DNA-DNA INTERFERENCE MEDIATED BY THERMUS THERMOPHILUS ARGONAUTA PROTEIN AND GENOMIC EDITION APPLICATIONS (Q3138236)

From EU Knowledge Graph
Jump to navigation Jump to search
Project Q3138236 in Spain
Language Label Description Also known as
English
DNA-DNA INTERFERENCE MEDIATED BY THERMUS THERMOPHILUS ARGONAUTA PROTEIN AND GENOMIC EDITION APPLICATIONS
Project Q3138236 in Spain

    Statements

    0 references
    118,592.1 Euro
    0 references
    217,800.0 Euro
    0 references
    54.45 percent
    0 references
    30 December 2016
    0 references
    31 December 2020
    0 references
    UNIVERSIDAD AUTONOMA DE MADRID
    0 references

    40°30'52.20"N, 3°41'52.76"W
    0 references
    28049
    0 references
    LAS PROTEINAS ARGONAUTA PRODUCEN LA INTERFERENCIA RNA-RNA RESPONSABLE DEL SILENCIAMIENTO GENICO EN EUCARIOTAS, AUNQUE MUCHAS ARQUEAS Y ALGUNAS BACTERIAS TAMBIEN CODIFICAN PROTEINAS DE LA FAMILIA ARGONAUTA. LA PROTEINA THAGO DE THERMUS THERMOPHILUS ( HOMOLOGA DE LA PROTEINA AGO2 HUMANA) PRESENTA LA INUSUAL CAPACIDAD DE CORTAR DNA COMPLEMENTARIO A GUIAS DE SSDNA, LO QUE CONSTITUYE UN NOVEDOSO SISTEMA DE INTERFERENCIA DNA-DNA. DATOS PREVIOS DEL LABORATORIO SOLICITANTE MUESTRAN QUE THAGO ACTUA COMO BARRERA DE INMUNIDAD INNATA FRENTE A DNA EXOGENO, DESTRUYENDO DE FORMA EFICAZ LA MAYOR PARTE (90%) DE LAS MOLECULAS DE DNA QUE ENTRAN EN LA CELULA POR TRANSFORMACION, PERO SIN ACTUAR SOBRE EL MISMO DNA CUANDO ESTE ES TRANSFERIDO DESDE OTRA BACTERIA DEL MISMO GENERO, LO QUE SUGIERE QUE LA ACTIVIDAD DE THAGO ESTA SOMETIDA A REGULACION EN LA CELULA. POR OTRA PARTE, LA CAPACIDAD DE CORTE DIRIGIDO POR SSDNA DE THAGO CONSTITUYE UNA PROPIEDAD DE EXTRAORDINARIO POTENCIAL DE APLICACION EN EDICION DE GENOMAS, SIMILAR EN SU FUNCIONAMIENTO PERO CON POTENCIALES VENTAJAS SOBRE EL SISTEMA CRISPR/CAS9. DE HECHO, EN UN PROYECTO EXPLORA FINALIZADO EN 2015 OBSERVAMOS QUE LA EXPRESION TRANSITORIA DE THAGO EN CELULAS DE RATON TRANSFECTADAS CON OLIGONUCLEOTIDOS GUIA ESPECIFICOS PRODUCIA EL APAGADO EN LA EXPRESION DE GFP DESDE UN PLASMIDO. EN EL PROYECTO QUE SE SOLICITA PRETENDEMOS PROFUNDIZAR EN LOS MECANISMOS QUE LE PERMITEN A THAGO DISTINGUIR ENTRE DNA ADQUIRIDO POR TRANSFORMACION O TRANSFERIDO DE OTRAS CELULAS CON EL FIN DE ENTENDER Y OPTIMIZAR SU FUNCIONAMIENTO DE CARA A SU APLICACION COMO HERRAMIENTA EN LA EDICION DE GENOMAS._x000D_ COMO PASO PREVIO A CUALQUIER PROCESO DE OPTIMIZACION DE LA PROTEINA, EL PRIMER OBJETIVO PROPUESTO TITULADO ¿IDENTIFICACION DE LOS COMPONENTES Y LOS MECANISMOS DE ACTIVACION/DESACTIVACION IMPLICADOS EN LA RESPUESTA DE INTERFERENCIA DNA-DNA MEDIADA POR THAGO¿, SERA ABORDADO MEDIANTE UNA COMBINACION DE TECNICAS BIOQUIMICAS, PROTEOMICAS Y GENETICAS PARA IDENTIFICAR POSIBLES MODIFICACIONES COVALENTES E INTERACCIONES CON OTRAS PROTEINAS NECESARIAS PARA LA INTERFERENCIA. EN EL SEGUNDO OBJETIVO ¿UTILIZACION DE PROTEINAS PAGO COMO HERRAMIENTAS PARA LA MODIFICACION DE DNA¿, SE ABORDARA LA MODIFICACION DE THAGO TANTO FOCALIZADA EN BASE A LOS DATOS OBTENIDOS EN EL PRIMER OBJETIVO, COMO AL AZAR, MEDIANTE EVOLUCION DIRIGIDA IN VITRO. LAS VARIANTES MAS EFICIENTES EN ENSAYOS DE CORTE DIRIGIDOS POR GUIA SERAN UTILIZADAS IN VITRO EN PROCESOS DE MODIFICACION DE DNA COMO ENZIMA DE RESTRICCION PROGRAMABLE, Y APLICADAS DIRECTAMENTE IN VIVO PARA LA EDICION DE GENOMAS DE PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS. EN EL CASO DE LOS GENOMAS DE EUCARIOTAS, LA ADICION DE DE SEÑALES DE LOCALIZACION NUCLEAR A ESTAS VARIANTES MEJORADAS PERMITIRIA LA TRANSFECCION DIRECTA DE LA PROTEINA YA UNIDA A GUIAS DE SSDNA, EVITANDO EL RIESGO DE INCORPORACION ACCIDENTAL DE DNA EXOGENO EN EL GENOMA ASOCIADO A LAS TECNICAS CRISPR/CAS9 ACTUALES. (Spanish)
    0 references
    ARGONAUTA PROTEINS PRODUCE RNA-RNA INTERFERENCE RESPONSIBLE FOR GENIC SILENCING IN EUKARYOTES, ALTHOUGH MANY ARCHAEA AND SOME BACTERIA ALSO ENCODE PROTEINS FROM THE ARGONAUT FAMILY. THE THAGO PROTEIN FROM THERMUS THERMOPHILUS (HUMAN AGO2 PROTEIN HORMONE) PRESENTS THE UNUSUAL ABILITY TO CUT DNA COMPLEMENTARY TO SSDNA GUIDES, WHICH IS A NOVEL DNA-DNA INTERFERENCE SYSTEM. PREVIOUS DATA FROM THE REQUESTING LABORATORY SHOW THAT THAGO ACTS AS A BARRIER OF INNATE IMMUNITY AGAINST EXOGENOUS DNA, EFFECTIVELY DESTROYING MOST (90 %) OF THE DNA MOLECULES THAT ENTER THE CELL BY TRANSFORMATION, BUT WITHOUT ACTING ON THE SAME DNA WHEN IT IS TRANSFERRED FROM ANOTHER BACTERIUM OF THE SAME GENUS, SUGGESTING THAT THAGO’S ACTIVITY IS SUBJECT TO REGULATION IN THE CELL. ON THE OTHER HAND, THE CUTTING CAPACITY LED BY SSDNA OF THAGO CONSTITUTES A PROPERTY OF EXTRAORDINARY APPLICATION POTENTIAL IN GENOME EDITION, SIMILAR IN ITS OPERATION BUT WITH POTENTIAL ADVANTAGES OVER THE CRISPR/CAS9 SYSTEM. IN FACT, IN A PROJECT EXPLORED COMPLETED IN 2015 WE OBSERVED THAT THE TRANSIENT EXPRESSION OF THAGO IN TRANSFECTED RATON CELLS WITH SPECIFIC OLIGONUCLEOTIDES PRODUCED THE SHUTDOWN IN THE EXPRESSION OF GFP FROM A PLASMAID. In THE PROJECT THAT IS REQUESTed we intend to PROFUND in the MECHANISMS that allow you to make it available to you to enter DNA ADQUIRIED by TRANSFORMATION or TRANSFERIING OF Other CELULS WITH THE FINANCIAL AND OPTIMITION OF YOUR FUNCTIONING OF HIS APPLICATION AS TOOL IN THE EDITION OF GENOMAS._x000D_ as a preliminary step to any process of openness of the PROTEIN, THE FIRST OBJECTIVE PROPOSAL PROPOSAL IENTIFICATION OF COMPONENTS AND ACTIVITIES/deactivation MECANISMs included in the DNA-DNA Interference Answer Measured by THAGO, it will be addressed by means of a combination of biochemical, protheomic and GENETIC technologies for identification of covalent modifications and interactions with other necessities for interference. IN THE SECOND OBJECTIVE, WILL THE USE OF PROTEINS PAID AS TOOLS FOR DNA MODIFICATION BE ADDRESSED THE MODIFICATION OF THAGO FOCUSED ON THE DATA OBTAINED IN THE FIRST OBJECTIVE, AS WELL AS RANDOMLY, THROUGH IN VITRO DIRECTED EVOLUTION. THE MOST EFFICIENT VARIANTS IN CUTTING TESTS LED BY GUIA WILL BE USED IN VITRO IN DNA MODIFICATION PROCESSES AS A PROGRAMMABLE RESTRICTION ENZYME, AND APPLIED DIRECTLY IN VIVO FOR THE EDITING OF GENOMES OF PROKARYOTES AND EUKARYOTES. IN THE CASE OF GENOMES OF EUKARYOTES, THE ADDITION OF NUCLEAR LOCATION SIGNALS TO THESE IMPROVED VARIANTS WOULD ALLOW DIRECT TRANSFECCION OF THE PROTEIN ALREADY LINKED TO SSDNA GUIDES, AVOIDING THE RISK OF ACCIDENTAL INCORPORATION OF EXOGENOUS DNA INTO THE GENOME ASSOCIATED WITH THE CURRENT CRISPR/CAS9 TECHNIQUES. (English)
    12 October 2021
    0.5711151532185953
    0 references
    LES PROTÉINES ARGONAUTA PRODUISENT DES INTERFÉRENCES ARN-ARN RESPONSABLES DU SILENCIEUX GÉNIQUE CHEZ LES EUCARYOTES, BIEN QUE DE NOMBREUSES ARCHÉES ET CERTAINES BACTÉRIES CODENT ÉGALEMENT DES PROTÉINES DE LA FAMILLE DES ARGONAUTES. LA PROTÉINE THAGO DE THERMUS THERMOPHILUS (HORMONE PROTÉIQUE HUMAINE AGO2) PRÉSENTE LA CAPACITÉ INHABITUELLE DE COUPER L’ADN COMPLÉMENTAIRE AUX GUIDES DE L’ADN SS, QUI EST UN NOUVEAU SYSTÈME D’INTERFÉRENCE ADN-ADN. DES DONNÉES ANTÉRIEURES DU LABORATOIRE DEMANDEUR MONTRENT QUE THAGO AGIT COMME UNE BARRIÈRE D’IMMUNITÉ INNÉE CONTRE L’ADN EXOGÈNE, DÉTRUISANT EFFECTIVEMENT LA PLUPART (90 %) DES MOLÉCULES D’ADN QUI PÉNÈTRENT DANS LA CELLULE PAR TRANSFORMATION, MAIS SANS AGIR SUR LE MÊME ADN LORSQU’IL EST TRANSFÉRÉ D’UNE AUTRE BACTÉRIE DU MÊME GENRE, SUGGÉRANT QUE L’ACTIVITÉ DE THAGO EST SOUMISE À LA RÉGLEMENTATION DANS LA CELLULE. D’AUTRE PART, LA CAPACITÉ DE COUPE MENÉE PAR L’ADN SS DE THAGO CONSTITUE UNE PROPRIÉTÉ D’UN POTENTIEL D’APPLICATION EXTRAORDINAIRE DANS L’ÉDITION DU GÉNOME, SIMILAIRE DANS SON FONCTIONNEMENT, MAIS AVEC DES AVANTAGES POTENTIELS PAR RAPPORT AU SYSTÈME CRISPR/CAS9. EN FAIT, DANS UN PROJET EXPLORÉ EN 2015, NOUS AVONS OBSERVÉ QUE L’EXPRESSION TRANSITOIRE DE THAGO DANS DES CELLULES DE RATON TRANSFECTÉES AVEC DES OLIGONUCLÉOTIDES SPÉCIFIQUES PRODUISAIT L’ARRÊT DANS L’EXPRESSION DU GFP À PARTIR D’UN PLASMAID. Dans LE PROJET qu’il nous a demandé d’entreprendre dans les MECHANISMS qui vous permettent de le mettre à votre disposition pour entrer l’ADN ADQUIRIÉ par TRANSFORMATION ou TRANSFERIATION D’autres CELULS AVEC LA FINANCITÉ ET OPTIMITION DE VOTRE FONCTIONNEMENT DE SES APPLICATION À L’ÉDITION DES GENOMAS._x000D_comme étape préliminaire à tout processus d’ouverture du PROTÉIN, la PREMIÈRE PROPOSITION OBJECTIVE IENTIFICATION DES COMPONENTS ET ACTIVITÉS/mécanismes de désactivation inclus dans la réponse d’interférence ADN-ADN Mesurée par THAGO, elle sera traitée au moyen d’une combinaison de technologies biochimiques, prothéomiques et GENETIQUEs pour l’identification des modifications covalentes et des interactions avec d’autres nécessités d’interférence. DANS LE DEUXIÈME OBJECTIF, L’UTILISATION DE PROTÉINES PAYÉES COMME OUTILS DE MODIFICATION DE L’ADN SERA-T-ELLE ABORDÉE LA MODIFICATION DE THAGO AXÉE SUR LES DONNÉES OBTENUES DANS LE PREMIER OBJECTIF, AINSI QUE DE FAÇON ALÉATOIRE, PAR L’ÉVOLUTION DIRIGÉE IN VITRO. LES VARIANTES LES PLUS EFFICACES DANS LES TESTS DE COUPE MENÉS PAR GUIA SERONT UTILISÉES IN VITRO DANS LES PROCESSUS DE MODIFICATION DE L’ADN EN TANT QU’ENZYME DE RESTRICTION PROGRAMMABLE, ET APPLIQUÉES DIRECTEMENT IN VIVO POUR L’ÉDITION DES GÉNOMES DES PROKARYOTES ET DES EUCARYOTES. DANS LE CAS DES GÉNOMES D’EUKARYOTES, L’AJOUT DE SIGNAUX DE LOCALISATION NUCLÉAIRE À CES VARIANTES AMÉLIORÉES PERMETTRAIT UNE TRANSFECCION DIRECTE DE LA PROTÉINE DÉJÀ LIÉE AUX GUIDES DE L’ADN SS, EN ÉVITANT LE RISQUE D’INCORPORATION ACCIDENTELLE DE L’ADN EXOGÈNE DANS LE GÉNOME ASSOCIÉ AUX TECHNIQUES ACTUELLES CRISPR/CAS9. (French)
