Causal role and modifier of the Notch signaling pathway in muscle dystrophy: specific study in relation to mutations in genes POGLUT1, DMD and TRIM32 (Q3143453)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3143453 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Causal role and modifier of the Notch signaling pathway in muscle dystrophy: specific study in relation to mutations in genes POGLUT1, DMD and TRIM32 |
Project Q3143453 in Spain |
Statements
73,712.4 Euro
0 references
91,500.0 Euro
0 references
80.56 percent
0 references
1 January 2017
0 references
31 March 2020
0 references
FUNDACION PUBLICA ANDALUZA PARA LA GESTION DE LA INVESTIGACION EN SALUD DE SEVILLA
0 references
Durante los últimos años nuestro grupo ha trabajado en la identificación del gen POGLUT1, responsable de la O-glicosilación de Notch, como nuevo gen causal de distrofia muscular recesiva, demostrando la implicación de Notch en miogénesis y en la correcta glicosilación de la proteina de matriz extracelular alfa-distroglicano (aDG). Además, recientemente se ha demostrado que la sobreexpresión de Jagged1, un conocido regulador de Notch, en un modelo animal de distrofia muscular de Duchenne (DMD) logra rescatar el fenotipo muscular. Por tanto, la modulacion de Notch se perfila como un potencial tratamiento en distrofias musculares. OBJETIVOS: 1. Generación y descripción de un modelo de ratón knock-in portador de la mutación D233E en POGLUT1 descrita en pacientes; 2. Rescatar el fenotipo muscular en el modelo murino generado; 3. Estudiar la vía Notch en pacientes DMD y establecer correlación con la gravedad del fenotipo; 4. Analizar la glicosilación de aDG en pacientes DMD, y correlacionarla con la activación de Notch. MÉTODO: 1.1 Generar un modelo knock-in portador de la mutacion D233E en POGLUT1 mediante técnología TALEN;1.2 Descripción del fenotipo funcional y molecular del knock-in; 1.3 Análisis cuantitativos y funcionales de células satélite aisladas del modelo knock-in; 2.1 Rescate de fenotipo en cultivo de mioblastos mediante activadores de Notch y sobreexpresión lentiviral de NICD1; 2. Rescate del fenotipo en ratones knock-in mediante: 2.2.2Tratamiento con activadores de Notch, 2.2.3Administración de iPS humanas generadas de fibroblastos de pacientes y controles; 3.1Reclutar pacientes portadores de mutaciones en el gen DMD de las Unidades Neuromusculares colaboradoras en el proyecto; 3.2Identificar portadores levemente afectados o asintomáticos y cuantificar nivel de activación de la vía Noth mediante expresión de reguladores y de efectores downstream; 4.Analizar si existe hipoglicosilacion de aDG en músculo de pacientes con vía Notch desregulada (DMD, TRIM32) (Spanish)
0 references
In recent years our group has worked on the identification of the POGLUT1 gene, responsible for Notch O-glycosylation, as a new causal gene of recessive muscular dystrophy, demonstrating the involvement of Notch in myogenesis and in the correct glycosylation of the extracellular alpha-distroglycan matrix protein (ADG). In addition, it has recently been shown that overexpression of Jagged1, a well-known Notch regulator, in an animal model of Duchenne muscular dystrophy (DMD) manages to rescue the muscle phenotype. Therefore, Notch modulation is profiled as a potential treatment in muscular dystrophy. OBJECTIVES: 1. Generation and description of a knock-in mouse model carrying the D233E mutation in POGLUT1 described in patients; 2. Rescue the muscle phenotype in the generated murine model; 3. Study the Notch pathway in DMD patients and establish correlation with phenotype severity; 4. Analyse the glycosylation of ADG in DMD patients, and correlate it with the activation of Notch. METHOD: 1.1 Generate a knock-in model carrying the D233E mutation in POGLUT1 using TALEN technology;1.2 Description of the functional and molecular phenotype of knock-in; 1.3 Quantitative and functional analysis of isolated satellite cells of the knock-in model; 2.1 Rescue of phenotype in myoblast culture using Notch activators and lentiviral overexpression of NICD1; 2. Rescue of phenotype in knock-in mice by: 2.2.2Treatment with Notch Activators, 2.2.3Management of human iPS generated from patient fibroblasts and controls; 3.1Recluting patients with mutations in the DMD gene of the Neuromuscular Units collaborating in the project; 3.2Identify slightly affected or asymptomatic carriers and quantify level of activation of the Noth pathway by expression of regulators and downstream effectors; 4.Analyse whether there is hypoglycosylation of ADG in muscle of patients with deregulated Notch pathway (DMD, TRIM32) (English)
12 October 2021
0.0534819816330642
0 references
Au cours des dernières années, notre groupe a travaillé sur l’identification du gène POGLUT1, responsable de la glycosylation Notch, comme un nouveau gène causal de la dystrophie musculaire récessive, démontrant l’implication de Notch dans la myogenèse et dans la glycosylation correcte de la protéine de la matrice alpha-distroglycane extracellulaire (ADG). En outre, il a été récemment démontré que la surexpression de Jagged1, un régulateur Notch bien connu, dans un modèle animal de dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) parvient à sauver le phénotype musculaire. Par conséquent, la modulation de Notch est présentée comme un traitement potentiel de la dystrophie musculaire. OBJECTIFS: 1. La génération et la description d’un modèle de souris à prise portant la mutation D233E chez POGLUT1 décrite chez les patients; 2. Sauver le phénotype musculaire dans le modèle murin généré; 3. Étudier la voie de Notch chez les patients atteints de DMD et établir une corrélation avec la sévérité du phénotype; 4. Analyser la glycosylation de l’ADG chez les patients atteints de DMD et la corréler avec l’activation de Notch. MÉTHODE: 1.1 Générer un modèle d’accrochage portant la mutation D233E dans POGLUT1 