ERDF — INSERM — Alloc cofin — Pauline HELIE (Q3673360)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3673360 in France
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | ERDF — INSERM — Alloc cofin — Pauline HELIE |
Project Q3673360 in France |
Statements
44,149.00 Euro
0 references
89,149.0 Euro
0 references
49.52 percent
0 references
1 October 2015
0 references
31 March 2019
0 references
INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE
0 references
59016
0 references
La sclérose en plaques (SEP) est une maladie neurodégénérative à composantes inflammatoire et autoimmune. Un dérèglement de la réponse immunitaire est décrit dans cette pathologie avec un déficit fonctionnel des lymphocytes T (LT) régulateurs (Treg) dont le rôle est de contrôler l activation de LT autoréactifs pathogéniques en périphérie. L activateur tissulaire du plasminogène (t-PA) est une sérine protéase avec des fonctions pléotropiques. Le tPA est impliqué en autres dans la fibrinolyse, la survie des neurones et l inflammation. Des données de la littérature montrent un rôle du tPA dans la sélection négative thymique, un mécanisme de tolérance immunitaire qui induit l apoptose des LT possédant une forte autoréactivité. D autre part, dans le modèle de l encéphalomyélite autoimmune expérimentale (EAE) proche de la SEP, des études avec des souris déficientes en t-PA suggèrent un rôle protecteur de cette molécule dans la phase tardive de la maladie. Dans notre laboratoire, nous avons développé un anticorps (Ac) bloquant l interaction entre le tPA et la sous-unité GlUN1 du récepteur NMDA qui limite l évolution de l EAE à un stade précoce. Notre projet vise à étudier le rôle du tPA en condition physiologique et immunopathologique (modèle EAE) en bloquant l action du tPA de manière génétique (souris déficientes pour le tPA) ou pharmacologique (utilisation de notre anticorps anti- GLUN1). Au sein des organes lymphoïdes et du cerveau, nous caractériserons les changements phénotypiques et fonctionnels des leucocytes impliqués dans la réponse immunitaire [LT, lymphocytes B (LB) et cellules dendritiques (DC)] avec un intérêt particulier pour les sous-populations des LT effecteurs spécifiques des peptides de myéline, et des Treg. Pour ce faire, les différentes populations leucocytaires isolées mécaniquement de la rate, des ganglions et cerveau de souris sauvages, tPA-/- induites ou non en EAE seront caractérisées en cytométrie en flux à l aide d Ac spécifiques. La spécificité antigénique et les fonctions des LT (prolifération et la production de cytokines) seront également analysées par des techniques de cytométrie. En parallèle, nous caractérisons l expression par les leucocytes des récepteurs avec lesquels interagissent avec le tPA, parmi lesquels le récepteur NMDA.Cette étude apportera une meilleure connaissance du rôle du tPA dans l immunité adaptative, et dans le mécanisme fondamental de la tolérance thymique. Les informations issues de cette étude seront également mises à profit pour développer des stratégies thérapeutiques dans la SEP et plus globalement dans les pathologies autoimmunes. (French)
0 references