    2 December 2021
    0 references
    ARGONAUTA-PROTEINE PRODUZIEREN RNA-RNA-INTERFERENZ, DIE FÜR DIE ABSCHOTTUNG IN EUKARYOTES VERANTWORTLICH IST, OBWOHL VIELE ARCHÄE UND EINIGE BAKTERIEN AUCH PROTEINE AUS DER ARGONAUT-FAMILIE CODIEREN. DAS THAGO-PROTEIN VON THERMUS THERMOPHILUS (HUMANES AGO2-PROTEINHORMON) ZEIGT DIE UNGEWÖHNLICHE FÄHIGKEIT, DNA KOMPLEMENTÄR ZU SSDNA-GUIDES ZU SCHNEIDEN, EIN NEUARTIGES DNA-DNA-INTERFERENZSYSTEM. FRÜHERE DATEN DES ANFRAGENDEN LABORS ZEIGEN, DASS THAGO ALS BARRIERE DER ANGEBORENEN IMMUNITÄT GEGEN EXOGENE DNA WIRKT UND DIE MEISTEN (90 %) DER DNA-MOLEKÜLE, DIE DURCH TRANSFORMATION IN DIE ZELLE GELANGEN, EFFEKTIV ZERSTÖRT, OHNE JEDOCH AUF DIESELBE DNA ZU WIRKEN, WENN SIE VON EINEM ANDEREN BAKTERIUM DERSELBEN GATTUNG ÜBERTRAGEN WIRD, WAS DARAUF HINDEUTET, DASS DIE AKTIVITÄT VON THAGO DER REGULIERUNG IN DER ZELLE UNTERLIEGT. ANDERERSEITS STELLT DIE VON SSDNA VON THAGO ANGEFÜHRTE SCHNEIDKAPAZITÄT EINE EIGENSCHAFT AUSSERGEWÖHNLICHER ANWENDUNGSPOTENZIALE IN GENOM-EDITION DAR, ÄHNLICH WIE IN IHREM BETRIEB, ABER MIT POTENZIELLEN VORTEILEN GEGENÜBER DEM CRISPR/CAS9-SYSTEM. IN EINEM 2015 ABGESCHLOSSENEN PROJEKT STELLTEN WIR FEST, DASS DIE VORÜBERGEHENDE EXPRESSION VON THAGO IN TRANSFEKTEN RATON-ZELLEN MIT SPEZIFISCHEN OLIGONUKLEOTIDEN DIE ABSCHALTUNG IM AUSDRUCK VON GFP AUS EINEM PLASMAID HERVORRIEF. In DER PROJEKT, dass wir gebeten werden, in den MECHANISMS PROFUNDEN, mit denen Sie es Ihnen zur Verfügung stellen können, die durch TRANSFORMATION oder TRANSFERIING OF Other CELULS mit dem FINANZ und EINER FUNKTION DER HINWEISIERUNG als ENTWICKLUNG IN DER GENOMAS._x000D_ als Vorstufe zu jedem Prozess der Offenheit des PROTEINs ANGENOMAS ANGENOMAS._x000D_ als Vorstufe zur Verfügung gestellt werden, die FIRST OBJECTIVE PROPOSAL PROPOSAL IENTIFIKATION DER COMPONENTE UND AKTIVITÄTEN/Deaktivierungsmekanismen, die in der von THAGO gemessenen DNA-DNA-Interferenzantwort enthalten sind, wird durch eine Kombination von biochemischen, protheomischen und GENETIC-Technologien zur Identifizierung von kovalenten Modifikationen und Wechselwirkungen mit anderen Interferenznotwendigkeiten behandelt. IM ZWEITEN ZIEL WIRD DIE VERWENDUNG VON PROTEINEN, DIE ALS WERKZEUGE FÜR DIE DNA-MODIFIKATION BEZAHLT WERDEN, AUF DIE MODIFIKATION VON THAGO AUSGERICHTET WERDEN, DIE SICH AUF DIE IM ERSTEN ZIEL GEWONNENEN DATEN SOWIE ZUFÄLLIG DURCH IN-VITRO GERICHTETE EVOLUTION KONZENTRIEREN. DIE EFFIZIENTESTEN VARIANTEN IN SCHNEIDVERSUCHEN UNTER DER LEITUNG VON GUIA WERDEN IN VITRO IN DNA MODIFIKATIONSPROZESSEN ALS PROGRAMMIERBARES RESTRIKTIONSENZYM VERWENDET UND DIREKT IN VIVO FÜR DIE BEARBEITUNG VON GENOMEN VON PROKARYOTEN UND EUKARYOTES ANGEWENDET. BEI GENOME VON EUKARYOTEN WÜRDE DIE AUFNAHME VON KERNORTSIGNALEN ZU DIESEN VERBESSERTEN VARIANTEN EINE DIREKTE TRANSFECCION DES PROTEINS ERMÖGLICHEN, DAS BEREITS MIT SSDNA-LEITFÄDEN VERBUNDEN IST, WODURCH DAS RISIKO EINER VERSEHENTLICHEN INTEGRATION EXOGENER DNA IN DAS GENOM, DAS MIT DEN DERZEITIGEN CRISPR/CAS9-TECHNIKEN VERBUNDEN IST, VERMIEDEN WÜRDE. (German)
    9 December 2021
    0 references
    ARGONAUTA-EIWITTEN PRODUCEREN RNA-RNA-INTERFERENTIE DIE VERANTWOORDELIJK IS VOOR HET TOT ZWIJGEN BRENGEN IN EUKARYOTES, HOEWEL VEEL ARCHAEA EN SOMMIGE BACTERIËN OOK EIWITTEN UIT DE ARGONAUT-FAMILIE CODEREN. HET THAGO-EIWIT VAN THERMUS THERMOPHILUS (MENSELIJK AGO2-EIWITHORMOON) PRESENTEERT HET ONGEWONE VERMOGEN OM DNA TE SNIJDEN ALS AANVULLING OP SSDNA-GIDSEN, WAT EEN NIEUW DNA-DNA-INTERFERENTIESYSTEEM IS. EERDERE GEGEVENS VAN HET VERZOEKENDE LABORATORIUM TONEN AAN DAT THAGO FUNGEERT ALS EEN BARRIÈRE VAN AANGEBOREN IMMUNITEIT TEGEN EXOGENE DNA, WAARDOOR DE MEESTE (90 %) VAN DE DNA-MOLECULEN DIE DE CEL BINNENKOMEN DOOR TRANSFORMATIE, MAAR ZONDER OP HETZELFDE DNA TE HANDELEN WANNEER HET WORDT OVERGEDRAGEN VAN EEN ANDERE BACTERIE VAN HETZELFDE GESLACHT, EFFECTIEF WORDEN VERNIETIGD, WAT SUGGEREERT DAT DE ACTIVITEIT VAN THAGO IN DE CEL ONDERWORPEN IS AAN REGELGEVING. ANDERZIJDS VORMT DE DOOR SSDNA VAN THAGO GELEIDE SNIJCAPACITEIT EEN EIGENSCHAP VAN BUITENGEWOON TOEPASSINGSPOTENTIEEL IN GENOOMEDITIE, VERGELIJKBAAR IN ZIJN WERKING, MAAR MET POTENTIËLE VOORDELEN TEN OPZICHTE VAN HET CRISPR/CAS9-SYSTEEM. IN EEN PROJECT DAT IN 2015 WERD AFGEROND, CONSTATEERDEN WE DAT DE TIJDELIJKE EXPRESSIE VAN THAGO IN GETRANSFECTEERDE RATONCELLEN MET SPECIFIEKE OLIGONUCLEOTIDEN DE SLUITING IN DE EXPRESSIE VAN GFP VAN EEN PLASMAID PRODUCEERDE. In HET PROJECT DAT wordt gevraagd, zijn wij van plan in de MECHANISMS te PROFUNDEN die u in staat stellen het DNA aan u ter beschikking te stellen om door TRANSFORMATION of TRANSFERIING VAN andere personen met de FINANCIËLE EN OPTIMITIE VAN UW FUNCTIONING VAN ZIJN TOOL IN DE EDITIE VAN GENOMAS._x000D_ als eerste stap naar een proces van openheid van het PROTEIN in te voeren, de eerste OBJECTIVE PROPOSAL PROPOSAL IENTIFICATIE VAN COMPONENTEN EN ACTIVITEITEN/deactivering mecanismen die zijn opgenomen in het DNA-DNA Interference Answer Measured door THAGO, zal worden aangepakt door middel van een combinatie van biochemische, protheomische en GENETIC technologieën voor de identificatie van covalente modificaties en interacties met andere benodigdheden voor interferentie. IN DE TWEEDE DOELSTELLING, ZAL HET GEBRUIK VAN EIWITTEN BETAALD ALS INSTRUMENT VOOR DNA-MODIFICATIE WORDEN AANGEPAKT DE WIJZIGING VAN THAGO GERICHT OP DE GEGEVENS VERKREGEN IN DE EERSTE DOELSTELLING, EVENALS WILLEKEURIG, DOOR MIDDEL VAN IN VITRO GERICHTE EVOLUTIE. DE MEEST EFFICIËNTE VARIANTEN IN SNIJTESTS ONDER LEIDING VAN GUYANA ZULLEN IN VITRO WORDEN GEBRUIKT IN DNA-MODIFICATIEPROCESSEN ALS EEN PROGRAMMEERBAAR RESTRICTIE-ENZYM, EN DIRECT IN VIVO WORDEN TOEGEPAST VOOR HET BEWERKEN VAN GENOOM VAN PROKARYOTES EN EUKARYOTES. IN HET GEVAL VAN GENOOMS VAN EUKARYOTES ZOU DE TOEVOEGING VAN KERNLOCATIESIGNALEN AAN DEZE VERBETERDE VARIANTEN DIRECTE TRANSFECCION VAN HET EIWIT MOGELIJK MAKEN DAT REEDS AAN SSDNA-GIDSEN IS GEKOPPELD, WAARDOOR HET RISICO WORDT VERMEDEN DAT EXOGENE DNA PER ONGELUK IN HET GENOOM WORDT OPGENOMEN DAT WORDT GEASSOCIEERD MET DE HUIDIGE CRISPR/CAS9-TECHNIEKEN. (Dutch)
    17 December 2021
    0 references
    LE PROTEINE DI ARGONAUTA PRODUCONO INTERFERENZA RNA-RNA RESPONSABILE DEL SILENZIAMENTO GENETICO NEGLI EUCARIOTI, ANCHE SE MOLTE ARCHEEE E ALCUNI BATTERI CODIFICANO ANCHE LE PROTEINE DELLA FAMIGLIA ARGONAUT. LA PROTEINA THAGO DI THERMUS THERMOPHILUS (ORMONE PROTEICO UMANO AGO2) PRESENTA L'INSOLITA CAPACITÀ DI TAGLIARE IL DNA COMPLEMENTARE ALLE GUIDE SSDNA, CHE È UN NUOVO SISTEMA DI INTERFERENZA DNA-DNA. DATI PRECEDENTI DEL LABORATORIO RICHIEDENTE MOSTRANO CHE THAGO AGISCE COME UNA BARRIERA DI IMMUNITÀ INNATA CONTRO IL DNA ESOGENO, DISTRUGGENDO EFFICACEMENTE LA MAGGIOR PARTE (90 %) DELLE MOLECOLE DI DNA CHE ENTRANO NELLA CELLULA PER TRASFORMAZIONE, MA SENZA AGIRE SULLO STESSO DNA QUANDO VIENE TRASFERITO DA UN ALTRO BATTERIO DELLO STESSO GENERE, SUGGERENDO CHE L'ATTIVITÀ DI THAGO È SOGGETTA A REGOLAZIONE NELLA CELLULA. D'ALTRA PARTE, LA CAPACITÀ DI TAGLIO GUIDATA DA SSDNA DI THAGO COSTITUISCE UNA PROPRIETÀ DI STRAORDINARIA POTENZIALITÀ APPLICATIVA IN EDIZIONE GENOMA, SIMILE NEL SUO FUNZIONAMENTO MA CON POTENZIALI VANTAGGI RISPETTO AL SISTEMA CRISPR/CAS9. INFATTI, IN UN PROGETTO ESPLORATO COMPLETATO NEL 2015 ABBIAMO OSSERVATO CHE L'ESPRESSIONE TRANSITORIA DI THAGO NELLE CELLULE DI RATON TRANSFETTATE CON OLIGONUCLEOTIDI SPECIFICI HA PRODOTTO L'ARRESTO NELL'ESPRESSIONE DI GFP DA UN PLASMAID. Nel PROGETTO che è richiesto intendiamo PROFONDARE nei MECCANIZZI che consentono di metterlo a vostra disposizione per inserire il DNA richiesto mediante TRASFORMAZIONE o TRASFERIMENTO DI ALTRI CELULI CON LA FINANZIARIA E OPTIMIZIONE DEL TUO FUNZIONAZIONE DELLA SULLA APPLICAZIONE COME NELL'EDIZIONE DI GENOMAS._x000D_ come passo preliminare a qualsiasi processo di apertura della PROTEIN, la PRIMA IENTIFICAZIONE PROPOSIVA PROPOSIVA OBGETIVA DI COMPONENTI E ATTIVITÀ/mecanismi di disattivazione inclusi nella risposta di interferenza DNA-DNA Misurata da THAGO, sarà affrontata mediante una combinazione di tecnologie biochimiche, proteomiche e GENETIC per l'identificazione di modifiche covalenti e interazioni con altre necessità di interferenza. NEL SECONDO OBIETTIVO, SARÀ AFFRONTATO L'USO DI PROTEINE PAGATE COME STRUMENTI PER LA MODIFICA DEL DNA, LA MODIFICA DI THAGO FOCALIZZATA SUI DATI OTTENUTI NEL PRIMO OBIETTIVO, COSÌ COME IN MODO CASUALE, ATTRAVERSO L'EVOLUZIONE IN VITRO DIRETTA. LE VARIANTI PIÙ EFFICIENTI NEI TEST DI TAGLIO CONDOTTI DA GUIA SARANNO UTILIZZATE IN VITRO NEI PROCESSI DI MODIFICA DEL DNA COME ENZIMA DI RESTRIZIONE PROGRAMMABILE E APPLICATE DIRETTAMENTE IN VIVO PER LA MODIFICA DI GENOMI DI PROCARIOTI ED EUCARIOTI. NEL CASO DEI GENOMI DI EUCARIOTI, L'AGGIUNTA DI SEGNALI DI LOCALIZZAZIONE NUCLEARE A QUESTE VARIANTI MIGLIORATE CONSENTIREBBE LA TRANSFECCION DIRETTA DELLA PROTEINA GIÀ COLLEGATA ALLE GUIDE SSDNA, EVITANDO IL RISCHIO DI INCORPORAZIONE ACCIDENTALE DEL DNA ESOGENO NEL GENOMA ASSOCIATO ALLE ATTUALI TECNICHE CRISPR/CAS9. (Italian)