en utilisant la technologie TALEN;1.2 Description du phénotype fonctionnel et moléculaire du knock-in; 1.3 Analyse quantitative et fonctionnelle des cellules satellitaires isolées du modèle KK-in; 2.1 Sauvegarde du phénotype en culture de myoblastes à l’aide d’activateurs Notch et d’une surexpression lentivirale du NICD1; 2. Sauvetage du phénotype chez les souris en contact avec: 2.2.2Traitement à l’aide d’activateurs Notch, 2.2.3Gestion de l’IPI humain généré par les fibroblastes et les témoins du patient; 3.1Reclut les patients présentant des mutations dans le gène DMD des unités neuromusculaires qui collaborent au projet; 3.2Identifier les porteurs légèrement affectés ou asymptomatiques et quantifier le niveau d’activation de la voie Noth par l’expression des régulateurs et des effecteurs en aval; 4.Analyser s’il y a hypoglycosylation de l’ADG dans le muscle des patients présentant une voie notch dérégulée (DMD, TRIM32) (French)
2 December 2021
0 references
In den letzten Jahren hat unsere Gruppe an der Identifizierung des POGLUT1-Gens gearbeitet, das für die Notch O-Glykosylierung verantwortlich ist, als neues kausales Gen der rezessiven Muskeldystrophie, das die Beteiligung von Notch an der Myogenese und in der korrekten Glykosylierung des extrazellulären alpha-distrogan Matrixproteins (ADG) demonstrierte. Darüber hinaus wurde kürzlich gezeigt, dass die Überexpression von Jagged1, einem bekannten Notch-Regulator, in einem Tiermodell der Duchenne Muskeldystrophie (DMD) den Muskelphänotyp retten kann. Daher wird Notch Modulation als mögliche Behandlung in der Muskeldystrophie profiliert. ZIELE: 1. Generierung und Beschreibung eines bei Patienten beschriebenen Knock-in-Mausmodells mit der D233E-Mutation in POGLUT1; 2. Rettet den Muskelphänotyp im generierten Murinmodell; 3. Den Notch-Pfad bei DMD-Patienten untersuchen und eine Korrelation mit dem Schweregrad des Phänotyps feststellen; 4. Analysieren Sie die Glykosylierung von ADG bei DMD-Patienten und korrelieren Sie sie mit der Aktivierung von Notch. METHODE: 1.1 Erzeugen Sie ein Knock-in-Modell mit der D233E-Mutation in POGLUT1 unter Verwendung der TALEN-Technologie;1.2 Beschreibung des funktionalen und molekularen Phänotyps von Knock-in; 1.3 Quantitative und funktionale Analyse isolierter Satellitenzellen des Knock-in-Modells; 2.1 Rettung des Phänotyps in der Myoblastkultur unter Verwendung von Notch-Aktivatoren und lentiviraler Überexpression von NICD1; 2. Rettung des Phänotyps in Knock-in-Mäusen durch: 2.2.2Behandlung mit Notch-Aktivatoren, 2.2.3Management von menschlichen iPS, erzeugt aus Patientenfibroblasten und Kontrollen; 3.1Berücksichtigung von Patienten mit Mutationen im DMD-Gen der Neuromuskulären Einheiten, die im Projekt zusammenarbeiten; 3.2Identifizieren Sie leicht betroffene oder asymptomatische Träger und quantifizieren Sie den Grad der Aktivierung des Noth-Wegs durch den Ausdruck von Regulatoren und nachgeschalteten Effektoren; 4.Analyse, ob es eine Hypoglykosylierung von ADG in Muskeln von Patienten mit dereguliertem Notch Pathway (DMD, TRIM32) gibt (German)
9 December 2021
0 references
In de afgelopen jaren heeft onze groep gewerkt aan de identificatie van het POGLUT1 gen, verantwoordelijk voor Notch O-glycosylation, als een nieuw causaal gen van recessieve spierdystrofie, waaruit de betrokkenheid van Notch bij myogenese en de juiste glycosylatie van het extracellulaire alfa-distroglycan matrix-eiwit (ADG) blijkt. Bovendien is onlangs aangetoond dat overexpressie van Jagged1, een bekende Notch-regulator, in een diermodel van Duchenne spierdystrofie (DMD) erin slaagt om het spierfenotype te redden. Daarom is Notch modulatie geprofileerd als een mogelijke behandeling bij spierdystrofie. DOELSTELLINGEN: 1. Generatie en beschrijving van een knock-in muismodel met de D233E-mutatie in POGLUT1 zoals beschreven bij patiënten; 2. Red het spierfenotype in het gegenereerde murinemodel; 3. Onderzoek de Notch-route bij DMD-patiënten en stel correlatie vast met de ernst van het fenotype; 4. Analyseer de glycosylatie van ADG bij DMD-patiënten en correleer deze met de activering van Notch. METHODE: 1.1 Genereer een knock-in model met de D233E-mutatie in POGLUT1 met behulp van TALEN-technologie;1.2 Beschrijving van het functionele en moleculaire fenotype van knock-in; 1.3 Kwantitatieve en functionele analyse van geïsoleerde satellietcellen van het knock-in-model; 2.1 Redding van fenotype in myoblastcultuur met Notch activatoren en lentivirale overexpressie van NICD1; 2. Redding van fenotype bij knock-in muizen door: 2.2.2Behandeling met Notch Activators, 2.2.3Management van humane iPS gegenereerd door fibroblasten en controles van patiënten; 3.1Recluting van patiënten met mutaties in het DMD-gen van de Neuromusculaire Eenheden die meewerken aan het project; 3.2Identificeer licht aangetaste of asymptomatische dragers en kwantificeer het activeringsniveau van de Noth-route door expressie van regelgevers en downstream-effectoren; 4.Analyseer of er hypoglycosylatie van ADG in spier van patiënten met gedereguleerde Notch-route (DMD, TRIM32) is (Dutch)
17 December 2021
0 references
