Development of a clinically applicable method for targeting peripheral nerves (Q2720768)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q2720768 in Cyprus
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Development of a clinically applicable method for targeting peripheral nerves |
Project Q2720768 in Cyprus |
Statements
212,500.0 Euro
0 references
250,000.0 Euro
0 references
85.0 percent
0 references
24 January 2019
0 references
30 November 2021
0 references
The Cyprus Foundation for Muscular Dystrophy Research Κυπριακό 'Ιδρυμα Ερευνών για τη Μυϊκή Δυστροφία (The Cyprus Institute of Neurology and Genetics)
0 references
Σκοπός της παρούσας εργασίας είναι η ανάπτυξη μιας στοχευόμενης γονιδιακής θεραπείας με τη χρήση ιικών φορέων που μπορούν να χρησιμοποιηθούν σε κλινικές μελέτες. Η μελέτη αυτή θα βοηθήσει στην εύρεση θεραπείας για κληρονομικές νευροπάθειες απομυελινωτικού τύπου οι οποίες οφείλονται σε μεταλλάξεις γονιδίων τα οποία εκφράζονται ειδικά στα κύτταρα του Schwann. Θα γίνει επιλογή κλινικά ασφαλών AAV οροτύπων, όπως AAV9, AAVrh10, AAV.PHP.S, AAV2/rh10, με βάση τον τροπισμό που επιδεικνύουν προς τα ανθρώπινα κύτταρα του Schwann. Παράλληλα θα ελεγχθούν μικρού μεγέθους υποκινητές ειδικοί για κύτταρα Schwann, όπως ο miniMpz και ο Aatk, των οποίων η ικανότητα για στοχευόμενη έκφραση θα ελεγχθεί σε κοινές κυτταροκαλλιέργειες κυττάρων του Schwann και PC12. Η ικανότητα των ιικών φορέων με μικρού μεγέθους υποκινητές να εκφραστούν στα κύτταρα Schwann θα εξεταστεί σε ποντίκια μετά από ενδοραχιαία έκχυση. Βασιζόμενοι στα αποτελέσματα αυτά θα γίνει παραγωγή των αντίστοιχων θεραπευτικών ιικών φορέων οι οποίοι θα ελεγχθούν σε δύο μοντέλα συχνών απομυελινωτικών νευροπαθειών, της CMT1A και της CMT1X. Οι νέοι αυτοί ιικοί φορείς καθώς και οι υποκινητές θα ελεγχθούν για τη θεραπευτική ικανότητά τους να αντιμετωπίσουν το μηχανισμό της κάθε νευροπάθειας στα κύτταρα του Schwann. Το γονίδιο GJB1 που είναι μεταλλαγμένο στην CMT1X θα αντικατασταθεί με τη βοήθεια του ιικού φορέα μετά από ενδοραχιαία έκχυση και θα γίνει ανάλυση της έκφρασής του καθώς και του εντοπισμού της κοννεξίνης 32 (Cx32) σε Cx32 ΚΟ ποντίκια, ενώ sh-RNAs που στοχεύουν το γονίδιο της PMP22 θα εγχυθούν ενδοραχιαία σε C61 ποντίκια που υπερεκφράζουν την PMP22, σαν μοντέλο για τη CMT1A. Τέλος, θα γίνει θεραπευτική δοκιμή και στα δύο μοντέλα της CMT χρησιμοποιώντας τους πιο αποτελεσματικούς ιικούς φορείς που θα καθοριστούν από τις προηγούμενες μελέτες. Επιβεβαίωση του θεραπευτικού ωφέλους της γονιδιακής θεραπείας θα γίνει με τη χρήση συμπεριφορικής, ηλεκτροφυσιολογικής, καθώς και μορφολογικής μελέτης, προσφέροντας απόδειξη για περε (Greek)
0 references
The purpose of this paper is to develop targeted gene therapy using viral vectors that can be used in clinical studies. This study will help find a cure for hereditary demyelinating neuropathies due to gene mutations specifically expressed in Schwann cells. Clinically safe AAV serotypes, such as AAV9, AAVrh10, AAV.PHP.S, AAV2/rh10, will be selected based on their modulation to Schwann human cells. At the same time, small-sized instigators for Schwann cells, such as miniMpz and Aatk, will be tested, whose ability for targeted expression will be tested in common cells of Schwann and PC12. The ability of viral vectors with small instigators to express themselves in Schwann cells will be examined in mice after intrathecal spillage. Based on these results, the respective therapeutic viral vectors will be produced, which will be tested in two models of frequent demyelinating neuropathies, CMT1A and CMT1X. These new viral carriers and instigators will be tested for their therapeutic ability to cope with the mechanism of any neuropathy in Schwann cells. The GJB1 mutated gene in CMT1X will be replaced with the help of the viral vector after intrathecal spillage and analysis of its expression and detection of connexin 32 (Cx32) in Cx32 KM mice, while sh-RNAs targeting the PMP22 gene will be injected intrathecally into C61 mice that overexpress the PMP1. Finally, both CMT models will be therapeutically tested using the most effective viral vectors to be defined in the previous studies. Confirmation of the therapeutic benefit of gene therapy will be done using behavioral, electrophysiological and morphological study, offering proof of Pere (English)