Multiple sclerosis (MS) is a neurodegenerative disease with inflammatory and autoimmune components. An immune response disorder is described in this pathology with a functional deficiency of T-cell regulators (Treg) whose role is to control the activation of pathogenic autoreactive LT in the periphery. Plasminogen tissue activator (t-PA) is a serine protease with pleotropic functions. TPA is involved in fibrinolysis, neuron survival and inflammation. Literature data show a role of tPA in negative thymic selection, an immune tolerance mechanism that induces LT apoptosis with high self-reactivity. On the other hand, in the model of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) close to MS, studies with mice deficient in t-PA suggest a protective role of this molecule in the late phase of the disease. In our laboratory, we developed an antibody (Ac) blocking the interaction between tPA and the GlUN1 subunit of the NMDA receptor that limits the evolution of EAE at an early stage. Our project aims to study the role of tPA in physiological and immunopathological condition (EAA model) by blocking the action of tPA in a genetic (muse deficient for tPA) or pharmacological (use of our anti-GLUN1 antibodies). In the lymphoid and brain organs, phenotypic and functional changes of the leukocytes involved in the immune response (LT, B lymphocytes (LB) and dendritic cells (DC)) will be characterised with particular interest in the LT-specific effector subpopulations of myelin peptides, and Treg. To achieve this, the different leukocyte populations mechanically isolated from the spleen, ganglia and brains of wild, tPA-/--AAE-induced or not will be characterised in flow cytometry using specific Acs. The antigenic specificity and functions of LT (proliferation and cytokine production) will also be analysed by cytometry techniques. In parallel, we characterise the expression by leukocytes of receptors interacting with tPA, including the NMDA receptor. This study will provide a better understanding of the role of tPA in adaptive immunity, and in the fundamental mechanism of thymic tolerance. The information from this study will also be used to develop therapeutic strategies in MS and more generally in autoimmune pathologies. (English)
18 November 2021
0.479823272557871
0 references
Multiple Sklerose (MS) ist eine neurodegenerative Erkrankung mit entzündlichen und autoimmunen Komponenten. Eine Störung der Immunantwort wird in dieser Pathologie mit einem funktionellen Mangel an T (LT) Regulatoren (Treg)-Lymphozyten beschrieben, deren Aufgabe es ist, die Aktivierung von autoreaktiven pathogenen LT an den Peripherie zu kontrollieren. Der Gewebeaktivator von Plasminogen (t-PA) ist ein Serin Protease mit pleotropen Funktionen. TPA ist an der Fibrinolyse, dem Überleben von Neuronen und Entzündungen beteiligt. Literaturdaten zeigen eine Rolle von TPA bei der thymischen negativen Selektion, einem Immun-Toleranzmechanismus, der die Apoptose der LT mit hoher Selbstreaktivität induziert. Andererseits deuten im Modell der experimentellen Autoimmunenzephalomyelitis (EAE) nahe der MS Studien mit t-PA-Mäusen auf eine schützende Rolle dieses Moleküls in der späten Krankheitsphase hin. In unserem Labor haben wir einen Antikörper (Ac) entwickelt, der die Interaktion zwischen TPA und der GlUN1-Untereinheit des NMDA-Rezeptors blockiert, die die Entwicklung des EAE in einem frühen Stadium einschränkt. Unser Projekt zielt darauf ab, die Rolle von TPA im physiologischen und immunpathologischen Zustand (EAE-Modell) zu untersuchen, indem die TPA-Wirkung genetisch (TPA-Maus) oder pharmakologische (Verwendung unseres Antikörpers gegen GLUN1) blockiert wird. Innerhalb der Lymphorgane und des Gehirns charakterisieren wir die phänotypischen und funktionellen Veränderungen der Leukozyten, die an der Immunantwort beteiligt sind (LT, B-Lymphozyten (LB) und dendritische Zellen (DC)) mit besonderem Interesse für die Subpopulationen von LT-spezifischen Effektoren von Myelin-Peptiden und Treg. Zu diesem Zweck werden die verschiedenen mechanisch isolierten Leukozytenpopulationen von Milz, Lymphknoten und Gehirn von wilden Mäusen, tPA-/- induziert oder nicht in EAE induziert, als Flusszytometrie mit Hilfe von spezifischen Ac charakterisiert. Die antigene Spezifität und die Funktionen von LT (Proliferation und Zytokinproduktion) werden ebenfalls durch Zytometrietechniken analysiert. Parallel dazu charakterisieren wir den Ausdruck durch die Leukozyten der Rezeptoren, mit denen mit TPA interagieren, darunter der NMDA-Rezeptor.Diese Studie wird ein besseres Verständnis der Rolle von TPA für die adaptive Immunität und den grundlegenden Mechanismus der thymischen Toleranz liefern. Die aus dieser Studie gewonnenen Informationen werden auch für die Entwicklung therapeutischer Strategien bei MS und allgemeiner bei Autoimmunerkrankungen genutzt werden. (German)
1 December 2021
0 references
Multiple sclerose (MS) is een neurodegeneratieve ziekte met ontstekings- en auto-immuuncomponenten. Een immuunresponsstoornis wordt beschreven in deze pathologie met een functionele tekortkoming van T-cel regulators (Treg) waarvan de rol is om de activering van pathogene autoreactieve LT in de periferie te controleren. Plasminogene weefsel activator (t-PA) is een serine protease met pleotropic functies. TPA is betrokken bij fibrinolyse, neuronenoverleving en ontsteking. Literatuurgegevens tonen een rol van tPA in negatieve thymische selectie, een immuuntolerantiemechanisme dat LT-apoptose met hoge zelfreactiviteit induceert. Anderzijds, in het model van experimentele auto-immune encefalomyelitis (EAE) dicht bij MS, studies met muizen tekortschieten in t-PA suggereren een beschermende rol van dit molecuul in de late fase van de ziekte. In ons laboratorium ontwikkelden we een antilichaam (Ac) dat de interactie tussen tPA en de GlUN1 subeenheid van de NMDA receptor blokkeert die de evolutie van EAE in een vroeg stadium beperkt. Ons project heeft tot doel de rol van tPA in fysiologische en immunopathologische aandoening (EAA-model) te bestuderen door de werking van tPA te blokkeren in een genetische (muse deficiënt voor tPA) of farmacologisch (gebruik van onze anti-GLUN1 antilichamen). In de lymfoïde en hersenorganen zullen fenotypische en functionele veranderingen van de leukocyten die betrokken zijn bij de immuunrespons (LT, B lymfocyten (LB) en dendritische cellen (DC)) worden gekenmerkt met bijzondere belangstelling voor de LT-specifieke effectorsubpopulaties van myelinepeptiden en Treg. Om dit te bereiken, zullen de verschillende leukocytenpopulaties mechanisch geïsoleerd uit de milt, ganglia en hersenen van wilde, tPA-/-AAE-geïnduceerde of niet worden gekarakteriseerd in flow cytometrie met behulp van specifieke Acs. De antigene specificiteit en functies van LT (proliferatie en cytokineproductie) zullen ook worden geanalyseerd met behulp van cytometrietechnieken. Tegelijkertijd karakteriseren we de expressie door leukocyten van receptoren die interageren met tPA, inclusief de NMDA-receptor. Deze studie zal een beter begrip bieden van de rol van tPA in adaptieve immuniteit en in het fundamentele mechanisme van thymische tolerantie. De informatie uit deze studie zal ook worden gebruikt om therapeutische strategieën in MS en meer in het algemeen in auto-immune pathologieën te ontwikkelen. (Dutch)
