Frequency, phenotype and function of regulator B cells (Breg) in patients with preclinical, early and established rheumatoid arthritis (RA) (Q3136812)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3136812 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Frequency, phenotype and function of regulator B cells (Breg) in patients with preclinical, early and established rheumatoid arthritis (RA) |
Project Q3136812 in Spain |
Statements
27,225.0 Euro
0 references
50,000.0 Euro
0 references
54.45 percent
0 references
1 January 2017
0 references
31 March 2020
0 references
FUNDACION INVESTIGACION BIOMEDICA HOSPITAL LA PAZ
0 references
Antecedentes: Las células B reguladoras (Breg) desempeñan un papel fundamental en el control negativo del desarrollo de enfermedades autoinmunes. Existe evidencia experimental de que la contribución patogénica de las células Breg varía a lo largo del tiempo siendo mayor en estadios precoces del desarrollo de la autoinmunidad. La caracterización fenotípica de las células Breg es controvertida, y actualmente se acepta que en humanos las células CD19+CD24highCD38high contienen la mayor proporción de células B con capacidad funcional reguladora y productora de IL-10. Se ha descrito alteraciones en el número y función de las células Breg CD19+CD24highCD38high en varias enfermedades autoinmunes pero en humanos existen escasos estudios sobre este tipo celular en AR y ninguno sobre las características de estas células en AR temprana o subclínica. Objetivos: Estudiar la frecuencia, fenotipo y función de las células Breg CD19+CD24highCD38high en pacientes con AR preclínica, de inicio y establecida. Métodos: Se obtendrá sangre periférica de controles sanos y pacientes con AR preclínica, temprana y establecida. Las células mononucleares de sangre periférica se estudiarán por citometría de flujo tras teñir con anticuerpos frente a CD3, CD4, CD19, CD24 y CD38. Para los estudios funcionales, aislaremos células CD19+ totales de pacientes y controles por separación magnética. Las células CD19+ deplecionadas de Breg se obtendrán tras pasar las células CD19+ totales por un sorter FacsVantage (Beckton Dickinson) eliminando toda la población CD19+CD24highCD38high. Se establecerá cultivos de células B CD19+ totales o CD19+ deplecionadas de Breg estimulados a través del BCR o TLR y en presencia o ausencia de CD40L. La secreción de TNF, IFN, IL-10 e IL-4 se determinará por ELISA en sobrenadantes de cultivo. (Spanish)
0 references
Background: Regulatory B cells (Breg) play a key role in the negative control of the development of autoimmune diseases. There is experimental evidence that the pathogenic contribution of Breg cells varies over time and is higher in early stages of autoimmunity development. The phenotypic characterisation of Breg cells is controversial, and it is now accepted that in humans CD19+CD24highCD38high cells contain the highest proportion of B cells with functional regulatory and production capacity of IL-10. Alterations in the number and function of the Breg CD19+CD24highCD38high cells have been reported in several autoimmune diseases, but in humans there are few studies on this cell type in RA and none on the characteristics of these cells in early or subclinical RA. Objectives: Study the frequency, phenotype and function of Breg CD19+CD24highCD38high cells in patients with preclinical, onset and established RA. Methods: Peripheral blood will be obtained from healthy controls and patients with preclinical, early and established RA. Peripheral blood mononuclear cells will be studied by flow cytometry after dyeing with antibodies to CD3, CD4, CD19, CD24 and CD38. For functional studies, we will isolate total CD19+ cells from patients and magnetic separation controls. Breg’s depleted CD19+ cells will be obtained after passing the total CD19+ cells through a FacsVantage (Beckton Dickinson) sorter eliminating the entire CD19+CD24highCD38high population. Breg-depleted B-cell cultures stimulated through BCR or TLR and in the presence or absence of CD40L shall be established with total CD19+ or CD19+ cells. The secretion of TNF, IFN, IL-10 and IL-4 shall be determined by ELISA in culture supernatants. (English)
12 October 2021
0.1807821914693691
0 references
Contexte: Les cellules B régulatrices (Breg) jouent un rôle clé dans le contrôle négatif du développement des maladies auto-immunes. Il existe des preuves expérimentales que la contribution pathogène des cellules Breg varie au fil du temps et qu’elle est plus élevée aux premiers stades du développement de l’auto-immunité. La caractérisation phénotypique des cellules Breg est controversée, et il est maintenant admis que chez les humains les cellules CD19+CD24highCD38contiennent la plus forte proportion de cellules B ayant une capacité de régulation fonctionnelle et de production de l’IL-10. Des altérations du nombre et de la fonction des cellules Breg CD19+CD24highCD38 ont été rapportées dans plusieurs maladies auto-immunes, mais chez l’homme, il y a peu d’études sur ce type de cellules dans la RA et aucune sur les caractéristiques de ces cellules dans la RA précoce ou subclinique. Objectifs: Étudier la fréquence, le phénotype et la fonction de Breg CD19+CD24hautCD38cellules supérieures chez les patients présentant une PR préclinique, initiale et établie. Méthodes: Le sang périphérique sera obtenu à partir de témoins sains et de patients atteints de PR