    16 January 2022
    0 references
    ARGONAUTA VALGUD TOODAVAD RNA-RNA HÄIREID, MIS PÕHJUSTAVAD EUKARÜOOTIDE GEENSET SUMMEERIMIST, KUIGI PALJUD ARHAAD JA MÕNED BAKTERID KODEERIVAD KA ARGONAUT’ PEREKONNA VALKE. THERMUS THERMOPHILUS’E (INIMESE AGO2 VALGUHORMOON) THAGO VALK KUJUTAB ENDAST EBATAVALIST VÕIMET LÕIGATA DNA-D, MIS TÄIENDAB SSDNA JUHENDEID, MIS ON UUDNE DNA-DNA SEGAMISSÜSTEEM. TAOTLUSE ESITANUD LABORI VARASEMAD ANDMED NÄITAVAD, ET THAGO TOIMIB KAASASÜNDINUD IMMUUNSUSE BARJÄÄRINA EKSOGEENSE DNA VASTU, HÄVITADES TÕHUSALT ENAMIKU (90 %) DNA MOLEKULIDEST, MIS SISENEVAD RAKU MUUNDUMISE TEEL, KUID EI TOIMI SAMA DNA-L, KUI SEE KANTAKSE ÜLE TEISEST SAMA PEREKONNA BAKTERIST, MIS VIITAB SELLELE, ET THAGO AKTIIVSUST REGULEERITAKSE RAKUS REGULEERIMISEGA. TEISEST KÜLJEST KUJUTAB THAGO SSDNA JUHITUD LÕIKAMISVÕIMSUS ENDAST GENOOMIVERSIOONIS ERAKORDSE RAKENDUSPOTENTSIAALI OMADUST, MIS ON SELLE TOIMIMISE POOLEST SARNANE, KUID MILLEL VÕIB OLLA EELISEID SÜSTEEMI CRISPR/CAS9 EES. ÕIGUPOOLEST TÄHELDASIME 2015. AASTAL LÕPETATUD PROJEKTIS, ET THAGO MÖÖDUV EKSPRESSIOON TRANSFEKTSIOONIGA RATONI RAKKUDES KOOS SPETSIIFILISTE OLIGONUKLEOTIIDIDEGA PÕHJUSTAS PLASMAIDIST GFP EKSPRESSIOONI. Tingimusel, et meil on palutud, et me kavatseme MEKHANISED, mis võimaldavad teil teha kättesaadavaks, et sisestada DNA TRANSFORMATION või TRANSFERIING teiste CELULS, FINANCIAL JA OPTIMITION Teie FUNCTIONING HIS APPLICATION AS TOOL IN THE EDITION OF GENOMAS._x000D_ eeletapina mis tahes protsessi avatuse PROTEIN, THAGO poolt mõõdetavas DNA-DNA sekkumisvastuses sisalduvate THAGO poolt mõõdetud DNA-DNA sekkumisvastuses sisalduvate THAGO poolt mõõdetavate DNA-DNA sekkumisvastustega KOHUSTUSLIK KOHUSTUSLIK JA TEGEVUSTE TÖÖVÕTMISE KASUTAMISE KOHUSTUSLIK THAGO poolt mõõdetavate biokeemiliste, proteoomiliste ja GENETIC-tehnoloogiate kombinatsiooni abil, et teha kindlaks kovalentsed modifikatsioonid ja koostoimed muude häirete vajadusega. TEISE EESMÄRGI PUHUL KÄSITLETAKSE MAKSTUD VALKUDE KASUTAMIST DNA MODIFITSEERIMISE VAHENDINA THAGO MUUTMISEL, KESKENDUDES ESIMESE EESMÄRGI RAAMES SAADUD ANDMETELE, SAMUTI JUHUSLIKULT IN VITRO SUUNATUD EVOLUTSIOONI KAUDU. GUIA JUHITAVATE LÕIKAMISKATSETE KÕIGE TÕHUSAMAID VARIANTE KASUTATAKSE IN VITRO DNA MUUNDAMISE PROTSESSIDES PROGRAMMEERITAVA RESTRIKTSIOONIENSÜÜMINA NING NEID KASUTATAKSE OTSE IN VIVO PROKARÜOOTIDE JA EUKARÜOOTIDE GENOOMIDE TOIMETAMISEKS. EUKARÜOOTIDE GENOOMIDE PUHUL VÕIMALDAKS TUUMAJAAMA ASUKOHA SIGNAALIDE LISAMINE NENDELE TÄIUSTATUD VARIANTIDELE OTSE TRANSFECCION’I SSDNA JUHENDITEGA JUBA SEOTUD VALGU PUHUL, VÄLTIDES OHTU, ET EKSOGEENSE DNA SATTUMINE GENOOMI, MIS ON SEOTUD PRAEGUSTE CRISPR/CAS9 MEETODITEGA. (Estonian)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA BALTYMAI GAMINA RNR-RNR TRUKDŽIUS, KURIE SUKELIA EUKARIOTŲ GENINĮ SILENCIMĄ, NORS DAUGELIS ARCHAEA IR KAI KURIOS BAKTERIJOS TAIP PAT KODUOJA ARGONAUTŲ ŠEIMOS BALTYMUS. THAGO BALTYMAS IŠ THERMUS THERMOPHILUS (ŽMOGAUS AGO2 BALTYMO HORMONAS) SUTEIKIA NEĮPRASTĄ GEBĖJIMĄ SUMAŽINTI DNR, PAPILDANČIĄ SSDNR VADOVUS, KURIS YRA NAUJA DNR-DNR TRUKDŽIŲ SISTEMA. ANKSTESNI PRAŠANČIOSIOS LABORATORIJOS DUOMENYS RODO, KAD THAGO VEIKIA KAIP ĮGIMTO IMUNITETO NUO EGZOGENINĖS DNR BARJERAS, VEIKSMINGAI SUNAIKINDAMAS DAUGUMĄ (90 %) DNR MOLEKULIŲ, KURIOS PATENKA Į LĄSTELĘ TRANSFORMACIJOS BŪDU, TAČIAU NEVEIKDAMAS TOS PAČIOS DNR, KAI JI PERDUODAMA IŠ KITOS TOS PAČIOS GENTIES BAKTERIJOS, O TAI RODO, KAD THAGO VEIKLAI TAIKOMAS REGULIAVIMAS LĄSTELĖJE. KITA VERTUS, THAGO SSDNA VADOVAUJAMI PJOVIMO PAJĖGUMAI YRA YPATINGO GENOMO LEIDIMO TAIKYMO POTENCIALO SAVYBĖ, PANAŠI Į JOS VEIKIMĄ, TAČIAU GALI BŪTI PRANAŠESNĖ UŽ CRISPR/CAS9 SISTEMĄ. TIESĄ SAKANT, 2015 M. UŽBAIGTAME PROJEKTE PASTEBĖJOME, KAD TRUMPALAIKIS THAGO IŠRAIŠKOS TRANSFEKUOTOSE RATON LĄSTELĖSE SU SPECIFINIAIS OLIGONUKLEOTIDAIS SUKĖLĖ GFP IŠ PLASMAID IŠRAIŠKĄ. Jei prašome, kad mes ketiname dalyvauti MECHANISMS, kad galėtumėte pateikti jums prieigą prie DNR, kuri jums leidžia įvesti DNR, kurią galite įvesti TRANSFORMATION arba TRANSFERIING kitų CELUES su FINANSINĖ IR VEIKLOS JŪSŲ GENOMAS APSAUGA._x000D_ kaip preliminarūs žingsniai į bet kokį PROTEINO atvirumo procesą, į THAGO išmatuotą DNR-DNR trukdžių atsakymuose į DNR-DNR trukdžių atsakymuose nurodytus PIRJEKTYVINIO PROPOSAVIMO PROPOSINIMO IR AKTIMŲ IENTIFIKACIJOS/deaktyvacijos mekanizmų THAGO matavimą, jis bus sprendžiamas naudojant biocheminių, proteominių ir GENETIC technologijų derinį, kad būtų galima nustatyti kovalentines modifikacijas ir sąveiką su kitais trukdžiams reikalingais dalykais. ANTRUOJU TIKSLU, AR BALTYMŲ, MOKAMŲ KAIP DNR MODIFIKAVIMO PRIEMONĖS, NAUDOJIMAS BUS SPRENDŽIAMAS THAGO MODIFIKACIJA, ORIENTUOTA Į DUOMENIS, GAUTUS ĮGYVENDINANT PIRMĄJĮ TIKSLĄ, TAIP PAT ATSITIKTINAI, PER IN VITRO NUKREIPTĄ EVOLIUCIJĄ. EFEKTYVIAUSI GUIA VADOVAUJAMŲ PJOVIMO BANDYMŲ VARIANTAI BUS NAUDOJAMI IN VITRO DNR MODIFIKACIJOS PROCESUOSE KAIP PROGRAMUOJAMAS APRIBOJIMO FERMENTAS IR TIESIOGIAI IN VIVO NAUDOJAMI PROKARIOTŲ IR EUKARIOTŲ GENOMŲ REDAGAVIMUI. EUKARIOTŲ GENOMŲ ATVEJU Į ŠIUOS PATOBULINTUS VARIANTUS PRIDĖJUS BRANDUOLINĖS VIETOS SIGNALUS BŪTŲ GALIMA TIESIOGIAI TRANSFECCION JAU SUSIETO SU SSDNR REKOMENDACIJOMIS BALTYMO, IŠVENGIANT ATSITIKTINIO EGZOGENINĖS DNR ĮTRAUKIMO Į GENOMĄ, SUSIJUSĮ SU DABARTINIAIS CRISPR/CAS9 METODAIS. (Lithuanian)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA PROTEINI PROIZVODE RNA-RNA INTERFERENCIJU KOJA JE ODGOVORNA ZA GENSKO PRIGUŠIVANJE U EUKARIOTIMA, IAKO MNOGE ARHEJE I NEKE BAKTERIJE TAKOĐER KODIRAJU PROTEINE IZ OBITELJI ARGONAUT. THAGO PROTEIN IZ THERMUS THERMOPHILUS (HUMAN AGO2 PROTEIN HORMONA) PREDSTAVLJA NEOBIČNU SPOSOBNOST REZANJA DNK KOMPLEMENTARNE SSDNA VODIČIMA, ŠTO JE NOVI DNA-DNA INTERFERENCIJSKI SUSTAV. PRETHODNI PODACI LABORATORIJA KOJI SU PODNIJELI ZAHTJEV POKAZUJU DA THAGO DJELUJE KAO BARIJERA UROĐENOG IMUNITETA PROTIV EGZOGENE DNK, UČINKOVITO UNIŠTAVAJUĆI VEĆINU (90 %) MOLEKULA DNK KOJE ULAZE U STANICU TRANSFORMACIJOM, ALI BEZ DJELOVANJA NA ISTI DNK KADA SE PRENOSI IZ DRUGE BAKTERIJE ISTOG RODA, ŠTO UPUĆUJE NA TO DA AKTIVNOST THAGO-A PODLIJEŽE REGULACIJI U STANICI. S DRUGE STRANE, KAPACITET REZANJA KOJI VODI SSDNA THAGO PREDSTAVLJA SVOJSTVO IZVANREDNOG APLIKACIJSKOG POTENCIJALA U IZDANJU GENOMA, SLIČNOG U RADU, ALI S POTENCIJALNIM PREDNOSTIMA U ODNOSU NA SUSTAV CRISPR/CAS9. ZAPRAVO, U PROJEKTU KOJI JE ISTRAŽEN 2015. GODINE, PRIMIJETILI SMO DA JE PROLAZNI IZRAZ THAGO-A U TRANSFECTIRANIM RATONOVIM STANICAMA SA SPECIFIČNIM OLIGONUKLEOTIDIMA UZROKOVAO GAŠENJE U EKSPRESIJI GFP-A IZ PLASMAID-A. U PROJEKTU da je zatražio da namjeravamo PROFUND u MECHANISMS koji vam omogućuju da unesete DNK ADQUIRIED TRANSFORMACIJA ili TRANSFERIING drugih CELULS S FINANCIJSKE I OPTIMICIJE VAŠE FUNCTIONING HIS APPLICATION AS TOOL U EDITION of GENOMAS._x000D_ kao preliminarni korak u bilo kojem procesu otvorenosti PROTEIN, FIRST OBJEKTIVE PROPOSAL IZVJEŠĆE KONKONENTNOSTI I AKTIVNOSTI/deaktivacija mekanizama uključenih u odgovor DNK-DNA mjeren THAGO-om, rješavat će se kombinacijom biokemijskih, proteomskih i GENETIC tehnologija za identifikaciju kovalentnih modifikacija i interakcija s drugim potrebama za interferencijom. U DRUGOM CILJU, HOĆE LI UPOTREBA PROTEINA PLAĆENIH KAO ALATA ZA MODIFIKACIJU DNK-A BITI USMJERENA NA MODIFIKACIJU THAGO-A USMJERENA NA PODATKE DOBIVENE U PRVOM CILJU, KAO I NASUMIČNO, KROZ IN VITRO USMJERENU EVOLUCIJU. NAJUČINKOVITIJE VARIJANTE U TESTOVIMA REZANJA KOJE VODI GUIA KORISTIT ĆE SE IN VITRO U PROCESIMA MODIFIKACIJE DNK KAO PROGRAMABILNI RESTRIKCIJSKI ENZIM, TE ĆE SE IZRAVNO PRIMIJENITI IN VIVO ZA UREĐIVANJE GENOMA PROKARYOTA I EUKARIOTA. U SLUČAJU GENOMA EUKARIOTA DODAVANJEM NUKLEARNIH LOKACIJSKIH SIGNALA TIM POBOLJŠANIM VARIJANTAMA OMOGUĆIO BI SE IZRAVAN TRANSFECCION PROTEINA KOJI JE VEĆ POVEZAN S VODIČIMA SSDNA-E, ČIME BI SE IZBJEGAO RIZIK OD SLUČAJNOG UKLJUČIVANJA EGZOGENE DNK U GENOM POVEZAN S TRENUTAČNIM TEHNIKAMA CRISPR/CAS9. (Croatian)