6 December 2021
0 references
La sclerosi multipla (MS) è una malattia neurodegenerativa con componenti infiammatori e autoimmuni. Un disturbo della risposta immunitaria è descritto in questa patologia con una carenza funzionale di regolatori delle cellule T (Treg) il cui ruolo è quello di controllare l'attivazione di LT autoreattivo patogeno nella periferia. Plasminogen tissue activator (t-PA) è una proteasi serina con funzioni pleotrope. Il TPA è coinvolto nella fibrinolisi, nella sopravvivenza dei neuroni e nell'infiammazione. I dati della letteratura mostrano un ruolo del tPA nella selezione timica negativa, un meccanismo di tolleranza immunitaria che induce l'apoptosi LT ad alta autoreattività. D'altra parte, nel modello di encefalomielite autoimmune sperimentale (EAE) vicino alla SM, studi con topi carenti in t-PA suggeriscono un ruolo protettivo di questa molecola nella fase avanzata della malattia. Nel nostro laboratorio, abbiamo sviluppato un anticorpo (Ac) che blocca l'interazione tra tPA e la subunità GlUN1 del recettore NMDA che limita l'evoluzione dell'EAE in una fase iniziale. Il nostro progetto mira a studiare il ruolo del tPA in condizioni fisiologiche e immunopatologiche (modello EAA) bloccando l'azione del tPA in un genetico (muse carente per il tPA) o farmacologico (uso dei nostri anticorpi anti-GLUN1). Nei linfoidi e negli organi cerebrali, i cambiamenti fenotipici e funzionali dei leucociti coinvolti nella risposta immunitaria (LT, B linfociti (LB) e cellule dendritiche (DC)) saranno caratterizzati con particolare interesse per le sottopopolazioni dell'effetto specifico LT dei peptidi di mielina e Treg. Per raggiungere questo obiettivo, le diverse popolazioni di leucociti isolate meccanicamente dalla milza, dai gangli e dai cervelli selvatici, indotti da tPA/-AAE o no, saranno caratterizzate in citometria a flusso utilizzando Ac specifici. La specificità antigenica e le funzioni della LT (proliferazione e produzione di citochine) saranno analizzate anche mediante tecniche di citometria. In parallelo, caratterizziamo l'espressione dai leucociti dei recettori che interagiscono con il tPA, compreso il recettore NMDA. Questo studio fornirà una migliore comprensione del ruolo del tPA nell'immunità adattativa e nel meccanismo fondamentale della tolleranza timica. Le informazioni tratte da questo studio saranno utilizzate anche per sviluppare strategie terapeutiche nella SM e più in generale nelle patologie autoimmuni. (Italian)
13 January 2022
0 references
La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad neurodegenerativa con componentes inflamatorios y autoinmunes. Un trastorno de respuesta inmunitaria se describe en esta patología con una deficiencia funcional de reguladores de células T (Treg) cuyo papel es controlar la activación de LT autoreactivo patógeno en la periferia. El activador del tejido plasminógeno (t-PA) es una proteasa serina con funciones pleotrópicas. La TPA está involucrada en fibrinólisis, supervivencia neuronal e inflamación. Los datos de la literatura muestran un papel de la TPA en la selección tímica negativa, un mecanismo de tolerancia inmune que induce apoptosis LT con alta autoreactividad. Por otro lado, en el modelo de encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) cercano a la EM, estudios con ratones deficientes en t-PA sugieren un papel protector de esta molécula en la fase tardía de la enfermedad. En nuestro laboratorio, desarrollamos un anticuerpo (Ac) que bloquea