préclinique, précoce et établie. Les cellules mononucléaires sanguines périphériques seront étudiées par cytométrie de flux après avoir teinté des anticorps contre les CD3, CD4, CD19, CD24 et CD38. Pour les études fonctionnelles, nous allons isoler le total des cellules CD19+ des patients et des témoins de séparation magnétique. Les cellules CD19+ épuisées de Breg seront obtenues après avoir passé le total des cellules CD19+ par un trieur FACSVantage (Beckton Dickinson) éliminant l’ensemble de la population CD19+CD24highCD38. Les cultures de cellules B appauvries en Breg stimulées par BCR ou TLR et en présence ou en absence de CD40L doivent être établies avec les cellules CD19+ ou CD19+ totales. La sécrétion du TNF, de l’INF, de l’IL-10 et de l’IL-4 doit être déterminée par ELISA chez les surnageants de culture. (French)
2 December 2021
0 references
Hintergrund: Regulatorische B-Zellen (Breg) spielen eine Schlüsselrolle bei der negativen Kontrolle der Entwicklung von Autoimmunerkrankungen. Es gibt experimentelle Beweise, dass der pathogene Beitrag von Breg-Zellen im Laufe der Zeit variiert und in den frühen Stadien der Autoimmunentwicklung höher ist. Die phänotypische Charakterisierung von Breg-Zellen ist umstritten, und es wird jetzt akzeptiert, dass CD19+CD24highCD38high-Zellen beim Menschen den höchsten Anteil an B-Zellen mit funktionellen Regulierungs- und Produktionskapazitäten von IL-10 enthalten. Veränderungen in der Anzahl und Funktion der Breg CD19+CD24highCD38High Zellen wurden bei mehreren Autoimmunerkrankungen berichtet, aber beim Menschen gibt es nur wenige Studien über diesen Zelltyp in RA und keine über die Eigenschaften dieser Zellen in frühen oder subklinischen RA. Ziele: Untersuchen Sie die Häufigkeit, den Phänotyp und die Funktion von Breg CD19+CD24highCD38high-Zellen bei Patienten mit präklinischem, eingeschaltetem und etabliertem RA. Methoden: Peripheres Blut wird von gesunden Kontrollen und Patienten mit präklinischen, frühen und etablierten RA gewonnen. Periphere mononukleare Blutzellen werden nach Färben mit Antikörpern zu CD3, CD4, CD19, CD24 und CD38 mittels Durchflusszytometrie untersucht. Für funktionelle Studien isolieren wir insgesamt CD19+ Zellen von Patienten und magnetischen Separationskontrollen. Bregs abgereicherte CD19±Zellen werden nach der Übergabe der gesamten CD19±Zellen durch einen FACSVantage-Sorter (Beckton Dickinson) gewonnen, der die gesamte CD19+CD24highCD38high Population eliminiert. B-Zellkulturen, die durch BCR oder TLR stimuliert werden und in Gegenwart oder Abwesenheit von CD40L mit insgesamt CD19+ oder CD19±Zellen stimuliert werden. Die Sekretion von TNF, IFN, IL-10 und IL-4 wird von ELISA bei Kulturüberständen bestimmt. (German)
9 December 2021
0 references
Achtergrond: Regelgevende B cellen (Breg) spelen een belangrijke rol in de negatieve controle van de ontwikkeling van auto-immuunziekten. Er is experimenteel bewijs dat de pathogene bijdrage van Breg cellen varieert in de tijd en hoger is in vroege stadia van auto-immuniteit ontwikkeling. De fenotypische karakterisering van Breg-cellen is controversieel en het wordt nu geaccepteerd dat CD19+CD24highCD38highcellen bij mensen het hoogste aandeel B-cellen met functionele regelgevende en productiecapaciteit van IL-10 bevatten. Veranderingen in het aantal en de functie van de Breg CD19+CD24highCD38hoge cellen zijn gemeld bij verschillende auto-immuunziekten, maar bij mensen zijn er weinig studies naar dit celtype in RA en geen naar de kenmerken van deze cellen in vroege of subklinische RA. Doelstellingen: Onderzoek de frequentie, het fenotype en de functie van Breg CD19+CD24highCD38highcellen bij patiënten met preklinische, beginnende en gevestigde RA. Methoden: Perifeer bloed zal worden verkregen van gezonde controles en patiënten met preklinische, vroege en gevestigde RA. Perifere bloed mononucleaire cellen zullen worden onderzocht door flow cytometrie na verven met antilichamen tegen CD3, CD4, CD19, CD24 en CD38. Voor functionele studies zullen we de totale CD19±cellen isoleren van patiënten en magnetische scheidingscontroles. Breg’s uitgeputte CD19±cellen zullen worden verkregen na het passeren van de totale CD19±cellen via een FACSVantage (Beckton Dickinson) sorteerder die de volledige CD19+CD24highCD38high-populatie elimineert. B-celculturen met breg-depletie, gestimuleerd door BCR of TLR en in aanwezigheid of afwezigheid van CD40L, worden vastgesteld met totale CD19± of CD19±cellen. De afscheiding van TNF, IFN, IL-10 en IL-4 wordt bepaald door Elisa in kweeksupernatanten. (Dutch)
17 December 2021
0 references
Contesto: Le cellule B regolatorie (Breg) svolgono un ruolo chiave nel controllo negativo dello sviluppo di malattie autoimmuni. Vi sono prove sperimentali che il contributo patogeno delle cellule di Breg varia nel tempo ed è più elevato nelle prime fasi di sviluppo dell'autoimmunità. La caratterizzazione fenotipica delle cellule di Breg è controversa ed è ora accettato che negli esseri umani le cellule CD19+CD24highCD38 contengono la più alta percentuale di cellule B con capacità di regolazione funzionale e di produzione di IL-10. Alterazioni del numero e della funzione delle cellule Breg CD19+CD24highCD38high sono state riportate in diverse malattie autoimmuni, ma nell'uomo ci sono pochi studi su questo tipo di cellule in RA e nessuno sulle caratteristiche di queste cellule nella RA precoce o subclinica. Obiettivi: Studia la frequenza, il fenotipo e la funzione delle cellule Breg CD19+CD24highCD38high in pazienti con RA preclinica, insorgenza e stabilita. Metodi: Il sangue periferico sarà ottenuto da controlli sani e da pazienti con RA preclinica, precoce e stabilita. Le cellule mononucleari del sangue periferico saranno studiate mediante citometria a flusso dopo la tintura con anticorpi CD3, CD4, CD19, CD24 e CD38. Per gli studi funzionali, isolamo le cellule CD19+ totali dai pazienti e dai controlli di separazione magnetica. Le cellule CD19+ esaurite di Breg saranno ottenute dopo aver superato il totale delle cellule CD19+ attraverso una selezionatrice FACSVantage (Beckton Dickinson) eliminando l'intera popolazione CD19+CD24highCD38. Le colture di cellule B depleted di Breg stimolate attraverso BCR o TLR e in presenza o in assenza di CD40L sono stabilite con cellule CD19+ o CD19+ totali. La secrezione di TNF, IFN, IL-10 e IL-4 è determinata da ELISA nei supernatanti della coltura. (Italian)
16 January 2022
0 references
Ιστορικό: Τα ρυθμιστικά κύτταρα Β (Breg) διαδραματίζουν βασικό ρόλο στον αρνητικό έλεγχο της ανάπτυξης αυτοάνοσων νόσων. Υπάρχουν πειραματικές ενδείξεις ότι η παθογόνος συμβολή των κυττάρων Breg ποικίλλει με την πάροδο του χρόνου και είναι υψηλότερη στα αρχικά στάδια της ανάπτυξης αυτοάνοσης. Ο φαινοτυπικός χαρακτηρισμός των κυττάρων Breg είναι αμφιλεγόμενος και είναι πλέον αποδεκτό ότι στον άνθρωπο τα κύτταρα CD19+CD24highCD38high περιέχουν το υψηλότερο ποσοστό κυττάρων Β με λειτουργική ρυθμιστική και παραγωγική ικανότητα IL-10. Μεταβολές στον αριθμό και τη λειτουργία των κυττάρων Breg CD19+CD24highCD38 high έχουν αναφερθεί σε αρκετές αυτοάνοσες νόσους, αλλά σε ανθρώπους υπάρχουν λίγες μελέτες για αυτόν τον κυτταρικό τύπο σε RA και καμία σχετικά με τα χαρακτηριστικά αυτών των κυττάρων σε πρώιμο ή υποκλινικό RA. Στόχοι: Μελέτη της συχνότητας, του φαινότυπου και της λειτουργίας των κυττάρων Breg CD19+CD24highCD38high σε ασθενείς με προκλινική, έναρξη και καθιερωμένη RA. Μέθοδοι: Το περιφερικό αίμα θα ληφθεί από υγιείς μάρτυρες και ασθενείς με προκλινικό, πρώιμο και καθιερωμένο RA. Τα μονοπυρηνικά κύτταρα του περιφερικού αίματος θα μελετηθούν με κυτταρομετρία ροής μετά τη βαφή με αντισώματα CD3, CD4, CD19, CD24 και CD38. Για λειτουργικές μελέτες, θα απομονώσουμε τα συνολικά κύτταρα CD19+ από τους ασθενείς και τους ελέγχους μαγνητικού διαχωρισμού. Τα εξαντλημένα κύτταρα CD19+ του Breg θα ληφθούν αφού περάσουν τα συνολικά κύτταρα CD19+ μέσω ενός ταξινομητή FACSVantage (Beckton Dickinson) εξαλείφοντας ολόκληρο τον πληθυσμό CD19+CD24highCD38high. Οι καλλιέργειες B-κυττάρων που διεγείρονται με Breg μέσω BCR ή TLR και παρουσία ή απουσία CD40L καθορίζονται με ολικές κυψέλες CD19+ ή CD19+. Η έκκριση των TNF, IFN, IL-10 και IL-4 προσδιορίζεται από την ELISA σε υπερκείμενο υλικό καλλιέργειας. (Greek)
17 August 2022
0 references
Baggrund: Regulatoriske B-celler (Breg) spiller en central rolle i den negative kontrol med udviklingen af autoimmune sygdomme. Der er eksperimentel dokumentation for, at Breg-cellernes patogene bidrag varierer over tid og er højere i de tidlige stadier af udviklingen af autoimmunitet. Den fænotypiske karakterisering af Breg-celler er kontroversiel, og det accepteres nu, at CD19+CD24highCD38-celler i mennesker indeholder den højeste andel af B-celler med funktionel regulerings- og produktionskapacitet af IL-10. Ændringer i antallet og funktionen af Breg CD19+CD24highCD38 høje celler er blevet rapporteret i flere autoimmune sygdomme, men hos mennesker er der kun få undersøgelser af denne celletype i RA, og ingen af disse cellers karakteristika i tidlig eller subklinisk RA. Målsætninger: Undersøg hyppigheden, fænotypen og funktionen af Breg CD19+CD24highCD38highCD38-celler hos patienter med præklinisk, begyndende og etableret RA. Metoder: Perifert blod opnås fra sunde kontroller og patienter med præklinisk, tidlig og etableret RA. Perifere mononukleære blodceller vil blive undersøgt ved flowcytometri efter farvning med antistoffer mod CD3, CD4, CD19, CD24 og CD38. Til funktionelle undersøgelser isolerer vi total CD19 + celler fra patienter og magnetisk adskillelseskontrol. Bregs udtømte CD19±celler opnås efter at have passeret de samlede CD19±celler gennem en FACSVantage (Beckton Dickinson) sortering, der eliminerer hele CD19+CD24highCD38 høje population. Breg-depleterede B-cellekulturer stimuleret gennem BCR eller TLR og ved tilstedeværelse eller fravær af CD40L skal fastlægges med i alt CD19+ eller CD19+ celler. Udskillelsen af TNF, IFN, IL-10 og IL-4 bestemmes af ELISA i kultursupernatanter. (Danish)
17 August 2022
0 references
