ROLE OF CYTOPLASMIC CYTOPLASMATIC CYCLINE COMPLEX D1-CDK4 IN CELLULAR SIGNALING (Q3139200)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3139200 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | ROLE OF CYTOPLASMIC CYTOPLASMATIC CYCLINE COMPLEX D1-CDK4 IN CELLULAR SIGNALING |
Project Q3139200 in Spain |
Statements
98,826.75 Euro
0 references
181,500.0 Euro
0 references
54.45 percent
0 references
30 December 2016
0 references
31 December 2020
0 references
UNIVERSIDAD DE LERIDA
0 references
25071
0 references
LAS CICLINAS ACTUAN COMO SUBUNIDADES REGULADORAS DE LAS CINASAS DEPENDIENTES DE CICLINA O CDKS Y SON PIEZAS CLAVE EN LA DEFINICION DE LAS ETAPAS DE LA DIVISION CELULAR. LOS COMPLEJOS CICLINA D-CDK4/6 EN MAMIFEROS ESTAN ESPECIALIZADOS EN EL CONTROL DE LA ENTRADA EN EL CICLO DE DIVISION CELULAR BASICAMENTE A TRAVES DE MECANISMOS DE REGULACION TRANSCRIPCIONAL. ESTA FUNCION NUCLEAR DE CICLINA D-CDK4/6 ES ESPECIALMENTE IMPORTANTE DURANTE EL DESARROLLO TISULAR, Y ALTERACIONES EN LA EXPRESION DE ESTE COMPLEJO PROMUEVEN LA FORMACION DE TUMORES. ASI, CICLINA D1 (CCND1) Y CDK4 SON DOS DE LOS ONCOGENES MAS AMPLIFICADOS EN DISTINTOS TIPOS TUMORALES. TAMBIEN SE SABE QUE CCND1-CDK4 ESTA IMPLICADO EN LA REGULACION DE LA ADHESION Y MIGRACION CELULARES, PROCESOS ESENCIALES DURANTE EL DESARROLLO. NUESTRO GRUPO HA MOSTRADO QUE COMPLEJOS CCND1-CDK4 LOCALIZADOS EN EL CITOPLASMA CONTROLAN ESTOS PROCESOS A TRAVES DE LA ACTIVACION DE LAS GTPASAS RAL Y RAC1. ESTE HALLAZGO CAMBIA EL PARADIGMA QUE SITUA A CCND1 COMO UNO DE LOS EFECTORES ULTIMOS DE LAS VIAS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES PARA EL CONTROL DE LA DIVISION CELULAR Y SUGIERE QUE SU ACTIVIDAD CITOPLASMATICA PUEDE DESEMPEÑAR UN ROL MUCHO MAS IMPORTANTE COMO REGULADOR DE LA SEÑALIZACION CELULAR DE LO QUE HASTA AHORA SE LE ATRIBUIA. ASI, EL PROPOSITO PRINCIPAL DE ESTE PROYECTO ES EL ESTUDIO DE LA IMPORTANCIA DE LAS FUNCIONES CITOPLASMATICAS DE CCND1-CDK4 EN LA REGULACION DE LA SEÑALIZACION CELULAR DURANTE EL DESARROLLO Y EN EL CANCER. PARA ELLO PROPONEMOS TRES OBJETIVOS CONCRETOS: 1) LA CARACTERIZACION DE LAS VIAS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES REGULADAS POR EL COMPLEJO CCND1-CDK4 CITOPLASMATICO. MEDIANTE DISTINTAS TECNICAS DE PROTEOMICA PRETENDEMOS DESCUBRIR Y CARACTERIZAR DIANAS DE CCND1-CDK4 IMPLICADAS EN LA SEÑALIZACION CELULAR. DENTRO DE ESTE OBJETIVO, TAMBIEN ESTUDIAREMOS LAS PROHIBITINAS, INTERACTORES DE CDK4 OBTENIDOS EN ANTERIORES SCREENINGS Y QUE PODRIAN ESTAR IMPLICADAS EN LA LOCALIZACION Y ACTIVIDAD CITOPLASMATICA DE CCND1-CDK4; 2) EL ESTUDIO DEL ROL DE CCND1-CDK4 EN EL DESARROLLO. NOS CENTRAREMOS EN EL ESTUDIO DEL CORTEX CEREBRAL YA QUE RESULTADOS PREVIOS DE NUESTRO GRUPO Y COLABORADORES INDICAN QUE LA ACTIVIDAD CCND1-CDK4 ES IMPORTANTE PARA LA ESTRUCTURACION DE LAS CAPAS DE LA CORTEZA CEREBRAL. ADEMAS, SABEMOS QUE LA EXPRESION DE CCND1 EN EL CITOPLASMA INDUCE NEURITOGENESIS EN CULTIVOS PRIMARIOS DE NEURONAS CORTICALES, Y HEMOS COMPROBADO QUE CCND1 INTERACCIONA CON PALS1 Y RALA, AMBOS RELEVANTES EN LOS PROCESOS DE POLARIDAD Y MIGRACION NEURONAL; 3) LA EVALUACION DE LA IMPORTANCIA DE LAS FUNCIONES CITOPLASMATICAS DE CCND1-CDK4 EN LOS TUMORES HUMANOS. NUESTROS RESULTADOS PRELIMINARES CON MODELOS MURINOS SUGIEREN LA IMPORTANCIA DEL COMPLEJO CCND1-CDK4 CITOPLASMATICO EN LA PROGRESION TUMORAL. QUEREMOS AHORA CARACTERIZAR LAS FUNCIONES CITOPLASMATICAS DE CCND1-CDK4 EN CULTIVOS PRIMARIOS Y TUMOROSFERAS AISLADAS DE TUMORES HUMANOS. HEMOS GENERADO ALGUNOS RESULTADOS PRELIMINARES EN CELULAS DE GLIOBLASTOMA HUMANO, UN TUMOR CON ALTA CAPACIDAD INVASIVA. EN CONCLUSION, LA FINANCIACION OBTENIDA EN LOS ANTERIORES PROYECTOS NOS HA PERMITIDO ESTABLECER QUE CCND1-CDK4 TIENE ACTIVIDAD CITOPLASMATICA RELEVANTE DURANTE EL DESARROLLO Y EN PROCESOS PATOLOGICOS COMO EL CANCER. ESTO NOS ABRE UN CAMPO DE INVESTIGACION POCO ESTUDIADO, Y EN ESTE NUEVO PROYECTO QUEREMOS ABORDAR LA CARACTERIZACION DE MECANISMOS DE SEÑALIZACION REGULADOS POR LOS COMPLEJOS CCND1-CDK4 CITOPLASMATICOS. (Spanish)
0 references
CYCLINES ACT AS REGULATORY SUBUNITS OF CYCLINE-DEPENDENT KINASES OR CDKS AND ARE KEY PARTS IN THE DEFINITION OF CELL DIVISION STAGES. THE D-CDK4/6 CYCLINE COMPLEXES IN MAMMALS ARE SPECIALISED IN CONTROLLING THE INPUT INTO THE CELL DIVISION CYCLE BASICALLY THROUGH TRANSCRIPTIONAL REGULATION MECHANISMS. THIS NUCLEAR FUNCTION OF CYCLINE D-CDK4/6 IS ESPECIALLY IMPORTANT DURING TISSUE DEVELOPMENT, AND ALTERATIONS IN THE EXPRESSION OF THIS COMPLEX PROMOTE THE FORMATION OF TUMORS. THUS, CYCLINE D1 (CCND1) AND CDK4 ARE TWO OF THE MOST AMPLIFIED ONCOGENES IN DIFFERENT TUMOR TYPES. IT IS ALSO KNOWN THAT CCND1-CDK4 IS INVOLVED IN THE REGULATION OF CELLULAR ADHESION AND MIGRATION, ESSENTIAL PROCESSES DURING DEVELOPMENT. OUR GROUP HAS SHOWN THAT CCND1-CDK4 COMPLEXES LOCATED IN THE CYTOPLASM CONTROL THESE PROCESSES THROUGH ACTIVATION OF RAL AND RAC1 GT PASSES. THIS FINDING CHANGES THE PARADIGM THAT PLACES CCND1 AS ONE OF THE EFFECTS OF THE TRANSDUCTION PATHWAYS FOR THE CONTROL OF CELL DIVISION AND SUGGESTS THAT ITS CYTOPLASMIC ACTIVITY CAN PLAY A MUCH MORE IMPORTANT ROLE AS REGULATOR OF CELLULAR SIGNALING THAN PREVIOUSLY ATTRIBUTED TO IT. THUS, THE MAIN PURPOSE OF THIS PROJECT IS TO STUDY THE IMPORTANCE OF THE CYTOPLASMIC FUNCTIONS OF CCND1-CDK4 IN THE REGULATION OF CELLULAR SIGNALING DURING DEVELOPMENT AND IN CANCER. TO THIS END, WE PROPOSE THREE SPECIFIC OBJECTIVES: 1) THE CHARACTERISATION OF THE TRANSDUCTION PATHWAYS OF SIGNALS REGULATED BY THE CCND1-CDK4 CYTOPLASMIC COMPLEX. USING DIFFERENT PROTEOMIC TECHNIQUES WE AIM TO DISCOVER AND CHARACTERISE CCND1-CDK4 TARGETS INVOLVED IN CELLULAR SIGNALING. WITHIN THIS OBJECTIVE, WE WILL ALSO STUDY THE PROHIBITINAS, CDK4 INTERACTORS OBTAINED IN PREVIOUS SCREENINGS AND THAT COULD BE INVOLVED IN THE LOCATION AND CYTOPLASMIC ACTIVITY OF CCND1-CDK4; 2) THE STUDY OF THE ROLE OF CCND1-CDK4 IN DEVELOPMENT. WE WILL FOCUS ON THE STUDY OF CEREBRAL CORTEX SINCE PREVIOUS RESULTS OF OUR GROUP AND COLLABORATORS INDICATE THAT CCND1-CDK4 ACTIVITY IS IMPORTANT FOR THE STRUCTURING OF THE LAYERS OF THE CEREBRAL CORTEX. IN ADDITION, WE KNOW THAT THE EXPRESSION OF CCND1 IN THE CYTOPLASM INDUCES NEURITOGENESIS IN PRIMARY CULTURES OF CORTICAL NEURONS, AND WE HAVE FOUND THAT CCND1 INTERACTS WITH PALS1 AND RALA, BOTH OF WHICH ARE RELEVANT IN THE PROCESSES OF POLARITY AND NEURONAL MIGRATION; 3) THE EVALUATION OF THE IMPORTANCE OF THE CYTOPLASMIC FUNCTIONS OF CCND1-CDK4 IN HUMAN TUMORS. OUR PRELIMINARY RESULTS WITH MURINE MODELS SUGGEST THE IMPORTANCE OF THE CYTOPLASMIC CCND1-CDK4 COMPLEX IN TUMOR PROGRESSION. WE NOW WANT TO CHARACTERISE THE CYTOPLASMIC FUNCTIONS OF CCND1-CDK4 IN PRIMARY CULTURES AND TUMOROSPHERAS ISOLATED FROM HUMAN TUMORS. WE HAVE GENERATED SOME PRELIMINARY RESULTS IN HUMAN GLIOBLASTOMA CELLS, A TUMOR WITH HIGH INVASIVE CAPACITY. IN CONCLUSION, THE FUNDING OBTAINED IN THE PREVIOUS PROJECTS HAS ALLOWED US TO ESTABLISH THAT CCND1-CDK4 HAS RELEVANT CYTOPLASMIC ACTIVITY DURING DEVELOPMENT AND IN PATHOLOGICAL PROCESSES SUCH AS CANCER. THIS OPENS UP A FIELD OF RESEARCH LITTLE STUDIED, AND IN THIS NEW PROJECT WE WANT TO ADDRESS THE CHARACTERISATION OF SIGNALING MECHANISMS REGULATED BY THE CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC COMPLEXES. (English)
12 October 2021
0.2094054752581112
0 references
CYCLINES ACTE EN TANT QUE SOUS-UNITÉS RÉGLEMENTAIRES DES KINASES CYCLINE-DÉPENDANTES OU CDK ET SONT DES ÉLÉMENTS CLÉS DANS LA DÉFINITION DES STADES DE DIVISION CELLULAIRE. LES COMPLEXES CYCLIQUES D-CDK4/6 CHEZ LES MAMMIFÈRES SONT SPÉCIALISÉS DANS LE CONTRÔLE DE L’ENTRÉE DANS LE CYCLE DE DIVISION CELLULAIRE ESSENTIELLEMENT PAR DES MÉCANISMES DE RÉGULATION TRANSCRIPTIONNELLE. CETTE FONCTION NUCLÉAIRE DE LA CYCLINE D-CDK4/6 EST PARTICULIÈREMENT IMPORTANTE AU COURS DU DÉVELOPPEMENT TISSULAIRE, ET LES ALTÉRATIONS DANS L’EXPRESSION DE CE COMPLEXE FAVORISENT LA FORMATION DE TUMEURS. AINSI, LA CYCLINE D1 (CCND1) ET LE CDK4 SONT DEUX DES ONCOGÈNES LES PLUS AMPLIFIÉS DANS DIFFÉRENTS TYPES DE TUMEURS. ON SAIT ÉGALEMENT QUE LE CCND1-CDK4 EST IMPLIQUÉ DANS LA RÉGULATION DE L’ADHÉRENCE ET DE LA MIGRATION CELLULAIRES, PROCESSUS ESSENTIELS PENDANT LE DÉVELOPPEMENT. NOTRE GROUPE A MONTRÉ QUE LES COMPLEXES CCND1-CDK4 SITUÉS DANS LE CYTOPLASME CONTRÔLENT CES PROCESSUS PAR L’ACTIVATION DES PASSES RAL ET RAC1 GT. CETTE DÉCOUVERTE MODIFIE LE PARADIGME QUI PLACE LE CCND1 COMME L’UN DES EFFETS DES VOIES DE TRANSDUCTION POUR LE CONTRÔLE DE LA DIVISION CELLULAIRE ET SUGGÈRE QUE SON ACTIVITÉ CYTOPLASMIQUE PEUT JOUER UN RÔLE BEAUCOUP PLUS IMPORTANT EN TANT QUE RÉGULATEUR DE LA SIGNALISATION CELLULAIRE QU’ON NE LUI A ATTRIBUÉ AUPARAVANT. AINSI, LE BUT PRINCIPAL DE CE PROJET EST D’ÉTUDIER L’IMPORTANCE DES FONCTIONS CYTOPLASMIQUES DU CCND1-CDK4 DANS LA RÉGULATION DE LA SIGNALISATION CELLULAIRE PENDANT LE DÉVELOPPEMENT ET DANS LE CANCER. À CETTE FIN, NOUS PROPOSONS TROIS OBJECTIFS SPÉCIFIQUES: 1) LA CARACTÉRISATION DES VOIES DE TRANSDUCTION DES SIGNAUX RÉGULÉS PAR LE COMPLEXE CYTOPLASMIQUE CCND1-CDK4. EN UTILISANT DIFFÉRENTES TECHNIQUES PROTÉOMIQUES, NOUS CHERCHONS À DÉCOUVRIR ET À CARACTÉRISER LES CIBLES CCND1-CDK4 IMPLIQUÉES DANS LA SIGNALISATION CELLULAIRE. DANS LE CADRE DE CET OBJECTIF, NOUS ÉTUDIERONS ÉGALEMENT LES INTERACTIONS PROHIBITINAS, CDK4 OBTENUES LORS DE DÉPISTAGES PRÉCÉDENTS ET QUI POURRAIENT ÊTRE IMPLIQUÉES DANS LA LOCALISATION ET L’ACTIVITÉ CYTOPLASMIQUE DU CCND1-CDK4; 2) L’ÉTUDE DU RÔLE DE LA CCND1-CDK4 DANS LE DÉVELOPPEMENT. NOUS NOUS CONCENTRERONS SUR L’ÉTUDE DU CORTEX CÉRÉBRAL PUISQUE LES RÉSULTATS PRÉCÉDENTS DE NOTRE GROUPE ET DE NOS COLLABORATEURS INDIQUENT QUE L’ACTIVITÉ CCND1-CDK4 EST IMPORTANTE POUR LA STRUCTURATION DES COUCHES DU CORTEX CÉRÉBRAL. EN OUTRE, NOUS SAVONS QUE L’EXPRESSION DU CCND1 DANS LE CYTOPLASME INDUIT LA NEURITOGENÈSE DANS LES CULTURES PRIMAIRES DES NEURONES CORTICALS, ET NOUS AVONS CONSTATÉ QUE LE CCND1 INTERAGIT AVEC LE PALS1 ET LE RALA, QUI SONT TOUS DEUX PERTINENTS DANS LES PROCESSUS DE POLARITÉ ET DE MIGRATION NEURONALE; 3) L’ÉVALUATION DE L’IMPORTANCE DES FONCTIONS CYTOPLASMIQUES DU CCND1-CDK4 DANS LES TUMEURS HUMAINES. NOS RÉSULTATS PRÉLIMINAIRES AVEC DES MODÈLES MURINS SUGGÈRENT L’IMPORTANCE DU COMPLEXE CYTOPLASMIQUE CCND1-CDK4 DANS LA PROGRESSION TUMORALE. NOUS VOULONS MAINTENANT CARACTÉRISER LES FONCTIONS CYTOPLASMIQUES DU CCND1-CDK4 DANS LES CULTURES PRIMAIRES ET LES TUMOROSPHERAS ISOLÉS DES TUMEURS HUMAINES. NOUS AVONS PRODUIT QUELQUES RÉSULTATS PRÉLIMINAIRES DANS LES CELLULES DE GLIOBLASTOME HUMAIN, UNE TUMEUR À HAUTE CAPACITÉ INVASIVE. EN CONCLUSION, LE FINANCEMENT OBTENU DANS LES PROJETS PRÉCÉDENTS NOUS A PERMIS D’ÉTABLIR QUE LE CCND1-CDK4 A UNE ACTIVITÉ CYTOPLASMIQUE PERTINENTE PENDANT LE DÉVELOPPEMENT ET DANS DES PROCESSUS PATHOLOGIQUES TELS QUE LE CANCER. CELA OUVRE UN CHAMP DE RECHERCHE PEU ÉTUDIÉ, ET DANS CE NOUVEAU PROJET, NOUS VOULONS ABORDER LA CARACTÉRISATION DES MÉCANISMES DE SIGNALISATION RÉGLEMENTÉS PAR LES COMPLEXES CITOPLASMATIC CCND1-CDK4. (French)