    4 August 2022
    0 references
    ΟΙ ΠΡΩΤΕΪ́ΝΕΣ ARGONAUTA ΠΑΡΆΓΟΥΝ RNA-RNA ΠΑΡΕΜΒΟΛΈΣ ΠΟΥ ΕΥΘΎΝΟΝΤΑΙ ΓΙΑ ΤΗ ΣΙΓΑΣΤΉΡΑ ΤΟΥ ΓΟΝΙΚΟΎ ΣΤΟΥΣ ΕΥΚΑΡΥΏΤΕΣ, ΑΝ ΚΑΙ ΠΟΛΛΆ ΑΡΧΑΊΑ ΚΑΙ ΜΕΡΙΚΆ ΒΑΚΤΉΡΙΑ ΚΩΔΙΚΟΠΟΙΟΎΝ ΕΠΊΣΗΣ ΠΡΩΤΕΪ́ΝΕΣ ΑΠΌ ΤΗΝ ΟΙΚΟΓΈΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΡΓΟΝΑΥΤΏΝ. Η ΠΡΩΤΕΪ́ΝΗ THAGO ΑΠΌ ΤΟ THERMUS THERMOPHILUS (ΑΝΘΡΏΠΙΝΗ ΠΡΩΤΕΪΝΙΚΉ ΟΡΜΌΝΗ AGO2) ΠΑΡΟΥΣΙΆΖΕΙ ΤΗΝ ΑΣΥΝΉΘΙΣΤΗ ΙΚΑΝΌΤΗΤΑ ΚΟΠΉΣ DNA ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΆ ΠΡΟΣ ΤΟΥΣ ΟΔΗΓΟΎΣ SSDNA, ΤΟ ΟΠΟΊΟ ΕΊΝΑΙ ΈΝΑ ΝΈΟ ΣΎΣΤΗΜΑ ΠΑΡΕΜΒΟΛΏΝ DNA-DNA. ΠΡΟΗΓΟΎΜΕΝΑ ΣΤΟΙΧΕΊΑ ΑΠΌ ΤΟ ΑΙΤΟΎΝ ΕΡΓΑΣΤΉΡΙΟ ΔΕΊΧΝΟΥΝ ΌΤΙ ΤΟ THAGO ΔΡΑ ΩΣ ΦΡΑΓΜΌΣ ΈΜΦΥΤΗΣ ΑΝΟΣΊΑΣ ΈΝΑΝΤΙ ΤΟΥ ΕΞΩΓΕΝΟΎΣ DNA, ΚΑΤΑΣΤΡΈΦΟΝΤΑΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΆ ΤΑ ΠΕΡΙΣΣΌΤΕΡΑ (90 %) ΑΠΌ ΤΑ ΜΌΡΙΑ DNA ΠΟΥ ΕΙΣΈΡΧΟΝΤΑΙ ΣΤΟ ΚΎΤΤΑΡΟ ΜΕ ΜΕΤΑΣΧΗΜΑΤΙΣΜΌ, ΑΛΛΆ ΧΩΡΊΣ ΝΑ ΕΝΕΡΓΕΊ ΣΤΟ ΊΔΙΟ DNA ΌΤΑΝ ΜΕΤΑΦΈΡΕΤΑΙ ΑΠΌ ΆΛΛΟ ΒΑΚΤΉΡΙΟ ΤΟΥ ΊΔΙΟΥ ΓΈΝΟΥΣ, ΥΠΟΔΗΛΏΝΟΝΤΑΣ ΌΤΙ Η ΔΡΑΣΤΗΡΙΌΤΗΤΑ ΤΗΣ THAGO ΥΠΌΚΕΙΤΑΙ ΣΕ ΡΎΘΜΙΣΗ ΣΤΟ ΚΎΤΤΑΡΟ. ΑΠΌ ΤΗΝ ΆΛΛΗ ΠΛΕΥΡΆ, Η ΙΚΑΝΌΤΗΤΑ ΚΟΠΉΣ ΜΕ ΕΠΙΚΕΦΑΛΉΣ ΤΟ SSDNA ΤΗΣ THAGO ΑΠΟΤΕΛΕΊ ΙΔΙΌΤΗΤΑ ΕΞΑΙΡΕΤΙΚΉΣ ΔΥΝΑΤΌΤΗΤΑΣ ΕΦΑΡΜΟΓΉΣ ΣΤΗΝ ΈΚΔΟΣΗ ΓΟΝΙΔΙΏΜΑΤΟΣ, ΠΑΡΌΜΟΙΑ ΣΤΗ ΛΕΙΤΟΥΡΓΊΑ ΤΗΣ, ΑΛΛΆ ΜΕ ΔΥΝΗΤΙΚΆ ΠΛΕΟΝΕΚΤΉΜΑΤΑ ΣΕ ΣΧΈΣΗ ΜΕ ΤΟ ΣΎΣΤΗΜΑ CRISPR/CAS9. ΣΤΗΝ ΠΡΑΓΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑ, ΣΕ ΈΝΑ ΈΡΓΟ ΠΟΥ ΔΙΕΡΕΥΝΉΘΗΚΕ ΟΛΟΚΛΗΡΏΘΗΚΕ ΤΟ 2015 ΠΑΡΑΤΗΡΉΣΑΜΕ ΌΤΙ Η ΠΑΡΟΔΙΚΉ ΈΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥ THAGO ΣΕ ΔΙΑΜΟΛΥΣΜΈΝΑ ΚΎΤΤΑΡΑ RATON ΜΕ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΈΝΑ ΟΛΙΓΟΝΟΥΚΛΕΟΤΊΔΙΑ ΠΡΟΚΆΛΕΣΕ ΤΟ ΚΛΕΊΣΙΜΟ ΣΤΗΝ ΈΚΦΡΑΣΗ ΤΗΣ GFP ΑΠΌ ΈΝΑ PLASMAID. Στο ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ σκοπεύουμε να εμβαθύνουμε στα ΜΗΧΑΝΙΣΜΑΤΑ που σας επιτρέπουν να το θέσετε στη διάθεσή σας για να εισαγάγετε το DNA που σας έχει εγκριθεί από την TRANSFORMATION ή TRANSFERIING OF Other CELULS ΜΕ ΤΗΝ ΟΙΚΟΝΟΜΙΚΗ ΚΑΙ ΕΠΙΛΟΓΗ ΤΗΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ ΣΑΣ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΟΥ ΠΡΟΤΕΙΝΙΟΥ ΩΣ ΕΡΓΑΛΕΙΟ ΣΤΗΝ ΕΚΔΟΣΗ ΓΕΝΟΜΑΣ._x000D_ ως προκαταρκτικό βήμα για οποιαδήποτε διαδικασία ανοίγματος του ΠΡΩΤΕΙΝΟΥ, η ΠΡΩΤΗ ΣΤΟΧΙΚΗ ΠΡΟΤΑΤΙΚΗ ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΤΩΝ ΣΥΝΕΡΓΑΤΩΝ ΚΑΙ ΔΡΑΣΤΗΡΙΟΤΗΤΩΝ/ΜΗΚΑΝΙΣΜΟΙ απενεργοποίησης που περιλαμβάνονται στην απάντηση παρέμβασης DNA-DNA που μετρήθηκε από την THAGO, θα αντιμετωπιστεί μέσω ενός συνδυασμού βιοχημικών, προθεωματικών και ΓΕΝΕΤΙΚΩΝ τεχνολογιών για τον εντοπισμό ομοιοπολικών τροποποιήσεων και αλληλεπιδράσεων με άλλες ανάγκες παρέμβασης. ΣΤΟ ΠΛΑΊΣΙΟ ΤΟΥ ΔΕΎΤΕΡΟΥ ΣΤΌΧΟΥ, Η ΧΡΉΣΗ ΠΡΩΤΕΪΝΏΝ ΠΟΥ ΑΜΕΊΒΟΝΤΑΙ ΩΣ ΕΡΓΑΛΕΊΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΤΡΟΠΟΠΟΊΗΣΗ ΤΟΥ DNA ΘΑ ΑΝΤΙΜΕΤΩΠΙΣΤΕΊ ΜΕ ΤΗΝ ΤΡΟΠΟΠΟΊΗΣΗ ΤΟΥ THAGO ΕΣΤΙΑΣΜΈΝΗ ΣΤΑ ΔΕΔΟΜΈΝΑ ΠΟΥ ΛΑΜΒΆΝΟΝΤΑΙ ΣΤΟ ΠΛΑΊΣΙΟ ΤΟΥ ΠΡΏΤΟΥ ΣΤΌΧΟΥ, ΚΑΘΏΣ ΚΑΙ ΤΥΧΑΊΑ, ΜΈΣΩ IN VITRO ΚΑΤΕΥΘΥΝΌΜΕΝΗΣ ΕΞΈΛΙΞΗΣ. ΟΙ ΠΙΟ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΈΣ ΠΑΡΑΛΛΑΓΈΣ ΣΕ ΔΟΚΙΜΈΣ ΚΟΠΉΣ ΜΕ ΕΠΙΚΕΦΑΛΉΣ ΤΟΝ GUIA ΘΑ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΟΎΝ IN VITRO ΣΕ ΔΙΑΔΙΚΑΣΊΕΣ ΤΡΟΠΟΠΟΊΗΣΗΣ DNA ΩΣ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑΤΙΖΌΜΕΝΟ ΈΝΖΥΜΟ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΎ ΚΑΙ ΘΑ ΕΦΑΡΜΟΣΤΟΎΝ ΑΠΕΥΘΕΊΑΣ IN VIVO ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΠΕΞΕΡΓΑΣΊΑ ΓΟΝΙΔΙΩΜΆΤΩΝ ΠΡΟΚΑΡΥΏΤΩΝ ΚΑΙ ΕΥΚΑΡΥΏΤΩΝ. ΣΤΗΝ ΠΕΡΊΠΤΩΣΗ ΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΜΆΤΩΝ ΤΩΝ ΕΥΚΑΡΥΩΤΏΝ, Η ΠΡΟΣΘΉΚΗ ΣΗΜΆΤΩΝ ΠΥΡΗΝΙΚΉΣ ΘΈΣΗΣ ΣΕ ΑΥΤΈΣ ΤΙΣ ΒΕΛΤΙΩΜΈΝΕΣ ΠΑΡΑΛΛΑΓΈΣ ΘΑ ΕΠΈΤΡΕΠΕ ΤΗΝ ΆΜΕΣΗ ΜΕΤΑΦΟΡΑ ΤΗΣ ΠΡΩΤΕΪ́ΝΗΣ ΠΟΥ ΉΔΗ ΣΥΝΔΈΕΤΑΙ ΜΕ ΤΟΥΣ ΟΔΗΓΟΎΣ SSDNA, ΑΠΟΦΕΎΓΟΝΤΑΣ ΤΟΝ ΚΊΝΔΥΝΟ ΤΥΧΑΊΑΣ ΕΝΣΩΜΆΤΩΣΗΣ ΕΞΩΓΕΝΟΎΣ DNA ΣΤΟ ΓΟΝΙΔΊΩΜΑ ΠΟΥ ΣΥΝΔΈΕΤΑΙ ΜΕ ΤΙΣ ΤΡΈΧΟΥΣΕΣ ΤΕΧΝΙΚΈΣ CRISPR/CAS9. (Greek)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA PROTEÍNY PRODUKUJÚ RNA-RNA INTERFERENCIU, KTORÁ JE ZODPOVEDNÁ ZA GÉNOVÉ TLMENIE EUKARYOTOV, HOCI MNOHO ARCHEY A NIEKTORÉ BAKTÉRIE TIEŽ KÓDUJÚ PROTEÍNY Z RODINY ARGONAUTOV. THAGO PROTEÍN Z THERMUS THERMOPHILUS (ĽUDSKÝ PROTEÍNOVÝ HORMÓN AGO2) PREDSTAVUJE NEOBVYKLÚ SCHOPNOSŤ ZNÍŽIŤ DNA KOMPLEMENTÁRNE K SPRIEVODCOM SSDNA, ČO JE NOVÝ SYSTÉM INTERFERENCIE DNA-DNA. PREDCHÁDZAJÚCE ÚDAJE ZO ŽIADAJÚCEHO LABORATÓRIA UKAZUJÚ, ŽE THAGO PÔSOBÍ AKO BARIÉRA VRODENEJ IMUNITY PROTI EXOGÉNNEJ DNA A ÚČINNE NIČÍ VÄČŠINU (90 %) MOLEKÚL DNA, KTORÉ VSTUPUJÚ DO BUNKY TRANSFORMÁCIOU, ALE NEPÔSOBÍ NA TÚ ISTÚ DNA, KEĎ SA PRENÁŠA Z INEJ BAKTÉRIE ROVNAKÉHO RODU, ČO NAZNAČUJE, ŽE ČINNOSŤ THAGO PODLIEHA REGULÁCII V BUNKE. NA DRUHEJ STRANE REZNÁ KAPACITA VEDENÁ SPOLOČNOSŤOU SSDNA SPOLOČNOSTI THAGO PREDSTAVUJE VLASTNOSŤ MIMORIADNEHO APLIKAČNÉHO POTENCIÁLU V EDÍCII GENÓMU, PODOBNE AKO V JEJ PREVÁDZKE, ALE S POTENCIÁLNYMI VÝHODAMI V POROVNANÍ SO SYSTÉMOM CRISPR/CAS9. V SKUTOČNOSTI SME V PROJEKTE, KTORÝ BOL PRESKÚMANÝ V ROKU 2015, ZISTILI, ŽE PRECHODNÁ EXPRESIA THAGO V TRANSFEKTOVANÝCH RATONOVÝCH BUNKÁCH SO ŠPECIFICKÝMI OLIGONUKLEOTIDMI SPÔSOBILA ODSTAVENIE V EXPRESII GFP Z PLASMAID. V PROJEKTU, že máme v úmysle, aby sme sa v MECHANISMS, ktoré vám umožnia, aby bolo k dispozícii na zadanie DNA PODMIENKY PRÍSLUŠENSTVA alebo PREPRAVY iných CELULS s FINANCIÁLNYCH A OPTIMICIÁCIE VŠETKÝCH POŽIADAVKU AKOLIZÁCIE, ako predbežný krok k akémukoľvek procesu otvorenosti programu PROTEIN, PRVÝ OBJEKTÍVny PROPOSAL PROPOSAL IENTIFIKÁCIA SPOLOČNOSTÍ a ATIVITIČNÝCH/deaktivačných mekanizmov zahrnutých do odpovede na interferenciu DNA-DNA meranej spoločnosťou THAGO sa bude riešiť kombináciou biochemických, proteomických a GENETICKých technológií na identifikáciu kovalentných modifikácií a interakcií s inými potrebami interferencie. V DRUHOM CIELI, SA BUDE RIEŠIŤ POUŽITIE PROTEÍNOV PLATENÝCH AKO NÁSTROJE NA MODIFIKÁCIU DNA MODIFIKÁCIE THAGO ZAMERANÉ NA ÚDAJE ZÍSKANÉ V PRVOM CIELI, AKO AJ NÁHODNE, PROSTREDNÍCTVOM IN VITRO RIADENÉ EVOLÚCIE. NAJÚČINNEJŠIE VARIANTY V REZNÝCH TESTOCH VEDENÝCH GUIOU SA POUŽIJÚ IN VITRO V MODIFIKAČNÝCH PROCESOCH DNA AKO PROGRAMOVATEĽNÝ REŠTRIKČNÝ ENZÝM A POUŽIJÚ SA PRIAMO IN VIVO NA ÚPRAVU GENÓMOV PROKARYOTOV A EUKARYOTOV. V PRÍPADE GENÓMOV EUKARYOTOV BY PRIDANIE SIGNÁLOV JADROVEJ POLOHY K TÝMTO VYLEPŠENÝM VARIANTOM UMOŽNILO PRIAME TRANSFECCION PROTEÍNU, KTORÝ JE UŽ SPOJENÝ S PRÍRUČKAMI SSDNA, ČÍM BY SA ZABRÁNILO RIZIKU NÁHODNÉHO ZAČLENENIA EXOGÉNNEJ DNA DO GENÓMU SPOJENÉHO SO SÚČASNÝMI TECHNIKAMI CRISPR/CAS9. (Slovak)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA-PROTEIINIT TUOTTAVAT RNA-RNA-HÄIRIÖITÄ, JOTKA AIHEUTTAVAT EUKARYOOTTIEN GENEETTISTÄ ÄÄNENVAIMENNUSTA, VAIKKA MONET ARKEAT JA JOTKUT BAKTEERIT KOODAAVAT MYÖS ARGONAUT-PERHEEN PROTEIINEJA. THERMUS THERMOPHILUS -PROTEIINISTA (IHMISEN AGO2-PROTEIINIHORMONI) SAATAVA THAGO-PROTEIINI TARJOAA EPÄTAVALLISEN KYVYN LEIKATA DNA:TA, JOKA TÄYDENTÄÄ SSDNA-OPPAITA, JOKA ON UUSI DNA-DNA-HÄIRIÖJÄRJESTELMÄ. PYYNNÖN ESITTÄNEESTÄ LABORATORIOSTA SAADUT AIEMMAT TIEDOT OSOITTAVAT, ETTÄ THAGO TOIMII SYNNYNNÄISEN IMMUNITEETIN ESTEENÄ EKSOGEENISTA DNA:TA VASTAAN, JA SE TUHOAA TEHOKKAASTI SUURIMMAN OSAN (90 PROSENTTIA) DNA-MOLEKYYLISTÄ, JOTKA TULEVAT SOLUUN MUUNTAMALLA, MUTTA VAIKUTTAMATTA SAMAAN DNA:HAN, KUN SE SIIRRETÄÄN TOISESTA SAMAN SUVUN BAKTEERISTA, MIKÄ VIITTAA SIIHEN, ETTÄ THAGO:N TOIMINTAA SÄÄNNELLÄÄN SOLUSSA. TOISAALTA SSDNA:N THAGO:N JOHTAMA LEIKKUUKAPASITEETTI MUODOSTAA OMINAISUUDEN, JOLLA ON POIKKEUKSELLISTA KÄYTTÖPOTENTIAALIA GENOMIN PAINOKSESSA, SAMALLA TAVOIN KUIN SEN TOIMINNASSA, MUTTA SILLÄ ON MAHDOLLISIA ETUJA CRISPR/CAS9-JÄRJESTELMÄÄN VERRATTUNA. VUONNA 2015 VALMISTUNEESSA HANKKEESSA HAVAITSIMME, ETTÄ THAGO:N OHIMENEVÄ ILMENTYMÄ TRANSFEKTOITUNEISSA RATON-SOLUISSA ERITYISILLÄ OLIGONUKLEOTIDEILLA JOHTI PLASMAIDIN GFP-ILMAISUUN. TÄMÄN TÄMÄN TIEDOT Aiomme käsitellä MECHANISMS: ssä, joiden avulla voit asettaa sen sinun saatavillesi, jotta voit syöttää DNA:n, joka on TRANSFORMATION tai TRANSFERIING Muiden CELULIStien, joilla on RAHOITUS JA OPTIMITION RAHOITUS JA OPTIMITION TUOTTEIDEN RAHOITUKSEN JA VAHVISTUKSEN RAHOITUKSEN JA VAIKUTUKSEN RAHOITUKSEN, joiden avulla voit antaa sen GENOMAS._x000D_: ssä, joka on ensimmäinen askel mihin tahansa Proteiinien avoimuuteen, THAGOn mittaamaan DNA-DNA-interferenssivastausanturiin sisältyvään DNA-DNA-interferenssivastausvastaukseen sisältyvään ensimmäiseen tavoitteeseen, jota käsitellään yhdistelmällä biokemiallisia, proteeseja ja GENETIC-tekniikoita, pyritään tunnistamaan kovalenttiset muutokset ja vuorovaikutukset muiden häiriöiden tarpeellisuuden tunnistamiseksi. TOISESSA TAVOITTEESSA KÄSITELLÄÄNKÖ DNA:N MUUNTAMISEN VÄLINEINÄ MAKSETTUJEN PROTEIINIEN KÄYTTÖÄ THAGO:N MUUTTAMISEEN KESKITTYEN ENSIMMÄISESSÄ TAVOITTEESSA SAATUIHIN TIETOIHIN SEKÄ SATUNNAISESTI IN VITRO -SUUNTAUTUNEEN EVOLUUTION AVULLA. TEHOKKAIMPIA MUUNNELMIA GUIAN OHJAAMISSA LEIKKAUSTESTEISSÄ KÄYTETÄÄN IN VITRO DNA-MUUNNOSPROSESSEISSA OHJELMOITAVANA RAJOITUSENTSYYMINÄ, JA NIITÄ KÄYTETÄÄN SUORAAN IN VIVO PROKARYOOTTIEN JA EUKARYOOTTIEN GENOMIEN MUOKKAAMISEEN. EUKARYOOTTIEN GENOMIEN TAPAUKSESSA YDINALUEEN SIJAINTISIGNAALIEN LISÄÄMINEN NÄIHIN PARANNETUIHIN MUUNNELMIIN MAHDOLLISTAISI SSDNA-OHJEISIIN JO LIITTYVÄN PROTEIININ SUORAN TRANSFECCIONIN JA VÄLTTÄISI SEN RISKIN, ETTÄ EKSOGEENINEN DNA LIITETÄÄN VAHINGOSSA NYKYISIIN CRISPR/CAS9-TEKNIIKOIHIN LIITTYVÄÄN GENOMIIN. (Finnish)