Tausta: Sääntelyn B-soluilla (Breg) on keskeinen rooli autoimmuunisairauksien kehittymisen negatiivisessa hallinnassa. On olemassa kokeellista näyttöä siitä, että Breg-solujen patogeeninen vaikutus vaihtelee ajan mittaan ja on suurempi autoimmuniteetin kehityksen alkuvaiheessa. Breg-solujen fenotyyppinen luonnehdinta on kiistanalainen, ja nyt on hyväksytty, että ihmisillä CD19 + CD24highCD38korkeat solut sisältävät suurimman osan B-soluista, joiden toiminnallinen sääntely- ja tuotantokapasiteetti on IL-10. Breg CD19+CD24highCD38 -solujen lukumäärän ja toiminnan muutoksia on raportoitu useissa autoimmuunisairauksissa, mutta ihmisillä on vain vähän tutkimuksia tästä solutyypistä nivelreumassa eikä mitään näiden solujen ominaisuuksista varhaisessa tai subkliinisessa nivelreumassa. Tavoitteet: Tutkitaan Breg CD19+CD24highCD38 -solujen esiintymistiheyttä, fenotyyppiä ja toimintaa potilailla, joilla on prekliininen, puhkeava ja vakiintunut nivelreuma. Menetelmät: Perifeerinen veri saadaan terveistä verrokeista ja potilaista, joilla on prekliininen, varhainen ja vakiintunut nivelreuma. Perifeerisen veren mononukleaarisoluja tutkitaan virtaussytometrialla sen jälkeen, kun ne on värjätty CD3-, CD4-, CD19-, CD24- ja CD38-vasta-aineilla. Toiminnallisia tutkimuksia varten eristämme CD19±solujen kokonaismäärän potilailta ja magneettisia erotuskontrolleja. Bregin tyhjentyneet CD19±solut saadaan sen jälkeen, kun CD19±solut on siirretty FACSVantage (Beckton Dickinson) -lajittelulaitteen kautta, mikä poistaa koko CD19+CD24highCD38-populaation. BCR:n tai TLR:n avulla ja CD40L:n läsnä ollessa tai ilman sitä stimuloidut Breg- köyhdytetyt B-soluviljelmät on määritettävä CD19± tai CD19±solujen kokonaismäärällä. Elisa määrittää TNF:n, IFN:n, IL-10:n ja IL-4:n erityksen kulttuurin supernatanteissa. (Finnish)
17 August 2022
0 references
Sfond: Iċ-ċelloli B regolatorji (Breg) għandhom rwol ewlieni fil-kontroll negattiv tal-iżvilupp ta’ mard awtoimmuni. Hemm evidenza sperimentali li l-kontribuzzjoni patoġenika taċ-ċelloli Breg tvarja maż-żmien u hija ogħla fl-istadji bikrija tal-iżvilupp awtoimmunitarju. Il-karatterizzazzjoni fenotipika taċ-ċelloli Breg hija kontroversjali, u issa huwa aċċettat li fil-bnedmin iċ-ċelloli CD19+CD24highCD38 għandhom l-ogħla proporzjon ta’ ċelloli B b’kapaċità funzjonali regolatorja u ta’ produzzjoni ta’ IL-10. Tibdil fin-numru u fil-funzjoni taċ-ċelluli Breg CD19+CD24highCD38 ġew irrappurtati f’diversi mard awtoimmuni, iżda fil-bnedmin hemm ftit studji dwar dan it-tip ta’ ċellula f’RA u xejn fuq il-karatteristiċi ta’ dawn iċ-ċelluli f’RA kmieni jew subklinika. Għanijiet: Studja l-frekwenza, il-fenotip u l-funzjoni ta’ Breg CD19+CD24highCD38 f’pazjenti b’RA preklinika, b’bidu u b’RA stabbilit. Metodi: Id-demm periferali jinkiseb minn kontrolli b’saħħithom u pazjenti b’RA preklinika, bikrija u stabbilita. Iċ-ċelluli mononukleari tad-demm periferali se jiġu studjati permezz ta’ ċitometrija tal-fluss wara ż-żbigħ b’antikorpi għal CD3, CD4, CD19, CD24 u CD38. Għal studji funzjonali, aħna se jiżolaw ċelluli CD19 + totali minn pazjenti u kontrolli separazzjoni manjetiċi. Iċ-ċelloli CD19+ imnaqqsa ta’ Breg jinkisbu wara li jgħaddu ċ-ċelloli CD19+ totali permezz ta’ sorter ta’ FACSVantage (Beckton Dickinson) li jelimina l-popolazzjoni sħiħa ta’ CD19+CD24highCD38. Il-kulturi taċ-ċelloli B imnaqqsa b’Breg stimulati permezz tal-BCR jew TLR u fil-preżenza jew fin-nuqqas ta’ CD40L għandhom jiġu stabbiliti b’ċelloli totali CD19+ jew CD19+. Is-sekrezzjoni ta’ TNF, IFN, IL-10 u IL-4 għandha tiġi stabbilita minn ELISA f’supernatanti ta’ kultura. (Maltese)
17 August 2022
0 references
Vispārīga informācija: Regulējošām B šūnām (Breg) ir būtiska nozīme autoimūnu slimību attīstības negatīvajā kontrolē. Ir eksperimentāli pierādījumi, ka Breg šūnu patogēnais devums laika gaitā atšķiras un ir lielāks autoimunitātes attīstības sākumposmā. Breg šūnu fenotipiskais raksturojums ir pretrunīgs, un tagad ir pieņemts, ka cilvēkiem CD19+CD24highCD38high šūnas satur lielāko daļu B šūnu ar funkcionālo regulatīvo un ražošanas jaudu IL-10. Ir ziņots par Breg CD19+CD24highCD38augstu šūnu skaita un funkcijas izmaiņām vairāku autoimūnu slimību gadījumā, bet cilvēkiem ir maz pētījumu par šo šūnu tipu RA un neviens no pētījumiem par šo šūnu īpašībām agrīnā vai subklīniskajā RA. Mērķi: Pētīt Breg CD19+CD24highCD38augsto šūnu biežumu, fenotipu un funkciju pacientiem ar preklīnisku, sākotnēju un pierādītu RA. Metodes: Perifērās asinis tiks iegūtas no veselām kontrolēm un pacientiem ar preklīnisku, agrīnu un noteiktu RA. Perifēro asiņu mononukleārās šūnas tiks pētītas ar plūsmas citometriju pēc krāsošanas ar antivielām pret CD3, CD4, CD19, CD24 un CD38. Funkcionāliem pētījumiem mēs izolēsim kopējo CD19+ šūnas no pacientiem un magnētiskās separācijas kontroli. Brega noplicinātās CD19+ šūnas tiks iegūtas pēc tam, kad visas CD19+ šūnas tiks nodotas caur FACSVantage (Beckton Dickinson) šķirotāju, kas likvidē visu CD19+CD24highCD38augstu populāciju. Ar BCR vai TLR un CD40L klātbūtnē vai bez tās stimulētas BCR vai TLR stimulētas B šūnu kultūras nosaka ar kopējo CD19+ vai CD19+ šūnu skaitu. TNF, IFN, IL-10 un IL-4 sekrēciju nosaka ar ELISA metodi kultūras centrifugātos. (Latvian)
17 August 2022
0 references
Súvislosti: Regulačné B bunky (Breg) zohrávajú kľúčovú úlohu pri negatívnej kontrole vývoja autoimunitných ochorení. Existujú experimentálne dôkazy o tom, že patogénny prínos Bregových buniek sa v priebehu času mení a je vyšší v počiatočných štádiách vývoja autoimunity. Fenotypová charakterizácia Bregových buniek je kontroverzná a teraz sa uznáva, že u ľudí CD19+CD24highCD38high bunky obsahujú najvyšší podiel B buniek s funkčnou regulačnou a výrobnou kapacitou IL-10. Zmeny počtu a funkcie Breg CD19+CD24highCD38highCD38high-Slovakia boli hlásené pri niekoľkých autoimunitných ochoreniach, ale u ľudí existuje niekoľko štúdií o tomto type buniek v RA a žiadna o charakteristikách týchto buniek na začiatku alebo subklinickej RA. Ciele: Štúdia frekvencie, fenotypu a funkcie Breg CD19+CD24highCD38high-Slovakia u pacientov s predklinickým, nástupom a preukázanou RA. Metódy: Periférna krv sa získa od zdravých kontrol a pacientov s predklinickým, včasným a zavedeným RA. Mononukleárne bunky periférnej krvi budú študované prietokovou cytometriou po farbení protilátok proti CD3, CD4, CD19, CD24 a CD38. Pre funkčné štúdie budeme izolovať celkové CD19+ bunky od pacientov a kontrolu magnetickej separácie. Bregovo vyčerpané CD19+ bunky sa získajú po prechode všetkých CD19+ buniek cez triedič FACSVantage (Beckton Dickinson), ktorý eliminuje celú populáciu CD19+CD24highCD38high. Kultúry B-buniek s depléciou Breg stimulované prostredníctvom BCR alebo TLR a v prítomnosti alebo neprítomnosti CD40L sa stanovia s celkovým počtom CD19+ alebo CD19+ buniek. Sekréciu TNF, IFN, IL-10 a IL-4 stanoví ELISA v kultivačných supernatantoch. (Slovak)