Negli ultimi anni il nostro gruppo ha lavorato all'identificazione del gene POGLUT1, responsabile di Notch O-glicosilazione, come nuovo gene causale di distrofia muscolare recessiva, dimostrando il coinvolgimento di Notch nella mioogenesi e nella corretta glicosilazione della proteina extracellulare della matrice alfa-distroglica (ADG). Inoltre, è stato recentemente dimostrato che l'eccessiva espressione di Jagged1, un noto regolatore Notch, in un modello animale di distrofia muscolare Duchenne (DMD) riesce a salvare il fenotipo muscolare. Pertanto, la modulazione di Notch è profilata come un trattamento potenziale nella distrofia muscolare. OBIETTIVI: 1. Generazione e descrizione di un modello di topo knock-in con la mutazione D233E in POGLUT1 descritta nei pazienti; 2. Salvare il fenotipo muscolare nel modello murino generato; 3. Studiare la via di Notch nei pazienti con DMD e stabilire la correlazione con la gravità del fenotipo; 4. Analizzare la glicosilazione di ADG nei pazienti con DMD e correlarla con l'attivazione di Notch. METODO: 1.1 Generare un modello knock-in con la mutazione D233E in POGLUT1 utilizzando la tecnologia TALEN;1.2 Descrizione del fenotipo funzionale e molecolare del knock-in; 1.3 Analisi quantitativa e funzionale delle celle satellitari isolate del modello knock-in; 2.1 Salvataggio del fenotipo nella coltura del myoblast utilizzando attivatori Notch e sovraespressione lentivirale di NICD1; 2. Salvataggio di fenotipo in topi knock-in da: 2.2.2Trattamento con Attivatori Notch, 2.2.3Gestione dell'IPS umano generato da fibroblasti e controlli del paziente; 3.1Recludere i pazienti con mutazioni nel gene DMD delle Unità Neuromuscolari che collaborano al progetto; 3.2Individuare i vettori leggermente colpiti o asintomatici e quantificare il livello di attivazione della via Noth mediante l'espressione di regolatori e attuatori a valle; 4.Analizzare se c'è ipoglicosilazione di ADG nel muscolo di pazienti con via di Notch deregolamentata (DMD, TRIM32) (Italian)
16 January 2022
0 references
Τα τελευταία χρόνια η ομάδα μας έχει εργαστεί για την ταυτοποίηση του γονιδίου POGLUT1, υπεύθυνο για τη γλυκοζυλίωση του Notch O, ως νέου αιτίου γονιδίου της υπολειμματικής μυϊκής δυστροφίας, αποδεικνύοντας την εμπλοκή του Notch στη μυογένεση και στη σωστή γλυκοζυλίωση της εξωκυτταρικής πρωτεΐνης άλφα-διστρογλυκάνης μήτρας (ADG). Επιπλέον, πρόσφατα έχει αποδειχθεί ότι η υπερέκφραση του Jagged1, ένας γνωστός ρυθμιστής εγκοπής, σε ένα ζωικό μοντέλο της μυϊκής δυστροφίας Duchenne (DMD) καταφέρνει να διασώσει τον μυϊκό φαινότυπο. Ως εκ τούτου, η διαμόρφωση του Notch χαρακτηρίζεται ως πιθανή θεραπεία της μυϊκής δυστροφίας. ΣΤΌΧΟΙ: 1. Παραγωγή και περιγραφή μοντέλου ποντικιού με κτυπημένο ποντίκι που φέρει τη μετάλλαξη D233E στο POGLUT1 που περιγράφεται στους ασθενείς· 2. Διάσωση του φαινότυπου των μυών στο παραγόμενο μοντέλο μυϊκών ιόντων. 3. Μελέτη της οδού Notch σε ασθενείς με DMD και δημιουργία συσχέτισης με τη σοβαρότητα του φαινότυπου· 4. Αναλύστε τη γλυκοζυλίωση της ADG σε ασθενείς με DMD και συσχετίστε την με την ενεργοποίηση του Notch. ΜΈΘΟΔΟΣ: 1.1 Δημιουργήστε ένα μοντέλο knock-in που μεταφέρει τη μετάλλαξη D233E στο POGLUT1 χρησιμοποιώντας την τεχνολογία TALEN 1.2 Περιγραφή του λειτουργικού και μοριακού φαινότυπου του knock-in. 1.3 Ποσοτική και λειτουργική ανάλυση απομονωμένων δορυφορικών κυττάρων του μοντέλου knock-in· 2.1 Διάσωση φαινότυπου σε καλλιέργεια μυοβλάστες με ενεργοποιητές Notch και lentiviral υπερέκφραση του NICD1· 2. Διάσωση φαινότυπου σε ποντίκια με χτυπήματα από: Επεξεργασία με ενεργοποιητές εγκοπής, 2.2.3Διαχείριση ανθρώπινων iPS που παράγονται από ινοβλάστες και μάρτυρες ασθενών· Απομάκρυνση ασθενών με μεταλλάξεις στο γονίδιο DMD των νευρομυϊκών μονάδων που συνεργάζονται στο έργο. 3.2Προσδιορισμός ελαφρώς επηρεαζόμενων ή ασυμπτωματικών φορέων και ποσοτικός προσδιορισμός του επιπέδου ενεργοποίησης της οδού Noth μέσω της έκφρασης των ρυθμιστικών αρχών και των κατάντη παραγόντων· 4.Analyse εάν υπάρχει υπογλυκοζυλίωση του ADG στους μυς ασθενών με απορρυθμισμένη οδό Notch (DMD, TRIM32) (Greek)
17 August 2022
0 references
I de seneste år har vores gruppe arbejdet på identifikation af POGLUT1-genet, der er ansvarlig for Notch O-glycosylering, som et nyt kausalt gen af recessiv muskeldystrofi, der demonstrerer Notchs involvering i myogenese og i den korrekte glycosylation af det ekstracellulære alfa-distroglycan-matrixprotein (ADG). Desuden er det for nylig blevet vist, at overekspression af Jagged1, en velkendt Notch regulator, i en dyremodel af Duchenne muskuløs dystrofi (DMD) formår at redde muskelfænotypen. Derfor er Notch modulation profileret som en potentiel behandling ved muskeldystrofi. MÅLSÆTNINGER: 1. Generering og beskrivelse af en knock-in musemodel med D233E-mutationen i POGLUT1 beskrevet hos patienter 2. Redde muskelfænotype i den genererede murin model; 3. Undersøgelse af Notch-vejen hos DMD-patienter og etablering af korrelation med fænotype sværhedsgrad 4. Analyse af ADG's glycosylation hos DMD-patienter, og korreler det med aktiveringen af Notch. METODE: 1.1 Generer en knock-in-model, der bærer D233E-mutationen i POGLUT1 ved hjælp af TALEN-teknologi1.2 Beskrivelse af den funktionelle og molekylære fænotype af knock-in; 1.3 Kvantitativ og funktionel analyse af isolerede satellitceller i knock-in-modellen; 2.1 Rescue af fænotype i myoblastkultur ved hjælp af Notch-aktivatorer og lentiviral overekspression af NICD1; 2. Redning af fænotype i knock-in mus ved: 2.2.2Behandling med Notch Activators, 2.2.3Management of human iPS genereret af patienters fibroblaster og kontrol; 3.1Recluting af patienter med mutationer i DMD-genet i de neuromuskulære enheder, der samarbejder i projektet 3.2Identificere let påvirkede eller asymptomatiske bærere og kvantificere niveauet for aktivering af Noth-vejen ved udtryk af regulatorer og downstream-effektorer 4.Analyser, om der er hypoglykosylering af ADG hos patienter med dereguleret Notch-vej (DMD, TRIM32) (Danish)
17 August 2022
0 references