la interacción entre tPA y la subunidad GlUN1 del receptor NMDA que limita la evolución de EAE en una etapa temprana. Nuestro proyecto tiene como objetivo estudiar el papel de la TPA en la condición fisiológica e inmunopatológica (modelo EAA) bloqueando la acción de la TPA en una genética (déficit de muse para tPA) o farmacológica (uso de nuestros anticuerpos anti-GLUN1). En los órganos linfoides y cerebrales, los cambios fenotípicos y funcionales de los leucocitos implicados en la respuesta inmunitaria (LT, linfocitos B (LB) y células dendríticas (DC)) se caracterizarán con especial interés en las subpoblaciones del efector específico del LT de los péptidos de mielina y Treg. Para lograrlo, las diferentes poblaciones de leucocitos aisladas mecánicamente del bazo, ganglios y cerebros silvestres, inducidas o no por tPA-/-AAE, se caracterizarán en la citometría de flujo utilizando Acs específicos. La especificidad antigénica y las funciones de los LT (proliferación y producción de citoquinas) también se analizarán mediante técnicas de citometría. En paralelo, caracterizamos la expresión por los leucocitos de los receptores que interactúan con la TPA, incluyendo el receptor NMDA. Este estudio proporcionará una mejor comprensión del papel de la TPA en la inmunidad adaptativa, y en el mecanismo fundamental de tolerancia tímica. La información de este estudio también se utilizará para desarrollar estrategias terapéuticas en la EM y más generalmente en patologías autoinmunes. (Spanish)
14 January 2022
0 references
Sclerosis multiplex (MS) on neurodegeneratiivne haigus põletikuliste ja autoimmuunsete komponentidega. Selles patoloogias kirjeldatakse immuunvastuse häiret T-rakkude regulaatorite (Treg) funktsionaalse puudusega, kelle ülesanne on kontrollida patogeense autoreaktiivse LT aktiveerumist perifeerias. Plasminogeeni koe aktivaator (t-PA) on pleotroopsete funktsioonidega seriinproteaas. TPA osaleb fibrinolüüsis, neuronite ellujäämises ja põletikus. Kirjanduse andmed näitavad tPA rolli negatiivses tüemilises valikus, immuuntolerantsi mehhanismis, mis põhjustab kõrge enesereaktiivsusega LT apoptoosi. Teisest küljest näitavad hulgiskleroosile lähedalasuva eksperimentaalse autoimmuunse entsefalomüeliidi (EAE) mudelis uuringud, kus hiirtel on puudus t-PA-st, selle molekuli kaitsvat rolli haiguse hilises faasis. Meie laboris arendasime välja antikeha (Ac), mis blokeerib tPA ja NMDA retseptori GlUN1 alaühiku koostoime, mis piirab EAE evolutsiooni varases staadiumis. Meie projekti eesmärk on uurida tPA rolli füsioloogilises ja immunopatoloogilises seisundis (EAA mudel), blokeerides tPA toime geneetilises (tPA-raskus) või farmakoloogilises (meie anti-GLUN1 antikehade kasutamine). Lümfoid- ja ajuorganites iseloomustavad immuunvastuses osalevate leukotsüütide fenotüübilised ja funktsionaalsed muutused (LT, B-lümfotsüüdid (LB) ja dendriitrakud (DC)) eriti huvi müeliinpeptiidide ja Tregi LT-speptiidide alapopulatsioonide vastu. Selle saavutamiseks iseloomustatakse erinevaid leukotsüütide populatsioone, mis on mehhaaniliselt eraldatud põrnast, ganglionidest ja metsikutest ajudest, tPA-/-AAE-indutseeritud või mitte, voolutsütomeetriliselt, kasutades spetsiifilisi Acs’e. LT antigeenset spetsiifilisust ja funktsioone (proliferatsioon ja tsütokiini tootmine) analüüsitakse ka tsütomeetriliste meetodite abil. Samal ajal iseloomustame tPA-ga, sealhulgas NMDA retseptoritega seotud retseptorite, sealhulgas NMDA retseptorite ekspressiooni leukotsüütide poolt. See uuring annab parema ülevaate tPA rollist adaptiivses immuunsuses ja tüemilise sallivuse põhimehhanismis. Sellest uuringust saadud teavet kasutatakse ka terapeutiliste strateegiate väljatöötamiseks hulgiskleroosis ja üldisemalt autoimmuunpatoloogiates. (Estonian)