17 August 2022
0 references
Cúlra: Tá ról lárnach ag cealla rialála B (Breg) i rialú diúltach ar fhorbairt galar uathimdhíonachta. Tá fianaise thurgnamhach ann go n-athraíonn rannchuidiú pataigineach na gceall Breg le himeacht ama agus go bhfuil sé níos airde i luathchéimeanna forbartha uathdhíonta. Is é an tréithriú feinitíopach na cealla Breg conspóideach, agus glactar leis anois go bhfuil i ndaoine CD19 +CD24highCD38high cealla an cion is airde de chealla B le cumas rialála agus táirgthe feidhmiúil IL-10. Tuairiscíodh athruithe ar líon agus ar fheidhm na gceall Breg CD19+CD24highCD38high i roinnt galar uathimdhíonachta, ach i ndaoine níl mórán staidéar ar an gcineál cille seo in RA agus níl aon cheann acu ar shaintréithe na gceall seo in RA go luath nó go fochliniciúil. Cuspóirí: Déan staidéar ar mhinicíocht, feinitíopa agus feidhm na gceall Breg CD19 +CD24highCD38high in othair a bhfuil RA réamhchliniciúil, tosaithe agus seanbhunaithe acu. Modhanna: Gheofar fuil imeallach ó rialuithe sláintiúla agus ó othair a bhfuil RA réamhchliniciúil, luath agus seanbhunaithe acu. Déanfar staidéar ar chealla monanúicléacha fola imeallacha trí chíteaiméadracht sreafa tar éis dathú le hantasubstaintí go CD3, CD4, CD19, CD24 agus CD38. Maidir le staidéir fheidhmiúla, déanfaimid cealla CD19 + iomlán ó othair agus rialuithe scaradh maighnéadacha a leithlisiú. Gheofar cealla laghdaithe CD19+ Breg tar éis dul thar na cealla iomlán CD19+ trí shórtóir FacsVantage (Beckton Dickinson) a chuireann deireadh leis an daonra iomlán CD19+CD24highCD38high. Saothráin B-chealla laghdaithe Breg a spreagtar trí BCR nó TLR agus i láthair nó in éagmais CD40L, bunófar iad le cealla iomlána CD19+ nó CD19+. Is é ELISA a chinnfidh rúnú TNF, IFN, IL-10 agus IL-4 i bhforlíontaí cultúir. (Irish)
17 August 2022
0 references
Souvislosti: Regulační B buňky (Breg) hrají klíčovou roli v negativní kontrole vývoje autoimunních onemocnění. Existují experimentální důkazy, že patogenní přínos Bregových buněk se v průběhu času liší a je vyšší v počátečních stádiích vývoje autoimunity. Fenotypová charakterizace Bregových buněk je kontroverzní a nyní se uznává, že u lidí CD19+CD24highCD38vysoké buňky obsahují nejvyšší podíl B buněk s funkční regulační a výrobní kapacitou IL-10. Změny v počtu a funkci buněk Breg CD19+CD24highCD38 byly hlášeny u několika autoimunních onemocnění, ale u lidí existuje jen málo studií na tomto typu buněk u RA a žádná z charakteristik těchto buněk v časných nebo subklinických RA. Cíle: Studie frekvence, fenotypu a funkce Breg CD19+CD24highCD38 buněk u pacientů s preklinickým, nástupem a stanovením RA. Metody: Periferní krev bude získána ze zdravých kontrol a pacientů s preklinickým, časným a zavedeným RA. Mononukleární buňky periferní krve budou studovány průtokovou cytometrií po barvení protilátky na CD3, CD4, CD19, CD24 a CD38. Pro funkční studie budeme izolovat celkové CD19+ buňky od pacientů a magnetické separační kontroly. Bregovy vyčerpané CD19+ buňky budou získány po průchodu celkem CD19+ buňkami FACSVantage (Beckton Dickinson), který eliminuje celou populaci CD19+CD24highCD38. B-buněčné kultury vyčerpané Bregem stimulované BCR nebo TLR a za přítomnosti nebo nepřítomnosti CD40L se stanoví s celkovými buňkami CD19+ nebo CD19+. Sekreci TNF, IFN, IL-10 a IL-4 stanoví ELISA v kulturně supernatantech. (Czech)
17 August 2022
0 references
Antecedentes: As células B reguladoras (Breg) desempenham um papel fundamental no controlo negativo do desenvolvimento de doenças autoimunes. Há evidências experimentais de que a contribuição patogénica das células Breg varia ao longo do tempo e é maior nas fases iniciais do desenvolvimento da autoimunidade. A caracterização fenotípica das células Breg é controversa e é agora aceite que, nos seres humanos, as células CD19+CD24highCD38high contêm a maior proporção de células B com capacidade funcional reguladora e de produção de IL-10. Alterações no número e função das células Breg CD19+CD24highCD38high foram relatadas em várias doenças autoimunes, mas em humanos há poucos estudos sobre este tipo de célula na AR e nenhum sobre as características destas células na AR precoce ou subclínica. Objectivos: Estudar a frequência, o fenótipo e a função das células Breg CD19+CD24highCD38high em doentes com AR pré-clínica, de início e estabelecida. Métodos: O sangue periférico será obtido a partir de controlos saudáveis e de doentes com AR pré-clínica, precoce e estabelecida. As células mononucleares do sangue periférico serão estudadas por citometria de fluxo após tingimento com anticorpos para CD3, CD4, CD19, CD24 e CD38. Para estudos funcionais, isolaremos as células CD19+ totais dos doentes e dos controlos de separação magnética. As células CD19+ empobrecidas de Breg serão obtidas depois de passar as células CD19+ totais através de um classificador FacsVantage (Beckton Dickinson), eliminando toda a população CD19+CD24highCD38high. As culturas de células B empobrecidas em Breg estimuladas através de BCR ou TLR e na presença ou ausência de CD40L devem ser estabelecidas com células CD19+ ou CD19+ totais. A secreção de TNF, IFN, IL-10 e IL-4 deve ser determinada pelo método ELISA em sobrenadantes de cultura. (Portuguese)