Ryhmämme on viime vuosina työskennellyt Notch O-glykosylaatiosta vastuussa olevan POGLUT1-geenin tunnistamiseksi resessiivisen lihasdystrofian uutena syy-geeninä, mikä osoittaa Notchin osallistumisen myogeneesiin ja solunulkoisen alfa-distroglykaanin matriisiproteiinin (ADG) oikeaan glykosylaatioon. Lisäksi äskettäin on osoitettu, että tunnettu Notch-säädin Jagged1: n yliilmaisussa Duchennen lihasdystrofiassa (DMD) onnistuu pelastamaan lihasten fenotyypin. Siksi Notch-modulaatio on profiloituna mahdollisena hoitona lihasdystrofiassa. TAVOITTEET: 1. Potilaille kuvaillun POGLUT1:n D233E-mutaatiota sisältävän kolkutushiiren mallin luominen ja kuvaus; 2. Lihasten fenotyypin pelastaminen syntyneessä hiiren mallissa; 3. Tutkitaan Notch-reittiä DMD-potilailla ja määritetään korrelaatio fenotyypin vakavuuteen; 4. Analysoi ADG:n glykosylaatio DMD-potilailla ja korreloi sen Notchin aktivoitumisen kanssa. MENETELMÄ: 1.1 Luodaan D233E-mutaatio POGLUT1 -mutaatiolla TALEN-tekniikalla toimiva ja molekyylin fenotyyppi 1.2 Kuvaus koputuksen toiminnallisesta ja molekulaarisesta fenotyypistä. 1.3 Kvantitatiivinen ja toiminnallinen analyysi knock-in-mallin eristetyistä satelliittisoluista; 2.1 Fenotyypin pelastus myoblastviljelyssä käyttäen Notch-aktivaattoreita ja NICD1:n lentiviraalista yliilmaisua; 2. Fenotyypin pelastaminen koputtavilla hiirillä: 2.2.2Hoito notch-aktivaattoreilla, 2.2.3 Potilaiden fibroblastien ja kontrollien tuottaman ihmisen iPS:n hallinta; 3.1Hankkeeseen osallistuvien Neuromuskulaariyksiköiden DMD-geenin mutaatiopotilaiden eristäminen 3.2Tunnistaa lievästi vaikuttavat tai oireettomat kuljettajat ja kvantifioi Noth-reitin aktivoinnin tason sääntelijöiden ja alavirtaan vaikuttavien vaikuttimien avulla; 4.Analysoi, onko ADG: n hypoglykosylaatiota potilailla, joilla on sääntelemätön Notch-reitti (DMD, TRIM32) (Finnish)
17 August 2022
0 references
F’dawn l-aħħar snin il-grupp tagħna ħadem fuq l-identifikazzjoni tal-ġene POGLUT1, responsabbli għal O-glikosilazzjoni b’Bosta, bħala ġene kawżali ġdid ta’ distrofija muskolari reċessiva, li juri l-involviment ta’ Notch fil-mijoġenesi u fil-glikosilazzjoni korretta tal-proteina extraċellulari tal-matriċi alfa-distroglikan (ADG). Barra minn hekk, dan l-aħħar intwera li espressjoni żejda ta’ Jagged1, regolatur magħruf sew tat-Talbiet, f’mudell ta’ annimal ta’ distrofija muskolari Duchenne (DMD) jirnexxilu jsalva l-fenotip muskolari. Għalhekk, il-modulazzjoni b’darbtejn hija profilata bħala kura potenzjali f’distrofija muskolari. GĦANIJIET: 1. Ġenerazzjoni u deskrizzjoni ta’ mudell ta’ ġurdien knock-in li jġorr il-mutazzjoni D233E f’POGLUT1 deskritt fil-pazjenti; 2. Salva l-fenotip muskolari fil-mudell tal-ġrieden iġġenerat; 3. Studja l-passaġġ tat-tarf f’pazjenti b’DMD u stabbilixxi korrelazzjoni mas-severità fenotipika; 4. Analizza l-glikosilazzjoni ta’ ADG f’pazjenti b’DMD, u tikkorrelataha mal-attivazzjoni ta’ Notch. METODU: 1.1 Iġġenera mudell knock-in li jġorr il-mutazzjoni D233E fil-POGLUT1 bl-użu tat-teknoloġija TALEN; 1.2 Deskrizzjoni tal-fenotip funzjonali u molekulari ta’ knock-in; 1.3 L-analiżi kwantitattiva u funzjonali taċ-ċelloli iżolati tas-satelliti tal-mudell knock-in; 2.1 Salvataġġ ta’ fenotip f’kultura ta’ mijoblast bl-użu ta’ attivaturi b’darbtejn u espressjoni żejda lentivirali tal-NICD1; 2. Salvataġġ ta’ fenotip fi ġrieden knock-in permezz ta’: 2.2.2 Trattament b’Attivaturi tal-Bidu, 2.2.3Ġestjoni ta’ iPS umana ġġenerata minn fibroblasts u kontrolli tal-pazjenti; 3.1L-esklużjoni ta’ pazjenti b’mutazzjonijiet fil-ġene DMD tal-Unitajiet Newromuskolari li jikkollaboraw fil-proġett; 3.2Jidentifika trasportaturi kemxejn affettwati jew asintomatiċi u jikkwantifika l-livell ta’ attivazzjoni tal-ebda mogħdija bl-espressjoni ta’ regolaturi u effetturi downstream; 4.Analyze jekk hemmx ipoglikosilazzjoni ta’ ADG fil-muskoli ta’ pazjenti b’passaġġ deregolat tal-Bidu (DMD, TRIM32) (Maltese)
17 August 2022
0 references
Pēdējo gadu laikā mūsu grupa ir strādājusi, lai identificētu POGLUT1 gēnu, kas ir atbildīgs par Notch O-glikozilāciju, kā jaunu recesīvās muskuļu distrofijas cēlonisko gēnu, parādot Notch iesaistīšanos mioģenēzes procesā un ekstracelulārā alfa-distroglikāna matricas proteīna (ADG) pareizu glikozilāciju. Turklāt nesen ir pierādīts, ka Jagged1 pārmērīga ekspresija, kas ir labi pazīstams Notch regulators, Duchenne muskuļu distrofijas (DMD) dzīvnieku modelī izdodas glābt muskuļu fenotipu. Tāpēc, Notch modulācija ir profilēts kā potenciāls ārstēšana muskuļu distrofija. MĒRĶI: 1. Pacientiem aprakstītā POGLUT1 ievades peļu modeļa ar D233E mutāciju ģenerēšana un apraksts; 2. Glābt muskuļu fenotipu ģenerētajā peļu modelī; 3. Izpētīt iecirtuma ceļu DMD pacientiem un noteikt korelāciju ar fenotipa smagumu; 4. Analizējiet ADG glikozilāciju DMD pacientiem un korelējiet to ar Notch aktivāciju. METODE: 1.1 Izveidot pieklauvēt modeli ar D233E mutāciju POGLUT1 izmantojot TALEN tehnoloģiju;1.2 Funkcionālās un molekulārās fenotipa apraksts; 1.3 Pieslēgšanās modeļa izolēto satelīta šūnu kvantitatīvā un funkcionālā analīze; 2.1 fenotipa glābšana mioblastu kultūrā, izmantojot ligzdas aktivatorus, un lēcu pārmērīga NICD1 ekspresija; 2. Fenotipa glābšana ar knock-in pelēm: 2.2.2Ārstēšana ar iecirtuma aktivētājiem, 2.2.3.No pacienta fibroblastiem un kontrolēm iegūtas cilvēka iPS pārvaldība; 3.1Atbrīvojot pacientus ar mutācijām Neuromuskulāro vienību DMD gēnā, kas sadarbojas projektā; 3.2Noteikt nedaudz skartos vai asimptomātiskos nesējus un kvantificēt Noth ceļa aktivizēšanas līmeni, izsakot regulatorus un pakārtotos efektus; 4. Analizējiet, vai ir hipoglikozilācija ADG muskuļos pacientiem ar deregulētu Notch ceļu (DMD, TRIM32) (Latvian)
17 August 2022
0 references