2 December 2021
0 references
CYCLINES FUNGIEREN ALS REGULATORISCHE UNTEREINHEITEN VON CYCLINABHÄNGIGEN KINASEN ODER CDKS UND SIND WICHTIGE BESTANDTEILE BEI DER DEFINITION VON ZELLTEILUNGSSTUFEN. DIE CYCLINE-KOMPLEXE D-CDK4/6 BEI SÄUGETIEREN SIND DARAUF SPEZIALISIERT, DEN EINGANG IN DEN ZELLTEILUNGSZYKLUS GRUNDSÄTZLICH DURCH TRANSKRIPTIONSKONTROLLMECHANISMEN ZU STEUERN. DIESE KERNFUNKTION VON CYCLINE D-CDK4/6 IST BESONDERS WICHTIG BEI DER GEWEBEENTWICKLUNG, UND VERÄNDERUNGEN IN DER EXPRESSION DIESES KOMPLEXES FÖRDERN DIE BILDUNG VON TUMOREN. SO SIND CYCLINE D1 (CCND1) UND CDK4 ZWEI DER AM STÄRKSTEN VERSTÄRKTEN ONKOGENE IN VERSCHIEDENEN TUMORTYPEN. ES IST AUCH BEKANNT, DASS CCND1-CDK4 AN DER REGULIERUNG DER ZELLULÄREN HAFTUNG UND MIGRATION BETEILIGT IST, WESENTLICHE PROZESSE WÄHREND DER ENTWICKLUNG. UNSERE GRUPPE HAT GEZEIGT, DASS CCND1-CDK4-KOMPLEXE, DIE SICH IM ZYTOPLASMA BEFINDEN, DIESE PROZESSE DURCH AKTIVIERUNG VON RAL- UND RAC1 GT-PÄSSEN STEUERN. DIESE FESTSTELLUNG VERÄNDERT DAS PARADIGMA, DAS CCND1 ALS EINEN DER AUSWIRKUNGEN DER TRANSDUKTIONSWEGE FÜR DIE KONTROLLE DER ZELLTEILUNG EINSETZT, UND DEUTET DARAUF HIN, DASS SEINE ZYTOPLASMISCHE AKTIVITÄT ALS REGULATOR DER ZELLULÄREN SIGNALGEBUNG EINE VIEL WICHTIGERE ROLLE SPIELEN KANN, ALS ZUVOR IHM ZUGESCHRIEBEN WURDE. DAS HAUPTZIEL DIESES PROJEKTS IST ES, DIE BEDEUTUNG DER ZYTOPLASMISCHEN FUNKTIONEN VON CCND1-CDK4 IN DER REGULIERUNG DER ZELLULÄREN SIGNALGEBUNG WÄHREND DER ENTWICKLUNG UND BEI KREBS ZU UNTERSUCHEN. ZU DIESEM ZWECK SCHLAGEN WIR DREI SPEZIFISCHE ZIELE VOR: 1) DIE CHARAKTERISIERUNG DER TRANSDUKTIONSWEGE VON SIGNALEN, DIE DURCH DEN ZYTOPLASMISCHEN KOMPLEX CCND1-CDK4 REGULIERT WERDEN. MIT HILFE VERSCHIEDENER PROTEOMISCHER TECHNIKEN WOLLEN WIR CCND1-CDK4-ZIELE ENTDECKEN UND CHARAKTERISIEREN, DIE AN DER ZELLULÄREN SIGNALISIERUNG BETEILIGT SIND. IM RAHMEN DIESES ZIELS WERDEN WIR AUCH DIE PROHIBITINAS, CDK4-INTERAKTIONÄRE, DIE IN FRÜHEREN SCREENINGS GEWONNEN WURDEN, UNTERSUCHEN, DIE AN DER STANDORT- UND ZYTOPLASMISCHEN AKTIVITÄT VON CCND1-CDK4 BETEILIGT SEIN KÖNNTEN; 2) DIE UNTERSUCHUNG DER ROLLE VON CCND1-CDK4 IN DER ENTWICKLUNG. WIR WERDEN UNS AUF DIE UNTERSUCHUNG DER HIRNRINDE KONZENTRIEREN, DA FRÜHERE ERGEBNISSE UNSERER GRUPPE UND MITARBEITER DARAUF HINDEUTEN, DASS DIE AKTIVITÄT CCND1-CDK4 FÜR DIE STRUKTURIERUNG DER SCHICHTEN DER HIRNRINDE WICHTIG IST. DARÜBER HINAUS WISSEN WIR, DASS DIE EXPRESSION VON CCND1 IM ZYTOPLASMA NEURITOGENESE IN PRIMÄRKULTUREN VON KORTIKALEN NEURONEN INDUZIERT, UND WIR HABEN FESTGESTELLT, DASS CCND1 MIT PALS1 UND RALA INTERAGIERT, DIE BEIDE FÜR DIE PROZESSE DER POLARITÄT UND DER NEURONALEN MIGRATION RELEVANT SIND; 3) DIE BEWERTUNG DER BEDEUTUNG DER ZYTOPLASMISCHEN FUNKTIONEN VON CCND1-CDK4 IN MENSCHLICHEN TUMOREN. UNSERE VORLÄUFIGEN ERGEBNISSE MIT MURINMODELLEN DEUTEN AUF DIE BEDEUTUNG DES ZYTOPLASMISCHEN CCND1-CDK4-KOMPLEXES IM TUMORVERLAUF HIN. WIR WOLLEN NUN DIE ZYTOPLASMISCHEN FUNKTIONEN VON CCND1-CDK4 IN PRIMÄRKULTUREN UND TUMOROSPHERAS, DIE VON MENSCHLICHEN TUMOREN ISOLIERT SIND, CHARAKTERISIEREN. WIR HABEN EINIGE VORLÄUFIGE ERGEBNISSE IN MENSCHLICHEN GLIOBLASTOMZELLEN, EINEM TUMOR MIT HOHER INVASIVER KAPAZITÄT, GENERIERT. ZUSAMMENFASSEND LÄSST SICH FESTSTELLEN, DASS CCND1-CDK4 WÄHREND DER ENTWICKLUNG UND IN PATHOLOGISCHEN PROZESSEN WIE KREBS EINE RELEVANTE ZYTOPLASMISCHE AKTIVITÄT HAT. DIES ERÖFFNET EIN WENIG ERFORSCHTES FORSCHUNGSGEBIET, UND IN DIESEM NEUEN PROJEKT WOLLEN WIR DIE CHARAKTERISIERUNG VON SIGNALISIERUNGSMECHANISMEN, DIE DURCH DIE CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC-KOMPLEXE REGULIERT WERDEN, ANGEHEN. (German)
9 December 2021
0 references
CYCLINES ACT ALS REGELGEVENDE SUBEENHEDEN VAN CYCLINE-AFHANKELIJKE KINASEN OF CDK’S EN ZIJN BELANGRIJKE ONDERDELEN IN DE DEFINITIE VAN CELDELING STADIA. DE CYCLINE COMPLEXEN VAN D-CDK4/6 IN ZOOGDIEREN ZIJN GESPECIALISEERD IN HET CONTROLEREN VAN DE INPUT IN DE CELDELINGSCYCLUS HOOFDZAKELIJK DOOR TRANSCRIPTIONAL REGULATION MECHANISMEN. DEZE NUCLEAIRE FUNCTIE VAN CYCLINE D-CDK4/6 IS VOORAL BELANGRIJK TIJDENS WEEFSELONTWIKKELING, EN VERANDERINGEN IN DE EXPRESSIE VAN DIT COMPLEX BEVORDEREN DE VORMING VAN TUMOREN. ZO ZIJN CYCLINE D1 (CCND1) EN CDK4 TWEE VAN DE MEEST VERSTERKTE ONCOGENES IN VERSCHILLENDE TUMORTYPES. HET IS OOK BEKEND DAT CCND1-CDK4 BETROKKEN IS BIJ DE REGULERING VAN CELLULAIRE HECHTING EN MIGRATIE, ESSENTIËLE PROCESSEN TIJDENS DE ONTWIKKELING. ONZE GROEP HEEFT AANGETOOND DAT CCND1-CDK4-COMPLEXEN DIE ZICH IN HET CYTOPLASMA BEVINDEN DEZE PROCESSEN CONTROLEREN DOOR ACTIVERING VAN RAL- EN RAC1 GT-PASSEN. DEZE BEVINDING VERANDERT HET PARADIGMA DAT CCND1 PLAATST ALS EEN VAN DE EFFECTEN VAN DE TRANSDUCTIETRAJECTEN VOOR DE CONTROLE VAN CELDELING EN SUGGEREERT DAT ZIJN CYTOPLASMISCHE ACTIVITEIT EEN VEEL BELANGRIJKERE ROL KAN SPELEN ALS REGULATOR VAN CELLULAIRE SIGNALERING DAN EERDER AAN HET WORDT TOEGESCHREVEN. HET BELANGRIJKSTE DOEL VAN DIT PROJECT IS DUS HET BESTUDEREN VAN HET BELANG VAN DE CYTOPLASMISCHE FUNCTIES VAN CCND1-CDK4 IN DE VERORDENING VAN CELLULAIRE SIGNALERINGEN TIJDENS ONTWIKKELING EN BIJ KANKER. DAARTOE STELLEN WIJ DRIE SPECIFIEKE DOELSTELLINGEN VOOR: 1) DE KARAKTERISERING VAN DE TRANSDUCTIEROUTES VAN SIGNALEN DIE DOOR HET CYTOPLASMACOMPLEX CCND1-CDK4 WORDEN GEREGULEERD. MET BEHULP VAN VERSCHILLENDE PROTEOMISCHE TECHNIEKEN STREVEN WE ERNAAR OM CCND1-CDK4-DOELEN TE ONTDEKKEN EN TE KARAKTERISEREN DIE BETROKKEN ZIJN BIJ CELLULAIRE SIGNALERINGEN. IN HET KADER VAN DEZE DOELSTELLING ZULLEN WE OOK DE PROHIBITINAS, CDK4-INTERACTORS DIE ZIJN VERKREGEN BIJ EERDERE SCREENINGS ONDERZOEKEN EN DIE BETROKKEN KUNNEN ZIJN BIJ DE LOCATIE EN CYTOPLASMISCHE ACTIVITEIT VAN CCND1-CDK4; 2) DE STUDIE VAN DE ROL VAN CCND1-CDK4 IN ONTWIKKELING. WE ZULLEN ONS CONCENTREREN OP DE STUDIE VAN CEREBRALE CORTEX OMDAT EERDERE RESULTATEN VAN ONZE GROEP EN MEDEWERKERS AANGEVEN DAT CCND1-CDK4-ACTIVITEIT BELANGRIJK IS VOOR DE STRUCTURERING VAN DE LAGEN VAN DE CEREBRALE CORTEX. DAARNAAST WETEN WE DAT DE EXPRESSIE VAN CCND1 IN HET CYTOPLASMA NEURITOGENESE INDUCEERT IN PRIMAIRE CULTUREN VAN CORTICALE NEURONEN, EN WE HEBBEN VASTGESTELD DAT CCND1 INTERACTIE HEEFT MET PALS1 EN RALA, DIE BEIDE RELEVANT ZIJN IN DE PROCESSEN VAN POLARITEIT EN NEURONALE MIGRATIE; 3) DE EVALUATIE VAN HET BELANG VAN DE CYTOPLASMISCHE FUNCTIES VAN CCND1-CDK4 IN MENSELIJKE TUMOREN. ONZE VOORLOPIGE RESULTATEN MET MURINEMODELLEN SUGGEREREN HET BELANG VAN HET CYTOPLASMATISCHE CCND1-CDK4-COMPLEX IN TUMORPROGRESSIE. WE WILLEN NU DE CYTOPLASMISCHE FUNCTIES VAN CCND1-CDK4 KARAKTERISEREN IN PRIMAIRE CULTUREN EN TUMOROSPHERAS GEÏSOLEERD VAN MENSELIJKE TUMOREN. WE HEBBEN WAT VOORLOPIGE RESULTATEN GEGENEREERD IN MENSELIJKE GLIOBLASTOOMCELLEN, EEN TUMOR MET EEN HOGE INVASIEVE CAPACITEIT. CONCLUDEREND, DE FINANCIERING DIE IN DE VORIGE PROJECTEN IS VERKREGEN, HEEFT ONS IN STAAT GESTELD VAST TE STELLEN DAT CCND1-CDK4 RELEVANTE CYTOPLASMATISCHE ACTIVITEIT HEEFT TIJDENS DE ONTWIKKELING EN IN PATHOLOGISCHE PROCESSEN ZOALS KANKER. DIT OPENT EEN ONDERZOEKSGEBIED WEINIG BESTUDEERD, EN IN DIT NIEUWE PROJECT WILLEN WE DE KARAKTERISERING VAN SIGNAALMECHANISMEN GEREGULEERD DOOR DE CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC COMPLEXEN. (Dutch)
17 December 2021
0 references
CYCLINES ACT COME SUBUNITÀ REGOLATORIE DI CHINASI CICLO-DIPENDENTI O CDK E SONO PARTI CHIAVE NELLA DEFINIZIONE DELLE FASI DI DIVISIONE CELLULARE. I COMPLESSI DI CICLONI D-CDK4/6 NEI MAMMIFERI SONO SPECIALIZZATI NEL CONTROLLARE L'INGRESSO NEL CICLO DI DIVISIONE CELLULARE FONDAMENTALMENTE ATTRAVERSO MECCANISMI DI REGOLAZIONE TRASCRIZIONALE. QUESTA FUNZIONE NUCLEARE DELLA CICLONA D-CDK4/6 È PARTICOLARMENTE IMPORTANTE DURANTE LO SVILUPPO DEI TESSUTI, E LE ALTERAZIONI NELL'ESPRESSIONE DI QUESTO COMPLESSO PROMUOVONO LA FORMAZIONE DI TUMORI. PERTANTO, LA CICLINA D1 (CCND1) E IL CDK4 SONO DUE DEGLI ONCOGENI PIÙ AMPLIFICATI IN DIVERSI TIPI DI TUMORE. È ANCHE NOTO CHE CCND1-CDK4 È COINVOLTO NELLA REGOLAZIONE DELL'ADESIONE CELLULARE E DELLA MIGRAZIONE, PROCESSI ESSENZIALI DURANTE LO SVILUPPO. IL NOSTRO GRUPPO HA DIMOSTRATO CHE I COMPLESSI CCND1-CDK4 SITUATI NEL CITOPLASMA CONTROLLANO QUESTI PROCESSI ATTRAVERSO L'ATTIVAZIONE DEI PASSAGGI RAL E RAC1 GT. QUESTA SCOPERTA CAMBIA IL PARADIGMA CHE PONE CCND1 COME UNO DEGLI EFFETTI DELLE VIE DI TRASDUZIONE PER IL CONTROLLO DELLA DIVISIONE CELLULARE E SUGGERISCE CHE LA SUA ATTIVITÀ CITOPLASMICA PUÒ SVOLGERE UN RUOLO MOLTO PIÙ IMPORTANTE COME REGOLATORE DELLA SEGNALAZIONE CELLULARE RISPETTO A QUANTO PRECEDENTEMENTE ATTRIBUITO AD ESSA. PERTANTO, LO SCOPO PRINCIPALE DI QUESTO PROGETTO È QUELLO DI STUDIARE L'IMPORTANZA DELLE FUNZIONI CITOPLASMICHE DI CCND1-CDK4 NEL REGOLAMENTO DELLA SEGNALAZIONE CELLULARE DURANTE LO SVILUPPO E NEL CANCRO. A TAL FINE, PROPONIAMO TRE OBIETTIVI SPECIFICI: 1) LA CARATTERIZZAZIONE DELLE VIE DI TRASDUZIONE DEI SEGNALI REGOLATI DAL COMPLESSO CITOPLASMICO CCND1-CDK4. UTILIZZANDO DIVERSE TECNICHE PROTEOMICHE MIRIAMO A SCOPRIRE E CARATTERIZZARE GLI OBIETTIVI CCND1-CDK4 COINVOLTI NELLA SEGNALAZIONE CELLULARE. NELL'AMBITO DI QUESTO OBIETTIVO, STUDIEREMO ANCHE I PROHIBITINAS, GLI INTEROPERATORI CDK4 OTTENUTI IN PRECEDENTI SCREENING E CHE POTREBBERO ESSERE COINVOLTI NELLA LOCALIZZAZIONE E NELL'ATTIVITÀ CITOPLASMICA DI CCND1-CDK4; 2) LO STUDIO DEL RUOLO DEL CCND1-CDK4 NELLO SVILUPPO. CI CONCENTREREMO SULLO STUDIO DELLA CORTECCIA CEREBRALE DAL MOMENTO CHE I RISULTATI PRECEDENTI DEL NOSTRO GRUPPO E COLLABORATORI INDICANO CHE L'ATTIVITÀ CCND1-CDK4 È IMPORTANTE PER LA STRUTTURAZIONE DEGLI STRATI DELLA CORTECCIA CEREBRALE. INOLTRE, SAPPIAMO CHE L'ESPRESSIONE DI CCND1 NEL CITOPLASMA INDUCE NEURITOGENESI NELLE COLTURE PRIMARIE DI NEURONI CORTICALI, E ABBIAMO SCOPERTO CHE CCND1 INTERAGISCE CON PALS1 E RALA, ENTRAMBI RILEVANTI NEI PROCESSI DI POLARITÀ E MIGRAZIONE NEURONALE; 3) LA VALUTAZIONE DELL'IMPORTANZA DELLE FUNZIONI CITOPLASMICHE DI CCND1-CDK4 NEI TUMORI UMANI. I NOSTRI RISULTATI PRELIMINARI CON MODELLI MURINI SUGGERISCONO L'IMPORTANZA DEL COMPLESSO CITOPLASMICO CCND1-CDK4 NELLA PROGRESSIONE TUMORALE. ORA VOGLIAMO CARATTERIZZARE LE FUNZIONI CITOPLASMICHE DI CCND1-CDK4 NELLE COLTURE PRIMARIE E TUMOROSPHERAS ISOLATE DAI TUMORI UMANI. ABBIAMO PRODOTTO ALCUNI RISULTATI PRELIMINARI NELLE CELLULE DEL GLIOBLASTOMA UMANO, UN TUMORE AD ALTA CAPACITÀ INVASIVA. IN CONCLUSIONE, I FINANZIAMENTI OTTENUTI NEI PROGETTI PRECEDENTI CI HANNO PERMESSO DI STABILIRE CHE CCND1-CDK4 HA UN'ATTIVITÀ CITOPLASMICA RILEVANTE DURANTE LO SVILUPPO E IN PROCESSI PATOLOGICI COME IL CANCRO. QUESTO APRE UN CAMPO DI RICERCA POCO STUDIATO, E IN QUESTO NUOVO PROGETTO VOGLIAMO AFFRONTARE LA CARATTERIZZAZIONE DEI MECCANISMI DI SEGNALAZIONE REGOLATI DAI COMPLESSI CITOPLASMATIC CCND1-CDK4. (Italian)