    4 August 2022
    0 references
    BIAŁKA ARGONAUTA WYTWARZAJĄ ZAKŁÓCENIA RNA-RNA ODPOWIEDZIALNE ZA WYCISZANIE GENÓW W EUKARIOTACH, CHOCIAŻ WIELE ARCHEI I NIEKTÓRYCH BAKTERII KODUJE RÓWNIEŻ BIAŁKA Z RODZINY ARGONAUTÓW. BIAŁKO THAGO Z THERMUS THERMOPHILUS (LUDZKIEGO HORMONU BIAŁKOWEGO AGO2) PREZENTUJE NIEZWYKŁĄ ZDOLNOŚĆ DO CIĘCIA DNA UZUPEŁNIAJĄCEGO PRZEWODNIKI SSDNA, KTÓRY JEST NOWATORSKIM SYSTEMEM INTERFERENCJI DNA-DNA. POPRZEDNIE DANE Z LABORATORIUM WNIOSKUJĄCEGO WSKAZUJĄ, ŻE THAGO DZIAŁA JAKO BARIERA WRODZONEJ ODPORNOŚCI NA EGZOGENNE DNA, SKUTECZNIE NISZCZĄC WIĘKSZOŚĆ (90 %) CZĄSTECZEK DNA, KTÓRE WCHODZĄ DO KOMÓRKI PRZEZ TRANSFORMACJĘ, ALE NIE DZIAŁAJĄC NA TO SAMO DNA, GDY JEST PRZENOSZONA Z INNEJ BAKTERII TEGO SAMEGO RODZAJU, CO SUGERUJE, ŻE AKTYWNOŚĆ THAGO PODLEGA REGULACJI W KOMÓRCE. Z DRUGIEJ STRONY, ZDOLNOŚĆ CIĘCIA PROWADZONA PRZEZ SSDNA FIRMY THAGO STANOWI WŁASNOŚĆ NIEZWYKŁEGO POTENCJAŁU APLIKACYJNEGO W EDYCJI GENOMU, PODOBNIE JAK W JEGO DZIAŁANIU, ALE Z POTENCJALNYMI ZALETAMI NAD SYSTEMEM CRISPR/CAS9. W RZECZYWISTOŚCI W RAMACH BADANEGO PROJEKTU ZAKOŃCZONEGO W 2015 R. ZAOBSERWOWALIŚMY, ŻE PRZEJŚCIOWA EKSPRESJA THAGO W TRANSFEKOWANYCH KOMÓRKACH RATONA Z OKREŚLONYMI OLIGONUKLEOTYDAMI SPOWODOWAŁA ZAMKNIĘCIE W EKSPRESJI GFP Z PLASMAIDU. W PROJEKTU ŻYCIA ŻYWNOŚCI mamy zamiar PROFUNDOWAĆ w MECHANISMS, które pozwalają Ci na wprowadzenie DNA ADQUIRIED przez TRANSFORMATION lub TRANSFERIING innych CELUALÓW z FINANCIAL I OPTYMICJI TWOJEGO FUNKCJANIE JEGO APLIKACJI AS TOOL W EDYCJI GENOMAS._x000D_ jako wstępny krok do każdego procesu otwartości PROTEINU, pierwszy OBJECTIVE PROPOSAL PROPOSAL IENTIFICATION OF COMPONENTS AND ACTIVITIES/dezaktywacja mekanizmów zawartych w odpowiedzi DNA-DNA Interference Answer Measureed by THAGO, zostanie ona rozwiązana za pomocą kombinacji technologii biochemicznych, proteomicznych i GENETIC w celu identyfikacji modyfikacji kowalencyjnych i interakcji z innymi potrzebami dla zakłóceń. W DRUGIM CELU, WYKORZYSTANIE BIAŁEK PŁATNYCH JAKO NARZĘDZIA DO MODYFIKACJI DNA ZOSTANĄ UWZGLĘDNIONE MODYFIKACJĘ THAGO KONCENTRUJE SIĘ NA DANYCH UZYSKANYCH W PIERWSZYM CELU, A TAKŻE LOSOWO, POPRZEZ IN VITRO UKIERUNKOWANĄ EWOLUCJĘ. NAJBARDZIEJ EFEKTYWNE WARIANTY W TESTACH CIĘCIA PROWADZONYCH PRZEZ GUIA BĘDĄ STOSOWANE IN VITRO W PROCESACH MODYFIKACJI DNA JAKO PROGRAMOWALNY ENZYM OGRANICZAJĄCY I BĘDĄ STOSOWANE BEZPOŚREDNIO IN VIVO DO EDYCJI GENOMÓW PROKARIOTÓW I EUKARIOTÓW. W PRZYPADKU GENOMÓW EUKARIOTÓW DODANIE DO TYCH ULEPSZONYCH WARIANTÓW SYGNAŁÓW LOKALIZACJI JĄDROWEJ POZWOLIŁOBY NA BEZPOŚREDNIĄ TRANSFECCJĘ BIAŁKA JUŻ ZWIĄZANEGO Z PRZEWODNIKAMI SSDNA, UNIKAJĄC RYZYKA PRZYPADKOWEGO WŁĄCZENIA EGZOGENNEGO DNA DO GENOMU ZWIĄZANEGO Z OBECNYMI TECHNIKAMI CRISPR/CAS9. (Polish)
    4 August 2022
    0 references
    AZ ARGONAUTA FEHÉRJÉK RNS-RNS INTERFERENCIÁT TERMELNEK, AMELY AZ EUKARIÓTÁKBAN A GÉN HANGTOMPÍTÁSÉRT FELELŐS, BÁR SOK ARCHAEA ÉS NÉHÁNY BAKTÉRIUM AZ ARGONAUT CSALÁDBÓL SZÁRMAZÓ FEHÉRJÉKET IS KÓDOL. A THERMUS THERMOPHILUSBÓL SZÁRMAZÓ THAGO FEHÉRJE (HUMÁN AGO2 FEHÉRJEHORMON) AZT A SZOKATLAN KÉPESSÉGET MUTATJA, HOGY AZ SSDNS ÚTMUTATÓKAT KIEGÉSZÍTŐ DNS-T VÁGJA, AMI EGY ÚJ DNS-DNS INTERFERENCIA RENDSZER. A KÉRELMEZŐ LABORATÓRIUM KORÁBBI ADATAI AZT MUTATJÁK, HOGY A THAGO AZ EXOGÉN DNS-SEL SZEMBENI VELESZÜLETETT IMMUNITÁS GÁTJAKÉNT MŰKÖDIK, HATÉKONYAN ELPUSZTÍTVA A SEJTBE TRANSZFORMÁCIÓVAL BELÉPŐ DNS-MOLEKULÁK TÖBBSÉGÉT (90%) ANÉLKÜL, HOGY UGYANARRA A DNS-RE HATNA, AMIKOR AZ UGYANAZON NEMZETSÉGBE TARTOZÓ MÁSIK BAKTÉRIUMBÓL KERÜL ÁTVITELRE, AMI ARRA UTAL, HOGY A THAGO AKTIVITÁSA A SEJTBEN A RENDELET HATÁLYA ALÁ TARTOZIK. MÁSRÉSZT A THAGO SSDNA-JA ÁLTAL VEZETETT VÁGÁSI KAPACITÁS A GENOM KIADÁSÁBAN RENDKÍVÜLI ALKALMAZÁSI POTENCIÁLT KÉPVISEL, HASONLÓAN A MŰKÖDÉSÉHEZ, DE POTENCIÁLIS ELŐNYÖKKEL RENDELKEZIK A CRISPR/CAS9 RENDSZERREL SZEMBEN. VALÓJÁBAN EGY 2015-BEN BEFEJEZETT PROJEKTBEN MEGJEGYEZTÜK, HOGY A THAGO ÁTMENETI KIFEJEZŐDÉSE TRANSZFERTÁLT RATON SEJTEKBEN SPECIFIKUS OLIGONUKLEOTIDOKKAL, A PLASMAID GFP KIFEJEZÉSÉBEN A LEÁLLÍTÁST EREDMÉNYEZTE. A PROJEKT azt kérte, hogy szándékunkban áll, hogy a MECHANISMS, amely lehetővé teszi, hogy elérhetővé tegye az Ön számára, hogy adja meg a DNS ADQUIRIED TRANSFORMATION vagy TRANSFERIING of Egyéb CELULS A PÉNZÜGYI ÉS OPTIMICIÁLÁSA A GENOMAS EDITIONA._x000D_, mint az előzetes lépés bármely folyamat nyitottságát a PROTEIN, a THAGO által mért, a DNS-DNS interferencia válaszában szereplő, az összetevők és a hatástalanító mecanizmusok/deaktivációs mecanizmusok első OBJECTÁLIS PROPOSÁLIS ELŐZETES ELŐZETES ELJÁRÁSA a biokémiai, proteomikus és GENETIC technológiák kombinációjával kerül kezelésre a kovalens módosítások és az interferencia egyéb szükségleteivel való kölcsönhatások azonosítására szolgáló biokémiai, proteomikus és GENETIC technológiák kombinációjával. A MÁSODIK CÉLKITŰZÉS KERETÉBEN A DNS-MÓDOSÍTÁS ESZKÖZEKÉNT FIZETETT FEHÉRJÉK HASZNÁLATÁT KEZELNI FOGJÁK A THAGO-NAK AZ ELSŐ CÉLKITŰZÉS KERETÉBEN NYERT ADATOKRA ÖSSZPONTOSÍTÓ, VALAMINT VÉLETLENSZERŰEN, IN VITRO IRÁNYÍTOTT EVOLÚCIÓ RÉVÉN TÖRTÉNŐ MÓDOSÍTÁSÁRA. A GUIA ÁLTAL VEZETETT VÁGÁSI VIZSGÁLATOK LEGHATÉKONYABB VÁLTOZATAIT A DNS-MÓDOSÍTÁSI FOLYAMATOKBAN IN VITRO HASZNÁLJÁK PROGRAMOZHATÓ KORLÁTOZÓ ENZIMKÉNT, ÉS KÖZVETLENÜL IN VIVO ALKALMAZZÁK A PROKARIÓTÁK ÉS AZ EUKARIÓTÁK GENOMJAINAK SZERKESZTÉSÉRE. AZ EUKARIÓTÁK GENOMJAI ESETÉBEN A NUKLEÁRIS HELYJELEK E TOVÁBBFEJLESZTETT VÁLTOZATOKHOZ VALÓ HOZZÁADÁSA LEHETŐVÉ TENNÉ AZ SSDNS ÚTMUTATÓKHOZ MÁR KAPCSOLÓDÓ FEHÉRJE KÖZVETLEN TRANSFECCION-JÁT, ELKERÜLVE ANNAK KOCKÁZATÁT, HOGY AZ EXOGÉN DNS VÉLETLENÜL BEKERÜLJÖN A JELENLEGI CRISPR/CAS9 TECHNIKÁKHOZ KAPCSOLÓDÓ GENOMBA. (Hungarian)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA PROTEINY PRODUKUJÍ RNA-RNA INTERFERENCE ZODPOVĚDNÝ ZA GENOVÉ UMLČOVÁNÍ EUKARYOTŮ, I KDYŽ MNOHO ARCHAEA A NĚKTERÉ BAKTERIE TAKÉ KÓDOVAT PROTEINY Z RODINY ARGONAUT. PROTEIN THAGO Z THERMUS THERMOPHILUS (LIDSKÝ PROTEINOVÝ HORMON AGO2) PŘEDSTAVUJE NEOBVYKLOU SCHOPNOST ŘEZAT DNA JAKO DOPLNĚK K VODÍTKU SSDNA, COŽ JE NOVÝ SYSTÉM RUŠENÍ DNA-DNA. PŘEDCHOZÍ ÚDAJE Z ŽÁDAJÍCÍ LABORATOŘE UKAZUJÍ, ŽE THAGO PŮSOBÍ JAKO BARIÉRA VROZENÉ IMUNITY PROTI EXOGENNÍ DNA, KTERÁ ÚČINNĚ NIČÍ VĚTŠINU (90 %) MOLEKUL DNA, KTERÉ VSTUPUJÍ DO BUŇKY TRANSFORMACÍ, ALE ANIŽ BY JEDNALA NA STEJNÉ DNA, KDYŽ JE PŘENESENA Z JINÉ BAKTERIE STEJNÉHO RODU, COŽ NAZNAČUJE, ŽE AKTIVITA THAGO JE V BUŇCE PŘEDMĚTEM REGULACE. NA DRUHÉ STRANĚ ŘEZNÁ KAPACITA VEDENÁ SSDNA THAGO PŘEDSTAVUJE VLASTNOST MIMOŘÁDNÉHO APLIKAČNÍHO POTENCIÁLU V EDICI GENOMU, PODOBNĚ JAKO V JEHO PROVOZU, ALE S POTENCIÁLNÍMI VÝHODAMI OPROTI SYSTÉMU CRISPR/CAS9. VE SKUTEČNOSTI V PROJEKTU, KTERÝ BYL DOKONČEN V ROCE 2015, JSME ZJISTILI, ŽE PŘECHODNÁ EXPRESE THAGO V TRANSFEKTOVANÝCH BUŇKÁCH RATON SE SPECIFICKÝMI OLIGONUKLEOTIDY ZPŮSOBILA VYPNUTÍ VE VYJÁDŘENÍ GFP Z PLASMAIDU. V PROJEKTU, že je požadováno, že máme v úmyslu PROFUND v MECHANISMS, které vám umožní, aby vám ji k dispozici pro zadání DNA ADQUIRIED prostřednictvím TRANSFORMATION nebo TRANSFERIATION of other CELULS S FINANCIAL A OPTIMITION OF YOUR FUNCTIONING OF HIS APLICATION AS TOOL IN THE OF OF GENOMAS._x000D_ jako předběžný krok k jakémukoli procesu otevřenosti PROTEIN, první OBJECTIVE PROPOSAL PROPOSAL IENTIFICATION of COMPONENTS AND ACTIVITIES/deaktivace mekanismů zahrnutých do odpovědi na interference DNA-DNA změřené THAGO, bude řešen pomocí kombinace biochemických, proteomických a GENETIC technologií pro identifikaci kovalentních modifikací a interakcí s jinými nezbytnými pro interference. VE DRUHÉM CÍLI BUDE POUŽÍVÁNÍ BÍLKOVIN PLACENÝCH JAKO NÁSTROJŮ PRO MODIFIKACI DNA ŘEŠENO ÚPRAVOU THAGO ZAMĚŘENOU NA ÚDAJE