V posledných rokoch naša skupina pracovala na identifikácii génu POGLUT1, zodpovedného za zárez O-glykozyláciu, ako nového kauzálneho génu recesívnej svalovej dystrofie, čo dokazuje zapojenie zárezu do myogenézy a správnej glykozylácie extracelulárneho alfa-distroglykánového matricového proteínu (ADG). Okrem toho sa nedávno ukázalo, že nadmerná expresia Jagged1, známeho regulátora zárezu, v zvieracom modeli Duchenneovej svalovej dystrofie (DMD) dokáže zachrániť svalový fenotyp. Preto je modulácia zárezu profilovaná ako potenciálna liečba pri svalovej dystrofii. CIELE: 1. Generovanie a opis modelu knock-in myší s mutáciou D233E v POGLUT1 popísanej u pacientov; 2. Zachrániť svalový fenotyp v generovanom myšom modeli; 3. Štúdia zárezovej dráhy u pacientov s DMD a stanovenie korelácie s fenotypovou závažnosťou; 4. Analyzujte glykozyláciu ADG u pacientov s DMD a korelujte ju s aktiváciou zárezu. METÓDA: 1.1 Generovať knock-in model nesúci mutáciu D233E v POGLUT1 pomocou technológie TALEN;1.2 Opis funkčného a molekulárneho fenotypu knock-inu; 1.3 Kvantitatívne a funkčné analýzy izolovaných satelitných buniek modelu knock-in; 2.1 Záchrana fenotypu v myoblastovej kultúre použitím zárezových aktivátorov a nadmernej expresie lentiviru NICD1; 2. Záchrana fenotypu u knock-in myší: 2.2.2 Liečba s zárezovými aktivátormi, 2.2.3Riešenie ľudských iPS vytvorených z fibroblastov a kontrol pacientov; 3.1Uzmierňujúci pacienti s mutáciami v géne DMD Neuromuskulárnych jednotiek spolupracujúcich v projekte; 3.2identifikujte mierne postihnuté alebo asymptomatické nosiče a kvantifikujte úroveň aktivácie deviatej dráhy vyjadrením regulátorov a efektorov smerom nadol; 4.Analyzujte, či dochádza k hypoglykozylácii ADG u pacientov s deregulovanou zárezovou dráhou (DMD, TRIM32) (Slovak)
17 August 2022
0 references
Le blianta beaga anuas tá ár ngrúpa ag obair ar aithint an ghéine POGLUT1, atá freagrach as Notch O-glycosylation, mar ghéine cúiseach nua de dhiostróife mhatánach cúlaitheach, rud a léiríonn rannpháirtíocht Notch i myogenesis agus i glycosylation ceart an próitéin maitrís seachcheallach alfa-distroglycan (ADG). Ina theannta sin, tá sé léirithe le déanaí go bhfuil ró-léiriú Jagged1, rialtóir Notch-aitheanta go maith, i samhail ainmhithe de diostróife mhatánach Duchenne (DMD) bainistíonn chun tarrthála an phenotype muscle. Dá bhrí sin, déantar modhnú Notch a phróifíliú mar chóireáil fhéideartha i dystrophy mhatánach. CUSPÓIRÍ: 1. Giniúint agus cur síos ar shamhail luiche cnagtha ina n-iompraítear sóchán D233E in POGLUT1 a ndéantar cur síos air in othair; 2. Tarrthála an feinitíopa muscle sa tsamhail murine ghintear; 3. Staidéar a dhéanamh ar chonair Notch in othair DMD agus comhghaolú a bhunú le déine feinitíopa; 4. Anailís a dhéanamh ar glycosylation ADG in othair DMD, agus é a chreimeadh le gníomhachtú Notch. MODH: 1.1 Gin samhail cnag-i iompar an sóchán D233E i POGLUT1 ag baint úsáide as teicneolaíocht TALEN; 1.2 Cur síos ar an bhfeinitíopa feidhmiúil agus móilíneach de cnag isteach; 1.3 Anailís chainníochtúil agus fheidhmiúil ar chealla satailíte scoite den tsamhail chiarach; 2.1 Féinitíopa a tharrtháil i gcultúr mioblastach ag baint úsáide as gníomhachtóirí notch agus as ró-léiriú iasachta de NICD1; 2. Tarrtháil feinitíopa i lucha cnagtha ag: 2.2.2Cóireáil le Gníomhachtóirí Notch, 2.2.3Bainistiú iPS daonna a ghintear ó fhíblastáin agus rialuithe othar; 3.1Othair a bhfuil sócháin acu i ngéin DMD na nAonad Neuromuscular atá ag comhoibriú leis an tionscadal a lipéadú; 3.2iompróirí a bhfuil tionchar beag acu nó iompróirí aisiomptómacha a shainaithint agus leibhéal gníomhachtaithe an Nóú conaire a chainníochtú trí rialtóirí agus éifeachtóirí iartheachtacha a léiriú; 4.Analyse cibé an bhfuil hypoglycosylation ADG i muscle na n-othar a bhfuil cosán Notch dírialáilte (DMD, TRIM32) (Irish)
17 August 2022
0 references
V posledních letech naše skupina pracovala na identifikaci genu POGLUT1, který je zodpovědný za O-glykosylace Notch, jako nového kauzálního genu recesivní svalové dystrofie, což dokazuje zapojení Notche do myogeneze a do správné glykosylace extracelulární alfa-distroglykanové matricové bílkoviny (ADG). Kromě toho bylo nedávno prokázáno, že nadměrná exprese Jagged1, známého regulátora Notch, ve zvířecím modelu Duchenne svalové dystrofie (DMD) dokáže zachránit svalový fenotyp. Proto je Notch modulace profilována jako potenciální léčba svalové dystrofie. CÍLE: 1. Vytvoření a popis modelu klepání myši nesoucího mutaci D233E v POGLUT1 popsané u pacientů; 2. Zachránit svalový fenotyp ve vygenerovaném modelu myší; 3. Studie Notchovy dráhy u pacientů s DMD a stanovení korelace se závažností fenotypu; 4. Analyzovat glykosylace ADG u pacientů s DMD a korelovat ji s aktivací přípravku Notch. METODA: 1.1 Generovat knock-in model nesoucí mutaci D233E v POGLUT1 pomocí technologie TALEN;1.2 Popis funkčního a molekulárního fenotypu knock-in; 1.3 Kvantitativní a funkční analýza izolovaných satelitních buněk modelu knock-in; 2.1 Záchrana fenotypu v myoblastové kultuře za použití Notchových aktivátorů a lentivirové nadměrné exprese NICD1; 2. Záchrana fenotypu u myší: 2.2.2Léčba s aktivátory Notch, 2.2.3Správa lidských iPS generovaných z pacientských fibroblastů a ovládacích prvků; 3.1 Upozornění pacientů s mutacemi v genu DMD Neuromuskulárních jednotek spolupracujících v projektu; 3.2Identifikovat mírně postižené nebo asymptomatické nosiče a kvantifikovat úroveň aktivace Noth dráhy vyjádřením regulátorů a následných efektorů; 4.Analyzujte, zda existuje hypoglykosylace ADG u svalů pacientů s deregulovanou Notchovou cestou (DMD, TRIM32) (Czech)
17 August 2022
0 references
Nos últimos anos, o nosso grupo tem trabalhado na identificação do gene POGLUT1, responsável pela O-glicosilação do entalhe, como um novo gene causal da distrofia muscular recessiva, demonstrando o envolvimento do entalhe na miogénese e na glicosilação correcta da proteína da matriz alfa-distroglicano extracelular (ADG). Além disso, foi recentemente demonstrado que a superexpressão de Jagged1, um conhecido regulador de entalhe, em um modelo animal de distrofia muscular de Duchenne (DMD) consegue resgatar o fenótipo muscular. Portanto, a modulação de Notch é perfilada como um potencial tratamento na distrofia muscular. OBJETIVOS: 1. Geração e descrição de um modelo de ratinho knock-in portador da mutação D233E no POGLUT1 descrito em doentes; 2. Resgatar o fenótipo muscular no modelo murino gerado; 3. Estudar a via de entalhe em doentes com DMD e estabelecer correlação com a gravidade do fenótipo; 4. Analisar a glicosilação de ADG em pacientes com DMD, e correlacioná-lo com a activação de Notch. MÉTODO: 1.1 Gerar um modelo knock-in portador da mutação D233E no POGLUT1 utilizando a tecnologia TALEN;1.2 Descrição do fenótipo funcional e molecular do knock-in; 1.3 Análise quantitativa e funcional de células satélite isoladas do modelo knock-in; 2.1 Resgate do fenótipo em cultura de mioblastos com activadores de Notch e sobre-expressão lentiviral da NICD1; 2. Resgate do fenótipo em ratos knock-in por: 2.2.2Tratamento com activadores de entalhe, 2.2.3Gestão de iPS humanas geradas a partir de fibroblastos e controlos de doentes; 3.1Recluir doentes com mutações no gene DMD das Unidades Neuromusculares que colaboram no projecto; 3.2Identificar portadores ligeiramente afetados ou assintomáticos e quantificar o nível de ativação da via Noth por expressão de reguladores e efetores a jusante; 4.Analisar se existe hipoglicosilação de ADG no músculo de doentes com via de entalhe desregulada (DMD, TRIM32) (Portuguese)
