să generăm prin editarea genelor in vivo un model PH1 într-un fundal imuno-eficient care ne permite să evaluăm eficacitatea strategiilor de terapie celulară utilizând celule umane editate. Acest proiect poate fi un avans în tratamentul acestei boli, în cazul în care tratamentele disponibile în prezent sunt limitate. (Romanian)
4 August 2022
0 references
Primär hyperoxaluria typ I (PH1) är en sällsynt störning av glykoxylatmetabolism, orsakad av mutationer i TFA-enzymet, vilket resulterar i överdriven oxalatsyntes. Syftet med detta projekt är att utvärdera potentialen hos genredigering med hjälp av CRISPR/Cas för utveckling av innovativa terapeutiska strategier mot PH1 och generering av relevanta cellmodeller som täcker bristerna i de nuvarande. De särskilda målen är att 1) Generera in vitro PH1-modeller genom genredigering. För detta föreslår vi att man använder kvasi-primära leverceller (upcytehepatocyter) för att införa representativa mutationer av varje PH1-fenotyp genom genredigering med CRISPR/Cas. Dessa celler kan vara ett användbart verktyg för att utvärdera små molekyler som nya behandlingar jämfört med PH1. 2) Demonstrera effekten av in vivo genredigering som PH1-behandling i en djurmodell. Vi föreslår två tillvägagångssätt: Den första är baserad på att hämma de huvudsakliga källorna till glykoxylat genom CRISPR/Cas och därmed minska produktionen av oxalat (substratreduktion). Den andra är baserad på att återställa aktiviteten hos TFA-enzymet genom in vivo-genredigering (enzymatisk ersättning). 3) Utvärdera effektiviteten av korrigerad upcyte® hepatocyttransplantation i en djurmodell av PH1. Vi föreslår att generera genom in vivo genredigering av en PH1-modell i en immuneffektiv bakgrund som gör det möjligt för oss att utvärdera effektiviteten av cellterapistrategier med hjälp av redigerade mänskliga celler. Detta projekt kan vara ett framsteg i behandlingen av denna sjukdom, där det för närvarande finns få behandlingar. (Swedish)
4 August 2022
0 references
Pamplona/Iruña
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
PI16_00150
0 references