17 August 2022
0 references
Taust: Regulatiivsetel B-rakkudel (Breg) on oluline roll autoimmuunhaiguste arengu negatiivses kontrollis. On eksperimentaalseid tõendeid, et Bregi rakkude patogeensete panus varieerub aja jooksul ja on autoimmuunsuse arengu varases staadiumis suurem. Breg-rakkude fenotüübiline iseloomustus on vastuoluline ja nüüd on aktsepteeritud, et inimestel sisaldavad CD19+CD24highCD38high cells kõige rohkem B-rakke, millel on funktsionaalne regulatiivne ja tootmisvõimsus IL-10. Mitmete autoimmuunhaiguste puhul on teatatud Breg CD19+CD24highCD38high cell’i arvu ja funktsiooni muutustest, kuid inimestel on selle rakutüübi kohta RA-s vähe uuringuid ja nende rakkude omaduste kohta varases või subkliinilises RAs ei ole ühtegi uuringut. Eesmärgid: Uurige Breg CD19+CD24highCD38high cell’i sagedust, fenotüüpi ja funktsiooni prekliinilise, algusega ja väljakujunenud reumatoidartriidiga patsientidel. Meetodid: Perifeerset verd saadakse tervetest kontrollproovidest ja patsientidel, kellel on prekliiniline, varajane ja väljakujunenud reumatoidartriit. Perifeerse vere mononukleaarseid rakke uuritakse voolutsütomeetriliselt pärast värvimist CD3, CD4, CD19, CD24 ja CD38 antikehadega. Funktsionaalsete uuringute jaoks isoleerime CD19+ rakud patsientidelt ja magnetilise eraldamise kontroll(imehhanism)id. Breg ammendunud CD19+ rakud saadakse pärast kogu CD19+ rakkude läbimist läbi FACSVantage (Beckton Dickinson) sorter elimineerides kogu CD19+CD24highCD38high populatsiooni. Breg-vaese B-rakkude kultuurid, mida stimuleeritakse BCRi või TLRi kaudu ja CD40L juuresolekul või puudumisel, tehakse kindlaks CD19+ või CD19+ rakkude koguarvuga. TNF, IFN, IL-10 ja IL-4 sekretsioon määratakse kindlaks ELISA abil kultuuri supernatantide puhul. (Estonian)
17 August 2022
0 references
Háttér: A szabályozó B-sejtek (Breg) kulcsszerepet játszanak az autoimmun betegségek kialakulásának negatív kontrolljában. Kísérleti bizonyíték van arra, hogy a Breg-sejtek patogén hozzájárulása idővel változik, és az autoimmunitás kialakulásának korai szakaszában magasabb. A Breg sejtek fenotípusos jellemzése ellentmondásos, és most már elfogadott, hogy emberben a CD19+CD24highCD38magas sejtek a legnagyobb arányban tartalmazzák az IL-10 funkcionális szabályozói és termelési kapacitásával rendelkező B sejteket. Számos autoimmun betegségben beszámoltak a Breg CD19+CD24highCD38magas sejtek számában és funkciójában bekövetkezett változásokról, de emberben kevés vizsgálat van az RA-ban e sejttípusról, és ezeknek a sejteknek a jellemzőiről sem korai vagy szubklinikai RA-ban. Célkitűzések: A Breg CD19+CD24highCD38magas sejtek gyakoriságának, fenotípusának és funkciójának vizsgálata preklinikai, kialakuló és igazolt RA-ban szenvedő betegeknél. Módszerek: A perifériás vért egészséges kontrollokból és preklinikai, korai és igazolt RA-ban szenvedő betegekből nyerik. A perifériás vér mononukleáris sejtjeit a CD3, CD4, CD19, CD24 és CD38 ellenanyagokkal történő festést követően áramlási citometriával kell vizsgálni. Funkcionális vizsgálatokhoz az összes CD19+ sejtet elkülönítjük a betegektől és a mágneses szeparációs kontrolloktól. A Breg kimerült CD19+ sejtjeit a teljes CD19+ cellák áthaladása után nyerik egy FACSVantage (Beckton Dickinson) válogatón keresztül, amely eltávolítja a teljes CD19+CD24highCD38highpopulációt. A BCR-en vagy TLR-en keresztül stimulált Breg-szegény B-sejtkultúrákat CD40L jelenlétében vagy hiányában az összes CD19+ vagy CD19+ sejttel együtt kell meghatározni. A TNF, az IFN, az IL-10 és az IL-4 szekrécióját az ELISA határozza meg tenyésztési szupernatánsokban. (Hungarian)
17 August 2022
0 references
Контекст: Регулаторните В-клетки (Breg) играят ключова роля в отрицателния контрол на развитието на автоимунни заболявания. Има експериментални доказателства, че патогенният принос на Breg клетките варира с течение на времето и е по-висок в ранните стадии на автоимунно развитие. Фенотипното характеризиране на Breg клетките е спорно и сега се приема, че при хората CD19+CD24highCD38 клетките съдържат най-висок дял на В-клетки с функционален регулаторен и производствен капацитет на IL-10. При няколко автоимунни заболявания са докладвани промени в броя и функцията на Breg CD19+CD24highCD38високи клетки, но при хора има малко проучвания за този клетъчен тип в РА и няма данни за характеристиките на тези клетки в ранни или субклинични RA. Цели: Проучване на честотата, фенотипа и функцията на Breg CD19+CD24highCD38 високи клетки при пациенти с предклинична, начална и установена РА. Методи: Периферна кръв ще бъде получена от здрави контроли и пациенти с предклинична, ранна и установена РА. Моноядрените клетки в периферната кръв ще бъдат изследвани чрез поточна цитометрия след боядисване с антитела към CD3, CD4, CD19, CD24 и CD38. За функционални изследвания ще изолираме общо CD19+ клетки от пациентите и магнитно-отделящите контроли. Изчерпаните CD19+ клетки на Breg ще бъдат получени след преминаване на общите CD19+ клетки чрез сортировъчна машина FACSVantage (Beckton Dickinson), елиминираща цялата популация CD19+CD24highCD38. Обеднените B-клетъчни култури в Breg, стимулирани чрез BCR или TLR и при наличие или отсъствие на CD40L, се установяват с общо CD19+ или CD19+ клетки. Секрецията на TNF, IFN, IL-10 и IL-4 се определя от ELISA в супернатанти от култура. (Bulgarian)