16 January 2022
0 references
TSÜKLIINIDE SEADUS KUI TSÜKLIST SÕLTUVATE KINAASIDE VÕI CDKDE REGULATIIVSED ALLÜKSUSED NING ON RAKKUDE JAGUNEMISE ETAPPIDE MÄÄRATLEMISE PÕHIELEMENDID. IMETAJATE D-CDK4/6 JALGRATTAKOMPLEKSID ON SPETSIALISEERUNUD RAKKUDE JAGUNEMISE TSÜKLI SISENDI KONTROLLIMISELE PEAMISELT TRANSKRIPTSIOONI REGULEERIMISE MEHHANISMIDE KAUDU. SEE TUUMAFUNKTSIOON TSÜKLIIN D-CDK4/6 ON ERITI OLULINE AJAL KOE ARENG, JA MUUTUSED VÄLJENDUS SELLE KOMPLEKS EDENDADA TEKET KASVAJAD. SEEGA ON TSÜKLIIN D1 (CCND1) JA CDK4 KAKS KÕIGE VÕIMENDATUMAT ONKOGEENI ERINEVATES KASVAJATÜÜPIDES. SAMUTI ON TEADA, ET CCND1-CDK4 OSALEB RAKU HAARDUMISE JA MIGRATSIOONI REGULEERIMISES, MIS ON OLULISED PROTSESSID ARENGU AJAL. MEIE GRUPP ON NÄIDANUD, ET TSÜTOPLASMAS ASUVAD CCND1-CDK4 KOMPLEKSID KONTROLLIVAD NEID PROTSESSE RAL JA RAC1 GT AKTIVEERIMISE KAUDU. SEE LEID MUUDAB PARADIGMAT, MIS ASETAB CCND1 RAKKUDE JAGUNEMISE KONTROLLI TRANSDUKTSIOONRADADE ÜHEKS MÕJUKS JA VIITAB SELLELE, ET SELLE TSÜTOPLASMA AKTIIVSUS VÕIB OLLA RAKULISE SIGNAALI REGULAATORINA PALJU OLULISEM KUI VAREM OMISTATUD. SEEGA ON SELLE PROJEKTI PEAMINE EESMÄRK UURIDA CCND1-CDK4 TSÜTOPLASMA FUNKTSIOONIDE TÄHTSUST RAKULISTE SIGNAALIDE REGULEERIMISEL ARENGU JA VÄHI KORRAL. SELLEKS PAKUME VÄLJA KOLM KONKREETSET EESMÄRKI: 1) CCND1-CDK4 TSÜTOPLASMA KOMPLEKSIGA REGULEERITUD SIGNAALIDE TRANSDUKTSIOONRADADE ISELOOMUSTUS. KASUTADES ERINEVAID PROTEOOMILISI TEHNIKAID, PÜÜAME AVASTADA JA ISELOOMUSTADA CCND1-CDK4 SIHTMÄRKE, MIS ON SEOTUD RAKUSIGNAALIDEGA. SELLE EESMÄRGI RAAMES UURIME KA PROHIBITINAS’E, CDK4 INTERAKTOREID, MIS ON SAADUD VARASEMATEL SÕELUURINGUTEL JA MIS VÕIVAD OLLA SEOTUD CCND1-CDK4 ASUKOHA JA TSÜTOPLASMA AKTIIVSUSEGA; 2) UURING CCND1-CDK4 ROLLI KOHTA ARENGUS. KESKENDUME AJUKOORE UURINGULE, KUNA MEIE GRUPI JA KOOSTÖÖPARTNERITE VARASEMAD TULEMUSED NÄITAVAD, ET CCND1-CDK4 AKTIIVSUS ON OLULINE AJUKOORE KIHTIDE STRUKTUREERIMISEKS. LISAKS TEAME, ET CCND1 EKSPRESSIOON TSÜTOPLASMAS PÕHJUSTAB NEURITOGENEESI KORTIKAALSETE NEURONITE PRIMAARKULTUURIDES NING OLEME LEIDNUD, ET CCND1 SUHTLEB PALS1 JA RALAGA, MIS MÕLEMAD ON OLULISED POLAARSUSE JA NEURONAALSE MIGRATSIOONI PROTSESSIDES; 3) CCND1-CDK4 TSÜTOPLASMA FUNKTSIOONIDE OLULISUSE HINDAMINE INIMESE KASVAJATES. MEIE ESIALGSED TULEMUSED HIIREMUDELITEGA NÄITAVAD TSÜTOPLASMA CCND1-CDK4 KOMPLEKSI TÄHTSUST KASVAJA PROGRESSIOONIS. NÜÜD TAHAME ISELOOMUSTADA CCND1-CDK4 TSÜTOPLASMA FUNKTSIOONE PRIMAARKULTUURIDES JA INIMESE KASVAJATEST ISOLEERITUD TUMOROSPHERAS. OLEME LOONUD MÕNINGAID ESIALGSEID TULEMUSI INIMESE GLIOBLASTOOMI RAKKUDES, SUURE INVASIIVSE VÕIMEGA KASVAJAS. KOKKUVÕTTES ON EELMISTE PROJEKTIDE RAAMES SAADUD RAHALISED VAHENDID VÕIMALDANUD MEIL KINDLAKS TEHA, ET CCND1-CDK4-L ON ARENGU AJAL JA PATOLOOGILISTES PROTSESSIDES, NAGU VÄHK, ASJAKOHANE TSÜTOPLASMA AKTIIVSUS. SEE AVAB VÄHE UURITUD UURIMISVALDKONNA JA SELLES UUES PROJEKTIS TAHAME TEGELEDA CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC KOMPLEKSIDE POOLT REGULEERITUD SIGNAALIMISMEHHANISMIDE ISELOOMUSTAMISEGA. (Estonian)
4 August 2022
0 references
CIKLAI VEIKIA KAIP NUO CIKLINO PRIKLAUSOMŲ KINAZIŲ ARBA CDK REGULIUOJAMIEJI SUBVIENETAI IR YRA PAGRINDINIAI LĄSTELIŲ DALIJIMOSI ETAPŲ APIBRĖŽIMO ELEMENTAI. ŽINDUOLIŲ D-CDK4/6 CIKLŲ KOMPLEKSAI SPECIALIZUOJASI KONTROLIUOTI ĮĖJIMO Į LĄSTELIŲ DALIJIMOSI CIKLĄ IŠ ESMĖS PER TRANSKRIPCIJOS REGULIAVIMO MECHANIZMUS. ŠI BRANDUOLINĖ CIKLINO D-CDK4/6 FUNKCIJA YRA YPAČ SVARBI AUDINIŲ VYSTYMOSI METU, O ŠIO KOMPLEKSO EKSPRESIJOS POKYČIAI SKATINA NAVIKŲ SUSIDARYMĄ. TAIGI, CIKLINAS D1 (CCND1) IR CDK4 YRA DU IŠ LABIAUSIAI SUSTIPRĖJUSIŲ ONKOGENŲ SKIRTINGŲ NAVIKŲ TIPŲ. TAIP PAT ŽINOMA, KAD CCND1-CDK4 DALYVAUJA REGULIUOJANT LĄSTELIŲ SUKIBIMĄ IR MIGRACIJĄ – ESMINIUS PROCESUS KŪRIMO METU. MŪSŲ GRUPĖ PARODĖ, KAD CCND1-CDK4 KOMPLEKSAI, ESANTYS CITOPLAZMOS KONTROLĖS ŠIŲ PROCESŲ PER AKTYVAVIMO RAL IR RAC1 GT PRAEINA. ŠIS NUSTATYMAS KEIČIA PARADIGMĄ, PAGAL KURIĄ CCND1 YRA VIENAS IŠ TRANSDUKCIJOS BŪDŲ, SKIRTŲ LĄSTELIŲ DALIJIMUISI KONTROLIUOTI, POVEIKIO IR RODO, KAD JO CITOPLAZMINIS AKTYVUMAS GALI ATLIKTI DAUG SVARBESNĮ VAIDMENĮ KAIP LĄSTELIŲ SIGNALIZAVIMO REGULIATORIUS NEI ANKSČIAU JAM PRISKIRTAS. TAIGI, PAGRINDINIS ŠIO PROJEKTO TIKSLAS YRA IŠTIRTI CCND1-CDK4 CITOPLAZMINIŲ FUNKCIJŲ SVARBĄ LĄSTELIŲ SIGNALIZAVIMO VYSTYMOSI IR VĖŽIO METU REGLAMENTE. ŠIUO TIKSLU SIŪLOME TRIS KONKREČIUS TIKSLUS: 1) CCND1-CDK4 CITOPLAZMINIU KOMPLEKSU REGULIUOJAMŲ SIGNALŲ TRANSDUKCIJOS BŪDŲ APIBŪDINIMAS. NAUDODAMI SKIRTINGUS PROTEOMINIUS METODUS, SIEKIAME ATRASTI IR APIBŪDINTI CCND1-CDK4 TAIKINIUS, SUSIJUSIUS SU KORINIU SIGNALIZAVIMU. SIEKIANT ŠIO TIKSLO, MES TAIP PAT TIRSIME PROHIBITINAS, CDK4 SĄVEIKAUJANČIUS, GAUTUS ANKSTESNĖSE PATIKROSE IR KURIE GALĖTŲ BŪTI ĮTRAUKTI Į CCND1-CDK4 VIETĄ IR CITOPLAZMINĮ AKTYVUMĄ; 2) CCND1-CDK4 VAIDMENS PLĖTOJANT TYRIMĄ. MES SUTELKSIME DĖMESĮ Į SMEGENŲ ŽIEVĖS TYRIMĄ, NES ANKSTESNI MŪSŲ GRUPĖS IR BENDRADARBIŲ REZULTATAI RODO, KAD CCND1-CDK4 VEIKLA YRA SVARBI SMEGENŲ ŽIEVĖS SLUOKSNIŲ STRUKTŪRIZAVIMUI. BE TO, ŽINOME, KAD CCND1 IŠRAIŠKA CITOPLAZMOJE SUKELIA NEURITOGENEZĘ PIRMINĖSE ŽIEVĖS NEURONŲ KULTŪROSE, IR NUSTATĖME, KAD CCND1 SĄVEIKAUJA SU PALS1 IR RALA, KURIE ABU YRA SVARBŪS POLIARIŠKUMO IR NEURONŲ MIGRACIJOS PROCESUOSE; 3) CCND1-CDK4 CITOPLAZMINIŲ FUNKCIJŲ SVARBOS ŽMOGAUS NAVIKAMS ĮVERTINIMAS. MŪSŲ PRELIMINARŪS REZULTATAI SU PELIŲ MODELIAIS RODO CITOPLAZMINIO CCND1-CDK4 KOMPLEKSO SVARBĄ NAVIKO PROGRESAVIMUI. DABAR NORIME APIBŪDINTI CCND1-CDK4 CITOPLAZMINES FUNKCIJAS PIRMINĖSE KULTŪROSE IR TUMOROSPHERAS, IŠSKIRTUS IŠ ŽMOGAUS NAVIKŲ. MES SUKŪRĖME KELETĄ PRELIMINARIŲ REZULTATŲ ŽMOGAUS GLIOBLASTOMOS LĄSTELĖSE, NAVIKAS SU DIDELIU INVAZINIU PAJĖGUMU. APIBENDRINANT, ANKSTESNIŲ PROJEKTŲ FINANSAVIMAS LEIDO MUMS NUSTATYTI, KAD CCND1-CDK4 VYSTYMOSI IR PATOLOGINIŲ PROCESŲ, PVZ., VĖŽIO, METU TURI ATITINKAMĄ CITOPLAZMINĮ AKTYVUMĄ. TAI ATVERIA MAŽAI TIRTĄ MOKSLINIŲ TYRIMŲ SRITĮ, IR ŠIAME NAUJAME PROJEKTE NORIME ATKREIPTI DĖMESĮ Į CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC KOMPLEKSŲ REGULIUOJAMŲ SIGNALIZACIJOS MECHANIZMŲ APIBŪDINIMĄ. (Lithuanian)
4 August 2022
0 references
CIKLONI ZAKON KAO REGULATORNE PODJEDINICE KINAZA OVISNIH O CIKLONU ILI CDK-OVA I KLJUČNI SU DIJELOVI U DEFINIRANJU FAZA STANIČNE PODJELE. KOMPLEKSI CIKLONA D-CDK4/6 KOD SISAVACA SPECIJALIZIRANI SU ZA KONTROLU ULAZA U CIKLUS DIOBE STANICA U OSNOVI PUTEM TRANSKRIPCIJSKIH MEHANIZAMA REGULACIJE. OVA NUKLEARNA FUNKCIJA CIKLONA D-CDK4/6 POSEBNO JE VAŽNA TIJEKOM RAZVOJA TKIVA, A PROMJENE U IZRAŽAVANJU OVOG KOMPLEKSA POTIČU STVARANJE TUMORA. DAKLE, CIKLIN D1 (CCND1) I CDK4 SU DVA OD NAJVIŠE POJAČANIH ONKOGENES U RAZLIČITIM VRSTAMA TUMORA. TAKOĐER JE POZNATO DA JE CCND1-CDK4 UKLJUČEN U REGULACIJU STANIČNE ADHEZIJE I MIGRACIJE, ŠTO SU KLJUČNI PROCESI TIJEKOM RAZVOJA. NAŠA GRUPA JE POKAZALA DA CCND1-CDK4 KOMPLEKSI SMJEŠTENI U CYTOPLAZMU KONTROLIRAJU OVE PROCESE KROZ AKTIVACIJU RAL I RAC1 GT PROLAZI. OVAJ NALAZ MIJENJA PARADIGMU KOJA STAVLJA CCND1 KAO JEDAN OD UČINAKA TRANSDUKCIJSKIH PUTOVA ZA KONTROLU STANIČNE DIOBE I SUGERIRA DA NJEGOVA CITOPLAZMIČKA AKTIVNOST MOŽE IGRATI MNOGO VAŽNIJU ULOGU KAO REGULATOR STANIČNE SIGNALIZACIJE NEGO ŠTO SE PRETHODNO PRIPISIVAO. STOGA JE GLAVNA SVRHA OVOG PROJEKTA PROUČAVANJE VAŽNOSTI CITOPLAZMIČKIH FUNKCIJA CCND1-CDK4 U REGULACIJI STANIČNE SIGNALIZACIJE TIJEKOM RAZVOJA I KOD RAKA. U TU SVRHU PREDLAŽEMO TRI POSEBNA CILJA: 1) KARAKTERIZACIJA TRANSDUKCIJSKIH PUTOVA SIGNALA REGULIRANIH CITOPLAZMSKIM KOMPLEKSOM CCND1-CDK4. POMOĆU RAZLIČITIH PROTEOMSKIH TEHNIKA NASTOJIMO OTKRITI I KARAKTERIZIRATI CILJEVE CCND1-CDK4 UKLJUČENE U STANIČNU SIGNALIZACIJU. U OKVIRU OVOG CILJA TAKOĐER ĆEMO PROUČITI PROHIBITINAS, CDK4 INTERAKCIJE DOBIVENE U PRETHODNIM PROBIRAMA I KOJI BI MOGLI BITI UKLJUČENI U LOKACIJU I CITOPLAZMIČKU AKTIVNOST CCND1-CDK4; 2) PROUČAVANJE ULOGE CCND1-CDK4 U RAZVOJU. USREDOTOČIT ĆEMO SE NA PROUČAVANJE MOŽDANE KORE JER DOSADAŠNJI REZULTATI NAŠE GRUPE I SURADNICI POKAZUJU DA JE CCND1-CDK4 AKTIVNOST VAŽNA ZA STRUKTURIRANJE SLOJEVA MOŽDANE KORE. OSIM TOGA, ZNAMO DA EKSPRESIJA CCND1 U CITOPLAZMU IZAZIVA NEURITOGENEZU U PRIMARNIM KULTURAMA KORTIKALNIH NEURONA, TE SMO OTKRILI DA CCND1 KOMUNICIRA S PALS1 I RALA, KOJI SU RELEVANTNI U PROCESIMA POLARITETA I NEURONSKE MIGRACIJE; 3) PROCJENA VAŽNOSTI CITOPLAZMSKIH FUNKCIJA CCND1-CDK4 U LJUDSKIM TUMORIMA. NAŠI PRELIMINARNI REZULTATI S MODELIMA MURINA UKAZUJU NA VAŽNOST CITOPLAZMIČNOG CCND1-CDK4 KOMPLEKSA U PROGRESIJI TUMORA. SADA ŽELIMO KARAKTERIZIRATI CITOPLAZMIČKE FUNKCIJE CCND1-CDK4 U PRIMARNIM KULTURAMA I TUMOROSPHERAS IZOLIRANI IZ LJUDSKIH TUMORA. DOBILI SMO PRELIMINARNE REZULTATE U STANICAMA LJUDSKOG GLIOBLASTOMA, TUMORU VISOKOG INVAZIVNOG KAPACITETA. ZAKLJUČNO, SREDSTVA DOBIVENA U PRETHODNIM PROJEKTIMA OMOGUĆILA SU NAM DA UTVRDIMO DA CCND1-CDK4 IMA RELEVANTNU CITOPLAZMIČKU AKTIVNOST TIJEKOM RAZVOJA I PATOLOŠKIH PROCESA KAO ŠTO JE RAK. TO OTVARA PODRUČJE ISTRAŽIVANJA MALO STUDIRAO, A U OVOM NOVOM PROJEKTU ŽELIMO SE BAVITI KARAKTERIZACIJOM SIGNALNO-SIGURNOSNIH MEHANIZAMA REGULIRANIH CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC KOMPLEKSIMA. (Croatian)