11 August 2022
0 references
Išsėtinė sklerozė (IS) yra neurodegeneracinė liga su uždegiminiais ir autoimuniniais komponentais. Imuninio atsako sutrikimas yra aprašytas šioje patologijoje su funkciniu T-ląstelių reguliatorių (Treg) trūkumu, kurio vaidmuo yra kontroliuoti patogeninio autoreactive LT aktyvavimą periferijoje. Plazminogeno audinių aktyvatorius (t-PA) yra serino proteazė, turinti pleotropinių funkcijų. TPA dalyvauja fibrinolizėje, neuronų išgyvenamumui ir uždegimui. Literatūriniai duomenys rodo TPA vaidmenį neigiamam tirominiam pasirinkimui, imuniniam tolerancijos mechanizmui, kuris sukelia LT apoptozę su dideliu savęs reaktyvumu. Kita vertus, eksperimentinio autoimuninio encefalomielito (EAE) modelyje, artima IS, tyrimai su pelėmis, neturinčiomis t-PA, rodo šios molekulės apsauginį vaidmenį vėlyvojoje ligos fazėje. Mūsų laboratorijoje mes sukūrėme antikūną (Ac), kuris blokuoja sąveiką tarp tPA ir NMDA receptoriaus GlUN1 subvieneto, kuris riboja EAE evoliuciją ankstyvoje stadijoje. Mūsų projekto tikslas – ištirti TPA vaidmenį fiziologinei ir imunopatologinei būklei (EAA modelis), blokuojant tPA veikimą genetiniame (turinio trūkumas dėl tPA) arba farmakologiniame (vartojant mūsų anti-GLUN1 antikūnus). Limfoidiniuose ir smegenų organuose leukocitų fenotipiniai ir funkciniai pokyčiai, susiję su imuniniu atsaku (LT, B limfocitai (LB) ir dendritinės ląstelės (DC)), bus apibūdinami ypač susidomėję mielino peptidų ir Treg specifinėmis poveikio ar subpopuliacijomis. Norint tai pasiekti, įvairios leukocitų populiacijos, mechaniškai izoliuotos nuo laukinių blužnies, ganglijų ir smegenų, tPA/-AAE sukeltas arba ne, bus apibūdinamos srauto citometrijoje naudojant specifinius Acs. Taip pat bus analizuojamas LT antigeninis specifiškumas ir funkcijos (platinimas ir citokinų gamyba) taikant citometrijos metodus. Lygiagrečiai apibūdiname receptorių, sąveikaujančių su tPA, įskaitant NMDA receptorius, leukocitų ekspresiją. Šis tyrimas suteiks geresnį supratimą apie TPA vaidmenį prisitaikantis imunitetas, ir pagrindinio mechanizmo Teminės tolerancijos. Šio tyrimo informacija taip pat bus naudojama kuriant gydymo strategijas IS ir apskritai autoimuninėse patologijose. (Lithuanian)
11 August 2022
0 references
Multipla skleroza (MS) je neurodegenerativna bolest s upalnim i autoimunim komponentama. Poremećaj imunološkog odgovora opisan je u ovoj patologiji s funkcionalnim nedostatkom regulatora T-stanica (Treg) čija je uloga kontrolirati aktivaciju patogenog autoreaktivnog LT-a u periferiji. Aktivator tkiva plasminogena (t-PA) je serin proteaza s pleotropnim funkcijama. TPA je uključena u fibrinolizu, preživljenje neurona i upalu. Podaci iz literature pokazuju ulogu tPA u negativnom timijskom odabiru, mehanizmu imunološke tolerancije koji izaziva LT apoptozu s visokom samoreaktivnošću. S druge strane, u modelu eksperimentalnog autoimunog encefalomijelitisa (EAE) blizu MS-a, ispitivanja na miševima s manjkom t-PA ukazuju na zaštitnu ulogu ove molekule u kasnoj fazi bolesti. U našem laboratoriju razvili smo protutijelo (Ac) koje blokira interakciju između tPA i GlUN1 podjedinice NMDA receptora koji ograničava evoluciju EAE-a u ranoj fazi. Naš projekt ima za cilj proučavanje uloge tPA u fiziološkom