17 August 2022
0 references
Bendra informacija: Reguliavimo B ląstelės (Breg) vaidina svarbų vaidmenį neigiamai kontroliuojant autoimuninių ligų vystymąsi. Yra eksperimentinių įrodymų, kad Breg ląstelių patogeninis poveikis laikui bėgant kinta ir yra didesnis ankstyvosiose autoimunijos vystymosi stadijose. Fenotipinis Breg ląstelių apibūdinimas yra prieštaringas, ir dabar pripažįstama, kad žmonėms CD19 + CD24highCD38high ląstelėse yra didžiausia B ląstelių dalis, turinti IL-10 funkcinį reguliavimą ir gamybos pajėgumą. Buvo pranešta apie Breg CD19+CD24highCD38high ląstelių skaičiaus ir funkcijos pakitimus keliose autoimuninėse ligose, tačiau su žmonėmis atlikta nedaug šio tipo ląstelių tyrimų RA ir nė vieno iš šių ląstelių savybių ankstyvojo ar subklinikinio RA tyrimo metu. Tikslai: Tirkite Breg CD19+CD24highCD38aukštos ląstelių dažnį, fenotipą ir funkciją pacientams, sergantiems ikiklinikiniu, pasireiškusiu ir nustatytu RA. Metodai: Periferinis kraujas bus gaunamas iš sveikų kontrolinių pacientų ir pacientų, sergančių ikiklinikiniu, ankstyvuoju ir įsitvirtinusiu RA. Periferinio kraujo mononuklearinės ląstelės bus tiriamos srauto citometrija po dažymo su antikūnais prieš CD3, CD4, CD19, CD24 ir CD38. Funkciniams tyrimams mes izoliuosime visas CD19+ ląsteles nuo pacientų ir magnetinio atskyrimo kontrolės. Breg išeikvotos CD19+ ląstelės bus gautos išdavus visas CD19+ ląsteles per FACSVantage (Beckton Dickinson) rūšiatorių, pašalinant visą CD19 + CD24highCD38 didelę populiaciją. Breg išeikvotos B ląstelių kultūros, stimuliuojamos BCR arba TLR ir esant arba nesant CD40L, nustatomos naudojant bendrą CD19+ arba CD19+ ląstelių kiekį. TNF, IFN, IL-10 ir IL-4 sekrecija nustatoma taikant ELISA metodą kultūros supernatantuose. (Lithuanian)
17 August 2022
0 references
Kontekst: Regulatorne B stanice (Breg) imaju ključnu ulogu u negativnoj kontroli razvoja autoimunih bolesti. Postoje eksperimentalni dokazi da patogeni doprinos Breg stanica varira tijekom vremena i da je veći u ranim fazama razvoja autoimunosti. Fenotipska karakterizacija Breg stanica je kontroverzna, a sada je prihvaćeno da u ljudi CD19+CD24highCD38high cells sadrže najveći udio B stanica s funkcionalnim regulatornim i proizvodnim kapacitetom IL-10. Promjene u broju i funkciji Breg CD19+CD24highCD38visoke stanice zabilježene su u nekoliko autoimunih bolesti, ali u ljudi postoji malo istraživanja o ovom tipu stanica u RA i nijedna o karakteristikama tih stanica u ranim ili subkliničkim RA. Ciljevi: Ispitati učestalost, fenotip i funkciju Breg CD19 + CD24highCD38highCD38high cell u bolesnika s pretkliničkim, nastupom i ustanovljenim RA. Metode: Periferna krv će biti dobivena od zdravih kontrola i bolesnika s pretkliničkim, ranim i ustanovljenim RA. Mononuklearne stanice periferne krvi proučavat će se protočnom citometrijom nakon bojenja antitijelima na CD3, CD4, CD19, CD24 i CD38. Za funkcionalne studije izdvojit ćemo ukupne CD19+ stanice od pacijenata i kontrole magnetskog odvajanja. Bregove osiromašene CD19+ stanice dobit će se nakon prolaska ukupnih CD19+ stanica kroz FACSVantage (Beckton Dickinson) sorter eliminirajući cijelu CD19+CD24highCD38high populaciju. Kulture B-stanica s osiromašenim Bregom stimulirane BCR-om ili TLR-om i u prisutnosti ili odsutnosti CD40L utvrđuju se s ukupnim CD19+ ili CD19+ stanicama. Izlučivanje TNF-a, IFN-a, IL-10 i IL-4 određuje ELISA u supernatanta za kulturu. (Croatian)
17 August 2022
0 references
Bakgrund: Regulatoriska B-celler (Breg) spelar en nyckelroll i den negativa kontrollen av utvecklingen av autoimmuna sjukdomar. Det finns experimentella belägg för att Bregcellernas patogena bidrag varierar över tid och är högre i tidiga stadier av autoimmunitetsutveckling. Den fenotypiska karakteriseringen av Bregceller är kontroversiell, och det är nu accepterat att CD19+CD24highCD38höga celler hos människor innehåller den högsta andelen B-celler med funktionell regulatorisk och produktionskapacitet av IL-10. Förändringar i antalet och funktionen hos Breg CD19+CD24highCD38höga celler har rapporterats vid flera autoimmuna sjukdomar, men hos människor finns det få studier på denna celltyp i RA och inga på egenskaperna hos dessa celler vid tidig eller subklinisk RA. Mål: Studera frekvens, fenotyp och funktion av Breg CD19+CD24highCD38höga celler hos patienter med preklinisk, debuterande och etablerad RA. Metoder: Perifert blod kommer att erhållas från friska kontroller och patienter med prekliniskt, tidigt och etablerat RA. Mononukleära celler i perifert blod kommer att studeras genom flödescytometri efter färgning med antikroppar mot CD3, CD4, CD19, CD24 och CD38. För funktionella studier kommer vi att isolera totalt CD19±celler från patienter och magnetiska separationskontroller. Bregs utarmade CD19±celler kommer att erhållas efter att ha passerat de totala CD19±cellerna genom en FACSVantage (Beckton Dickinson) sortering som eliminerar hela CD19+CD24highCD38högpopulationen. Breg-utarmade B-cellkulturer som stimuleras genom BCR eller TLR och i närvaro eller frånvaro av CD40L ska fastställas med totalt CD19+ eller CD19±celler. Utsöndringen av TNF, IFN, IL-10 och IL-4 ska bestämmas av Elisa i kultursupernatanter. (Swedish)