4 August 2022
0 references
ΟΙ ΚΥΚΛΊΝΕΣ ΔΡΟΥΝ ΩΣ ΡΥΘΜΙΣΤΙΚΈΣ ΥΠΟΜΟΝΆΔΕΣ ΚΙΝΆΣΕΣ ΕΞΑΡΤΏΜΕΝΕΣ ΑΠΌ ΚΥΚΛΊΝΗ Ή CDK ΚΑΙ ΑΠΟΤΕΛΟΎΝ ΒΑΣΙΚΆ ΜΈΡΗ ΤΟΥ ΟΡΙΣΜΟΎ ΤΩΝ ΣΤΑΔΊΩΝ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉΣ ΔΙΑΊΡΕΣΗΣ. ΤΑ ΣΎΜΠΛΟΚΑ ΚΥΚΛΊΝΗΣ D-CDK4/6 ΣΤΑ ΘΗΛΑΣΤΙΚΆ ΕΞΕΙΔΙΚΕΎΟΝΤΑΙ ΣΤΟΝ ΈΛΕΓΧΟ ΤΩΝ ΕΙΣΡΟΏΝ ΣΤΟΝ ΚΎΚΛΟ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉΣ ΔΙΑΊΡΕΣΗΣ ΒΑΣΙΚΆ ΜΈΣΩ ΜΗΧΑΝΙΣΜΏΝ ΜΕΤΑΓΡΑΦΙΚΟΎ ΚΑΝΟΝΙΣΜΟΎ. ΑΥΤΉ Η ΠΥΡΗΝΙΚΉ ΛΕΙΤΟΥΡΓΊΑ ΤΗΣ ΚΥΚΛΊΝΗΣ D-CDK4/6 ΕΊΝΑΙ ΙΔΙΑΊΤΕΡΑ ΣΗΜΑΝΤΙΚΉ ΚΑΤΆ ΤΗ ΔΙΆΡΚΕΙΑ ΤΗΣ ΑΝΆΠΤΥΞΗΣ ΤΩΝ ΙΣΤΏΝ, ΚΑΙ ΟΙ ΜΕΤΑΒΟΛΈΣ ΣΤΗΝ ΈΚΦΡΑΣΗ ΑΥΤΟΎ ΤΟΥ ΣΥΓΚΡΟΤΉΜΑΤΟΣ ΠΡΟΩΘΟΎΝ ΤΟ ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΌ ΌΓΚΩΝ. ΈΤΣΙ, Η ΚΥΚΛΊΝΗ D1 (CCND1) ΚΑΙ ΤΟ CDK4 ΕΊΝΑΙ ΔΎΟ ΑΠΌ ΤΑ ΠΙΟ ΕΝΙΣΧΥΜΈΝΑ ΟΓΚΟΓΟΝΊΔΙΑ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΟΎΣ ΤΎΠΟΥΣ ΌΓΚΩΝ. ΕΊΝΑΙ ΕΠΊΣΗΣ ΓΝΩΣΤΌ ΌΤΙ ΤΟ CCND1-CDK4 ΣΥΜΜΕΤΈΧΕΙ ΣΤΟΝ ΚΑΝΟΝΙΣΜΌ ΓΙΑ ΤΗΝ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉ ΠΡΌΣΦΥΣΗ ΚΑΙ ΤΗ ΜΕΤΑΝΆΣΤΕΥΣΗ, ΒΑΣΙΚΈΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΊΕΣ ΚΑΤΆ ΤΗ ΔΙΆΡΚΕΙΑ ΤΗΣ ΑΝΆΠΤΥΞΗΣ. Η ΟΜΆΔΑ ΜΑΣ ΈΧΕΙ ΔΕΊΞΕΙ ΌΤΙ ΤΑ ΣΎΜΠΛΟΚΑ CCND1-CDK4 ΠΟΥ ΒΡΊΣΚΟΝΤΑΙ ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΌΠΛΑΣΜΑ ΕΛΈΓΧΟΥΝ ΑΥΤΈΣ ΤΙΣ ΔΙΕΡΓΑΣΊΕΣ ΜΈΣΩ ΤΗΣ ΕΝΕΡΓΟΠΟΊΗΣΗΣ ΤΩΝ ΠΕΡΑΣΜΆΤΩΝ RAL ΚΑΙ RAC1 GT. ΑΥΤΌ ΤΟ ΕΎΡΗΜΑ ΑΛΛΆΖΕΙ ΤΟ ΠΑΡΆΔΕΙΓΜΑ ΠΟΥ ΤΟΠΟΘΕΤΕΊ ΤΟ CCND1 ΩΣ ΈΝΑ ΑΠΌ ΤΑ ΑΠΟΤΕΛΈΣΜΑΤΑ ΤΩΝ ΔΙΑΔΡΟΜΏΝ ΜΕΤΑΓΩΓΉΣ ΓΙΑ ΤΟΝ ΈΛΕΓΧΟ ΤΗΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉΣ ΔΙΑΊΡΕΣΗΣ ΚΑΙ ΥΠΟΔΗΛΏΝΕΙ ΌΤΙ Η ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΉ ΤΟΥ ΔΡΑΣΤΗΡΙΌΤΗΤΑ ΜΠΟΡΕΊ ΝΑ ΔΙΑΔΡΑΜΑΤΊΣΕΙ ΠΟΛΎ ΠΙΟ ΣΗΜΑΝΤΙΚΌ ΡΌΛΟ ΩΣ ΡΥΘΜΙΣΤΉΣ ΤΗΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉΣ ΣΗΜΑΤΟΔΌΤΗΣΗΣ ΑΠΌ Ό,ΤΙ ΣΤΟ ΠΑΡΕΛΘΌΝ. ΈΤΣΙ, Ο ΚΎΡΙΟΣ ΣΚΟΠΌΣ ΑΥΤΟΎ ΤΟΥ ΈΡΓΟΥ ΕΊΝΑΙ ΝΑ ΜΕΛΕΤΉΣΕΙ ΤΗ ΣΗΜΑΣΊΑ ΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΏΝ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΏΝ ΤΟΥ CCND1-CDK4 ΣΤΟΝ ΚΑΝΟΝΙΣΜΌ ΤΗΣ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉΣ ΣΗΜΑΤΟΔΌΤΗΣΗΣ ΚΑΤΆ ΤΗ ΔΙΆΡΚΕΙΑ ΤΗΣ ΑΝΆΠΤΥΞΗΣ ΚΑΙ ΣΤΟΝ ΚΑΡΚΊΝΟ. ΓΙΑ ΤΟΝ ΣΚΟΠΌ ΑΥΤΌ, ΠΡΟΤΕΊΝΟΥΜΕ ΤΡΕΙΣ ΕΙΔΙΚΟΎΣ ΣΤΌΧΟΥΣ: 1) Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΌΣ ΤΩΝ ΟΔΏΝ ΜΕΤΑΓΩΓΉΣ ΣΗΜΆΤΩΝ ΠΟΥ ΡΥΘΜΊΖΟΝΤΑΙ ΑΠΌ ΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΌ ΣΎΜΠΛΕΓΜΑ CCND1-CDK4. ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΏΝΤΑΣ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΈΣ ΠΡΩΤΕΩΜΙΚΈΣ ΤΕΧΝΙΚΈΣ ΣΚΟΠΕΎΟΥΜΕ ΝΑ ΑΝΑΚΑΛΎΨΟΥΜΕ ΚΑΙ ΝΑ ΧΑΡΑΚΤΗΡΊΣΟΥΜΕ ΣΤΌΧΟΥΣ CCND1-CDK4 ΠΟΥ ΕΜΠΛΈΚΟΝΤΑΙ ΣΤΗΝ ΚΥΤΤΑΡΙΚΉ ΣΗΜΑΤΟΔΌΤΗΣΗ. ΣΤΟ ΠΛΑΊΣΙΟ ΑΥΤΟΎ ΤΟΥ ΣΤΌΧΟΥ, ΘΑ ΜΕΛΕΤΉΣΟΥΜΕ ΕΠΊΣΗΣ ΤΟ PROHIBITINAS, ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΤΙΚΟΎΣ ΠΑΡΆΓΟΝΤΕΣ CDK4 ΠΟΥ ΑΠΟΚΤΉΘΗΚΑΝ ΣΕ ΠΡΟΗΓΟΎΜΕΝΕΣ ΠΡΟΒΟΛΈΣ ΚΑΙ ΟΙ ΟΠΟΊΟΙ ΘΑ ΜΠΟΡΟΎΣΑΝ ΝΑ ΣΥΜΜΕΤΈΧΟΥΝ ΣΤΗ ΘΈΣΗ ΚΑΙ ΤΗΝ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΉ ΔΡΑΣΤΗΡΙΌΤΗΤΑ ΤΟΥ CCND1-CDK4· 2) Η ΜΕΛΈΤΗ ΤΟΥ ΡΌΛΟΥ ΤΟΥ CCND1-CDK4 ΣΤΗΝ ΑΝΆΠΤΥΞΗ. ΘΑ ΕΠΙΚΕΝΤΡΩΘΟΎΜΕ ΣΤΗ ΜΕΛΈΤΗ ΤΟΥ ΕΓΚΕΦΑΛΙΚΟΎ ΦΛΟΙΟΎ ΑΦΟΎ ΠΡΟΗΓΟΎΜΕΝΑ ΑΠΟΤΕΛΈΣΜΑΤΑ ΤΗΣ ΟΜΆΔΑΣ ΜΑΣ ΚΑΙ ΣΥΝΕΡΓΆΤΕΣ ΜΑΣ ΔΕΊΧΝΟΥΝ ΌΤΙ Η ΔΡΑΣΤΗΡΙΌΤΗΤΑ CCND1-CDK4 ΕΊΝΑΙ ΣΗΜΑΝΤΙΚΉ ΓΙΑ ΤΗ ΔΙΆΡΘΡΩΣΗ ΤΩΝ ΣΤΡΩΜΆΤΩΝ ΤΟΥ ΕΓΚΕΦΑΛΙΚΟΎ ΦΛΟΙΟΎ. ΕΠΙΠΛΈΟΝ, ΓΝΩΡΊΖΟΥΜΕ ΌΤΙ Η ΈΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥ CCND1 ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΌΠΛΑΣΜΑ ΠΡΟΚΑΛΕΊ ΝΕΥΡΙΤΟΓΈΝΕΣΗ ΣΕ ΠΡΩΤΟΓΕΝΕΊΣ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΕΣ ΦΛΟΙΩΔΏΝ ΝΕΥΡΏΝΩΝ, ΚΑΙ ΔΙΑΠΙΣΤΏΣΑΜΕ ΌΤΙ ΤΟ CCND1 ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΆ ΜΕ ΤΟ PALS1 ΚΑΙ ΤΟ RALA, ΚΑΙ ΤΑ ΔΎΟ ΕΊΝΑΙ ΣΧΕΤΙΚΆ ΜΕ ΤΙΣ ΔΙΕΡΓΑΣΊΕΣ ΠΟΛΙΚΌΤΗΤΑΣ ΚΑΙ ΝΕΥΡΩΝΙΚΉΣ ΜΕΤΑΝΆΣΤΕΥΣΗΣ. 3) Η ΑΞΙΟΛΌΓΗΣΗ ΤΗΣ ΣΗΜΑΣΊΑΣ ΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΏΝ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΏΝ ΤΟΥ CCND1-CDK4 ΣΤΟΥΣ ΑΝΘΡΏΠΙΝΟΥΣ ΌΓΚΟΥΣ. ΤΑ ΠΡΟΚΑΤΑΡΚΤΙΚΆ ΑΠΟΤΕΛΈΣΜΑΤΆ ΜΑΣ ΜΕ ΤΑ ΜΟΝΤΈΛΑ ΜΟΥΡΊΑΣ ΔΕΊΧΝΟΥΝ ΤΗ ΣΗΜΑΣΊΑ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΟΎ ΣΥΜΠΛΈΓΜΑΤΟΣ CCND1-CDK4 ΣΤΗΝ ΕΞΈΛΙΞΗ ΤΟΥ ΌΓΚΟΥ. ΤΏΡΑ ΘΈΛΟΥΜΕ ΝΑ ΧΑΡΑΚΤΗΡΊΣΟΥΜΕ ΤΙΣ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΈΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΊΕΣ ΤΟΥ CCND1-CDK4 ΣΕ ΠΡΩΤΟΓΕΝΕΊΣ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΕΣ ΚΑΙ TUMOROSPHERAS ΠΟΥ ΑΠΟΜΟΝΏΝΟΝΤΑΙ ΑΠΌ ΑΝΘΡΏΠΙΝΟΥΣ ΌΓΚΟΥΣ. ΈΧΟΥΜΕ ΔΗΜΙΟΥΡΓΉΣΕΙ ΚΆΠΟΙΑ ΠΡΟΚΑΤΑΡΚΤΙΚΆ ΑΠΟΤΕΛΈΣΜΑΤΑ ΣΕ ΑΝΘΡΏΠΙΝΑ ΚΎΤΤΑΡΑ ΓΛΟΙΟΒΛΆΣΤΩΜΑ, ΈΝΑΝ ΌΓΚΟ ΜΕ ΥΨΗΛΉ ΕΠΕΜΒΑΤΙΚΉ ΙΚΑΝΌΤΗΤΑ. ΕΝ ΚΑΤΑΚΛΕΊΔΙ, Η ΧΡΗΜΑΤΟΔΌΤΗΣΗ ΠΟΥ ΑΠΟΚΤΉΘΗΚΕ ΣΤΑ ΠΡΟΗΓΟΎΜΕΝΑ ΈΡΓΑ ΜΑΣ ΕΠΈΤΡΕΨΕ ΝΑ ΔΙΑΠΙΣΤΏΣΟΥΜΕ ΌΤΙ ΤΟ CCND1-CDK4 ΈΧΕΙ ΣΧΕΤΙΚΉ ΚΥΤΤΑΡΟΠΛΑΣΜΑΤΙΚΉ ΔΡΑΣΤΗΡΙΌΤΗΤΑ ΚΑΤΆ ΤΗ ΔΙΆΡΚΕΙΑ ΤΗΣ ΑΝΆΠΤΥΞΗΣ ΚΑΙ ΣΕ ΠΑΘΟΛΟΓΙΚΈΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΊΕΣ ΌΠΩΣ Ο ΚΑΡΚΊΝΟΣ. ΑΥΤΌ ΑΝΟΊΓΕΙ ΈΝΑ ΠΕΔΊΟ ΈΡΕΥΝΑΣ ΛΊΓΟ ΜΕΛΕΤΗΜΈΝΟ, ΚΑΙ ΣΕ ΑΥΤΌ ΤΟ ΝΈΟ ΈΡΓΟ ΘΈΛΟΥΜΕ ΝΑ ΕΞΕΤΆΣΟΥΜΕ ΤΟ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΌ ΤΩΝ ΜΗΧΑΝΙΣΜΏΝ ΣΗΜΑΤΟΔΌΤΗΣΗΣ ΠΟΥ ΡΥΘΜΊΖΟΝΤΑΙ ΑΠΌ ΤΑ CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC ΣΥΓΚΡΟΤΉΜΑΤΑ. (Greek)
4 August 2022
0 references
ZÁKON O CYKLISTIKE AKO REGULAČNÉ PODJEDNOTKY KINÁZ ZÁVISLÝCH OD CYKLÍN ALEBO CDK A SÚ KĽÚČOVÝMI SÚČASŤAMI VYMEDZENIA ETÁP DELENIA BUNIEK. KOMPLEXY CYKLÍN D-CDK4/6 U CICAVCOV SA ŠPECIALIZUJÚ NA KONTROLU VSTUPU DO CYKLU DELENIA BUNIEK V PODSTATE PROSTREDNÍCTVOM TRANSKRIPČNÝCH REGULAČNÝCH MECHANIZMOV. TÁTO JADROVÁ FUNKCIA CYKLÍNU D-CDK4/6 JE OBZVLÁŠŤ DÔLEŽITÁ POČAS VÝVOJA TKANIVA A ZMENY V EXPRESII TOHTO KOMPLEXU PODPORUJÚ TVORBU NÁDOROV. TAK, CYKLÍN D1 (CCND1) A CDK4 SÚ DVA Z NAJVIAC ZOSILNENÉ ONKOGÉNY V RÔZNYCH TYPOCH NÁDOROV. JE TIEŽ ZNÁME, ŽE CCND1-CDK4 JE ZAPOJENÝ DO REGULÁCIE BUNKOVEJ ADHÉZIE A MIGRÁCIE, ČO SÚ ZÁKLADNÉ PROCESY POČAS VÝVOJA. NAŠA SKUPINA UKÁZALA, ŽE KOMPLEXY CCND1-CDK4 UMIESTNENÉ V CYTOPLAZME KONTROLUJÚ TIETO PROCESY PROSTREDNÍCTVOM AKTIVÁCIE RAL A RAC1 GT PRIECHODOV. TÝMTO ZISTENÍM SA MENÍ PARADIGMA, KTORÁ KLADIE CCND1 AKO JEDEN Z ÚČINKOV TRANSDUKČNÝCH CIEST NA KONTROLU DELENIA BUNIEK A NAZNAČUJE, ŽE JEHO CYTOPLAZMATICKÁ AKTIVITA MÔŽE ZOHRÁVAŤ OVEĽA DÔLEŽITEJŠIU ÚLOHU AKO REGULÁTOR BUNKOVEJ SIGNALIZÁCIE AKO PREDTÝM PRISÚDENÁ. HLAVNÝM ÚČELOM TOHTO PROJEKTU JE TEDA PRESKÚMAŤ VÝZNAM CYTOPLAZMICKÝCH FUNKCIÍ CCND1-CDK4 V REGULÁCII BUNKOVEJ SIGNALIZÁCIE POČAS VÝVOJA A RAKOVINY. NA TENTO ÚČEL NAVRHUJEME TRI KONKRÉTNE CIELE: 1) CHARAKTERIZÁCIA TRANSDUKČNÝCH DRÁH SIGNÁLOV REGULOVANÝCH CYTOPLAZMICKÝM KOMPLEXOM CCND1-CDK4. POMOCOU RÔZNYCH PROTEOMICKÝCH TECHNÍK SA SNAŽÍME OBJAVIŤ A CHARAKTERIZOVAŤ CIELE CCND1-CDK4 ZAPOJENÉ DO BUNKOVEJ SIGNALIZÁCIE. V RÁMCI TOHTO CIEĽA BUDEME ŠTUDOVAŤ AJ PROHIBITINAS, CDK4 INTERAKCIE ZÍSKANÉ V PREDCHÁDZAJÚCICH SKRÍNINGOCH, KTORÉ BY MOHLI BYŤ ZAPOJENÉ DO UMIESTNENIA A CYTOPLAZMICKEJ AKTIVITY CCND1-CDK4; 2) ŠTÚDIUM ÚLOHY CCND1-CDK4 VO VÝVOJI. ZAMERIAME SA NA ŠTÚDIUM MOZGOVEJ KÔRY, PRETOŽE PREDCHÁDZAJÚCE VÝSLEDKY NAŠEJ SKUPINY A SPOLUPRACOVNÍKOV NAZNAČUJÚ, ŽE AKTIVITA CCND1-CDK4 JE DÔLEŽITÁ PRE ŠTRUKTÚROVANIE VRSTIEV MOZGOVEJ KÔRY. OKREM TOHO VIEME, ŽE EXPRESIA CCND1 V CYTOPLAZME INDUKUJE NEURITOGENÉZU V PRIMÁRNYCH KULTÚRACH KORTIKÁLNYCH NEURÓNOV A ZISTILI SME, ŽE CCND1 INTERAGUJE S PALS1 A RALA, KTORÉ SÚ RELEVANTNÉ V PROCESOCH POLARITY A NEURÓNOVEJ MIGRÁCIE; 3) HODNOTENIE DÔLEŽITOSTI CYTOPLAZMICKÝCH FUNKCIÍ CCND1-CDK4 U ĽUDSKÝCH NÁDOROV. NAŠE PREDBEŽNÉ VÝSLEDKY S MYŠÍ MODELMI NAZNAČUJÚ DÔLEŽITOSŤ CYTOPLAZMICKÉHO KOMPLEXU CCND1-CDK4 V PROGRESII NÁDORU. TERAZ CHCEME CHARAKTERIZOVAŤ CYTOPLAZMICKÉ FUNKCIE CCND1-CDK4 V PRIMÁRNYCH KULTÚRACH A TUMOROSPHERAS IZOLOVANÉ OD ĽUDSKÝCH NÁDOROV. VYTVORILI SME NIEKTORÉ PREDBEŽNÉ VÝSLEDKY V BUNKÁCH ĽUDSKÉHO GLIOBLASTÓMU, NÁDOR S VYSOKOU INVAZÍVNOU KAPACITOU. NA ZÁVER, FINANCOVANIE ZÍSKANÉ V PREDCHÁDZAJÚCICH PROJEKTOCH NÁM UMOŽNILO STANOVIŤ, ŽE CCND1-CDK4 MÁ RELEVANTNÚ CYTOPLAZMICKÚ AKTIVITU POČAS VÝVOJA A V PATOLOGICKÝCH PROCESOCH, AKO JE RAKOVINA. TÝM SA OTVÁRA MÁLO ŠTUDOVANÁ OBLASŤ VÝSKUMU A V TOMTO NOVOM PROJEKTE SA CHCEME ZAOBERAŤ CHARAKTERIZÁCIOU SIGNALIZAČNÝCH MECHANIZMOV REGULOVANÝCH KOMPLEXMI CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Slovak)
4 August 2022
0 references
SYKLIT LAKI SYKLISTÄ RIIPPUVAISTEN KINAASIEN TAI CDK-YHDISTEIDEN SÄÄNTELYALOISTA JA OVAT KESKEISIÄ OSIA SOLUNJAKAUTUMISVAIHEIDEN MÄÄRITTELYSSÄ. NISÄKKÄIDEN D-CDK4/6-SYKLIKOMPLEKSIT OVAT ERIKOISTUNEET OHJAAMAAN SOLUNJAKAUTUMISSYKLIN SYÖTTÖÄ PERIAATTEESSA TRANSKRIPTIOIDEN SÄÄTELYMEKANISMIEN AVULLA. TÄMÄ SYKLIN D-CDK4/6 YDINTOIMINTO ON ERITYISEN TÄRKEÄ KUDOSTEN KEHITYKSEN AIKANA, JA TÄMÄN MONIMUTKAISEN ILMENTYMÄN MUUTOKSET EDISTÄVÄT KASVAINTEN MUODOSTUMISTA. NÄIN OLLEN SYKLI D1 (CCND1) JA CDK4 OVAT KAKSI ENITEN TÄYDENNETTY ONCOGENES ERI KASVAINTYYPPEJÄ. ON MYÖS TIEDOSSA, ETTÄ CCND1-CDK4 OSALLISTUU SOLUJEN TARTTUMISEN JA SIIRTYMISEN SÄÄTELYYN, MIKÄ ON VÄLTTÄMÄTÖNTÄ KEHITYKSEN AIKANA. RYHMÄMME ON OSOITTANUT, ETTÄ CCND1-CDK4 KOMPLEKSEJA SIJAITSEVAT SYTOPLASMA HALLITA NÄITÄ PROSESSEJA AKTIVOIMALLA RAL JA RAC1 GT KULKEE. TÄMÄ HAVAINTO MUUTTAA PARADIGMAA, JOKA ASETTAA CCND1:N YHDEKSI TRANSDUKTIOREITTIEN VAIKUTUKSISTA SOLUJEN JAKAUTUMISEN HALLINTAAN, JA VIITTAA SIIHEN, ETTÄ SEN SYTOPLASMISELLA AKTIIVISUUDELLA VOI OLLA PALJON TÄRKEÄMPI ROOLI SOLUSIGNAALIN SÄÄTELIJÄNÄ KUIN AIEMMIN ON SILLE ANNETTU. NÄIN OLLEN TÄMÄN HANKKEEN PÄÄTARKOITUKSENA ON TUTKIA CCND1-CDK4:N SYTOPLASMISTEN TOIMINTOJEN MERKITYSTÄ SOLUSIGNAALIEN SÄÄNTELYSSÄ KEHITYKSEN AIKANA JA SYÖVÄSSÄ. TÄTÄ VARTEN EHDOTAMME KOLMEA ERITYISTAVOITETTA: 1) CCND1-CDK4-SYTOPLASMISEN KOMPLEKSIN SÄÄTELEMIEN SIGNAALIEN TRANSDUKTIOREITTIEN LUONNEHDINTA. ERILAISTEN PROTEOMISTEN TEKNIIKOIDEN AVULLA PYRIMME LÖYTÄMÄÄN JA LUONNEHTIMAAN CCND1-CDK4-KOHTEITA SOLUSIGNAALIEN YHTEYDESSÄ. TÄMÄN TAVOITTEEN PUITTEISSA TUTKIMME MYÖS PROHIBITINASIA, CDK4-INTERAKTIOITA, JOTKA ON SAATU