i imunopatološkom stanju (EAA model) blokiranjem djelovanja tPA u genetskom (muzijskom manjku za tPA) ili farmakološkim (upotreba naših anti-GLUN1 protutijela). U limfoidnim i moždanim organima fenotipske i funkcionalne promjene leukocita uključenih u imunološki odgovor (LT, B limfociti (LB) i dendritičke stanice (DC)) karakterizirat će se s posebnim interesom za LT-specifičnu subpopulaciju efektorskih potpopulacija mijelinskih peptida i Trega. Kako bi se to postiglo, različite populacije leukocita mehanički izolirane iz slezene, ganglije i mozga divlje, tPA-/----AAE-inducirane ili ne, biti će karakterizirane u protočnoj citometriji pomoću specifične Acs. Antigenska specifičnost i funkcije LT-a (širenje i proizvodnja citokina) analizirat će se i tehnikama citometrije. Istodobno karakteriziramo ekspresiju pomoću leukocita receptora u interakciji s tPA, uključujući NMDA receptor. Ova studija će omogućiti bolje razumijevanje uloge tPA u adaptivnom imunitetu, te u temeljnom mehanizmu timičke tolerancije. Informacije iz ove studije također će se koristiti za razvoj terapijskih strategija u MS-u i općenito u autoimunim patologijama. (Croatian)
11 August 2022
0 references
Η σκλήρυνση κατά πλάκας (MS) είναι μια νευροεκφυλιστική νόσος με φλεγμονώδη και αυτοάνοσα συστατικά. Μια διαταραχή ανοσολογικής απόκρισης περιγράφεται σε αυτή την παθολογία με μια λειτουργική ανεπάρκεια των ρυθμιστών Τ- κυττάρων (Treg), ο ρόλος των οποίων είναι ο έλεγχος της ενεργοποίησης της παθογόνου αυτοαντιδρώσας LT στην περιφέρεια. Ο ενεργοποιητής ιστού Plasminogen (τ-PA) είναι μια πρωτεάση σερίνης με τις λειτουργίες pleotropic. Η TPA εμπλέκεται στην ινωδόλυση, στην επιβίωση των νευρώνων και στη φλεγμονή. Τα βιβλιογραφικά δεδομένα δείχνουν έναν ρόλο της tPA στην αρνητική επιλογή του θύμου, έναν μηχανισμό ανοσολογικής ανοχής που προκαλεί LT απόπτωση με υψηλή αυτο-αντιδραστικότητα. Από την άλλη πλευρά, στο μοντέλο της πειραματικής αυτοάνοσης εγκεφαλομυελίτιδας (EAE) κοντά στην ΣΚΠ, μελέτες με ποντίκια που παρουσιάζουν ανεπάρκεια t-PA υποδηλώνουν προστατευτικό ρόλο αυτού του μορίου στην όψιμη φάση της νόσου. Στο εργαστήριό μας, αναπτύξαμε ένα αντίσωμα (Ac) που εμποδίζει την αλληλεπίδραση μεταξύ του tPA και της υπομονάδας GlUN1 του υποδοχέα NMDA που περιορίζει την εξέλιξη των ΗΑΕ σε πρώιμο στάδιο. Το έργο μας έχει ως στόχο να μελετήσει το ρόλο του tPA στη φυσιολογική και ανοσοπαθολογική πάθηση (μοντέλο EAA) αναστέλλοντας τη δράση του tPA σε ένα γενετικό (muse ανεπαρκή για tPA) ή φαρμακολογικό (χρήση αντισωμάτων αντι-GLUN1). Στα λεμφοειδή και εγκεφαλικά όργανα, οι φαινοτυπικές και λειτουργικές αλλαγές των λευκοκυττάρων που εμπλέκονται στην ανοσολογική απόκριση (LT, B λεμφοκύτταρα (LB) και δενδριτικά κύτταρα (DC)) θα χαρακτηριστούν με ιδιαίτερο ενδιαφέρον για τις υποπληθυσμοί των πεπτιδίων της μυελίνης ειδικά για την LT και Treg. Για να επιτευχθεί αυτό, οι διάφοροι πληθυσμοί λευκοκυττάρων που έχουν απομονωθεί μηχανικά από τη σπλήνα, τα γαγγλία και τους εγκεφάλους των άγριων, που προκαλούνται από tPA-/--AAE ή όχι, θα χαρακτηριστούν στην κυτταρομετρία ροής χρησιμοποιώντας συγκεκριμένα Acs. Η αντιγονική ιδιαιτερότητα και οι λειτουργίες της LT (πολλαπλασιασμός και παραγωγή κυτοκίνης) θα αναλυθούν επίσης με τεχνικές κυτταρομετρίας. Παράλληλα, χαρακτηρίζουμε την έκφραση από λευκοκύτταρα των υποδοχέων που αλληλεπιδρούν με το tPA, συμπεριλαμβανομένου του υποδοχέα NMDA. Η μελέτη αυτή θα παράσχει καλύτερη κατανόηση του ρόλου της TPA στην προσαρμοστική ανοσία και στον θεμελιώδη μηχανισμό ανοχής του θύμου. Οι πληροφορίες από τη μελέτη αυτή θα χρησιμοποιηθούν επίσης για την ανάπτυξη θεραπευτικών στρατηγικών στα κράτη μέλη και γενικότερα στις αυτοάνοσες παθολογίες. (Greek)