17 August 2022
0 references
Context: Celulele B de reglementare (Breg) joacă un rol-cheie în controlul negativ al dezvoltării bolilor autoimune. Există dovezi experimentale că contribuția patogenă a celulelor Breg variază în timp și este mai mare în stadiile incipiente ale dezvoltării autoimunității. Caracterizarea fenotipică a celulelor Breg este controversată și acum este acceptat faptul că la om celulele CD19+CD24highCD38high conțin cea mai mare proporție de celule B cu capacitate funcțională de reglementare și de producție de IL-10. Au fost raportate modificări ale numărului și funcției celulelor Breg CD19+CD24highCD38high în mai multe boli autoimune, dar la om există puține studii cu privire la acest tip de celule în PR și niciunul privind caracteristicile acestor celule în PR precoce sau subclinic. Obiective: Se studiază frecvența, fenotipul și funcția celulelor Breg CD19+CD24highCD38high la pacienții cu PR preclinică, debut și stabilită. Metode: Sângele periferic va fi obținut de la martori sănătoși și de la pacienți cu PR preclinică, precoce și stabilită. Celulele mononucleare din sângele periferic vor fi studiate prin citometrie de flux după vopsirea cu anticorpi la CD3, CD4, CD19, CD24 și CD38. Pentru studiile funcționale, vom izola celulele CD19+ totale de la pacienți și controalele de separare magnetică. Celulele CD19+ epuizate de Breg vor fi obținute după trecerea celulelor CD19+ totale printr-un sortator FACSVantage (Beckton Dickinson), eliminând întreaga populație CD19+CD24highCD38high. Culturile de celule B sărăcite de Breg stimulate prin BCR sau TLR și în prezența sau absența CD40L se stabilesc cu celule CD19+ sau CD19+ totale. Secreția de TNF, IFN, IL-10 și IL-4 se determină de către ELISA în supernatanții de cultură. (Romanian)
17 August 2022
0 references
Ozadje: Regulativne celice B (Breg) igrajo ključno vlogo pri negativnem nadzoru razvoja avtoimunskih bolezni. Obstajajo eksperimentalni dokazi, da se patogeni prispevek Breg celic s časom spreminja in je večji v zgodnjih fazah razvoja avtoimunosti. Fenotipska karakterizacija Breg celic je sporna in zdaj je sprejeto, da pri ljudeh CD19+CD24highCD38visoke celice vsebujejo največji delež celic B s funkcionalno regulativno in proizvodno zmogljivostjo IL-10. Pri več avtoimunskih boleznih so poročali o spremembah števila in delovanja celic Breg CD19+CD24highCD38, vendar je pri ljudeh malo študij o tem tipu celic pri revmatoidnem artritisu in nobene o značilnostih teh celic pri zgodnjem ali subkliničnem revmatoidnem artritisu. Cilji: Študija pogostnosti, fenotipa in delovanja celic Breg CD19+CD24highCD38highCD38 pri bolnikih s predklinično, na začetku in uveljavljenim revmatoidnim artritisom. Metode: Periferno kri dobimo pri zdravih kontrolah in bolnikih s predkliničnim, zgodnjim in uveljavljenim revmatoidnim artritisom. Mononuklearne celice periferne krvi bodo raziskane s pretočno citometrijo po barvanju s protitelesi proti CD3, CD4, CD19, CD24 in CD38. Za funkcionalne študije bomo izolirali celotne celice CD19+ iz bolnikov in kontrole magnetne ločevanja. Bregove izčrpane celice CD19+ bodo pridobljene po prehodu vseh celic CD19+ prek sortirnika FACSVantage (Beckton Dickinson), ki odpravlja celotno populacijo CD19+CD24highCD38. Breg-depleted B-celice kulture, stimulirane z BCR ali TLR in v prisotnosti ali odsotnosti CD40L se določijo s skupnimi celicami CD19+ ali CD19+. Izločanje TNF, IFN, IL-10 in IL-4 določi ELISA v supernatantih kultur. (Slovenian)
17 August 2022
0 references
Kontekst: Regulacyjne komórki B (Breg) odgrywają kluczową rolę w negatywnej kontroli rozwoju chorób autoimmunologicznych. Istnieją eksperymentalne dowody na to, że patogenny udział komórek Brega zmienia się w czasie i jest wyższy we wczesnych stadiach rozwoju autoimmunity. Fenotypowa charakterystyka komórek Breg jest kontrowersyjna i obecnie przyjmuje się, że u ludzi komórki CD19+CD24highCD38 zawierają najwyższy odsetek komórek B o funkcjonalnych zdolnościach regulacyjnych i produkcyjnych IL-10. Zmiany w liczbie i funkcji komórek Breg CD19+CD24highCD38 odnotowano w kilku chorobach autoimmunologicznych, ale u ludzi istnieje niewiele badań na tym typie komórek w RZS i brak danych dotyczących cech tych komórek we wczesnym lub subklinicznym RZS. Cele: Badanie częstości występowania, fenotypu i funkcji komórek Breg CD19+CD24highCD38 u pacjentów z przedkliniczną, początkową i ustaloną RZS. Metody: Krew obwodowa będzie pozyskiwana ze zdrowych grup kontrolnych i pacjentów z przedklinicznym, wczesnym i ustalonym RZS. Komórki jednojądrowe krwi obwodowej będą badane za pomocą cytometrii przepływu po barwieniu przeciwciałami przeciwko CD3, CD4, CD19, CD24 i CD38. Do badań funkcjonalnych będziemy izolować całkowite komórki CD19+ od pacjentów i magnetyczne kontrole separacji. Wyczerpane komórki CD19+ Breg zostaną uzyskane po przejściu wszystkich komórek CD19+ przez sorter FACSVantage (Beckton Dickinson) eliminujący całą populację CD19+CD24highCD38. Kultury zubożające komórki B stymulowane przez BCR lub TLR oraz w obecności lub braku CD40L ustanawia się łącznie z komórkami CD19+ lub CD19+. Wydzielanie TNF, IFN, IL-10 i IL-4 określa ELISA w supernatantach kulturowych. (Polish)
17 August 2022
0 references
Madrid
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
PI16_01189
0 references