ZÍSKANÉ V RÁMCI PRVNÍHO CÍLE, JAKOŽ I NÁHODNĚ PROSTŘEDNICTVÍM IN VITRO ŘÍZENÉ EVOLUCE. NEJÚČINNĚJŠÍ VARIANTY ŘEZNÝCH TESTŮ VEDENÝCH GUOU BUDOU POUŽITY IN VITRO V PROCESECH MODIFIKACE DNA JAKO PROGRAMOVATELNÝ OMEZUJÍCÍ ENZYM A APLIKOVÁNY PŘÍMO IN VIVO PRO EDITACI GENOMŮ PROKARYOTŮ A EUKARYOTŮ. V PŘÍPADĚ GENOMŮ EUKARYOTŮ BY PŘIDÁNÍ SIGNÁLŮ JADERNÉ POLOHY K TĚMTO VYLEPŠENÝM VARIANTÁM UMOŽNILO PŘÍMÉ TRANSFECCION PROTEINU, KTERÝ JIŽ SOUVISÍ S POKYNY SSDNA, ČÍMŽ BY SE ZABRÁNILO RIZIKU NÁHODNÉHO ZAČLENĚNÍ EXOGENNÍ DNA DO GENOMU SPOJENÉHO SE STÁVAJÍCÍMI TECHNIKAMI CRISPR/CAS9. (Czech)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA PROTEĪNI RADA RNS-RNS TRAUCĒJUMUS, KAS IR ATBILDĪGI PAR EUKARYOTES GENIC SILENCING, LAI GAN DAUDZI ARHEJA UN DAŽAS BAKTĒRIJAS ARĪ KODĒ PROTEĪNUS NO ARGONAUT ĢIMENES. THERMUS THERMOPHILUS (CILVĒKA AGO2 PROTEĪNA HORMONA) THAGO PROTEĪNS UZRĀDA NEPARASTU SPĒJU IZGRIEZT DNS PAPILDUS SSDNS VADOTNĒM, KAS IR JAUNA DNS-DNS TRAUCĒJUMU SISTĒMA. PIEPRASĪJUMA IESNIEDZĒJAS LABORATORIJAS IEPRIEKŠĒJIE DATI LIECINA, KA THAGO DARBOJAS KĀ IEDZIMTAS IMUNITĀTES BARJERA PRET EKSOGĒNU DNS, EFEKTĪVI IZNĪCINOT LIELĀKO DAĻU (90 %) DNS MOLEKULU, KAS NONĀK ŠŪNĀ TRANSFORMĀCIJAS CEĻĀ, BET NEDARBOJOTIES UZ TO PAŠU DNS, KAD TO PĀRNES NO CITAS TĀS PAŠAS ĢINTS BAKTĒRIJAS, KAS LIECINA, KA THAGO’S AKTIVITĀTE ŠŪNĀ IR PAKĻAUTA REGULAI. NO OTRAS PUSES, GRIEŠANAS JAUDA, KO VADA THAGO SSDNA, IR NEPARASTA PIELIETOJUMA POTENCIĀLA ĪPAŠĪBA GENOMA IZDEVUMĀ, KAS IR LĪDZĪGS TĀ DARBĪBAI, BET KAM IR POTENCIĀLAS PRIEKŠROCĪBAS SALĪDZINĀJUMĀ AR CRISPR/CAS9 SISTĒMU. FAKTISKI 2015. GADĀ PABEIGTĀ PROJEKTĀ MĒS KONSTATĒJĀM, KA THAGO PĀREJOŠĀ EKSPRESIJA RATONA ŠŪNĀS AR SPECIFISKIEM OLIGONUKLEOTĪDIEM IZRAISĪJA SLĒGŠANU, IZSAKOT GFP NO PLASMAID. In PROJEKTS, ka mēs lūdzām, lai mēs plānojam PROFUND MECHANISMS, kas ļauj jums, lai tā būtu pieejama, lai ievadītu DNS ADQUIRIED ar TRANSFORMĀCIJAS vai TRANSFERIING citu CELULS ar FINANŠU UN OPTIMITION OF HIS APPLICATION AS TOOLING GENOMAS EDITION._x000D_ kā sākotnējo soli uz jebkuru procesu atklātības PROTEIN, pirmā OBJECTIVE PROPOSAL PROPOSAL IENTIFIKĀCIJA COMPONENTS UN ACTIVITIES/deaktivizēšanas mekānisms, kas iekļauti DNS-DNS traucējumu atbildē, ko mēra ar THAGO, tiks risināta, apvienojot bioķīmiskās, protoomikas un GENETIC tehnoloģijas kovalento modifikāciju un mijiedarbības noteikšanai ar citām iejaukšanās vajadzībām. OTRAJĀ MĒRĶĪ TIKS RISINĀTS JAUTĀJUMS PAR TO, KĀ IZMANTOT APMAKSĀTĀS OLBALTUMVIELAS KĀ DNS MODIFIKĀCIJAS RĪKUS, JO THAGO MODIFIKĀCIJA IR VĒRSTA UZ DATIEM, KAS IEGŪTI PIRMAJĀ MĒRĶĪ, KĀ ARĪ NEJAUŠI, IZMANTOJOT IN VITRO VIRZĪTU ATTĪSTĪBU. VISEFEKTĪVĀKIE VARIANTI GRIEŠANAS TESTOS, KO VADA GUIA, TIKS IZMANTOTI IN VITRO DNS MODIFIKĀCIJAS PROCESOS KĀ PROGRAMMĒJAMS IEROBEŽOŠANAS ENZĪMS, UN TOS IZMANTOS TIEŠI IN VIVO PROKARRIOTU UN EIKARIOTU GENOMU REDIĢĒŠANAI. EIKARIOTU GENOMU GADĪJUMĀ KODOLA ATRAŠANĀS VIETAS SIGNĀLU PIEVIENOŠANA ŠIEM UZLABOTAJIEM VARIANTIEM ĻAUTU TIEŠI TRANSFECCION IZMANTOT PROTEĪNU, KAS JAU IR SAISTĪTS AR SSDNS VADOTNĒM, IZVAIROTIES NO RISKA, KA EKSOGĒNĀ DNS NEJAUŠI IEKĻŪST GENOMĀ, KAS SAISTĪTS AR PAŠREIZĒJĀM CRISPR/CAS9 METODĒM. (Latvian)
    4 August 2022
    0 references
    TÁIRGEANN PRÓITÉINÍ ARGONAUTA TRASNAÍOCHT RNA-RNA ATÁ FREAGRACH AS TOSTA GÉINEACH IN EUKARYOTES, CÉ GO N-IONCHÓDAÍONN GO LEOR ARCHAEA AGUS ROINNT BAICTÉIR PRÓITÉINÍ Ó THEAGHLACH ARGONAUT FREISIN. CUIREANN AN PRÓITÉIN THAGO Ó THERMUS THERMOPHILUS (DAONNA AGO2 HORMONE PRÓITÉIN) AN CUMAS NEAMHGHNÁCH A GHEARRADH DNA COMHLÁNTACH LE TREORACHA SSDNA, A BHFUIL CÓRAS TRASNAÍOCHT DNA-DNA NÚÍOSACH. LÉIRÍONN SONRAÍ ROIMHE SEO ÓN TSAOTHARLANN IARRTHACH GO NGNÍOMHAÍONN THAGO MAR BHAC AR DHÍOLÚINE DHÚCHASACH I GCOINNE DNA EISGINIÚIL, AG SCRIOSADH GO HÉIFEACHTACH AN CHUID IS MÓ (90 %) DE NA MÓILÍNÍ DNA A THÉANN ISTEACH SA CHILL TRÍ CHLAOCHLÚ, ACH GAN GNÍOMHÚ AR AN DNA CÉANNA NUAIR A AISTRÍTEAR É Ó BHAICTÉAR EILE DEN GHÉINEAS CÉANNA, RUD A THUGANN LE FIOS GO BHFUIL GNÍOMHAÍOCHT THAGO’S FAOI RÉIR RIALACHÁIN SA CHILL. AR AN TAOBH EILE, IS MAOIN Í AN ACMHAINN GHEARRTHA ATÁ FAOI STIÚIR SSDNA THAGO A D’FHÉADFADH CUR I BHFEIDHM URGHNÁCH A BHEITH ANN IN EAGRÁN GÉANÓMACH, ATÁ COSÚIL LENA OIBRIÚ ACH A BHFÉADFADH BUNTÁISTÍ A BHEITH LEIS THAR CHÓRAS CRISPR/CAS9. GO DEIMHIN, I DTIONSCADAL A NDEARNADH INIÚCHADH AIR IN 2015, THUGAMAR FAOI DEARA GUR CHRUTHAIGH LÉIRIÚ NEAMHBHUAN THAGO I GCEALLA RATON TRANSFECTED LE OLIGONUCLEOTIDES SONRACHA AN MÚCHADH I LÉIRIÚ GFP Ó PLASMAID. Sa PRIOECT GO bhfuil sé i gceist againn cómhaoiniú a dhéanamh sna MECHANISMS a ligeann duit é a chur ar fáil duit chun DNA a chur isteach a thig as faisnéis nó aistriú CELULS eile le haghaidh AIRGEADH AGUS FÉIDIR DO DHÉANAMH IARRATAS IARRATAS MAIDIR LE TOOL IN EDITION OF GENOMAS._x000D_ mar réamhchéim d’aon phróiseas oscailteachta an GENOMAS._x000D_ mar réamhchéim le haon phróiseas oscailteachta an PROTEIN, an CHÉAD OBJECTIVE PROPOSAL Ientification of COMPONENTS AND ACTIVITIES/deactivation mecanisms atá san áireamh sa Freagra Trasnaíochta DNA-DNA Tomhaiste ag THAGO, tabharfar aghaidh air trí mheascán de theicneolaíochtaí bithcheimiceacha, próitéamaíocha agus GENETIC chun modhnuithe agus idirghníomhaíochtaí comhfhiúsacha le riachtanais eile cur isteach a shainaithint. SA DARA CUSPÓIR, AN DTABHARFAR AGHAIDH AR ÚSÁID PRÓITÉINÍ A ÍOCTAR MAR UIRLISÍ LE HAGHAIDH MODHNÚ DNA AR MHODHNÚ THAGO DÍRITHE AR NA SONRAÍ A FHAIGHTEAR SA CHÉAD CHUSPÓIR, CHOMH MAITH LE GO RANDAMACH, TRÍ ÉABHLÓID ATÁ DÍRITHE AR IN VITRO. ÚSÁIDFEAR NA LEAGANACHA IS ÉIFEACHTAÍ I DTÁSTÁLACHA GEARRTHA FAOI STIÚIR GUIA IN VITRO I BPRÓISIS MHODHNAITHE DNA MAR EINSÍM SRIANTA IN-RÍOMHCHLÁRAITHE, AGUS CUIRFEAR I BHFEIDHM IAD GO DÍREACH IN VIVO CHUN GÉINEAM PROKARYOTES AGUS EUKARYOTES A CHUR IN EAGAR. I GCÁS GHÉANÓIM EUKARYOTES, TRÍ CHOMHARTHAÍ SUÍMH NÚICLÉICHE A CHUR LEIS NA HATHRAITHIGH FHEABHSAITHE SIN, D’FHÉADFAÍ TRANSFECCION DÍREACH DEN PHRÓITÉIN ATÁ NASCTHA CHEANA LE TREORACHA SSDNA A SHEACHAINT, RUD A SHEACHNÓDH AN BAOL GO NDÉANFAÍ DNA EISGINIÚIL A IONCHORPRÚ DE THAISME SA GHÉANÓM A BHAINEANN LEIS NA TEICNÍCÍ CRISPR/CAS9 ATÁ ANN FAOI LÁTHAIR. (Irish)
    4 August 2022
    0 references
    PROTEINI ARGONAUTA POVZROČAJO MOTNJE RNA-RNA, KI SO ODGOVORNE ZA GENSKO UTIŠANJE V EVKARIONTIH, ČEPRAV ŠTEVILNE ARHEJE IN NEKATERE BAKTERIJE KODIRAJO TUDI BELJAKOVINE IZ DRUŽINE ARGONAUT. PROTEIN THAGO IZ THERMUS THERMOPHILUS (ČLOVEŠKEGA PROTEINSKEGA HORMONA AGO2) PREDSTAVLJA NENAVADNO SPOSOBNOST REZANJA DNK, KI DOPOLNJUJE SSDNA VODNIKE, KAR JE NOV SISTEM MOTENJ DNA-DNK. PREJŠNJI PODATKI IZ LABORATORIJA, KI JE PREDLOŽIL ZAHTEVO, KAŽEJO, DA THAGO DELUJE KOT PREGRADA PRIROJENE IMUNOSTI PROTI EKSOGENI DNK IN UČINKOVITO UNIČI VEČINO (90 %) MOLEKUL DNK, KI VSTOPIJO V CELICO S TRANSFORMACIJO, VENDAR NE DELUJE NA ISTO DNK, KO SE PRENESE IZ DRUGE BAKTERIJE ISTEGA RODU, KAR KAŽE, DA JE AKTIVNOST THAGO-JA PREDMET UREDBE V CELICI. PO DRUGI STRANI JE ZMOGLJIVOST REZANJA, KI JO VODI DRUŽBA SSDNA PODJETJA THAGO, LASTNOST IZREDNEGA POTENCIALA ZA UPORABO V GENOMSKI IZDAJI, KI JE PODOBNA NJENEMU DELOVANJU, VENDAR IMA POTENCIALNE PREDNOSTI PRED SISTEMOM CRISPR/CAS9. V PROJEKTU, KI JE BIL ZAKLJUČEN LETA 2015, SMO UGOTOVILI, DA JE PREHODNA EKSPRESIJA THAGO V TRANSFEKTIRANIH CELICAH RATON S SPECIFIČNIMI OLIGONUKLEOTIDI POVZROČILA ZAUSTAVITEV IZRAŽANJA GFP IZ PLASMAID-A. V PROJEKTU, da smo zahtevali, da nameravamo v MEHANISMS, ki vam omogočajo, da ga dajo na voljo za vnos DNA, ADQUIRIED s TRANSFORMACIJE ali TRANSFERIING drugih CELULS z FINANCIALNO IN OPOMITEV vaše FUNCTIONING HIS APPLICATION AS TOOL V EDITION GENOMAS._x000D_ kot predhodni korak k vsakemu procesu odprtosti PROTEIN, FIRST OBJEKTIVE PROPOSALNE PROPOSALNE IENTIFIKACIJE Komponentov in aktivacij/deaktivacijskih mekanizmov, vključenih v odgovor na motnje DNA-DNA, ki ga izmeri THAGO, bo obravnavano s kombinacijo biokemičnih, proteomskih in GENETIC tehnologij za identifikacijo kovalentnih modifikacij in interakcij z drugimi potrebami po motnjah. V DRUGEM CILJU JE TREBA OBRAVNAVATI UPORABO BELJAKOVIN, PLAČANIH KOT ORODJA ZA SPREMINJANJE DNK, S SPREMEMBO THAGO, OSREDOTOČENO NA PODATKE, PRIDOBLJENE V OKVIRU PRVEGA CILJA, PA TUDI NAKLJUČNO, Z USMERJENIM RAZVOJEM IN VITRO. NAJUČINKOVITEJŠE VARIANTE V REZALNIH TESTIH, KI JIH VODI GUIA, SE BODO UPORABLJALE IN VITRO V PROCESIH SPREMINJANJA DNK KOT PROGRAMABILNI OMEJEVALNI ENCIM IN JIH NEPOSREDNO IN VIVO NANESLI ZA UREJANJE GENOMOV PROKARIONTOV IN EVKARIONTOV. V PRIMERU GENOMOV EVKARIONTOV BI DODAJANJE JEDRSKIH LOKACIJ TEM IZBOLJŠANIM RAZLIČICAM OMOGOČILO NEPOSREDNO TRANSFECCION BELJAKOVINE, KI JE ŽE POVEZANA Z VODNIKI SSDNA, S ČIMER BI SE IZOGNILI TVEGANJU NENAMERNEGA VKLJUČEVANJA EKSOGENE DNK V GENOM, POVEZAN S SEDANJIMI TEHNIKAMI CRISPR/CAS9. (Slovenian)