AIEMMISSA SEULONNOISSA JA JOTKA VOISIVAT OLLA MUKANA CCND1-CDK4:N SIJAINTI- JA SYTOPLASMISESSA AKTIIVISUUDESSA; 2) TUTKIMUS CCND1-CDK4: N ROOLISTA KEHITYKSESSÄ. KESKITYMME AIVOKUOREN TUTKIMUKSEEN, KOSKA RYHMÄMME JA YHTEISTYÖKUMPPANEIDEN AIEMMAT TULOKSET OSOITTAVAT, ETTÄ CCND1-CDK4-AKTIIVISUUS ON TÄRKEÄÄ AIVOKUOREN KERROSTEN JÄSENTÄMISESSÄ. LISÄKSI TIEDÄMME, ETTÄ CCND1:N ILMENTYMINEN SYTOPLASMASSA AIHEUTTAA NEURITOGENEOSIA KORTIKAALISTEN NEURONIEN PRIMAARIVILJELMISSÄ, JA OLEMME HAVAINNEET, ETTÄ CCND1 ON VUOROVAIKUTUKSESSA PALS1:N JA RALAN KANSSA, JOTKA MOLEMMAT OVAT MERKITYKSELLISIÄ POLAARISUUDEN JA NEURONAALISEN MUUTTOLIIKKEEN PROSESSEISSA; 3) CCND1-CDK4: N SYTOPLASMISTEN TOIMINTOJEN MERKITYKSEN ARVIOINTI IHMISEN KASVAIMISSA. ALUSTAVAT TULOKSET HIIREN MALLEILLA VIITTAAVAT SYTOPLASMISEN CCND1-CDK4-KOMPLEKSIN MERKITYKSEEN KASVAIMEN ETENEMISESSÄ. HALUAMME NYT LUONNEHTIA SYTOPLASMISIA TOIMINTOJA CCND1-CDK4 PRIMAARIVILJELMISSÄ JA TUMOROSPHERAS ERISTETTY IHMISEN KASVAIMIA. OLEMME TUOTTANEET ALUSTAVIA TULOKSIA IHMISEN GLIOBLASTOMASOLUISSA, KASVAIMESSA, JOLLA ON SUURI INVASIIVINEN KAPASITEETTI. YHTEENVETONA VOIDAAN TODETA, ETTÄ AIEMMISSA HANKKEISSA SAADUN RAHOITUKSEN AVULLA ON VOITU TODETA, ETTÄ CCND1-CDK4:LLÄ ON MERKITTÄVÄÄ SYTOPLASMISTA TOIMINTAA KEHITYKSEN AIKANA JA PATOLOGISISSA PROSESSEISSA, KUTEN SYÖVÄSSÄ. TÄMÄ AVAA VÄHÄN TUTKITTUA TUTKIMUSALAA, JA TÄSSÄ UUDESSA HANKKEESSA HALUAMME KÄSITELLÄ CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC -KOMPLEKSIEN SÄÄNTELEMIEN SIGNAALIMEKANISMIEN KARAKTERISOINTIA. (Finnish)
4 August 2022
0 references
CYKLINY DZIAŁAJĄ JAKO PODJEDNOSTKI REGULACYJNE KINAZ ZALEŻNYCH OD CYKLINY LUB CDK I SĄ KLUCZOWYMI ELEMENTAMI W DEFINICJI ETAPÓW PODZIAŁU KOMÓREK. KOMPLEKSY CYKLIN D-CDK4/6 U SSAKÓW SPECJALIZUJĄ SIĘ W KONTROLOWANIU WPROWADZANIA DO CYKLU PODZIAŁU KOMÓREK ZA POMOCĄ MECHANIZMÓW TRANSKRYPCYJNYCH. TA NUKLEARNA FUNKCJA CYKLINY D-CDK4/6 JEST SZCZEGÓLNIE WAŻNA PODCZAS ROZWOJU TKANKI, A ZMIANY W EKSPRESJI TEGO KOMPLEKSU SPRZYJAJĄ POWSTAWANIU NOWOTWORÓW. TAK WIĘC CYKLINA D1 (CCND1) I CDK4 SĄ DWOMA Z NAJBARDZIEJ WZMOCNIONYCH ONKOGENÓW W RÓŻNYCH TYPACH NOWOTWORÓW. WIADOMO RÓWNIEŻ, ŻE CCND1-CDK4 BIERZE UDZIAŁ W REGULACJI ADHEZJI KOMÓRKOWEJ I MIGRACJI, NIEZBĘDNYCH PROCESÓW PODCZAS ROZWOJU. NASZA GRUPA WYKAZAŁA, ŻE KOMPLEKSY CCND1-CDK4 ZNAJDUJĄCE SIĘ W CYTOPLAZMIE KONTROLUJĄ TE PROCESY POPRZEZ AKTYWACJĘ PRZEJŚĆ RAL I RAC1 GT. TO USTALENIE ZMIENIA PARADYGMAT, KTÓRY UMIESZCZA CCND1 JAKO JEDEN Z EFEKTÓW ŚCIEŻEK TRANSDUKCYJNYCH DLA KONTROLI PODZIAŁU KOMÓREK I SUGERUJE, ŻE JEGO AKTYWNOŚĆ CYTOPLAZMATYCZNA MOŻE ODGRYWAĆ ZNACZNIE WAŻNIEJSZĄ ROLĘ JAKO REGULATOR SYGNALIZACJI KOMÓRKOWEJ NIŻ WCZEŚNIEJ MU PRZYPISYWANO. W ZWIĄZKU Z TYM GŁÓWNYM CELEM TEGO PROJEKTU JEST ZBADANIE ZNACZENIA FUNKCJI CYTOPLAZMATYCZNYCH CCND1-CDK4 W ROZPORZĄDZENIU SYGNALIZACJI KOMÓRKOWEJ PODCZAS ROZWOJU I RAKA. W TYM CELU PROPONUJEMY TRZY CELE SZCZEGÓŁOWE: 1) CHARAKTERYSTYKA ŚCIEŻEK TRANSDUKCYJNYCH SYGNAŁÓW REGULOWANYCH PRZEZ KOMPLEKS CYTOPLAZMICZNY CCND1-CDK4. ZA POMOCĄ RÓŻNYCH TECHNIK PROTEOMICZNYCH STARAMY SIĘ ODKRYĆ I SCHARAKTERYZOWAĆ CELE CCND1-CDK4 ZWIĄZANE Z SYGNALIZACJĄ KOMÓRKOWĄ. W RAMACH TEGO CELU ZBADAMY RÓWNIEŻ PROHIBITINAS, INTERAKCJE CDK4 UZYSKANE W POPRZEDNICH BADANIACH PRZESIEWOWYCH, KTÓRE MOGŁYBY BYĆ ZAANGAŻOWANE W LOKALIZACJĘ I AKTYWNOŚĆ CYTOPLAZMATYCZNĄ CCND1-CDK4; 2) BADANIE ROLI CCND1-CDK4 W ROZWOJU. SKUPIMY SIĘ NA BADANIU KORY MÓZGOWEJ OD POPRZEDNICH WYNIKÓW NASZEJ GRUPY, A WSPÓŁPRACOWNICY WSKAZUJĄ, ŻE AKTYWNOŚĆ CCND1-CDK4 JEST WAŻNA DLA STRUKTURY WARSTW KORY MÓZGOWEJ. PONADTO WIEMY, ŻE EKSPRESJA CCND1 W CYTOPLAZMIE INDUKUJE NEURITOGENEZĘ W PODSTAWOWYCH KULTURACH NEURONÓW KOROWYCH I ODKRYLIŚMY, ŻE CCND1 WCHODZI W INTERAKCJE Z PALS1 I RALA, KTÓRE SĄ ISTOTNE W PROCESACH POLARYZACJI I MIGRACJI NEURONÓW; 3) OCENA ZNACZENIA FUNKCJI CYTOPLAZMATYCZNYCH CCND1-CDK4 W LUDZKICH NOWOTWORACH. NASZE WSTĘPNE WYNIKI Z MODELI MYSICH SUGERUJĄ ZNACZENIE CYTOPLAZMATYCZNEGO KOMPLEKSU CCND1-CDK4 W PROGRESJI GUZA. TERAZ CHCEMY SCHARAKTERYZOWAĆ FUNKCJE CYTOPLAZMATYCZNE CCND1-CDK4 W KULTURACH PODSTAWOWYCH I TUMOROSPHERAS WYIZOLOWANYCH Z LUDZKICH NOWOTWORÓW. UZYSKALIŚMY WSTĘPNE WYNIKI W LUDZKICH KOMÓRKACH GLEJAKA, GUZA O DUŻEJ POJEMNOŚCI INWAZYJNEJ. PODSUMOWUJĄC, FINANSOWANIE UZYSKANE W RAMACH POPRZEDNICH PROJEKTÓW POZWOLIŁO NAM USTALIĆ, ŻE CCND1-CDK4 WYKAZUJE ISTOTNĄ AKTYWNOŚĆ CYTOPLAZMATYCZNĄ W TRAKCIE ROZWOJU I W PROCESACH PATOLOGICZNYCH, TAKICH JAK RAK. OTWIERA TO POLE BADAŃ MAŁO ZBADANYCH, A W TYM NOWYM PROJEKCIE CHCEMY ZAJĄĆ SIĘ CHARAKTERYSTYKĄ MECHANIZMÓW SYGNALIZACYJNYCH REGULOWANYCH PRZEZ KOMPLEKSY CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Polish)
4 August 2022
0 references
A CIKLONOKRÓL SZÓLÓ TÖRVÉNY MINT A CIKLONFÜGGŐ KINÁZOK VAGY CDK-K SZABÁLYOZÁSI ALEGYSÉGEI, ÉS KULCSFONTOSSÁGÚ SZEREPET JÁTSZANAK A SEJTOSZTÓDÁSI SZAKASZOK MEGHATÁROZÁSÁBAN. AZ EMLŐSÖKBEN TALÁLHATÓ D-CDK4/6 CIKLON KOMPLEXEK ALAPVETŐEN TRANSZKRIPCIÓS SZABÁLYOZÁSI MECHANIZMUSOKON KERESZTÜL A SEJTOSZTÓDÁSI CIKLUSBA VALÓ BEVITEL SZABÁLYOZÁSÁRA SPECIALIZÁLÓDTAK. A D-CDK4/6 CIKLON NUKLEÁRIS FUNKCIÓJA KÜLÖNÖSEN FONTOS A SZÖVETFEJLESZTÉS SORÁN, ÉS ENNEK A KOMPLEXUMNAK A KIFEJEZÉSÉBEN BEKÖVETKEZŐ VÁLTOZÁSOK ELŐSEGÍTIK A DAGANATOK KIALAKULÁSÁT. ÍGY A D1 CIKLON (CCND1) ÉS A CDK4 A KÉT LEGINKÁBB FELERŐSÍTETT ONKOGÉN A KÜLÖNBÖZŐ TUMORTÍPUSOKBAN. AZ IS ISMERT, HOGY A CCND1-CDK4 RÉSZT VESZ A SEJTEK TAPADÁSÁNAK ÉS VÁNDORLÁSÁNAK SZABÁLYOZÁSÁBAN, AMELYEK A FEJLESZTÉS SORÁN ALAPVETŐ FONTOSSÁGÚ FOLYAMATOK. CSOPORTUNK MEGMUTATTA, HOGY A CITOPLAZMÁBAN TALÁLHATÓ CCND1-CDK4 KOMPLEXEK A RAL ÉS RAC1 GT PASSZOK AKTIVÁLÁSÁVAL SZABÁLYOZZÁK EZEKET A FOLYAMATOKAT. EZ A MEGÁLLAPÍTÁS MEGVÁLTOZTATJA AZT A PARADIGMÁT, AMELY A CCND1-ET A SEJTOSZTÓDÁS SZABÁLYOZÁSÁNAK TRANSZDUKCIÓS ÚTVONALAINAK EGYIK HATÁSÁVÁ TESZI, ÉS ARRA UTAL, HOGY CITOPLAZMIKUS AKTIVITÁSA SOKKAL FONTOSABB SZEREPET JÁTSZHAT A SEJTJELEK SZABÁLYOZÓJAKÉNT, MINT KORÁBBAN HOZZÁ RENDELTE. ÍGY A PROJEKT FŐ CÉLJA, HOGY TANULMÁNYOZZA A CCND1-CDK4 CITOPLAZMIKUS FUNKCIÓINAK FONTOSSÁGÁT A SEJTJELEZÉS SZABÁLYOZÁSÁBAN A FEJLŐDÉS SORÁN ÉS A RÁKBAN. E CÉLBÓL HÁROM KONKRÉT CÉLKITŰZÉST JAVASOLUNK: 1) A CCND1-CDK4 CITOPLAZMIKUS KOMPLEX ÁLTAL SZABÁLYOZOTT JELEK TRANSZDUKCIÓS ÚTVONALAINAK JELLEMZÉSE. KÜLÖNBÖZŐ PROTEOMIKUS TECHNIKÁKAT HASZNÁLVA CÉLUNK, HOGY FELFEDEZZÜK ÉS JELLEMEZZÜK A CCND1-CDK4 CÉLOKAT, AMELYEK RÉSZT VESZNEK A SEJTES JELZÉSBEN. E CÉLKITŰZÉS KERETÉBEN TANULMÁNYOZNI FOGJUK A KORÁBBI SZŰRÉSEK SORÁN KAPOTT PROHIBITINAS, CDK4 KÖLCSÖNHATÁSOKAT IS, AMELYEK RÉSZT VEHETNEK A CCND1-CDK4 HELYSZÍNÉBEN ÉS CITOPLAZMIKUS AKTIVITÁSÁBAN; 2) A CCND1-CDK4 FEJLESZTÉSI SZEREPÉNEK TANULMÁNYOZÁSA. AZ AGYKÉREG TANULMÁNYOZÁSÁRA ÖSSZPONTOSÍTUNK, MIVEL CSOPORTUNK ÉS MUNKATÁRSAINK KORÁBBI EREDMÉNYEI AZT MUTATJÁK, HOGY A CCND1-CDK4 AKTIVITÁS FONTOS AZ AGYKÉREG RÉTEGEINEK STRUKTURÁLÁSÁHOZ. EMELLETT TUDJUK, HOGY A CCND1 CITOPLAZMÁBAN VALÓ KIFEJEZŐDÉSE NEURITOGENEZIST INDUKÁL AZ AGYKÉREG ELSŐDLEGES TENYÉSZETEIBEN, ÉS MEGÁLLAPÍTOTTUK, HOGY A CCND1 KÖLCSÖNHATÁSBA LÉP A PALS1-GYEL ÉS A RALA-VAL, AMELYEK EGYARÁNT FONTOSAK A POLARITÁS ÉS A NEURONÁLIS VÁNDORLÁS FOLYAMATÁBAN; 3) A CCND1-CDK4 CITOPLAZMIKUS FUNKCIÓINAK FONTOSSÁGÁNAK ÉRTÉKELÉSE AZ EMBERI DAGANATOKBAN. ELŐZETES EREDMÉNYEINK A MURIN MODELLEKKEL ARRA UTALNAK, HOGY A CITOPLAZMÁS CCND1-CDK4 KOMPLEXUM FONTOS SZEREPET JÁTSZIK A TUMOR PROGRESSZIÓJÁBAN. MOST SZERETNÉNK JELLEMEZNI A CCND1-CDK4 CITOPLAZMIKUS FUNKCIÓIT AZ ELSŐDLEGES KULTÚRÁKBAN ÉS AZ EMBERI DAGANATOKTÓL IZOLÁLT TUMOROSPHERAS-T. NÉHÁNY ELŐZETES EREDMÉNYT HOZTUNK LÉTRE AZ EMBERI GLIOBLASTOMA SEJTEKBEN, EGY NAGY INVAZÍV KAPACITÁSÚ TUMORBAN. ÖSSZEFOGLALVA, AZ ELŐZŐ PROJEKTEK KERETÉBEN KAPOTT FINANSZÍROZÁS LEHETŐVÉ TETTE SZÁMUNKRA ANNAK MEGÁLLAPÍTÁSÁT, HOGY A CCND1-CDK4 JELENTŐS CITOPLAZMÁS AKTIVITÁSSAL RENDELKEZIK A FEJLESZTÉS SORÁN ÉS A KÓROS FOLYAMATOKBAN, PÉLDÁUL A RÁKBAN. EZ EGY KEVÉSSÉ TANULMÁNYOZOTT KUTATÁSI TERÜLETET NYIT MEG, ÉS EBBEN AZ ÚJ PROJEKTBEN A CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC KOMPLEXEK ÁLTAL SZABÁLYOZOTT JELZŐMECHANIZMUSOK JELLEMZÉSÉVEL KÍVÁNUNK FOGLALKOZNI. (Hungarian)
4 August 2022
0 references
CYKLINY PŮSOBÍ JAKO REGULAČNÍ PODJEDNOTKY KINÁZY ZÁVISLÉ NA CYKLINU NEBO CDK A JSOU KLÍČOVÝMI SOUČÁSTMI DEFINICE FÁZÍ BUNĚČNÉHO DĚLENÍ. CYKLINOVÉ KOMPLEXY D-CDK4/6 U SAVCŮ SE SPECIALIZUJÍ NA KONTROLU VSTUPU DO BUNĚČNÉHO DĚLENÍ V PODSTATĚ PROSTŘEDNICTVÍM TRANSKRIPČNÍCH REGULAČNÍCH MECHANISMŮ. TATO JADERNÁ FUNKCE CYKLINU D-CDK4/6 JE ZVLÁŠTĚ DŮLEŽITÁ PŘI VÝVOJI TKÁNĚ A ZMĚNY VE VYJÁDŘENÍ TOHOTO KOMPLEXU PODPORUJÍ TVORBU NÁDORŮ. CYKLIN D1 (CCND1) A CDK4 JSOU TEDY DVA Z NEJVÍCE ZESÍLENÝCH ONKOGENŮ V RŮZNÝCH TYPECH NÁDORŮ. JE ROVNĚŽ ZNÁMO, ŽE CCND1-CDK4 SE PODÍLÍ NA REGULACI BUNĚČNÉ PŘILNAVOSTI A MIGRACE, COŽ JSOU ZÁKLADNÍ PROCESY BĚHEM VÝVOJE. NAŠE SKUPINA PROKÁZALA, ŽE CCND1-CDK4 KOMPLEXY UMÍSTĚNÉ V ŘÍZENÍ CYTOPLAZMY TYTO PROCESY PROSTŘEDNICTVÍM AKTIVACE RAL A RAC1 GT PRŮCHODŮ. TOTO ZJIŠTĚNÍ MĚNÍ PARADIGMA, KTERÉ ŘADÍ CCND1 JAKO JEDEN Z ÚČINKŮ TRANSDUKČNÍCH CEST PRO ŘÍZENÍ BUNĚČNÉHO DĚLENÍ A NAZNAČUJE, ŽE JEHO CYTOPLAZMATICKÁ AKTIVITA MŮŽE HRÁT MNOHEM DŮLEŽITĚJŠÍ ROLI JAKO REGULÁTOR BUNĚČNÉ SIGNALIZACE, NEŽ TOMU BYLO DŘÍVE PŘIPISOVÁNO. HLAVNÍM CÍLEM TOHOTO PROJEKTU JE TEDY STUDOVAT VÝZNAM CYTOPLAZMATICKÝCH FUNKCÍ CCND1-CDK4 V REGULACI BUNĚČNÉ SIGNALIZACE BĚHEM VÝVOJE A U RAKOVINY. ZA TÍMTO ÚČELEM NAVRHUJEME TŘI KONKRÉTNÍ CÍLE: 1) CHARAKTERIZACE TRANSDUKČNÍCH DRAH SIGNÁLŮ REGULOVANÝCH CYTOPLAZMICKÝM KOMPLEXEM CCND1-CDK4. POMOCÍ RŮZNÝCH PROTEOMICKÝCH TECHNIK SE SNAŽÍME ZJISTIT A CHARAKTERIZOVAT CÍLE CCND1-CDK4 ZAPOJENÉ DO BUNĚČNÉ SIGNALIZACE. V RÁMCI TOHOTO CÍLE BUDEME TAKÉ STUDOVAT PROHIBITINAS, CDK4 INTERAKTORY ZÍSKANÉ PŘI PŘEDCHOZÍCH SCREENINGECH A KTERÉ BY MOHLY BÝT ZAPOJENY DO UMÍSTĚNÍ A CYTOPLAZMATICKÉ AKTIVITY CCND1-CDK4; 2) STUDIE ÚLOHY CCND1-CDK4 VE VÝVOJI. ZAMĚŘÍME SE NA STUDIUM MOZKOVÉ KŮRY, PROTOŽE PŘEDCHOZÍ VÝSLEDKY NAŠÍ SKUPINY A SPOLUPRACOVNÍKŮ NAZNAČUJÍ, ŽE AKTIVITA CCND1-CDK4 JE DŮLEŽITÁ PRO STRUKTUROVÁNÍ VRSTEV MOZKOVÉ KŮRY. KROMĚ TOHO VÍME, ŽE EXPRESE CCND1 V CYTOPLAZMĚ INDUKUJE NEURITOGENEZI V PRIMÁRNÍCH KULTURÁCH KORTIKÁLNÍCH NEURONŮ, A ZJISTILI JSME, ŽE CCND1 INTERAGUJE S PALS1 A RALOU, KTERÉ JSOU DŮLEŽITÉ PRO PROCESY POLARITY A NEURONÁLNÍ MIGRACE; 3) HODNOCENÍ VÝZNAMU CYTOPLAZMATICKÝCH FUNKCÍ CCND1-CDK4 U LIDSKÝCH NÁDORŮ. NAŠE PŘEDBĚŽNÉ VÝSLEDKY S MODELEM MYŠÍ NAZNAČUJÍ VÝZNAM CYTOPLAZMATICKÉHO CCND1-CDK4 KOMPLEXU PŘI PROGRESI NÁDORU. NYNÍ CHCEME CHARAKTERIZOVAT CYTOPLAZMATICKÉ FUNKCE CCND1-CDK4 V PRIMÁRNÍCH KULTURÁCH A TUMOROSPHERAS IZOLOVANÝCH Z LIDSKÝCH NÁDORŮ. VYTVOŘILI JSME PŘEDBĚŽNÉ VÝSLEDKY V LIDSKÝCH BUŇKÁCH GLIOBLASTOMU, NÁDORU S VYSOKOU INVAZIVNÍ KAPACITOU. ZÁVĚREM, FINANČNÍ PROSTŘEDKY ZÍSKANÉ V PŘEDCHOZÍCH PROJEKTECH NÁM UMOŽNILY PROKÁZAT, ŽE CCND1-CDK4 MÁ RELEVANTNÍ CYTOPLAZMICKOU AKTIVITU BĚHEM VÝVOJE A V PATOLOGICKÝCH PROCESECH, JAKO JE RAKOVINA. TÍM SE OTEVÍRÁ OBLAST VÝZKUMU MÁLO STUDOVANÝCH A V TOMTO NOVÉM PROJEKTU SE CHCEME ZABÝVAT CHARAKTERIZACÍ ZABEZPEČOVACÍCH MECHANISMŮ REGULOVANÝCH KOMPLEXY CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Czech)
