No label defined (Q3056378)
Jump to navigation
Jump to search
Project in Portugal 81
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | No label defined |
Project in Portugal 81 |
Statements
528,646.01 Euro
0 references
621,936.48 Euro
0 references
1 April 2017
0 references
31 March 2020
0 references
LATVIJAS UNIVERSITĀTE
0 references
1.1.1. Acetaldehīds ir vērtīga ķīmiskās rūpniecības izejviela. Etanolu sintezējošajos raugos un baktērijās šis metabolīts ir etanola tiešais priekštecis. Baktērijā Zymomonas mobilis tas veidojas citoplazmatiskajā piruvātdekarboksilāzes (PDC) reakcijā. Tas uzkrājas aerobos apstākļos, kad elpošana patērē daļu NADH, kurš nepieciešams alkoholdehidrogenāzes (ADH) reakcijā. Acetaldehīdu var aizvadīt no kultūras vides ar gāzes plūsmu. Acetaldehīda difūzijas ātrums caur membrānas lipīdu dubultslāni ir potenciāls limitējošais posms tā producēšanā. Šī metabolīta uzkrāšanās šūnā izraisa izteiktu augšanas inhibēšanu. Lai minimizētu acetaldehīda iekššūnas koncentrāciju, līdz ar to mazinot tā izraisīto inhibēšanu, mēs konstruēsim PDC fūzijas ar periplazmatisko proteīnu signālsekvencēm, ar mērķi acetaldehīda sintēzi pārnest uz periplazmu. Rekombinantais celms (celmi) tiks pakļauts selekcijas spiedienam ar ārēji pievienotu acetaldehīdu, lai iegūtu mutantus, kuriem būtu pazemināta citoplazmatiskās membrānas caurlaidība acetaldehīdam un paaugstināta citoplazmatisko stresa aizsardzības sistēmu aktivitāte. Tas radītu pamatu jauna tipa acetaldehīdu producējošiem celmiem ar augstu produktivitāti un rezistenci pret inhibēšanu. Tiks izveidots matemātisks modelis procesa kinētikas datorsimulēšanai, lai optimizētu kultivēšanas un piebarošanas režīmu.Atslēgas vārdi: acetaldehīds, Zymomonas mobilis, piruvātdekarboksilāze, periplazma, produkta inhibēšana, stresa rezistence1.1.2. Projekta mērķis: radīt Zymomonas mobilis celmu, kuram acetaldehīdu sintezējošā piruvātdekarboksilāzes (PDC) reakcija ir lokalizēta periplazmā, nevis citoplazmā, un kam piemīt paaugstināta acetaldehīda rezistence. Lai to veiktu, tiks: - konstruēts PDC-negatīvs celms un izmantojot selekciju hemostatā, paaugstināta piruvāta sintēze un izdalīšana vidē;- pdc gēna kodējošajai daļai pievienotas vairākas Z. mobilis periplazmatisko proteīnu signālsekvences, un ar iegūtajiem plazmīdu konstruktiem transformēts pdc-negatīvais mutants, iegūstot celmu, kuram acetaldehīda sintēzes reakcija ekspresēta periplazmā, nevis citoplazmā, lai sintezētais acetaldehīds varētu vieglāk nokļūt starpšūnu telpā, mazāk saskaroties ar citoplazmas komponentiem;- veikta selekcija hemostatā pie paaugstinātām acetaldehīda koncentrācijām vidē, lai celmam ar periplazmatisko PDC aktivitāti pazeminātu citoplazmatiskās membrānas caurlaidību acetaldehīdam, un pastiprinātu iekššūnas acetaldehīda rezistences mehanismus;- izveidots matemātiskais modelis, lai simulētu acetaldehīda sintēzes kinētiku un difūziju periplazmatiskajā telpā.Rezultātā tiks iegūts celms ar augstu rezistenci pret acetaldehīdu, kuram vienlaikus būtu augsta acetaldehīda produktivitāte, un kas varētu kalpot par pamatu tālākajai metaboliskajai inženierijai, lai konstruētu industriālus producentu celmus. Projektā paredzētais pētījumu veids: fundamentālie pētījumi.Projekts ir starpdisciplinārs: tas atbilst zinātnes nozarēm 1.6. ‘Bioloģijas zinātnes’ un 2.9. ‘Rūpnieciskā biotehnoloģija’. Projekts ir ar saimniecisko darbību nesaistīts.Projekta kopējās izmaksas ir 638 442.77 EUR, projekta ilgums ir 36 mēneši. Atbilstošā Viedās specializācijas joma: biomedicīna, medicīnas tehnoloģijas, biofarmācija un biotehnoloģija. (Latvian)
0 references
Jelgavas iela 1, Rīga, LV-1004
0 references
Identifiers
1.1.1.1/16/A/185
0 references