    4 August 2022
    0 references
    АРГОНАУТА ПРОТЕИНИТЕ ПРОИЗВЕЖДАТ РНК-РНК ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ, ОТГОВОРНА ЗА ГЕННОТО ЗАГЛУШАВАНЕ ПРИ ЕУКАРИОТИ, ВЪПРЕКИ ЧЕ МНОГО АРХЕИ И НЯКОИ БАКТЕРИИ СЪЩО КОДИРАТ ПРОТЕИНИ ОТ СЕМЕЙСТВО АРГОНАВТ. THAGO ПРОТЕИН ОТ THERMUS THERMOPHILUS (ЧОВЕШКИ AGO2 ПРОТЕИНОВ ХОРМОН) ПРЕДСТАВЯ НЕОБИЧАЙНА СПОСОБНОСТ ЗА РЯЗАНЕ НА ДНК, ДОПЪЛВАЩА SSDNA ВОДАЧИТЕ, КОЯТО Е НОВА ДНК-ДНК СИСТЕМА ЗА ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ. ПРЕДИШНИТЕ ДАННИ ОТ МОЛЕЩАТА ЛАБОРАТОРИЯ ПОКАЗВАТ, ЧЕ THAGO ДЕЙСТВА КАТО БАРИЕРА НА ВРОДЕН ИМУНИТЕТ СРЕЩУ ЕКЗОГЕННА ДНК, ЕФЕКТИВНО УНИЩОЖАВА ПОВЕЧЕТО (90 %) ОТ ДНК МОЛЕКУЛИ, КОИТО ВЛИЗАТ В КЛЕТКАТА ЧРЕЗ ТРАНСФОРМАЦИЯ, НО БЕЗ ДА ДЕЙСТВА ВЪРХУ СЪЩАТА ДНК, КОГАТО ТЯ СЕ ПРЕХВЪРЛЯ ОТ ДРУГА БАКТЕРИЯ ОТ СЪЩИЯ РОД, КОЕТО ПРЕДПОЛАГА, ЧЕ ДЕЙНОСТТА НА THAGO Е ПРЕДМЕТ НА РЕГУЛИРАНЕ В КЛЕТКАТА. ОТ ДРУГА СТРАНА, КАПАЦИТЕТЪТ ЗА РЯЗАНЕ, ВОДЕН ОТ SSDNA НА THAGO, ПРЕДСТАВЛЯВА СВОЙСТВО НА ИЗКЛЮЧИТЕЛЕН ПОТЕНЦИАЛ ЗА ПРИЛОЖЕНИЕ В ГЕНОМНОТО ИЗДАНИЕ, ПОДОБНО НА НЕГОВОТО ФУНКЦИОНИРАНЕ, НО С ПОТЕНЦИАЛНИ ПРЕДИМСТВА ПРЕД СИСТЕМАТА CRISPR/CAS9. ВСЪЩНОСТ В ПРОЕКТ, ЗАВЪРШЕН ПРЕЗ 2015 Г., СМЕТНАТА ПАЛАТА УСТАНОВИ, ЧЕ ПРЕХОДНАТА ЕКСПРЕСИЯ НА THAGO В ТРАНСФЕКТИРАНИ РАТОННИ КЛЕТКИ СЪС СПЕЦИФИЧНИ ОЛИГОНУКЛЕОТИДИ Е ПРОИЗВЕЛА СПИРАНЕТО В ЕКСПРЕСИЯТА НА GFP ОТ PLASMAID. В ПРОЕКТА, че е поискано от нас намерение да ПРОФУМИТЕ в МЕХАНИСМИте, които ви позволяват да я предоставите на Ваше разположение за въвеждане на ДНК ADQUIRIRIED чрез ТРАНСФОРМАЦИЯ или ТРАНСФЕРИРАНЕ НА ДЕЙНОСТТА С ФИНАНСОВИ И ИЗРАЗЯВАНЕ НА БЪЛГАРИЯТА НА ПРИЛОЖЕНИЕТО НА ПРИЛОЖЕНИЕТО НА GENOMAS._x000D_ като предварителна стъпка към всеки процес на откритост на защитата, първата ОПЕКТИВНА ПРОПОЗАЛНА ПРОПОСАЛНА ИЕНТИФИКАЦИЯ НА КОМПОНЕНТИ И АТИВИТИ/деактивиращи меканизми, включени в отговора за интерференция на ДНК-ДНК, измерен от THAGO, ще бъде разгледан чрез комбинация от биохимични, протеоми и GENETIC технологии за идентифициране на ковалентни модификации и взаимодействия с други нужди за интерференция. ВЪВ ВТОРАТА ЦЕЛ ЩЕ СЕ РАЗГЛЕДА ЛИ ИЗПОЛЗВАНЕТО НА ПРОТЕИНИ, ПЛАТЕНИ КАТО ИНСТРУМЕНТИ ЗА МОДИФИКАЦИЯ НА ДНК, ИЗМЕНЕНИЕТО НА THAGO, СЪСРЕДОТОЧЕНО ВЪРХУ ДАННИТЕ, ПОЛУЧЕНИ ПО ПЪРВАТА ЦЕЛ, КАКТО И НА СЛУЧАЕН ПРИНЦИП, ЧРЕЗ ИН ВИТРО НАСОЧЕНА ЕВОЛЮЦИЯ. НАЙ-ЕФЕКТИВНИТЕ ВАРИАНТИ ПРИ РЕЖЕЩИТЕ ТЕСТОВЕ, ВОДЕНИ ОТ GUIA, ЩЕ СЕ ИЗПОЛЗВАТ IN VITRO В ПРОЦЕСИТЕ НА МОДИФИЦИРАНЕ НА ДНК КАТО ПРОГРАМИРУЕМ РЕСТРИКТИВЕН ЕНЗИМ И ЩЕ СЕ ПРИЛАГАТ ДИРЕКТНО IN VIVO ЗА РЕДАКТИРАНЕ НА ГЕНОМИ НА ПРОКАРИОТИ И ЕУКАРИОТИ. В СЛУЧАЙ НА ГЕНОМИ НА ЕУКАРИОТИ ДОБАВЯНЕТО НА ЯДРЕНИ СИГНАЛИ ЗА МЕСТОПОЛОЖЕНИЕ КЪМ ТЕЗИ ПОДОБРЕНИ ВАРИАНТИ БИ ПОЗВОЛИЛО ПРЯКАТА ТРАНСФЕКЦИЯ НА ПРОТЕИНА, КОЙТО ВЕЧЕ Е СВЪРЗАН С РЪКОВОДСТВАТА НА SSDNA, КАТО СЕ ИЗБЯГВА РИСКЪТ ОТ СЛУЧАЙНО ВКЛЮЧВАНЕ НА ЕКЗОГЕННА ДНК В ГЕНОМА, СВЪРЗАН С НАСТОЯЩИТЕ ТЕХНИКИ CRISPR/CAS9. (Bulgarian)
    4 August 2022
    0 references
    IL-PROTEINI ARGONAUTA JIPPRODUĊU INTERFERENZA RNA-RNA RESPONSABBLI GĦAS-SAJLENSER ĠENIKU FL-EWKARJOTI, GĦALKEMM ĦAFNA ARKAEA U XI BATTERJI WKOLL JIKKODIFIKAW PROTEINI MILL-FAMILJA ARGONAUT. IL-PROTEINA THAGO MINN THERMUS THERMOPHILUS (ORMON TAL-PROTEINA AGO2 UMAN) TIPPREŻENTA L-ABBILTÀ MHUX TAS-SOLTU LI TAQTA’ DNA KOMPLEMENTARI GĦALL-GWIDI SSDNA, LI HIJA SISTEMA ĠDIDA TA’ INTERFERENZA TAD-DNA-DNA. DATA PREĊEDENTI MIL-LABORATORJU LI GĦAMEL IT-TALBA TURI LI THAGO JAĠIXXI BĦALA OSTAKLU TA’ IMMUNITÀ INNATA KONTRA DNA EŻOĠENU, LI EFFETTIVAMENT JEQRED IL-BIĊĊA L-KBIRA (90 %) TAL-MOLEKULI TAD-DNA LI JIDĦLU FIĊ-ĊELLOLA BI TRASFORMAZZJONI, IŻDA MINGĦAJR MA JAĠIXXI FUQ L-ISTESS DNA META JIĠI TRASFERIT MINN BATTERJU IEĦOR TAL-ISTESS ĠENERU, LI JISSUĠĠERIXXI LI L-ATTIVITÀ TA’ THAGO’S HIJA SOĠĠETTA GĦAL REGOLAMENT FIĊ-ĊELLOLA. MIN-NAĦA L-OĦRA, IL-KAPAĊITÀ TA’ QTUGĦ IMMEXXIJA MILL-SSDNA TA’ THAGO TIKKOSTITWIXXI PROPRJETÀ TA’ POTENZJAL TA’ APPLIKAZZJONI STRAORDINARJA FL-EDIZZJONI TAL-ĠENOMA, SIMILI FL-OPERAT TAGĦHA IŻDA B’VANTAĠĠI POTENZJALI FUQ IS-SISTEMA CRISPR/CAS9. FIL-FATT, FI PROĠETT ESPLORAT LI TLESTA FL-2015 AĦNA OSSERVAJNA LI L-ESPRESSJONI TEMPORANJA TA’ THAGO F’ĊELLOLI RATON TRANSFETTATI B’OLIGONUKLEOTIDI SPEĊIFIĊI PPRODUĊIET L-GĦELUQ FL-ESPRESSJONI TAL-GFP MINN PLASMAID. Fil-PROJECT LI talabna l-intenzjoni li nipprovokaw fil-MECHANISMS li jippermettulek li tagħmilha disponibbli għalik biex tidħol fid-DNA ADQUIRIED bit-TRASFORMAZZJONI jew bit-TRASFERIMENT TA’ ĊULLIZZJONIJIET Oħrajn Matul il-FINANZJONI U L-OPRIZZJONI TAL-FONCTIONING TIEGĦEK TAL-APPLIKAZZJONI TIEGĦEK KIF TOOLLU fl-EDIZZJONI TA’ ĠENOMAS._x000D_ bħala pass preliminari għal kwalunkwe proċess ta’ ftuħ tal-PROTEIN, l-IENTIFIKAZZJONI PROPOSTA PROPOSTA TA’ KOMONENTI U L-ATTIVITÀ/mekaniżmi ta’ diżattivazzjoni inklużi fit-Tweġiba ta’ Interferenza tad-DNA-DNA Imkejla minn THAGO, se tiġi indirizzata permezz ta’ kombinazzjoni ta’ teknoloġiji bijokimiċi, proteomiċi u GENETIC għall-identifikazzjoni ta’ modifiki u interazzjonijiet kovalenti ma’ ħtiġijiet oħra għall-interferenza. FIT-TIENI GĦAN, L-UŻU TA’ PROTEINI MĦALLSA BĦALA GĦODOD GĦALL-MODIFIKA TAD-DNA JIĠI INDIRIZZAT IL-MODIFIKA TAT-THAGO IFFUKATA FUQ ID-DATA MIKSUBA FL-EWWEL OBJETTIV, KIF UKOLL B’MOD ALEATORJU, PERMEZZ TA’ EVOLUZZJONI DIRETTA IN VITRO. IL-VARJANTI L-AKTAR EFFIĊJENTI FIT-TESTIJIET TAT-TQATTIGĦ IMMEXXIJA MILL-GUIA SE JINTUŻAW IN VITRO FIL-PROĊESSI TA’ MODIFIKA TAD-DNA BĦALA ENZIMA TA’ RESTRIZZJONI PROGRAMMABBLI, U JIĠU APPLIKATI DIRETTAMENT IN VIVO GĦALL-EDITJAR TAL-ĠENOMI TAL-PROKARJOTI U L-EWKARJOTI. FIL-KAŻ TA’ ĠENOMI TA’ EUKARYOTES, IŻ-ŻIEDA TA’ SINJALI TA’ LOKAZZJONI NUKLEARI MA’ DAWN IL-VARJANTI MTEJBA TIPPERMETTI TRANSFECCION DIRETTA TAL-PROTEINA DIĠÀ MARBUTA MA’ GWIDI SSDNA, FILWAQT LI JIĠI EVITAT IR-RISKJU TA’ INKORPORAZZJONI AĊĊIDENTALI TA’ DNA EŻOĠENU FIL-ĠENOMA ASSOĊJATA MAT-TEKNIKI CRISPR/CAS9 ATTWALI. (Maltese)
    4 August 2022
    0 references
    PROTEÍNAS DE ARGONAUTA PRODUZEM INTERFERÊNCIAS ARN-ARN RESPONSÁVEIS PELA SILENCIAGEM GENICA EM EUCARIÓTESES, MUITAS ARCHAEA E ALGUNS BACTERIAS SÃO TAMBÉM PROTEÍNAS DA FAMÍLIA ARGONAUTA. A THAGO PROTEIN FROM THERMUS THERMOPHILUS (Human AGO2 PROTEIN HORMONE) APRESENTA A UNUSUAL CAPACIDADE DE CORTAR O ADN COMPLEMENTAR AOS GUIAS DE SSDNA, QUE É UM NOVEL SISTEMA DE INTERFERÊNCIA ADN-DNA. Os dados anteriores do laboratório requerente mostram que o THAGO atua como obstáculo à imunidade interna contra o ADN exogênico, destruindo eficazmente a maior parte (90 %) das moléculas de ADN que entram na célula por transformação, mas sem atuar sobre o mesmo ADN quando este é transferido de outro BACTERIO DO MESMO GÉNERO, sugerindo que a atividade do THAGO está sujeita a regulamentação na célula. Por outro lado, a capacidade de corte conduzida pelo SSDNA do THAGO constitui uma propriedade de potencial de aplicação extraordinária na edição genética, semelhante na sua operação, mas com vantagens potenciais sobre o sistema CRISPR/CAS9. Na realidade, num projeto explorado concluído em 2015, observámos que a expressão transitória de THAGO em pilhas de ratona transferidas com oligonucleótidos específicos produzia a dispersão na expressão de GFP a partir de um plástico. No PROJETO QUE É SOLICITADO, pretendemos PROFUNDAR nos MECANISMOS que lhe permitem disponibilizá-lo para entrar no ADN ADQUIRIDO por TRANSFORMAÇÃO ou TRANSFERÊNCIA DE OUTROS CELULOS COM O FINANCEIRO E A OPTIMIÇÃO DO SEU FUNCIONAMENTO DA SUA APLICAÇÃO COMO FERRAMENTA NA EDIÇÃO DE GENOMAS._x000D_ como passo preliminar a qualquer processo de abertura da PROTEÍNA, A PRIMEIRA PROPOSTA OBJETIVA IENTIFICAÇÃO PROPOSAL DE COMPONENTES E ATIVIDADES/MECANISMOS de de desativação incluídos na Resposta de Interferência ADN-DNA Medida pelo THAGO, será abordada por meio de uma combinação de tecnologias bioquímicas, proteómicas e genéticas para identificação de modificações covalentes e interações com outras necessidades de interferência. No segundo objectivo, a utilização das proteínas pagas como ferramentas para a modificação do ADN será abordada através da modificação do tago centrada nos dados obtidos no primeiro objectivo, bem como de forma aleatória, através da evolução dirigida in vitro. Os VARIANTES MAIS EFICIENTES NOS ENSAIOS DE CORTE LED PELA GUIA SERÃO UTILIZADOS IN VITRO EM PROCESSOS DE ALTERAÇÃO DO ADN COMO ENZIMA DE RESTRIÇÃO PROGRAMÁVEL, E APLICADOS DIRETAMENTE EM VIVO PARA A EDIÇÃO DE GÉNEROS DE PROCARIÓTESES E EUCARIÓTESES. No caso dos géneros de EUKARYOTES, a adição de sinais de localização nUCLEAR a estes variadores melhorados permitiria a transferência direta da proteína já ligada aos códigos SSDNA, evitando o risco de incorporação acidental de ADN exogênico no genoma associado