17 August 2022
0 references
Viimastel aastatel on meie rühm töötanud Notch O-glükosüülimise eest vastutava POGLUT1 geeni kui retsessiivse lihasdüstroofia uue põhjusliku geeni kindlakstegemise nimel, näidates Notch’i seotust müogeneesiga ja ekstratsellulaarse alfa-distroglükaanmaatriksvalgu (ADG) õige glükosüleerimisega. Lisaks on hiljuti tõestatud, et tuntud Notch regulaatori Jagged1 üleekspressioon Duchenne’i lihasdüstroofia (DMD) loommudelis suudab päästa lihaste fenotüübi. Seetõttu kirjeldatakse Notch’i modulatsiooni võimaliku ravina lihasdüstroofia korral. EESMÄRGID: 1. D233E mutatsiooniga hiiremudeli loomine ja kirjeldus POGLUT1 patsientidel; 2. Päästa loodud hiiremudeli lihaste fenotüüp; 3. Uurida DMD patsientidel Notch’i rada ja teha kindlaks korrelatsioon fenotüübi raskusega; 4. Analüüsida DMD patsientidel ADG glükosüülimist ja korreleerida see Notch’i aktiveerimisega. MEETOD: 1.1 Loodav D233E mutatsiooniga mudel POGLUT1 TALEN-tehnoloogia abil;1.2 Koputamise funktsionaalse ja molekulaarse fenotüübi kirjeldus; 1.3 Koputamismudeli isoleeritud satelliitrakkude kvantitatiivne ja funktsionaalne analüüs; 2.1 fenotüübi päästmine müoblastkultuuris, kasutades Notch aktivaatoreid ja NICD1 läätseviiruslikku üleekspressiooni; 2. Fenotüübi päästmine sisselülitatud hiirtel: 2.2.2Töötlemine Notch Activatoritega, 2.2.3 Patsiendi fibroblastidest ja kontroll(imehhanism)idest tuleneva inimese iPSi haldamine; 3.1Projekti raames koostööd tegevate neuromuskulaarsete üksuste DMD geeni mutatsioonidega patsientide kaasamine; 3.2 Määrata vähesel määral mõjutatud või asümptomaatilised kandjad ja kvantifitseerida Noth pathway aktiveerimise tase reguleerijate ja järelmõjurite väljendamise teel; 4.Analüüsige, kas dereguleeritud Notch pathwayga (DMD, TRIM32) patsientide lihastes esineb ADG hüpoglükosülatsioon (Estonian)
17 August 2022
0 references
Az elmúlt években csoportunk a Notch O-glikozilációért felelős POGLUT1 gén azonosításán dolgozott, mint a recesszív izom disztrófia új ok-okozati génje, amely bizonyítja a Notch részvételét a miogenezisben és az extracelluláris alfa-disztroglikán mátrix fehérje (ADG) megfelelő glikozilációjában. Ezenkívül a közelmúltban kimutatták, hogy a Jagged1, egy jól ismert Notch-szabályozó, a Duchenne izom disztrófia (DMD) állatmodelljében történő túlexpressziója képes megmenteni az izomfenotípust. Ezért a Notch modulációt az izom disztrófia lehetséges kezeléseként profilozzák. CÉLKITŰZÉSEK: 1. A betegek által leírt POGLUT1 D233E mutációt hordozó kopogó egér modell létrehozása és leírása; 2. Megmenti az izom fenotípust a generált murine modellben; 3. Tanulmányozza a Notch útvonalat DMD-ben szenvedő betegeknél, és korrelációt állapítson meg a fenotípus súlyosságával; 4. Elemezze az ADG glikozilációját DMD-ben szenvedő betegeknél, és korrelálja azt a Notch aktiválásával. MÓDSZER: 1.1 TALEN technológiával hozzon létre egy D233E mutációt hordozó D233E mutációt a POGLUT1-ben;1.2 A kopogás funkcionális és molekuláris fenotípusának leírása; 1.3 A behatolási modell izolált műholdas sejtjeinek mennyiségi és funkcionális elemzése; 2.1 fenotípus megmentése myoblast-kultúrában Notch aktivátorokkal és NICD1 lentivirális túlexpressziójával; 2. Fenotípus mentése beütő egerekben: 2.2.2Kapcsolás Notch Activatorokkal, 2.2.3A betegek fibroblasztjaiból és kontrolljaiból származó humán iPS kezelése; 3.1A projektben együttműködő Neuromuscular Units DMD génjének mutációiban szenvedő betegek felvétele; 3.2Az enyhén érintett vagy tünetmentes hordozók azonosítása és a Noth útvonal aktiválási szintjének számszerűsítése a szabályozók és a downstream effektorok kifejezésével; 4.Annak elemzése, hogy van-e az ADG hypoglykozilációja a deregulált Notch útvonalban (DMD, TRIM32) szenvedő betegek izomjában (Hungarian)
17 August 2022
0 references
През последните години нашата група работи върху идентифицирането на гена POGLUT1, отговорен за Notch O-гликозилация, като нов причинен ген на рецесивна мускулна дистрофия, демонстриращ участието на Notch в миогенезата и в правилното гликозилиране на екстрацелуларния алфа-дистрогликанов матричен протеин (ADG). В допълнение, наскоро е доказано, че свръхекспресия на Jagged1, добре познат регулатор на Notch, в животински модел на мускулна дистрофия Дюшен (DMD) успява да спаси мускулния фенотип. Следователно, Notch модулация се профилира като потенциално лечение в мускулна дистрофия. ЦЕЛИ: 1. Генериране и описание на модел на мишка, носещ D233E мутация в POGLUT1, описан при пациенти; 2. Спасяване на мускулния фенотип в генерирания модел на миши; 3. Проучване на пътя на Notch при пациенти с ДМД и установяване на корелация с тежестта на фенотипа; 4. Анализирайте гликозилацията на ADG при пациенти с ДМД и го свържете с активирането на Notch. МЕТОД: 1.1 Генериране на модел удар с D233E мутация в POGLUT1 с помощта на TALEN технология;1.2 Описание на функционалния и молекулярен фенотип на удара; 1.3 Количествен и функционален анализ на изолирани сателитни клетки от модела на удара; 2.1 Спасяване на фенотипа в миобластната култура с помощта на активатори на Notch и ентивирусна свръхекспресия на NICD1; 2. Спасяване на фенотип при почукани мишки от: 2.2.2Лечение с активатори на Notch, 2.2.3Управление на човешки iPS, генерирани от фибробласти и контроли на пациента; 3.1Реклутиране на пациенти с мутации в гена DMD на невромускулните единици, които си сътрудничат в проекта; 3.2Идентифициране на леко засегнати или асимптоматични носители и количествено определяне на степента на задействане на Нотния път чрез изразяване на регулаторите и регулаторите надолу по веригата; 4.Анализ дали има хипогликозилация на ADG в мускулите на пациенти с дерегулиран път на възлите (DMD, TRIM32) (Bulgarian)