4 August 2022
0 references
CIKLĪNU LIKUMS IR CIKLĪNU ATKARĪGO KINĀŽU VAI CDK REGLAMENTĒJOŠĀS APAKŠVIENĪBAS, UN TĀS IR ŠŪNU DALĪŠANĀS POSMU DEFINĪCIJAS GALVENĀS SASTĀVDAĻAS. D-CDK4/6 CIKLĪNA KOMPLEKSI ZĪDĪTĀJIEM IR SPECIALIZĒJUŠIES KONTROLĒT IEVADI ŠŪNU DALĪŠANĀS CIKLĀ, GALVENOKĀRT IZMANTOJOT TRANSKRIPCIJAS REGULĒŠANAS MEHĀNISMUS. ŠĪ CIKLĪNA D-CDK4/6 KODOLFUNKCIJA IR ĪPAŠI SVARĪGA AUDU ATTĪSTĪBAS LAIKĀ, UN ŠĪ KOMPLEKSA IZPAUSMES IZMAIŅAS VEICINA AUDZĒJU VEIDOŠANOS. TĀDĒJĀDI, CIKLĪNA D1 (CCND1) UN CDK4 IR DIVI NO VISVAIRĀK PASTIPRINĀTI ONKOGĒNI DAŽĀDU AUDZĒJU TIPIEM. IR ARĪ ZINĀMS, KA CCND1-CDK4 IR IESAISTĪTS ŠŪNU ADHĒZIJAS UN MIGRĀCIJAS REGULĀ, KAS IR BŪTISKI PROCESI IZSTRĀDES LAIKĀ. MŪSU GRUPA IR PIERĀDĪJUSI, KA CCND1-CDK4 KOMPLEKSI, KAS ATRODAS CITOPLAZMĀ, KONTROLĒ ŠOS PROCESUS, AKTIVIZĒJOT RAL UN RAC1 GT. ŠIS KONSTATĒJUMS MAINA PARADIGMU, KAS NOSAKA CCND1 KĀ VIENU NO TRANSDUKCIJAS CEĻU SEKĀM ŠŪNU DALĪŠANĀS KONTROLEI, UN LIECINA, KA TĀ CITOPLAZMAS AKTIVITĀTEI VAR BŪT DAUDZ SVARĪGĀKA LOMA KĀ ŠŪNU SIGNĀLU REGULATORAM, NEKĀ IEPRIEKŠ TAM PIEŠĶIRTS. TĀDĒJĀDI ŠĀ PROJEKTA GALVENAIS MĒRĶIS IR PĒTĪT CCND1-CDK4 CITOPLAZMAS FUNKCIJU NOZĪMI ŠŪNU SIGNALIZĀCIJAS REGULĒJUMĀ ATTĪSTĪBAS LAIKĀ UN VĒŽA GADĪJUMĀ. ŠAJĀ NOLŪKĀ MĒS IEROSINĀM TRĪS KONKRĒTUS MĒRĶUS: 1) CCND1-CDK4 CITOPLAZMAS KOMPLEKSA REGULĒTO SIGNĀLU PĀRRAIDES CEĻU RAKSTUROJUMU. IZMANTOJOT DAŽĀDAS PROTEOMIKAS METODES, MĒS CENŠAMIES ATKLĀT UN RAKSTUROT CCND1-CDK4 MĒRĶUS, KAS SAISTĪTI AR ŠŪNU SIGNALIZĀCIJU. ŠĪ MĒRĶA IETVAROS MĒS ARĪ PĒTĪSIM PROHIBITINAS, CDK4 INTERAKTIVATORUS, KAS IEGŪTI IEPRIEKŠĒJOS SKRĪNINGOS UN KAS VARĒTU BŪT IESAISTĪTI CCND1-CDK4 ATRAŠANĀS VIETĀ UN CITOPLAZMAS DARBĪBĀ; 2) PĒTĪJUMS PAR CCND1-CDK4 LOMU ATTĪSTĪBĀ. MĒS KONCENTRĒSIMIES UZ SMADZEŅU GAROZAS IZPĒTI, JO MŪSU GRUPAS UN SADARBĪBAS PARTNERU IEPRIEKŠĒJIE REZULTĀTI LIECINA, KA CCND1-CDK4 AKTIVITĀTE IR SVARĪGA SMADZEŅU GAROZAS SLĀŅU STRUKTURĒŠANAI. TURKLĀT MĒS ZINĀM, KA CCND1 IZPAUSME CITOPLAZMĀ IZRAISA NEIRITOĢENĒZI KORTIKĀLO NEIRONU PRIMĀRAJĀS KULTŪRĀS, UN MĒS ESAM KONSTATĒJUŠI, KA CCND1 MIJIEDARBOJAS AR PALS1 UN RALA, KAS ABI IR BŪTISKI POLARITĀTES UN NEIRONU MIGRĀCIJAS PROCESOS; 3) CCND1-CDK4 CITOPLAZMAS FUNKCIJU NOZĪMĪGUMA NOVĒRTĒJUMS CILVĒKA AUDZĒJOS. MŪSU PROVIZORISKIE REZULTĀTI AR PEĻU MODEĻIEM LIECINA PAR CITOPLAZMAS CCND1-CDK4 KOMPLEKSA NOZĪMI AUDZĒJA PROGRESĒŠANĀ. TAGAD MĒS VĒLAMIES RAKSTUROT CCND1-CDK4 CITOPLAZMAS FUNKCIJAS PRIMĀRAJĀS KULTŪRĀS UN TUMOROSPHERAS, KAS IZOLĒTAS NO CILVĒKA AUDZĒJIEM. MĒS ESAM RADĪJUŠI DAŽUS PROVIZORISKUS REZULTĀTUS CILVĒKA GLIOBLASTOMAS ŠŪNĀS, AUDZĒJS AR AUGSTU INVAZĪVO JAUDU. VISBEIDZOT, IEPRIEKŠĒJOS PROJEKTOS IEGŪTAIS FINANSĒJUMS MUMS IR ĻĀVIS KONSTATĒT, KA CCND1-CDK4 IR BŪTISKA CITOPLAZMAS AKTIVITĀTE ATTĪSTĪBAS UN PATOLOĢISKO PROCESU, PIEMĒRAM, VĒŽA, LAIKĀ. TAS PAVER PĒTNIECĪBAS JOMU MAZ PĒTĪTA, UN ŠAJĀ JAUNAJĀ PROJEKTĀ MĒS VĒLAMIES RISINĀT RAKSTUROJUMU SIGNALIZĀCIJAS MEHĀNISMU REGULĒ CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC KOMPLEKSI. (Latvian)
4 August 2022
0 references
ACHT CYCLINES MAR FHO-AONAID RIALÁLA KINASES NÓ CDKS ATÁ SPLEÁCH AR THIMTHRIALLACHA AGUS IS CODANNA TÁBHACHTACHA IAD SA SAINMHÍNIÚ AR CHÉIMEANNA RANNÁN NA GCEALL. NA COIMPLÉISC D-CDK4/6 CYCLINE I MAMAIGH ATÁ SPEISIALAITHE I RIALÚ AN T-IONCHUR ISTEACH SA TIMTHRIALL RANNÁN CILLE GO BUNÚSACH TRÍ SHÁSRAÍ RIALACHÁN TRANSCRIPTIONAL. TÁ AN FHEIDHM NÚICLÉACH SEO DE CYCLINE D-CDK4/6 TÁBHACHTACH GO HÁIRITHE LE LINN FORBAIRT FÍOCHÁIN, AGUS ATHRUITHE AR LÉIRIÚ AN CHASTA SEO A CHUR CHUN CINN LE FOIRMIÚ SIADAÍ. DÁ BHRÍ SIN, TÁ CYCLINE D1 (CCND1) AGUS CDK4 DHÁ CHEANN DE NA ONCOGENES IS AMPLIFIED I GCINEÁLACHA MEALL ÉAGSÚLA. TÁ SÉ AR EOLAS FREISIN GO BHFUIL CCND1-CDK4 RANNPHÁIRTEACH SA RIALACHÁN MAIDIR LE GREAMAITHEACHT CHEALLACH AGUS IMIRCE, PRÓISIS RIACHTANACHA LE LINN NA FORBARTHA. TÁ SÉ LÉIRITHE AG ÁR NGRÚPA GO NDÉANANN COIMPLÉISC CCND1-CDK4 ATÁ LONNAITHE SA CYTOPLASM RIALÚ AR NA PRÓISIS SEO TRÍ GHNÍOMHACHTÚ RAL AGUS RAC1 GT. ATHRAÍONN AN TORADH SEO AN PARAIDÍM A CHUIREANN CCND1 MAR CHEANN DE NA HÉIFEACHTAÍ A BHAINEANN LEIS NA CONAIRÍ TRASDUCHTAITHE CHUN RANNÁN CILLE A RIALÚ AGUS TUGANN SÉ LE FIOS GUR FÉIDIR LENA GHNÍOMHAÍOCHT CYTOPLASMIC RÓL I BHFAD NÍOS TÁBHACHTAÍ A IMIRT MAR RIALTÓIR COMHARTHAÍOCHT CHEALLACHA NÁ MAR A TUGADH DÓ ROIMHE SEO. DÁ BHRÍ SIN, IS É PRÍOMHCHUSPÓIR AN TIONSCADAIL SEO STAIDÉAR A DHÉANAMH AR AN TÁBHACHT A BHAINEANN LE FEIDHMEANNA CÍTEAPLASMAÍ CCND1-CDK4 SA RIALACHÁN MAIDIR LE COMHARTHAÍOCHT CHEALLACHA LE LINN NA FORBARTHA AGUS NA HAILSE. CHUIGE SIN, MOLAIMID TRÍ CHUSPÓIR SHONRACHA: 1) TRÉITHRIÚ NA GCOSÁN TRAS-ASBHAINTE COMHARTHAÍ ARNA RIALÚ AG AN GCOIMPLÉASC CÍTEAPLASMIC CCND1-CDK4. AG BAINT ÚSÁIDE AS TEICNÍCÍ PROTEOMIC ÉAGSÚLA AIDHM AGAINN A FHÁIL AMACH AGUS CHARACTERIZE SPRIOCANNA CCND1-CDK4 A BHFUIL BAINT ACU LE COMHARTHAÍOCHT CHEALLACHA. LAISTIGH DEN CHUSPÓIR SIN, DÉANFAIMID STAIDÉAR FREISIN AR PROHIBITINAS, IDIRGHNÍOMHAITHE CDK4 A FUARTHAS I SCAGTHÁSTÁLACHA ROIMHE SEO AGUS A D’FHÉADFADH A BHEITH PÁIRTEACH I SUÍOMH AGUS I NGNÍOMHAÍOCHT CHÍTEAPLASMAÍ CCND1-CDK4; 2) AN STAIDÉAR AR RÓL CCND1-CDK4 I BHFORBAIRT. BEIMID AG DÍRIÚ AR AN STAIDÉAR AR CORTEX CEIRBREACH ÓS RUD É LÉIRÍONN TORTHAÍ ROIMHE SEO AR ÁR NGRÚPA AGUS COMHOIBRITHE GO BHFUIL GNÍOMHAÍOCHT CCND1-CDK4 TÁBHACHTACH DO STRUCHTÚRÚ NA SRAITHEANNA DEN CORTEX CEIRBREACH. INA THEANNTA SIN, TÁ A FHIOS AGAINN GO SPREAGANN LÉIRIÚ CCND1 SA CHIAPLASM NEURITOGENESIS I GCULTÚIR PHRÍOMHÚLA NÉARÓIN CHOIRTIÚLA, AGUS FUAIREAMAR AMACH GO N-IDIRGHNÍOMHAÍONN CCND1 LE PALS1 AGUS RALA, A BHFUIL AN DÁ CHEANN ACU ÁBHARTHA I BPRÓISIS POLARAÍOCHTA AGUS IMIRCE NÉARÓNACH; 3) AN MHEASTÓIREACHT AR THÁBHACHT FHEIDHMEANNA CYTOPLASMIC CCND1-CDK4 I SIADAÍ DAONNA. TUGANN ÁR DTORTHAÍ TOSAIGH LE SAMHLACHA MURINE AN TÁBHACHT A BHAINEANN LEIS AN CASTA CYTOPLASMIC CCND1-CDK4 I DUL CHUN CINN MEALL. BA MHAITH LINN ANOIS FEIDHMEANNA CYTOPLASMIC CCND1-CDK4 A THRÉITHRIÚ I GCULTÚIR PHRÍOMHÚLA AGUS TUMOROSPHERAS SCOITE AMACH Ó SIADAÍ DAONNA. TÁIMID TAR ÉIS A GHINTEAR ROINNT TORTHAÍ TOSAIGH I GCEALLA GLIOBLASTOMA DAONNA, MEALL LE CUMAS IONRACH ARD. MAR FHOCAL SCOIR, CHUIR AN MAOINIÚ A FUARTHAS SNA TIONSCADAIL ROIMHE SEO AR ÁR GCUMAS A SHUÍOMH GO BHFUIL GNÍOMHAÍOCHT CHÍTEAPLASMIC ÁBHARTHA AG CCND1-CDK4 LE LINN FORBARTHA AGUS I BPRÓISIS PHAITEOLAÍOCHA AMHAIL AILSE. OSCLAÍONN SÉ SEO RÉIMSE TAIGHDE BEAG STAIDÉAR, AGUS SA TIONSCADAL NUA SEO BA MHAITH LINN AGHAIDH A THABHAIRT AR THRÉITHRIÚ MEICNÍOCHTAÍ COMHARTHAÍOCHTA ARNA RIALÚ AG COIMPLÉISC CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Irish)
4 August 2022
0 references
CIKLINI DELUJEJO KOT REGULATIVNE PODENOTE KINAZ, ODVISNIH OD CIKLINA, ALI CDK-JEV IN SO KLJUČNI DELI PRI OPREDELITVI FAZ DELITVE CELIC. CIKLINSKI KOMPLEKSI D-CDK4/6 PRI SESALCIH SO SPECIALIZIRANI ZA NADZOR VHODA V CIKEL DELITVE CELIC V OSNOVI S TRANSKRIPCIJSKIMI MEHANIZMI REGULACIJE. TA JEDRSKA FUNKCIJA CIKLANA D-CDK4/6 JE ŠE POSEBEJ POMEMBNA PRI RAZVOJU TKIVA, SPREMEMBE V IZRAŽANJU TEGA KOMPLEKSA PA SPODBUJAJO NASTANEK TUMORJEV. TAKO STA CIKLIN D1 (CCND1) IN CDK4 DVA IZMED NAJBOLJ OJAČANIH ONKOGENOV PRI RAZLIČNIH VRSTAH TUMORJEV. ZNANO JE TUDI, DA CCND1-CDK4 SODELUJE PRI REGULACIJI CELIČNE ADHEZIJE IN MIGRACIJE, BISTVENIH PROCESOV MED RAZVOJEM. NAŠA SKUPINA JE POKAZALA, DA KOMPLEKSI CCND1-CDK4, KI SE NAHAJAJO V CITOPLAZMI, NADZORUJEJO TE PROCESE Z AKTIVACIJO RAL IN RAC1 GT. TA UGOTOVITEV SPREMINJA PARADIGMO, KI POSTAVLJA CCND1 KOT ENEGA OD UČINKOV TRANSDUKCIJSKIH POTI ZA NADZOR CELIČNE DELITVE IN KAŽE, DA IMA LAHKO NJEGOVA CITOPLAZMIČNA AKTIVNOST VELIKO POMEMBNEJŠO VLOGO KOT REGULATOR CELIČNEGA SIGNALA, KOT JE BIL PREJ PRIPISAN. ZATO JE GLAVNI NAMEN TEGA PROJEKTA PREUČITI POMEN CITOPLAZMIČNIH FUNKCIJ CCND1-CDK4 V REGULACIJI CELIČNIH SIGNALOV MED RAZVOJEM IN PRI RAKU. V TA NAMEN PREDLAGAMO TRI POSEBNE CILJE: 1) KARAKTERIZACIJA TRANSDUKCIJSKIH POTI SIGNALOV, KI JIH URAVNAVA CITOPLAZMIČNI KOMPLEKS CCND1-CDK4. Z RAZLIČNIMI PROTEOMSKIMI TEHNIKAMI ŽELIMO ODKRITI IN OPREDELITI TARČE CCND1-CDK4, KI SO VKLJUČENI V CELIČNO SIGNALIZACIJO. V OKVIRU TEGA CILJA BOMO PREUČILI TUDI PROHIBITINAS, CDK4 INTERAKCIJE, PRIDOBLJENE V PREJŠNJIH PRESEJALNIH PREGLEDIH IN KI BI LAHKO BILI VKLJUČENI V LOKACIJO IN CITOPLAZMIČNO AKTIVNOST CCND1-CDK4; 2) ŠTUDIJA VLOGE CCND1-CDK4 V RAZVOJU. OSREDOTOČILI SE BOMO NA PREUČEVANJE MOŽGANSKE SKORJE, SAJ PREJŠNJI REZULTATI NAŠE SKUPINE IN SODELAVCI KAŽEJO, DA JE AKTIVNOST CCND1-CDK4 POMEMBNA ZA STRUKTURIRANJE PLASTI MOŽGANSKE SKORJE. POLEG TEGA VEMO, DA IZRAŽANJE CCND1 V CITOPLAZMI INDUCIRA NEVRITOGENEZO V PRIMARNIH KULTURAH KORTIKALNIH NEVRONOV, IN UGOTOVILI SMO, DA CCND1 SODELUJE S PALS1 IN RALO, KI STA POMEMBNA V PROCESIH POLARNOSTI IN NEVRONSKE MIGRACIJE; 3) OCENA POMEMBNOSTI CITOPLAZMIČNIH FUNKCIJ CCND1-CDK4 PRI ČLOVEŠKIH TUMORJIH. NAŠI PREDHODNI REZULTATI Z MIŠJIMI MODELI KAŽEJO NA POMEN CITOPLAZMIČNEGA KOMPLEKSA CCND1-CDK4 PRI NAPREDOVANJU TUMORJA. ZDAJ ŽELIMO OPREDELITI CITOPLAZMIČNE FUNKCIJE CCND1-CDK4 V PRIMARNIH KULTURAH IN TUMOROSPHERAS, IZOLIRANE IZ ČLOVEŠKIH TUMORJEV. USTVARILI SMO NEKAJ PREDHODNIH REZULTATOV V ČLOVEŠKIH GLIOBLASTOM CELIC, TUMOR Z VISOKO INVAZIVNO SPOSOBNOSTJO. FINANCIRANJE, PRIDOBLJENO V PREJŠNJIH PROJEKTIH, NAM JE OMOGOČILO, DA UGOTOVIMO, DA IMA CCND1-CDK4 POMEMBNO CITOPLAZMIČNO AKTIVNOST MED RAZVOJEM IN V PATOLOŠKIH PROCESIH, KOT JE RAK. TO ODPIRA MALO RAZISKANO PODROČJE RAZISKAV IN V TEM NOVEM PROJEKTU ŽELIMO OBRAVNAVATI KARAKTERIZACIJO SIGNALNIH MEHANIZMOV, KI JIH UREJAJO KOMPLEKSI CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Slovenian)