às atuais técnicas CRISPR/CAS9. (Portuguese)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA-PROTEINER PRODUCERER RNA-RNA-INTERFERENS, DER ER ANSVARLIG FOR GENISK SILENCING I EUKARYOTER, SELV OM MANGE ARKÆER OG NOGLE BAKTERIER OGSÅ KODER PROTEINER FRA ARGONAUT-FAMILIEN. THAGO-PROTEINET FRA THERMUS THERMOPHILUS (HUMANT AGO2-PROTEINHORMON) PRÆSENTERER DEN USÆDVANLIGE EVNE TIL AT SKÆRE DNA SOM SUPPLEMENT TIL SSDNA-GUIDER, SOM ER ET NYT DNA-DNA-INTERFERENSSYSTEM. TIDLIGERE DATA FRA DET ANMODENDE LABORATORIUM VISER, AT THAGO VIRKER SOM EN BARRIERE FOR MEDFØDT IMMUNITET MOD EKSOGENT DNA, HVILKET EFFEKTIVT ØDELÆGGER DE FLESTE (90 %) AF DE DNA-MOLEKYLER, DER KOMMER IND I CELLEN VED OMDANNELSE, MEN UDEN AT HANDLE PÅ SAMME DNA, NÅR DET OVERFØRES FRA EN ANDEN BAKTERIE AF SAMME SLÆGT, HVILKET TYDER PÅ, AT THAGO'S AKTIVITET ER OMFATTET AF REGULERING I CELLEN. PÅ DEN ANDEN SIDE UDGØR DEN SKÆREKAPACITET, DER LEDES AF THAGO'S SSDNA, EN EGENSKAB AF EKSTRAORDINÆR ANVENDELSESPOTENTIALE I GENOMUDGAVEN, DER LIGNER DENS FUNKTION, MEN MED POTENTIELLE FORDELE I FORHOLD TIL CRISPR/CAS9-SYSTEMET. FAKTISK BEMÆRKEDE VI I ET PROJEKT, DER BLEV UNDERSØGT I 2015, AT THAGO'S FORBIGÅENDE UDTRYK I TRANSFICEREDE RATON-CELLER MED SPECIFIKKE OLIGONUCLEOTIDER PRODUCEREDE NEDLUKNINGEN I FORM AF GFP FRA ET PLASMAID. I PROJEKT, som er anmodet om, at vi agter at PROFUND i MECHANISMS, der giver dig mulighed for at gøre det tilgængeligt for dig at indtaste DNA godkendt ved TRANSFORMATION eller TRANSFERIING af andre CELULS med den FINANSIELLE OG OPTIMITION AF DIN FUNKTION AF HANS APPLIKATION AS TOOL IN THEDITION OF GENOMAS._x000D_ som et indledende skridt til enhver proces med åbenhed i PROTEIN, den FØRSTE OBJEKTIVE PROPOSAL IENTIFIKATION AF COMPONENTS OG AKTIVITITER/deaktiveringsmekanismer, der indgår i DNA-DNA-interferenssvaret målt af THAGO, vil det blive behandlet ved hjælp af en kombination af biokemiske, proteomiske og GENETIC-teknologier til identifikation af kovalente modifikationer og interaktioner med andre nødvendigheder for interferens. I DET ANDET MÅL VIL BRUGEN AF PROTEINER, DER BETALES SOM VÆRKTØJER TIL DNA-MODIFIKATION, BLIVE BEHANDLET MOD ÆNDRINGEN AF THAGO MED FOKUS PÅ DE DATA, DER ER INDHENTET I DET FØRSTE MÅL, SAMT TILFÆLDIGT GENNEM IN VITRO-RETTET EVOLUTION. DE MEST EFFEKTIVE VARIANTER I SKÆRETEST LEDET AF GUIA VIL BLIVE BRUGT IN VITRO I DNA-MODIFIKATIONSPROCESSER SOM ET PROGRAMMERBART RESTRIKTIONSENZYM OG ANVENDES DIREKTE IN VIVO TIL REDIGERING AF GENOMER AF PROKARYOTER OG EUKARYOTER. FOR SÅ VIDT ANGÅR EUKARYOTERS GENOMER VILLE TILFØJELSEN AF NUKLEARE LOKALISERINGSSIGNALER TIL DISSE FORBEDREDE VARIANTER GIVE MULIGHED FOR DIREKTE TRANSFECCION AF DET PROTEIN, DER ALLEREDE ER KNYTTET TIL SSDNA-VEJLEDNINGER, OG UNDGÅ RISIKOEN FOR UTILSIGTET INKORPORERING AF EKSOGENT DNA I DET GENOM, DER ER FORBUNDET MED DE NUVÆRENDE CRISPR/CAS9-TEKNIKKER. (Danish)
    4 August 2022
    0 references
    PROTEINELE ARGONAUTA PRODUC INTERFERENȚE ARN-ARN RESPONSABILE PENTRU REDUCEREA LA TĂCERE GENICĂ ÎN EUCARIOTE, DEȘI MULTE ARHEE ȘI UNELE BACTERII CODIFICĂ, DE ASEMENEA, PROTEINELE DIN FAMILIA ARGONAUT. PROTEINA THAGO DIN THERMUS THERMOPHILUS (HORMONUL PROTEIC AGO2 UMAN) PREZINTĂ CAPACITATEA NEOBIȘNUITĂ DE A TĂIA ADN-UL COMPLEMENTAR GHIDURILOR SSADN, CARE ESTE UN SISTEM NOU DE INTERFERENȚĂ ADN-ADN. DATELE ANTERIOARE ALE LABORATORULUI SOLICITANT ARATĂ CĂ THAGO ACȚIONEAZĂ CA O BARIERĂ A IMUNITĂȚII ÎNNĂSCUTE ÎMPOTRIVA ADN-ULUI EXOGEN, DISTRUGÂND EFECTIV MAJORITATEA (90 %) DIN MOLECULELE ADN CARE INTRĂ ÎN CELULĂ PRIN TRANSFORMARE, DAR FĂRĂ A ACȚIONA ASUPRA ACELUIAȘI ADN ATUNCI CÂND ESTE TRANSFERAT DE LA O ALTĂ BACTERIE DIN ACELAȘI GEN, SUGERÂND CĂ ACTIVITATEA THAGO ESTE SUPUSĂ REGULAMENTULUI ÎN CELULĂ. PE DE ALTĂ PARTE, CAPACITATEA DE TĂIERE CONDUSĂ DE SSDNA THAGO CONSTITUIE O PROPRIETATE CU POTENȚIAL DE APLICARE EXTRAORDINAR ÎN EDIȚIA GENOMICĂ, SIMILARĂ ÎN FUNCȚIONAREA SA, DAR CU AVANTAJE POTENȚIALE FAȚĂ DE SISTEMUL CRISPR/CAS9. DE FAPT, ÎNTR-UN PROIECT EXPLORAT FINALIZAT ÎN 2015, AM OBSERVAT CĂ EXPRESIA TRANZITORIE A THAGO ÎN CELULELE RATON TRANSFECTATE CU OLIGONUCLEOTIDE SPECIFICE A PRODUS ÎNCHIDEREA ÎN EXPRIMAREA GFP DINTR-UN PLASMAID. În PROIECTUL CĂ este solicitat intenționăm să PROFUND în MECHANISMS, care vă permit să-l pună la dispoziția dumneavoastră pentru a introduce ADN ADQUIRIED prin TRANSFORMAȚIE sau TRANSFERIING de alte CELULE cu ajutorul FINANCIAR ȘI OPTIMIȚIA FUNCȚIONAREA DE APLICARE A APLICAȚIEI SĂ SĂ PUNERE ÎN EDIȚIA GENOMAS._x000D_ ca un pas preliminar către orice proces de deschidere a PROTEINULUI, prima IENTIFICARE PROPOZALĂ PROPOZALĂ OBJECTIVĂ A COMPONENTILOR ȘI ACTIVITILOR/mecanismelor de dezactivare incluse în răspunsul la interferența ADN-ADN Măsurat de THAGO, va fi abordată printr-o combinație de tehnologii biochimice, proteomice și GENETIC pentru identificarea modificărilor covalente și a interacțiunilor cu alte necesități de interferență. ÎN AL DOILEA OBIECTIV, SE VA ABORDA UTILIZAREA PROTEINELOR PLĂTITE CA INSTRUMENTE PENTRU MODIFICAREA ADN-ULUI MODIFICAREA THAGO AXAT PE DATELE OBȚINUTE ÎN PRIMUL OBIECTIV, PRECUM ȘI ALEATORIU, PRIN EVOLUȚIE DIRECȚIONATĂ IN VITRO. CELE MAI EFICIENTE VARIANTE ÎN TESTELE DE TĂIERE CONDUSE DE GUIA VOR FI UTILIZATE IN VITRO ÎN PROCESELE DE MODIFICARE A ADN-ULUI CA ENZIMĂ DE RESTRICȚIE PROGRAMABILĂ ȘI APLICATE DIRECT IN VIVO PENTRU EDITAREA GENOMILOR PROCARIOTE ȘI EUCARIOTE. ÎN CAZUL GENOMILOR EUCARIOTELOR, ADĂUGAREA DE SEMNALE DE LOCALIZARE NUCLEARĂ LA ACESTE VARIANTE ÎMBUNĂTĂȚITE AR PERMITE TRANSFECCIA DIRECTĂ A PROTEINEI DEJA LEGATE DE GHIDURILE SSADN, EVITÂND RISCUL DE ÎNCORPORARE ACCIDENTALĂ A ADN-ULUI EXOGEN ÎN GENOMUL ASOCIAT TEHNICILOR ACTUALE CRISPR/CAS9. (Romanian)
    4 August 2022
    0 references
    ARGONAUTA-PROTEINER PRODUCERAR RNA-RNA-STÖRNINGAR SOM ÄR ANSVARIGA FÖR GENISK LJUDDÄMPNING I EUKARYOTER, ÄVEN OM MÅNGA ARKEA OCH VISSA BAKTERIER OCKSÅ KODAR PROTEINER FRÅN ARGONAUT-FAMILJEN. THAGO-PROTEINET FRÅN THERMUS THERMOPHILUS (HUMANT AGO2-PROTEINHORMON) PRESENTERAR DEN OVANLIGA FÖRMÅGAN ATT SKÄRA DNA SOM KOMPLEMENT TILL SSDNA-GUIDER, VILKET ÄR ETT NYTT DNA-DNA-INTERFERENSSYSTEM. TIDIGARE DATA FRÅN DET BEGÄRANDE LABORATORIET VISAR ATT THAGO FUNGERAR SOM EN BARRIÄR FÖR MEDFÖDD IMMUNITET MOT EXOGENT DNA, VILKET EFFEKTIVT FÖRSTÖR DE FLESTA (90 %) AV DE DNA-MOLEKYLER SOM KOMMER IN I CELLEN GENOM TRANSFORMATION, MEN UTAN ATT AGERA PÅ SAMMA DNA NÄR DET ÖVERFÖRS FRÅN EN ANNAN BAKTERIE AV SAMMA SLÄKTE, VILKET TYDER PÅ ATT THAGO’S AKTIVITET OMFATTAS AV FÖRORDNING I CELLEN. Å ANDRA SIDAN UTGÖR DEN KAPNINGSKAPACITET SOM LEDS AV SSDNA I THAGO EN EGENSKAP AV EXTRAORDINÄR TILLÄMPNINGSPOTENTIAL I GENOMUTGÅVAN, LIKNANDE I DESS DRIFT MEN MED POTENTIELLA FÖRDELAR JÄMFÖRT MED CRISPR/CAS9-SYSTEMET. I ETT PROJEKT SOM UNDERSÖKTES FÄRDIGT 2015 OBSERVERADE VI ATT DET ÖVERGÅENDE UTTRYCKET AV THAGO I TRANSFEKTERADE RATONCELLER MED SPECIFIKA OLIGONUCLEOTIDES PRODUCERADE AVSTÄNGNINGEN I GFP:S UTTRYCK FRÅN ETT PLASMAID. I PROJEKTET begärs att vi avser att söka i MECHANISMS som gör det möjligt för dig att göra det tillgängligt för dig att ange DNA som begärts genom TRANSFORMATION eller TRANSFERIING AV andra CLULS MED FINANCIAL OCH OPTIMITION AV DIN FUNKTIONERING AV HIS ANSÖKNING som TOOL IN THE EDITION OF GENOMAS._x000D_ som ett preliminärt steg mot någon process för öppenhet av PROTEIN, den FÖRSTA ÖBJEKTIV PROPOSALET PROPOSAL IENTIFIKATION AV KOMONENTER OCH ACTIVITIES/avaktiveringsmekanismer som ingår i DNA-DNA Interference Answer Measured av THAGO kommer att hanteras med hjälp av en kombination av biokemisk, proteomisk och genetisk teknik för identifiering av kovalenta modifieringar och interaktioner med andra nödvändiga störningar. I DET ANDRA MÅLET, KOMMER ANVÄNDNINGEN AV PROTEINER SOM BETALAS SOM VERKTYG FÖR DNA-MODIFIERING BEHANDLAS MODIFIERINGEN AV THAGO FOKUSERADE PÅ DE DATA SOM ERHÅLLITS I DET FÖRSTA MÅLET, SAMT SLUMPMÄSSIGT, GENOM IN VITRO-RIKTAD UTVECKLING. DE MEST EFFEKTIVA VARIANTERNA I SKÄRTESTER LEDDA AV GUIA KOMMER ATT ANVÄNDAS IN VITRO I DNA-MODIFIERINGSPROCESSER SOM ETT PROGRAMMERBART RESTRIKTIONSENZYM, OCH APPLICERAS DIREKT IN VIVO FÖR REDIGERING AV GENOMER AV PROKARYOTER OCH EUKARYOTER. NÄR DET GÄLLER GENOMER AV EUKARYOTES SKULLE TILLÄGG AV KÄRNVAPENLOKALISERINGSSIGNALER TILL DESSA FÖRBÄTTRADE VARIANTER MÖJLIGGÖRA DIREKT TRANSFECCION AV DET PROTEIN SOM REDAN ÄR KOPPLAT TILL SSDNA-GUIDER OCH UNDVIKA RISKEN FÖR OAVSIKTLIG INKORPORERING AV EXOGENT DNA I GENOMET I SAMBAND MED DEN NUVARANDE CRISPR/CAS9-TEKNIKEN. (Swedish)
    4 August 2022
    0 references
    Madrid
    0 references
    20 December 2023
    0 references

    Identifiers

    BIO2016-77031-R
    0 references