17 August 2022
0 references
Pastaraisiais metais mūsų grupė dirbo nustatant POGLUT1 geną, atsakingą už O-glikozilinimą, kaip naują recesyvinės raumenų distrofijos priežastinį geną, parodantį Noch dalyvavimą miogenezėje ir teisingą ekstraląstelinio alfa-distroglikano matricos baltymo (ADG) glikozilinimą. Be to, neseniai buvo įrodyta, kad Jagged1, gerai žinomo Noch reguliatoriaus, raiška gyvūnų modelyje Duchenne raumenų distrofija (DMD) sugeba išgelbėti raumenų fenotipą. Todėl Noch moduliacija apibūdinama kaip galimas raumenų distrofijos gydymas. TIKSLAI: 1. Grandininės pelės modelio, turinčio D233E mutaciją POGLUT1, generavimas ir aprašymas, aprašytas pacientams; 2. Išgelbėkite raumenų fenotipą sukurtame pelių modelyje; 3. Ištirti Noch kelią DMD sergantiems pacientams ir nustatyti koreliaciją su fenotipo sunkumu; 4. Analizuoti ADG glikozilinimą DMD sergantiems pacientams ir susieti jį su Noch aktyvavimu. METODAS: 1.1 Sukurkite grandininį modelį su D233E mutacija POGLUT1 naudojant TALEN technologiją;1.2 Funkcinio ir molekulinio fenotipo aprašymas; 1.3 Kiekybinę ir funkcinę atskirtų grandininio modelio palydovinių ląstelių analizę; 2.1 fenotipo gelbėjimas mioblasto kultūroje naudojant „NICD1“ aktyvatorius ir lęšių raišką; 2. Fenotipo gelbėjimas pelkėms: 2.2.2Gydymas su Notch aktyvatoriais, 2.2.3žmogaus iPS, susidarančio iš paciento fibroblastų ir kontrolės priemonių, valdymas; 3.1Pacientus, turinčius neuromuskulinių vienetų DMD geno mutacijų, bendradarbiaujančių projekte; 3.2nustatyti šiek tiek paveiktus arba besimptomius nešiklius ir kiekybiškai įvertinti Noth kelio aktyvavimo lygį reguliatoriams ir pasroviui veikiantiems subjektams; 4.Pacientų, sergančių dereguliuotu Noch keliu (DMD, TRIM32), raumenų ADG hipoglikozilinimas (Lithuanian)
17 August 2022
0 references
U posljednjih nekoliko godina naša grupa je radila na identifikaciji POGLUT1 gena, odgovornog za Notch O-glikosilaciju, kao novog uzročnog gena recesivne mišićne distrofije, pokazujući sudjelovanje Notcha u miogenezi i u ispravnoj glikozilaciji ekstracelularnog alfa-distroglikonskog matrica proteina (ADG). Osim toga, nedavno je dokazano da prekomjerno izražavanje Jagged1, poznatog regulatora Notch, u životinjskom modelu Duchenne mišićne distrofije (DMD) uspijeva spasiti mišićni fenotip. Stoga je modulacija Notcha profilirana kao potencijalno liječenje mišićne distrofije. CILJEVI: 1. Generiranje i opis modela kucanja miša koji nosi mutaciju D233E u POGLUT1 opisanoj u bolesnika; 2. Spasiti mišićni fenotip u stvorenom modelu murina; 3. Ispitati put kvržice u bolesnika s DMD-om i utvrditi korelaciju s težinom fenotipa; 4. Analizirati glikozilaciju ADG-a u bolesnika s DMD-om i povezati ga s aktivacijom Notcha. METODA: 1.1 Generirati knock-in model nosi mutaciju D233E u POGLUT1 pomoću TALEN tehnologije;1.2 Opis funkcionalnog i molekularnog fenotipa knock-in; 1.3 Kvantitativna i funkcionalna analiza izoliranih satelitskih stanica modela knock-in; 2.1 Spašavanje fenotipa u mioblastnoj kulturi primjenom aktivatora Notcha i lentiviralnog pretjeranog izražaja NICD1; 2. Spašavanje fenotipa u miševa: 2.2.2Liječenje s Notch aktivatorima, 2.2.3.Upravljanje ljudskim iPS-om dobivenim iz fibroblasta pacijenata i kontrola; 3.1Reklamiranje bolesnika s mutacijama u DMD genu neuromuskularne jedinice koje surađuju u projektu; 3.2Utvrđivati blago pogođene ili asimptomatske nosače i kvantificirati razinu aktivacije Noth putanje izražavanjem regulatora i silaznih efektora; 4. Analizirati postoji li hipoglikozilacija ADG-a u mišićima bolesnika s dereguliranim Notch putom (DMD, TRIM32) (Croatian)
17 August 2022
0 references
Under de senaste åren har vår grupp arbetat med identifiering av POGLUT1-genen, ansvarig för Notch O-glykosylering, som en ny orsaksgen till recessiv muskeldystrofi, vilket visar att Notch är involverat i myogenes och i korrekt glykosylering av det extracellulära alfadistroglykanmatrisproteinet (ADG). Dessutom har det nyligen visat sig att överuttryck av Jagged1, en välkänd Notch regulator, i en djurmodell av Duchenne muskeldystrofi (DMD) lyckas rädda muskelfenotypen. Därför är Notch modulering profilerad som en potentiell behandling i muskeldystrofi. MÅL: 1. Generering och beskrivning av en knock-in-musmodell som bär på D233E-mutationen i POGLUT1 som beskrivs hos patienter. 2. Rädda muskelfenotypen i den genererade murinmodellen; 3. Studera Notch-vägen hos DMD-patienter och fastställa korrelation med fenotyps allvarlighetsgrad. 4. Analysera glykosyleringen av ADG hos DMD-patienter och korrelera den med aktiveringen av Notch. METOD: 1.1 Skapa en knock-in-modell som bär på D233E-mutationen i POGLUT1 med hjälp av TALEN-teknik;1.2 Beskrivning av den funktionella och molekylära fenotypen av knock-in; 1.3 Kvantitativ och funktionell analys av isolerade satellitceller i knock-in-modellen. 2.1 Räddning av fenotyp i myoblastkultur med Notch-aktivatorer och lentiviral överuttryck av NICD1. 2. Räddning av fenotyp i knock-in möss genom att: 2.2.2Behandling med Notch-aktivatorer, 2.2.3 Hantering av humant iPS som genereras från patientfibroblaster och kontroller. 3.1Recluting av patienter med mutationer i DMD-genen hos de neuromuskulära enheterna som samarbetar i projektet. 3.2Identifiera något påverkade eller asymtomatiska transportörer och kvantifiera aktiveringsnivån för den noth-vägen genom att uttrycka regulatorer och effektfaktorer nedströms. 4.Analysera om det finns hypoglykosylering av ADG i muskeln hos patienter med avreglerad Notch-väg (DMD, TRIM32) (Swedish)