4 August 2022
0 references
ЦИКЛИНИТЕ ЗАКОНИ КАТО РЕГУЛАТОРНИ СУБЕДИНИЦИ НА ЦИКЛЕНОЗАВИСИМИ КИНАЗИ ИЛИ CDK И СА КЛЮЧОВИ ЧАСТИ В ОПРЕДЕЛЯНЕТО НА ЕТАПИТЕ НА КЛЕТЪЧНО ДЕЛЕНЕ. ЦИКЛИЧНИТЕ КОМПЛЕКСИ D-CDK4/6 ПРИ БОЗАЙНИЦИТЕ СА СПЕЦИАЛИЗИРАНИ В КОНТРОЛИРАНЕТО НА ВХОДА В ЦИКЪЛА НА КЛЕТЪЧНО ДЕЛЕНЕ ОСНОВНО ЧРЕЗ МЕХАНИЗМИ ЗА ТРАНСКРИПЦИОННО РЕГУЛИРАНЕ. ТАЗИ ЯДРЕНА ФУНКЦИЯ НА ЦИКЛИН D-CDK4/6 Е ОСОБЕНО ВАЖНА ПО ВРЕМЕ НА РАЗВИТИЕТО НА ТЪКАНИТЕ, А ПРОМЕНИТЕ В ИЗРАЗА НА ТОЗИ КОМПЛЕКС НАСЪРЧАВАТ ОБРАЗУВАНЕТО НА ТУМОРИ. ПО ТОЗИ НАЧИН ЦИКЛИН D1 (CCND1) И CDK4 СА ДВЕ ОТ НАЙ-УСИЛВАНИТЕ ОНКОГЕНИ В РАЗЛИЧНИ ВИДОВЕ ТУМОРИ. ИЗВЕСТНО Е СЪЩО, ЧЕ CCND1-CDK4 УЧАСТВА В РЕГУЛИРАНЕТО НА КЛЕТЪЧНОТО СЦЕПЛЕНИЕ И МИГРАЦИЯТА — ОСНОВНИ ПРОЦЕСИ ПО ВРЕМЕ НА РАЗРАБОТВАНЕТО. НАШАТА ГРУПА ПОКАЗА, ЧЕ CCND1-CDK4 КОМПЛЕКСИТЕ, РАЗПОЛОЖЕНИ В ЦИТОПЛАЗМАТА, КОНТРОЛИРАТ ТЕЗИ ПРОЦЕСИ ЧРЕЗ АКТИВИРАНЕ НА RAL И RAC1 GT. ТАЗИ КОНСТАТАЦИЯ ПРОМЕНЯ ПАРАДИГМАТА, КОЯТО ПОСТАВЯ CCND1 КАТО ЕДИН ОТ ЕФЕКТИТЕ НА ТРАНСДУКЦИОННИТЕ ПЪТИЩА ЗА КОНТРОЛ НА КЛЕТЪЧНОТО ДЕЛЕНЕ И ПРЕДПОЛАГА, ЧЕ НЕГОВАТА ЦИТОПЛАЗМЕНА АКТИВНОСТ МОЖЕ ДА ИГРАЕ МНОГО ПО-ВАЖНА РОЛЯ КАТО РЕГУЛАТОР НА КЛЕТЪЧНОТО СИГНАЛИЗИРАНЕ, ОТКОЛКОТО ПРИПИСВАНАТА ПРЕДИ ТОВА. ПО ТОЗИ НАЧИН ОСНОВНАТА ЦЕЛ НА ТОЗИ ПРОЕКТ Е ДА СЕ ПРОУЧИ ЗНАЧЕНИЕТО НА ЦИТОПЛАЗМЕНИТЕ ФУНКЦИИ НА CCND1-CDK4 В РЕГЛАМЕНТА ЗА КЛЕТЪЧНАТА СИГНАЛИЗАЦИЯ ПО ВРЕМЕ НА РАЗВИТИЕ И ПРИ РАК. ЗА ТАЗИ ЦЕЛ ПРЕДЛАГАМЕ ТРИ КОНКРЕТНИ ЦЕЛИ: 1) ХАРАКТЕРИЗИРАНЕТО НА ТРАНСДУКЦИОННИТЕ ПЪТИЩА НА СИГНАЛИТЕ, РЕГУЛИРАНИ ОТ ЦИТОПЛАЗМЕНИЯ КОМПЛЕКС CCND1-CDK4. ИЗПОЛЗВАЙКИ РАЗЛИЧНИ ПРОТЕОМНИ ТЕХНИКИ, НИЕ СЕ СТРЕМИМ ДА ОТКРИЕМ И ХАРАКТЕРИЗИРАМЕ CCND1-CDK4 ЦЕЛИ, УЧАСТВАЩИ В КЛЕТЪЧНОТО СИГНАЛИЗИРАНЕ. В РАМКИТЕ НА ТАЗИ ЦЕЛ ЩЕ ПРОУЧИМ И PROHIBITINAS, CDK4 ВЗАИМОВРЪЗКИ, ПОЛУЧЕНИ ПРИ ПРЕДИШНИ ПРОЖЕКЦИИ И КОИТО БИХА МОГЛИ ДА БЪДАТ ВКЛЮЧЕНИ В МЕСТОПОЛОЖЕНИЕТО И ЦИТОПЛАЗМЕНАТА АКТИВНОСТ НА CCND1-CDK4; 2) ИЗСЛЕДВАНЕТО НА РОЛЯТА НА CCND1-CDK4 В РАЗВИТИЕТО. ЩЕ СЕ СЪСРЕДОТОЧИМ ВЪРХУ ИЗСЛЕДВАНЕТО НА МОЗЪЧНАТА КОРА, ТЪЙ КАТО ПРЕДИШНИТЕ РЕЗУЛТАТИ НА НАШАТА ГРУПА И СЪТРУДНИЦИ ПОКАЗВАТ, ЧЕ ДЕЙНОСТТА НА CCND1-CDK4 Е ВАЖНА ЗА СТРУКТУРИРАНЕТО НА СЛОЕВЕТЕ НА МОЗЪЧНАТА КОРА. ОСВЕН ТОВА ЗНАЕМ, ЧЕ ЕКСПРЕСИЯТА НА CCND1 В ЦИТОПЛАЗМАТА ИНДУЦИРА НЕВРИТОГЕНЕЗА В ПЪРВИЧНИ КУЛТУРИ НА КОРТИКАЛНИТЕ НЕВРОНИ И УСТАНОВИХМЕ, ЧЕ CCND1 ВЗАИМОДЕЙСТВА С PALS1 И RALA, КОИТО СА ОТ ЗНАЧЕНИЕ ЗА ПРОЦЕСИТЕ НА ПОЛЯРНОСТ И НЕВРОНАЛНА МИГРАЦИЯ; 3) ОЦЕНКАТА НА ЗНАЧЕНИЕТО НА ЦИТОПЛАЗМЕНИТЕ ФУНКЦИИ НА CCND1-CDK4 ПРИ ЧОВЕШКИ ТУМОРИ. НАШИТЕ ПРЕДВАРИТЕЛНИ РЕЗУЛТАТИ С МИШИ МОДЕЛИ ПОКАЗВАТ ЗНАЧЕНИЕТО НА ЦИТОПЛАЗМЕНИЯ CCND1-CDK4 КОМПЛЕКС В ТУМОРНАТА ПРОГРЕСИЯ. СЕГА ИСКАМЕ ДА ХАРАКТЕРИЗИРАМЕ ЦИТОПЛАЗМЕНИТЕ ФУНКЦИИ НА CCND1-CDK4 В ПЪРВИЧНИ КУЛТУРИ И TUMOROSPHERAS ИЗОЛИРАНИ ОТ ЧОВЕШКИ ТУМОРИ. ИМАМЕ НЯКОИ ПРЕДВАРИТЕЛНИ РЕЗУЛТАТИ ЗА ЧОВЕШКИ ГЛИОБЛАСТОМНИ КЛЕТКИ, ТУМОР С ВИСОК ИНВАЗИВЕН КАПАЦИТЕТ. В ЗАКЛЮЧЕНИЕ, ФИНАНСИРАНЕТО, ПОЛУЧЕНО ПО ПРЕДИШНИТЕ ПРОЕКТИ, НИ ПОЗВОЛИ ДА УСТАНОВИМ, ЧЕ CCND1-CDK4 ИМА СЪОТВЕТНА ЦИТОПЛАЗМЕНА ДЕЙНОСТ ПО ВРЕМЕ НА РАЗРАБОТВАНЕТО И В ПАТОЛОГИЧНИ ПРОЦЕСИ КАТО РАК. ТОВА ОТВАРЯ МАЛКО ИЗСЛЕДВАНА ОБЛАСТ НА НАУЧНИ ИЗСЛЕДВАНИЯ И В ТОЗИ НОВ ПРОЕКТ ИСКАМЕ ДА РАЗГЛЕДАМЕ ХАРАКТЕРИЗИРАНЕТО НА СИГНАЛНИТЕ МЕХАНИЗМИ, РЕГУЛИРАНИ ОТ КОМПЛЕКСИТЕ CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Bulgarian)
4 August 2022
0 references
IĊ-ĊIKLINI JAĠIXXU BĦALA SUBUNITAJIET REGOLATORJI TA’ KINASES JEW CDKS DIPENDENTI FUQ IĊ-ĊIKLIN U HUMA PARTIJIET EWLENIN FID-DEFINIZZJONI TAL-ISTADJI TAD-DIVIŻJONI TAĊ-ĊELLOLI. IL-KUMPLESSI TAĊ-ĊIKLIN D-CDK4/6 FIL-MAMMIFERI HUMA SPEĊJALIZZATI FIL-KONTROLL TAL-INPUT FIĊ-ĊIKLU TAD-DIVIŻJONI TAĊ-ĊELLOLI BAŻIKAMENT PERMEZZ TA’ MEKKANIŻMI TA’ REGOLAMENT TRASKRIZZJONI. DIN IL-FUNZJONI NUKLEARI TAĊ-ĊIKLIN D-CDK4/6 HIJA PARTIKOLARMENT IMPORTANTI MATUL L-IŻVILUPP TAT-TESSUTI, U L-ALTERAZZJONIJIET FL-ESPRESSJONI TA’ DAN IL-KUMPLESS JIPPROMWOVU L-FORMAZZJONI TAT-TUMURI. GĦALHEKK, IĊ-ĊIKLIN D1 (CCND1) U CDK4 HUMA TNEJN MILL-ONKOĠENI L-AKTAR AMPLIFIKATI F’TIPI DIFFERENTI TA’ TUMURI. HUWA MAGĦRUF UKOLL LI CCND1-CDK4 HUWA INVOLUT FIR-REGOLAMENTAZZJONI TAL-ADEŻJONI ĊELLULARI U L-MIGRAZZJONI, PROĊESSI ESSENZJALI WAQT L-IŻVILUPP. IL-GRUPP TAGĦNA WERA LI L-KUMPLESSI CCND1-CDK4 LI JINSABU FIL-KONTROLL TAĊ-ĊITOPLAŻMA DAWN IL-PROĊESSI PERMEZZ TAL-ATTIVAZZJONI TAL-MOGĦDIJIET RAL U RAC1 GT. DIN IS-SEJBA TBIDDEL IL-PARADIGMA LI TQIEGĦED IS-CCND1 BĦALA WIEĦED MILL-EFFETTI TAL-MOGĦDIJIET TAT-TRANSDUZZJONI GĦALL-KONTROLL TAD-DIVIŻJONI TAĊ-ĊELLOLI U TISSUĠĠERIXXI LI L-ATTIVITÀ ĊITOPLASMIKA TAGĦHA JISTA’ JKOLLHA RWOL ĦAFNA AKTAR IMPORTANTI BĦALA REGOLATUR TAS-SINJALAR ĊELLULARI MILLI KIEN ATTRIBWIT LILHA QABEL. GĦALHEKK, L-GĦAN EWLIENI TA’ DAN IL-PROĠETT HUWA LI TIĠI STUDJATA L-IMPORTANZA TAL-FUNZJONIJIET ĊITOPLASMIĊI TAS-CCND1-CDK4 FIR-REGOLAMENTAZZJONI TAS-SINJALAR ĊELLULARI WAQT L-IŻVILUPP U FIL-KANĊER. GĦAL DAN IL-GĦAN, QED NIPPROPONU TLIET OBJETTIVI SPEĊIFIĊI: 1) IL-KARATTERIZZAZZJONI TAL-MOGĦDIJIET TAT-TRANSDUZZJONI TAS-SINJALI RREGOLATI MILL-KUMPLESS ĊITOPLASMIKU CCND1-CDK4. BL-UŻU TA ‘TEKNIKI PROTEOMIĊI DIFFERENTI AĦNA NIMMIRAW LI JISKOPRU U JIKKARATTERIZZAW MIRI CCND1-CDK4 INVOLUTI FIS-SINJALAR ĊELLULARI. F’DAN L-OBJETTIV, SER NISTUDJAW UKOLL IL-PROHIBITINAS, L-INTERKONNETTURI CDK4 MIKSUBA FI SKRININGS PREĊEDENTI U LI JISTGĦU JKUNU INVOLUTI FIL-POST U L-ATTIVITÀ ĊITOPLASMIKA TAS-CCND1-CDK4; 2) L-ISTUDJU TAR-RWOL TAS-CCND1-CDK4 FL-IŻVILUPP. AĦNA SE TIFFOKA FUQ L-ISTUDJU TA ‘KORTIĊI ĊEREBRALI PERESS RIŻULTATI PREĊEDENTI TAL-GRUPP TAGĦNA U KOLLABORATURI JINDIKAW LI L-ATTIVITÀ CCND1-CDK4 HUWA IMPORTANTI GĦALL-ISTRUTTURAR TAS-SAFFI TAL-KORTIĊI ĊEREBRALI. BARRA MINN HEKK, NAFU LI L-ESPRESSJONI TAS-CCND1 FIĊ-ĊITOPLAŻMA TINDUĊI NEVROĠENESI F’KULTURI PRIMARJI TA’ NEWRONI KORTIĊI, U SIBNA LI S-CCND1 JINTERAĠIXXI MA’ PALS1 U RALA, LI T-TNEJN HUMA RILEVANTI FIL-PROĊESSI TAL-POLARITÀ U L-MIGRAZZJONI NEWRONALI; 3) L-EVALWAZZJONI TA’ L-IMPORTANZA TAL-FUNZJONIJIET ĊITOPLASMIĊI TA’ CCND1-CDK4 FIT-TUMURI UMANI. IR-RIŻULTATI PRELIMINARI TAGĦNA B’MUDELLI TAL-ĠRIEDEN JISSUĠĠERIXXU L-IMPORTANZA TAL-KUMPLESS ĊITOPLASMIKU CCND1-CDK4 FIL-PROGRESSJONI TAT-TUMUR. ISSA RRIDU NIKKARATTERIZZAW IL-FUNZJONIJIET ĊITOPLASMIĊI TA ‘CCND1-CDK4 F’KULTURI PRIMARJI U TUMOROSPHERAS IŻOLATI MINN TUMURI UMANI. IĠĠENERAJNA XI RIŻULTATI PRELIMINARI FIĊ-ĊELLOLI TAL-GLIJOBLASTOMA TAL-BNIEDEM, TUMUR B’KAPAĊITÀ INVAŻIVA GĦOLJA. BĦALA KONKLUŻJONI, IL-FINANZJAMENT MIKSUB FIL-PROĠETTI PREĊEDENTI PPERMETTIELNA NISTABBILIXXU LI CCND1-CDK4 GĦANDU ATTIVITÀ ĊITOPLASMIKA RILEVANTI MATUL L-IŻVILUPP U FI PROĊESSI PATOLOĠIĊI BĦALL-KANĊER. DAN JIFTAĦ QASAM TA ‘RIĊERKA FTIT STUDJATI, U F’DAN IL-PROĠETT ĠDID IRRIDU NINDIRIZZAW IL-KARATTERIZZAZZJONI TA’ MEKKANIŻMI TA ‘SINJALAR REGOLATI MILL-KUMPLESSI CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Maltese)
4 August 2022
0 references
Os ciclínicos actuam como subunidades reguláveis dos tipos ou CDK dependentes da ciclina e são partes essenciais na definição das fases de divisão celular. A CICLINA D-CDK4/6 COMPLEXOS EM MAMÍLIAS ESTÁ ESPECIALIZADA NO CONTROLO DA INTRODUÇÃO NO CICLO DE DIVISÃO CELULAR BASICAMENTE ATRAVÉS DE MECANISMOS DE REGULAMENTAÇÃO TRANSCRIPCIONAL. ESTA FUNÇÃO NUCLEAR DA CICLINA D-CDK4/6 É ESPECIALMENTE IMPORTANTE DURANTE O DESENVOLVIMENTO DOS TECIDOS, E AS ALTERAÇÕES NA EXPRESSÃO DO PRESENTE COMPLEXO PROMOVEREM A FORMAÇÃO DOS TUMORES. Assim, a ciclina D1 (CCND1) e a CDK4 são dois dos oncogénos mais amplificados em diferentes tipos de tubagem. É igualmente sabido que o CCND1-CDK4 está envolvido no Regulamento da ADESÃO E MIGRAÇÃO CELULAR, PROCESSOS ESSENCIAIS DURANTE O DESENVOLVIMENTO. O nosso grupo mostrou que o CCND1-CDK4 COMPLEXOS ESTABELECIDOS NO CONTROLO DO CITOPLASMO ESTES PROCESSOS ATRAVÉS DA ATIVAÇÃO DE RAL E RAC1 GT PASSES. Esta constatação altera o paradigma que coloca o CCND1 como um dos efeitos dos percursos de transmissão para o controlo da divisão celular e sugere que a sua actividade citoplásmica possa desempenhar um papel muito mais importante como regulador da sinalização celular do que anteriormente atribuído a ela. Assim, o principal objectivo deste projecto consiste em estudar a importância das funções citoplásmicas do CCND1-CDK4 no regulamento da sinalização celular durante o desenvolvimento e em caso de cancro. Para este fim, propomos três objetivos específicos: 1) A CARACTERIZAÇÃO DOS VIAS DE TRANSDUÇÃO DOS SINAIS REGULAMENTADOS PELO COMPLEXO CITOPLASMICO CCND1-CDK4. A UTILIZAÇÃO DE DIFERENTES TÉCNICAS PROTEÓMICAS DESTINADAS A DETETAR E CARACTERIZAR OS OBJETIVOS CCND1-CDK4 ENVOLVIDOS NA SINALIZAÇÃO CELULAR. NO ÂMBITO DO PRESENTE OBJETIVO, estudaremos igualmente as PROIBITINAS, INTERACTORES CDK4 OBTIDOS EM VERIFICAÇÕES ANTERIORES E QUE PODEM SER ENVOLVIDOS NA ATIVIDADE DE LOCALIZAÇÃO E CITOPLASMIA DO CCND1-CDK4; 2) O ESTUDO DO PAPEL DO CCND1-CDK4 NO DESENVOLVIMENTO. Concentrar-nos-emos no estudo do CORTEX CEREBRAL desde os resultados anteriores do nosso grupo e colaboradores, indicando que a atividade do CCND1-CDK4 é importante para a estruturação das camadas do CORTEX CEREBRAL. Além disso, sabemos que a expressão do CCND1 no citoplasma induz a neurogenese nas culturas primárias de neuros corticais, e descobrimos que o CCND1 interage com PALS1 e RALA, ambos relevantes nos processos de polaridade e de migração neuronal; 3) AVALIAÇÃO DA IMPORTÂNCIA DAS FUNÇÕES CITOPLASMICAS DO CCND1-CDK4 EM TUMORES HUMANOS. OS NOSSOS RESULTADOS PRELIMINARES COM MODELOS MURINOS SUGEM A IMPORTÂNCIA DO COMPLEXO CITOPLASMICO CCND1-CDK4 NA PROGRESSÃO DO TUMOR. Agora queremos caracterizar as funções citoplásmicas do CCND1-CDK4 nas culturas primárias e nas tumorospérmicas isoladas dos tumeros humanos. Gerámos alguns resultados preliminares em células humanas de GLIOBLASTOMA, um som com grande capacidade invasiva. Em conclusão, o financiamento obtido nos projectos anteriores permitiu-nos estabelecer que o CCND1-CDK4 tem uma actividade citoplásmica relevante durante o desenvolvimento e em processos farmacológicos como o cancro. Neste novo projeto, queremos abordar a caraterização dos mecanismos de sinalização regulados pelos módulos CITOPLASMÁTICOS CCND1-CDK4. (Portuguese)