31 May 2021
0 references
Le but de ce travail est de développer une thérapie génique ciblée à l’aide de vecteurs viraux qui peut être utilisée dans des études cliniques. Cette étude aidera à trouver un traitement pour les neuropathies héréditaires de type démyélinisant causées par des mutations génétiques spécifiquement exprimées dans les cellules de Schwann. Une sélection de sérotypes AAV cliniquement sûrs, tels que AAV9, AAVrh10, AAV.PHP.S, AAV2/rh10, basé sur le tropisme manifesté envers les cellules humaines de Schwann. Dans le même temps, des stimulateurs spécifiques aux cellules de Schwann de petite taille tels que miniMpz et Aatk seront testés, dont la capacité d’expression ciblée sera testée dans des cultures cellulaires communes de Schwann et PC12. La capacité des porteurs viraux avec des stimulateurs de petite taille à s’exprimer dans les cellules de Schwann sera testée chez la souris après perfusion intrathécale. Sur la base de ces résultats, les vecteurs viraux thérapeutiques correspondants seront produits et testés dans deux modèles de neuropathies démyélinisantes fréquentes, CMT1A et CMT1X. Ces nouveaux vecteurs viraux et instigateurs seront testés pour leur capacité thérapeutique à faire face au mécanisme de toute neuropathie dans les cellules de Schwann. Le gène GJB1 muté dans CMT1X sera remplacé à l’aide du vecteur viral après perfusion intrathécale et analyse de son expression, ainsi que la détection de la connéxine 32 (Cx32) chez des souris CB Cx32, tandis que les ARN-sh ciblant le gène PMP22 seront injectés par voie intrathécale dans des souris C61 surexprimant le PMP22, comme modèle pour le CMT1A. Enfin, les deux modèles de CMT seront traités à l’aide des vecteurs viraux les plus efficaces à déterminer dans le cadre d’études antérieures. La confirmation de l’avantage thérapeutique de la thérapie génique sera effectuée à l’aide d’études comportementales, électrophysiologiques et morphologiques, ce qui permettra d’établir d’autres (French)
27 November 2021
0 references
Ziel dieser Arbeit ist die Entwicklung einer gezielten Gentherapie mit viralen Vektoren, die in klinischen Studien eingesetzt werden können. Diese Studie wird helfen, eine Behandlung für erbliche Neuropathien des demyelinierenden Typs zu finden, die durch Genmutationen verursacht werden, die speziell in Schwann-Zellen ausgedrückt werden. Eine Auswahl klinisch sicherer AAV-Serotypen wie AAV9, AAVrh10, AAV.PHP.S, AAV2/rh10, basierend auf dem Tropismus, der gegenüber den menschlichen Zellen von Schwann demonstriert. Gleichzeitig werden kleine Schwann zellspezifische Stimulatoren wie miniMpz und Aatk getestet, deren Fähigkeit zur gezielten Expression in gängigen Zellkulturen Schwann und PC12 getestet wird. Die Fähigkeit viraler Träger mit kleinen Stimulatoren, sich in Schwann-Zellen auszudrücken, wird nach intrathekaler Infusion in Mäusen getestet. Auf der Grundlage dieser Ergebnisse werden die entsprechenden therapeutischen viralen Vektoren in zwei Modellen von häufig demyelinierenden Neuropathien, CMT1A und CMT1X, produziert und getestet. Diese neuen viralen Vektoren und Anstifter werden auf ihre therapeutische Fähigkeit getestet, den Mechanismus jeder Neuropathie in Schwann-Zellen zu bewältigen. Das GJB1-Gen, das in CMT1X mutiert wird, wird mit Hilfe des viralen Vektors nach intrathekaler Infusion und Analyse seiner Expression sowie dem Nachweis von Connexin 32 (Cx32) in Cx32 CB Mäusen ersetzt, während sh-RNAs, die auf das PMP22-Gen abzielen, als Modell für CMT1A intrathekal in C61 Mäuse injiziert werden. Schließlich werden beide CMT-Modelle mit den effektivsten viralen Vektoren behandelt, die von früheren Studien bestimmt werden. Die Bestätigung des therapeutischen Nutzens der Gentherapie erfolgt unter Verwendung verhaltensbezogener, elektrophysiologischer sowie morphologischer Untersuchungen, die weitere Belege liefern. (German)
29 November 2021
0 references
*Δεν έχει γεωγραφική διάσταση*
0 references
Identifiers
34460
0 references