17 August 2022
0 references
În ultimii ani, grupul nostru a lucrat la identificarea genei POGLUT1, responsabilă pentru glicozilarea Notch O, ca o nouă genă cauzală de distrofie musculară recesivă, demonstrând implicarea Notch în miogeneză și în glicozilarea corectă a proteinei matricei alfa-distroglicane extracelulare (ADG). În plus, s-a demonstrat recent că supraexprimarea Jagged1, un bine-cunoscut regulator Notch, într-un model animal de distrofie musculară Duchenne (DMD) reușește să salveze fenotipul muscular. Prin urmare, modularea Notch este profilată ca un potențial tratament în distrofie musculară. OBIECTIVE: 1. Generarea și descrierea unui model de șoarece care poartă mutația D233E în POGLUT1 descrisă la pacienți; 2. Salvarea fenotipului muscular în modelul murine generat; 3. Studiați calea Notch la pacienții cu DMD și stabiliți corelația cu severitatea fenotipului; 4. Se analizează glicozilarea ADG la pacienții cu DMD și se corelează cu activarea Notch. METODĂ: 1.1 Generați un model de knock-in care transportă mutația D233E în POGLUT1 folosind tehnologia TALEN;1.2 Descrierea fenotipului funcțional și molecular al knock-in-ului; 1.3 Analiza cantitativă și funcțională a celulelor satelit izolate ale modelului knock-in; 2.1 Salvarea fenotipului în cultura mioblastică utilizând activatori Notch și supraexprimarea lentivirală a NICD1; 2. Salvarea fenotipului la șoareci knock-in prin: 2.2.2Tratamentul cu Activatori Notch, 2.2.3Gestionarea iPS umane generate de fibroblaste și controale ale pacienților; 3.1 Recluzând pacienții cu mutații în gena DMD a unităților neuromusculare care colaborează la proiect; 3.2Identificarea purtătorilor ușor afectați sau asimptomatici și cuantificarea nivelului de activare a căii Noth prin exprimarea regulatorilor și a efectorilor din aval; 4.Analizați dacă există hipoglicozilație a ADG în mușchii pacienților cu cale Notch dereglată (DMD, TRIM32) (Romanian)
17 August 2022
0 references
V zadnjih letih je naša skupina delala na identifikaciji gena POGLUT1, ki je odgovoren za Notch O-glikozilacijo, kot novega vzročnega gena recesivne mišične distrofije, kar dokazuje vpletenost Notcha v miogenezo in pravilno glikozilacijo zunajcelični alfa-distroglikan matriks protein (ADG). Poleg tega je bilo pred kratkim dokazano, da prekomerno izražanje Jagged1, dobro znanega regulatorja Notch, v živalskem modelu Duchennove mišične distrofije (DMD) uspe rešiti mišični fenotip. Zato je modulacija zareze profilirana kot potencialno zdravljenje mišične distrofije. CILJI: 1. Generiranje in opis modela miš, ki nosi mutacijo D233E v POGLUT1, ki je opisana pri bolnikih; 2. Reševanje mišičnega fenotipa v ustvarjenem mišjem modelu; 3. Preuči pot zareze pri bolnikih z DMD in ugotovi korelacijo z resnostjo fenotipa; 4. Pri bolnikih z DMD analizirajte glikozilacijo ADG in jo primerjajte z aktivacijo zdravila Notch. METODA: 1.1 Ustvarite model, ki nosi mutacijo D233E v POGLUT1 z uporabo tehnologije TALEN;1.2 Opis funkcionalnega in molekularnega fenotipa knock-in; 1.3 Kvantitativna in funkcionalna analiza izoliranih satelitskih celic modela knock-in; 2.1 Reševanje fenotipa v mioblastni kulturi z uporabo zareznih aktivatorjev in čezmerno ekspresijo lentivirala NICD1; 2. Reševanje fenotipa pri miših v trkanju z: 2.2.2Zdravljenje z zareznimi aktivatorji, 2.2.3 Upravljanje človeške iPS, pridobljene iz bolnikovih fibroblastov in kontrol; 3.1Odprava bolnikov z mutacijami gena za DMD nevromuskularnih enot, ki sodelujejo v projektu; 3.2 Opredeliti rahlo prizadete ali asimptomatske nosilce in količinsko opredeliti stopnjo aktivacije Nothove poti z izrazom regulatorjev in efektorjev navzdol; 4.Analiza, ali obstaja hipoglikozilacija ADG v mišicah bolnikov z deregulirano potjo zareze (DMD, TRIM32) (Slovenian)
17 August 2022
0 references
W ostatnich latach nasza grupa pracowała nad identyfikacją genu POGLUT1, odpowiedzialnego za glikozylację typu Notch O, jako nowego genu przyczynowego recesywnej dystrofii mięśniowej, wykazującego zaangażowanie Notch w miogenezę i prawidłową glikozylację pozakomórkowego białka macierzy alfa-distroglikanowej (ADG). Ponadto ostatnio wykazano, że nadekspresja Jagged1, znanego regulatora Notch, w zwierzęcym modelu dystrofii mięśni Duchenne’a (DMD) udaje się uratować fenotyp mięśniowy. Dlatego modulacja Notch jest profilowana jako potencjalne leczenie dystrofii mięśniowej. CELE: 1. Generowanie i opis modelu myszy typu knock-in z mutacją D233E w POGLUT1 opisanego u pacjentów; 2. Ratowanie fenotypu mięśni w wytwarzanym modelu mury; 3. Zbadać ścieżkę wycięcia u pacjentów z DMD i ustalić korelację z nasileniem fenotypu; 4. Analizować glikozylację ADG u pacjentów z DMD i korelować ją z aktywacją Notch. METODA: 1.1 Wygenerowanie modelu knock-in z mutacją D233E w POGLUT1 przy użyciu technologii TALEN;1.2 Opis funkcjonalnego i molekularnego fenotypu pukania; 1.3 Analiza ilościowa i funkcjonalna odizolowanych komórek satelitarnych modelu pukania; 2.1 Ratowanie fenotypu w kulturze mioblastowej przy użyciu aktywatorów Notch i nadekspresji lentiwirusowej NICD1; 2. Ratowanie fenotypu u myszy pukanych przez: 2.2.2Leczenie z aktywatorami wycięcia, 2.2.3Zarządzanie ludzkim iPS wytwarzanym przez fibroblasty i kontrole pacjentów; 3.1 Odmrażanie pacjentów z mutacjami w genie DMD jednostek neuromięśniowych współpracujących w projekcie; 3.2Zidentyfikowanie nieznacznych lub bezobjawowych nośników i ilościowe określenie poziomu aktywacji ścieżki Noth za pomocą regulatorów i czynników niższego szczebla; 4. Analiza, czy występuje hipoglikozylacja ADG w mięśniach pacjentów z deregulowaną ścieżką wycięcia (DMD, TRIM32) (Polish)
17 August 2022
0 references
Sevilla
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
PI16_01843
0 references