4 August 2022
0 references
CYKLIN FUNGERER SOM FORSKRIFTSMÆSSIGE UNDERENHEDER AF CYKLINAFHÆNGIGE KINASER ELLER CDK'ER OG ER CENTRALE DELE I DEFINITIONEN AF CELLEDELINGSFASER. D-CDK4/6-CYKLINKOMPLEKSERNE I PATTEDYR ER SPECIALISERET I AT KONTROLLERE INPUT TIL CELLEDELINGSCYKLUSSEN GENNEM TRANSKRIPTIONSREGULERINGSMEKANISMER. DENNE NUKLEARE FUNKTION AF CYKLIN D-CDK4/6 ER ISÆR VIGTIG UNDER VÆVSUDVIKLING, OG ÆNDRINGER I UDTRYKKET AF DETTE KOMPLEKS FREMMER DANNELSEN AF TUMORER. SÅLEDES ER CYCLIN D1 (CCND1) OG CDK4 TO AF DE MEST FORSTÆRKEDE ONKOGENER I FORSKELLIGE TUMORTYPER. DET ER OGSÅ KENDT, AT CCND1-CDK4 ER INVOLVERET I REGULERINGEN AF CELLULÆR VEDHÆFTNING OG MIGRATION, VÆSENTLIGE PROCESSER UNDER UDVIKLINGEN. VORES GRUPPE HAR VIST, AT CCND1-CDK4 KOMPLEKSER PLACERET I CYTOPLASM KONTROL DISSE PROCESSER GENNEM AKTIVERING AF RAL OG RAC1 GT PASSERER. DENNE KONSTATERING ÆNDRER DET PARADIGME, DER PLACERER CCND1 SOM EN AF VIRKNINGERNE AF TRANSDUKTIONSVEJE TIL KONTROL AF CELLEDELING OG TYDER PÅ, AT DETS CYTOPLASMISKE AKTIVITET KAN SPILLE EN LANGT VIGTIGERE ROLLE SOM REGULATOR FOR CELLULÆR SIGNALERING END TIDLIGERE TILSKREVET DET. HOVEDFORMÅLET MED DETTE PROJEKT ER SÅLEDES AT UNDERSØGE BETYDNINGEN AF CCND1-CDK4'S CYTOPLASMISKE FUNKTIONER I REGULERINGEN AF CELLULÆRE SIGNALER UNDER UDVIKLING OG KRÆFT. MED HENBLIK HERPÅ FORESLÅR VI TRE SPECIFIKKE MÅL: 1) KARAKTERISERING AF TRANSDUKTIONSVEJE AF SIGNALER REGULERET AF CCND1-CDK4 CYTOPLASMISK KOMPLEKS. VED HJÆLP AF FORSKELLIGE PROTEOMISKE TEKNIKKER, VI SIGTER MOD AT OPDAGE OG KARAKTERISERE CCND1-CDK4 MÅL INVOLVERET I CELLULÆRE SIGNALERING. INDEN FOR DETTE MÅL VIL VI OGSÅ UNDERSØGE PROHIBITINAS, CDK4-INTERACTORER, DER ER OPNÅET VED TIDLIGERE SCREENINGER, OG SOM KAN VÆRE INVOLVERET I CCND1-CDK4'S PLACERING OG CYTOPLASMISKE AKTIVITET; 2) UNDERSØGELSEN AF CCND1-CDK4'S ROLLE I UDVIKLINGEN. VI VIL FOKUSERE PÅ UNDERSØGELSEN AF CEREBRAL CORTEX, DA TIDLIGERE RESULTATER FRA VORES GRUPPE OG SAMARBEJDSPARTNERE VISER, AT CCND1-CDK4 AKTIVITET ER VIGTIG FOR STRUKTURERING AF LAGENE I HJERNEBARKEN. DESUDEN VED VI, AT CCND1'S EKSPRESSION I CYTOPLASMEN INDUCERER NEURITOGENESE I PRIMÆRE KULTURER AF KORTIKALE NEURONER, OG VI HAR KONSTATERET, AT CCND1 INTERAGERER MED PALS1 OG RALA, SOM BEGGE ER RELEVANTE I POLARITETSPROCESSERNE OG NEURONAL MIGRATION. 3) EVALUERING AF BETYDNINGEN AF DE CYTOPLASMISKE FUNKTIONER CCND1-CDK4 I MENNESKELIGE TUMORER. VORES FORELØBIGE RESULTATER MED MURINMODELLER TYDER PÅ BETYDNINGEN AF DET CYTOPLASMISKE CCND1-CDK4-KOMPLEKS I TUMORPROGRESSION. VI ØNSKER NU AT KARAKTERISERE CCND1-CDK4'S CYTOPLASMISKE FUNKTIONER I PRIMÆRE KULTURER OG TUMOROSPHERAS ISOLERET FRA MENNESKELIGE TUMORER. VI HAR GENERERET NOGLE FORELØBIGE RESULTATER I HUMANE GLIOBLASTOMA CELLER, EN TUMOR MED HØJ INVASIV KAPACITET. AFSLUTNINGSVIS HAR DEN FINANSIERING, DER ER OPNÅET I DE TIDLIGERE PROJEKTER, GJORT DET MULIGT AT FASTSLÅ, AT CCND1-CDK4 HAR RELEVANT CYTOPLASMISK AKTIVITET UNDER UDVIKLING OG I PATOLOGISKE PROCESSER SOM KRÆFT. DETTE ÅBNER OP FOR ET FORSKNINGSOMRÅDE, DER IKKE ER UNDERSØGT, OG I DETTE NYE PROJEKT ØNSKER VI AT BEHANDLE KARAKTERISERINGEN AF SIGNALMEKANISMER REGULERET AF CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC KOMPLEKSER. (Danish)
4 August 2022
0 references
CICLINELE ACT CA SUBUNITĂȚI DE REGLEMENTARE ALE KINAZELOR DEPENDENTE DE CICLIN SAU CDK ȘI SUNT PĂRȚI-CHEIE ÎN DEFINIREA ETAPELOR DIVIZIUNII CELULARE. COMPLEXELE DE CICLINĂ D-CDK4/6 LA MAMIFERE SUNT SPECIALIZATE ÎN CONTROLUL INTRĂRILOR ÎN CICLUL DE DIVIZIUNE CELULARĂ, PRACTIC PRIN MECANISME TRANSCRIPȚIONALE DE REGLEMENTARE. ACEASTĂ FUNCȚIE NUCLEARĂ A CICLINEI D-CDK4/6 ESTE DEOSEBIT DE IMPORTANTĂ ÎN TIMPUL DEZVOLTĂRII ȚESUTURILOR, IAR MODIFICĂRILE ÎN EXPRIMAREA ACESTUI COMPLEX PROMOVEAZĂ FORMAREA TUMORILOR. ASTFEL, CICLINA D1 (CCND1) ȘI CDK4 SUNT DOUĂ DINTRE CELE MAI AMPLIFICATE ONCOGENE ÎN DIFERITE TIPURI DE TUMORI. DE ASEMENEA, ESTE CUNOSCUT FAPTUL CĂ CCND1-CDK4 ESTE IMPLICAT ÎN REGLEMENTAREA ADERENȚEI CELULARE ȘI A MIGRAȚIEI, PROCESE ESENȚIALE ÎN TIMPUL DEZVOLTĂRII. GRUPUL NOSTRU A DEMONSTRAT CĂ COMPLEXE CCND1-CDK4 SITUATE ÎN CONTROLUL CITOPLASMEI ACESTE PROCESE PRIN ACTIVAREA TRECERILOR RAL ȘI RAC1 GT. ACEASTĂ CONSTATARE SCHIMBĂ PARADIGMA CARE PLASEAZĂ CCND1 CA UNUL DINTRE EFECTELE CĂILOR DE TRANSDUCȚIE PENTRU CONTROLUL DIVIZIUNII CELULARE ȘI SUGEREAZĂ CĂ ACTIVITATEA SA CITOPLASMICĂ POATE JUCA UN ROL MULT MAI IMPORTANT CA REGULATOR AL SEMNALIZĂRII CELULARE DECÂT I-A FOST ATRIBUIT ANTERIOR. ASTFEL, SCOPUL PRINCIPAL AL ACESTUI PROIECT ESTE STUDIEREA IMPORTANȚEI FUNCȚIILOR CITOPLASMICE ALE CCND1-CDK4 ÎN REGULAMENTUL SEMNALIZĂRII CELULARE ÎN TIMPUL DEZVOLTĂRII ȘI ÎN CANCER. ÎN ACEST SCOP, PROPUNEM TREI OBIECTIVE SPECIFICE: 1) CARACTERIZAREA CĂILOR DE TRANSDUCȚIE A SEMNALELOR REGLEMENTATE DE COMPLEXUL CITOPLASMIC CCND1-CDK4. FOLOSIND DIFERITE TEHNICI PROTEOMICE NE PROPUNEM SĂ DESCOPERIM ȘI SĂ CARACTERIZĂM ȚINTELE CCND1-CDK4 IMPLICATE ÎN SEMNALIZAREA CELULARĂ. ÎN CADRUL ACESTUI OBIECTIV, VOM STUDIA, DE ASEMENEA, INTERACȚIUNILE PROHIBITINAS, CDK4 OBȚINUTE ÎN SCREENING-URI ANTERIOARE ȘI CARE AR PUTEA FI IMPLICATE ÎN LOCALIZAREA ȘI ACTIVITATEA CITOPLASMICĂ A CCND1-CDK4; 2) STUDIUL ROLULUI CCND1-CDK4 ÎN DEZVOLTARE. NE VOM CONCENTRA PE STUDIUL CORTEXULUI CEREBRAL, DEOARECE REZULTATELE ANTERIOARE ALE GRUPULUI NOSTRU ȘI COLABORATORII INDICĂ FAPTUL CĂ ACTIVITATEA CCND1-CDK4 ESTE IMPORTANTĂ PENTRU STRUCTURAREA STRATURILOR CORTEXULUI CEREBRAL. ÎN PLUS, ȘTIM CĂ EXPRESIA CCND1 ÎN CITOPLASMĂ INDUCE NEURITOGENEZĂ ÎN CULTURILE PRIMARE DE NEURONI CORTICALI ȘI AM CONSTATAT CĂ CCND1 INTERACȚIONEAZĂ CU PALS1 ȘI RALA, AMBELE FIIND RELEVANTE ÎN PROCESELE POLARITĂȚII ȘI MIGRAȚIEI NEURONALE; 3) EVALUAREA IMPORTANȚEI FUNCȚIILOR CITOPLASMICE ALE CCND1-CDK4 ÎN TUMORILE UMANE. REZULTATELE NOASTRE PRELIMINARE CU MODELE MURINE SUGEREAZĂ IMPORTANȚA COMPLEXULUI CITOPLASMIC CCND1-CDK4 ÎN PROGRESIA TUMORII. ACUM DORIM SĂ CARACTERIZĂM FUNCȚIILE CITOPLASMICE ALE CCND1-CDK4 ÎN CULTURILE PRIMARE ȘI TUMOROSPHERAS IZOLATE DE TUMORILE UMANE. AM GENERAT UNELE REZULTATE PRELIMINARE ÎN CELULELE GLIOBLASTOM UMAN, O TUMOARE CU CAPACITATE INVAZIVA MARE. IN CONCLUZIE, FINANTAREA OBTINUTA IN PROIECTELE ANTERIOARE NE-A PERMIS SA STABILIM CA CCND1-CDK4 ARE ACTIVITATE CITOPLASMICA RELEVANTA IN TIMPUL DEZVOLTARII SI IN PROCESE PATOLOGICE PRECUM CANCERUL. ACEST LUCRU DESCHIDE UN DOMENIU DE CERCETARE PUȚIN STUDIAT, IAR ÎN ACEST NOU PROIECT DORIM SĂ ABORDĂM CARACTERIZAREA MECANISMELOR DE SEMNALIZARE REGLEMENTATE DE COMPLEXELE CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC. (Romanian)
4 August 2022
0 references
CYKLINLAGEN SOM REGULATORISKA UNDERENHETER AV CYKLINBEROENDE KINASER ELLER CDK:ER OCH ÄR VIKTIGA DELAR I DEFINITIONEN AV CELLDELNINGSSTADIER. D-CDK4/6 CYKLINKOMPLEXEN HOS DÄGGDJUR ÄR SPECIALISERADE PÅ ATT KONTROLLERA INMATNINGEN I CELLDELNINGSCYKELN I PRINCIP GENOM TRANSKRIPTIONSREGLERINGSMEKANISMER. DENNA KÄRNFUNKTION AV CYKLIN D-CDK4/6 ÄR SÄRSKILT VIKTIG UNDER VÄVNADSUTVECKLING, OCH FÖRÄNDRINGAR I UTTRYCKET AV DETTA KOMPLEX FRÄMJA BILDANDET AV TUMÖRER. SÅLEDES ÄR CYKLIN D1 (CCND1) OCH CDK4 TVÅ AV DE MEST AMPLIFIERADE ONKOGENERNA I OLIKA TUMÖRTYPER. DET ÄR OCKSÅ KÄNT ATT CCND1-CDK4 ÄR INVOLVERAD I REGLERINGEN AV VIDHÄFTNING OCH MIGRATION AV CELLER, VIKTIGA PROCESSER UNDER UTVECKLINGEN. VÅR GRUPP HAR VISAT ATT CCND1-CDK4-KOMPLEX SOM FINNS I CYTOPLASMA STYR DESSA PROCESSER GENOM AKTIVERING AV RAL OCH RAC1 GT PASSERAR. DETTA FYND FÖRÄNDRAR PARADIGMET SOM PLACERAR CCND1 SOM EN AV EFFEKTERNA AV TRANSDUKTIONSVÄGARNA FÖR KONTROLL AV CELLDELNING OCH ANTYDER ATT DESS CYTOPLASMISKA AKTIVITET KAN SPELA EN MYCKET VIKTIGARE ROLL SOM REGULATOR FÖR CELLULÄR SIGNALERING ÄN TIDIGARE TILLSKRIVITS DEN. DET HUVUDSAKLIGA SYFTET MED DETTA PROJEKT ÄR DÄRFÖR ATT STUDERA BETYDELSEN AV CYTOPLASMAFUNKTIONERNA HOS CCND1-CDK4 I REGLERINGEN AV CELLULÄR SIGNALERING UNDER UTVECKLING OCH I CANCER. I DETTA SYFTE FÖRESLÅR VI TRE SPECIFIKA MÅL: 1) KARAKTERISERING AV TRANSDUKTIONSVÄGARNA FÖR SIGNALER SOM REGLERAS AV CCND1-CDK4- CYTOPLASMAKOMPLEXET. MED HJÄLP AV OLIKA PROTEOMISKA TEKNIKER STRÄVAR VI EFTER ATT UPPTÄCKA OCH KARAKTERISERA CCND1-CDK4-MÅL SOM ÄR INVOLVERADE I CELLULÄR SIGNALERING. INOM RAMEN FÖR DETTA MÅL KOMMER VI OCKSÅ ATT STUDERA PROHIBITINAS, CDK4-INTERAKTIONER SOM ERHÅLLITS VID TIDIGARE SCREENINGER OCH SOM SKULLE KUNNA VARA INVOLVERADE I PLATSEN OCH CYTOPLASMISK AKTIVITET HOS CCND1-CDK4. 2) STUDIEN AV CCND1-CDK4:S ROLL I UTVECKLINGEN. VI KOMMER ATT FOKUSERA PÅ STUDIEN AV HJÄRNBARK EFTERSOM TIDIGARE RESULTAT AV VÅR GRUPP OCH MEDARBETARE TYDER PÅ ATT CCND1-CDK4-AKTIVITET ÄR VIKTIG FÖR STRUKTURERING AV HJÄRNBARKENS LAGER. DESSUTOM VET VI ATT UTTRYCKET CCND1 I CYTOPLASMAN INDUCERAR NEURITOGENES I PRIMÄRA KULTURER AV KORTIKALA NEURONER, OCH VI HAR FUNNIT ATT CCND1 INTERAGERAR MED PALS1 OCH RALA, VILKA BÅDA ÄR RELEVANTA FÖR POLARITET OCH NEURONAL MIGRATION. 3) UTVÄRDERINGEN AV BETYDELSEN AV CYTOPLASMISKA FUNKTIONER AV CCND1-CDK4 I MÄNSKLIGA TUMÖRER. VÅRA PRELIMINÄRA RESULTAT MED MURINMODELLER TYDER PÅ BETYDELSEN AV CYTOPLASMIC CCND1-CDK4-KOMPLEXET I TUMÖRPROGRESSION. VI VILL NU KARAKTERISERA DE CYTOPLASMISKA FUNKTIONERNA HOS CCND1-CDK4 I PRIMÄRA KULTURER OCH TUMOROSPHERAS ISOLERADE FRÅN MÄNSKLIGA TUMÖRER. VI HAR GENERERAT NÅGRA PRELIMINÄRA RESULTAT I MÄNSKLIGA GLIOBLASTOMCELLER, EN TUMÖR MED HÖG INVASIV KAPACITET. SAMMANFATTNINGSVIS HAR FINANSIERINGEN FRÅN TIDIGARE PROJEKT GJORT DET MÖJLIGT FÖR OSS ATT FASTSTÄLLA ATT CCND1-CDK4 HAR RELEVANT CYTOPLASMISK AKTIVITET UNDER UTVECKLING OCH I PATOLOGISKA PROCESSER SOM CANCER. DETTA ÖPPNAR UPP ETT FORSKNINGSOMRÅDE SOM INTE STUDERATS, OCH I DETTA NYA PROJEKT VILL VI TA ITU MED KARAKTERISERINGEN AV SIGNALMEKANISMER SOM REGLERAS AV CCND1-CDK4 CITOPLASMATIC-KOMPLEXEN. (Swedish)
4 August 2022
0 references
Lleida
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
BFU2016-78826-P
0 references