11 August 2022
0 references
Skleróza multiplex (MS) je neurodegeneratívne ochorenie so zápalovými a autoimunitnými zložkami. Porucha imunitnej odpovede je opísaná v tejto patológii s funkčným nedostatkom regulátorov T-buniek (Treg), ktorých úlohou je kontrolovať aktiváciu patogénneho autoreaktívneho LT na periférii. Aktivátor plazminogénového tkaniva (t-PA) je serínová proteáza s pleotropnými funkciami. TPA sa podieľa na fibrinolýze, prežívaní neurónov a zápale. Údaje v literatúre ukazujú úlohu tPA v negatívnom selekcii tymológie, čo je mechanizmus imunitnej tolerancie, ktorý indukuje LT apoptózu s vysokou samoreaktivitou. Na druhej strane, v modeli experimentálnej autoimunitnej encefalomyelitídy (EAE) v blízkosti MS štúdie s nedostatkom myší v t-PA naznačujú ochrannú úlohu tejto molekuly v neskorej fáze ochorenia. V našom laboratóriu sme vyvinuli protilátku (Ac), ktorá blokuje interakciu medzi tPA a podjednotkou GlUN1 receptora NMDA, ktorá obmedzuje vývoj EAE v počiatočnom štádiu. Cieľom nášho projektu je preskúmať úlohu tPA vo fyziologickom a imunopatologickom stave (model EAA) blokovaním účinku tPA v genetickom (muse deficit pre tPA) alebo farmakologickom (použitie našich protilátok proti GLUN1). V lymfoidných a mozgových orgánoch budú fenotypové a funkčné zmeny leukocytov zapojených do imunitnej odpovede (LT, B lymfocyty (LB) a dendritické bunky (DC)) charakterizované s osobitným záujmom o LT-špecifické efektorové subpopulácie myelínových peptidov a Treg. Na dosiahnutie tohto cieľa budú rôzne populácie leukocytov mechanicky izolované od sleziny, ganglií a mozgov divokých, indukovaných alebo neindukovaných tPA-/-AAE charakterizované prietokovou cytometriou pomocou špecifických Acs. Antigénna špecifickosť a funkcie LT (šírenie a produkcia cytokínov) sa budú analyzovať aj pomocou cytometrických techník. Paralelne charakterizujeme expresiu receptorov interagujúcich s tPA vrátane NMDA receptorov leukocytmi. Táto štúdia poskytne lepšie pochopenie úlohy tPA v adaptívnej imunite a v základnom mechanizme tymickej tolerancie. Informácie z tejto štúdie sa použijú aj na rozvoj terapeutických stratégií v MS a všeobecnejšie pri autoimunitných patológiách. (Slovak)
11 August 2022
0 references
Multippeliskleroosi (MS) on hermoston rappeutumissairaus, jossa on tulehdus- ja autoimmuunikomponentteja. Tässä patologiassa kuvataan immuunivastehäiriö, jossa on T-solujen säätelijöiden (Treg) toiminnallinen puute, jonka tehtävänä on hallita patogeenisen autoreaktiivisen LT:n aktivoitumista reuna-alueilla. Plasminogeenikudosaktivaattori (t-PA) on seriiniproteaasi, jolla on pleotrooppisia toimintoja. TPA osallistuu fibrinolyysiin, neuronien eloonjäämiseen ja tulehdukseen. Kirjallisuustiedot osoittavat tPA:n roolin negatiivisessa kateemiossa, joka on immuunitoleranssimekanismi, joka indusoi LT apoptoosia, jolla on korkea itsereaktiivisuus. Toisaalta MS-taudin lähellä olevan kokeellisen autoimmuunienkefalomyeliittimallin (EAE) mallissa t-PA:n puutteellisilla hiirillä tehdyt tutkimukset viittaavat tämän molekyylin suojaavaan rooliin taudin myöhäisessä vaiheessa. Laboratoriossamme kehitimme vasta-aineen (Ac), joka estää tPA:n ja NMDA-reseptorin GlUN1-alayksikön välisen vuorovaikutuksen, joka rajoittaa EAE:n kehittymistä varhaisessa vaiheessa. Hankkeessamme pyritään tutkimaan tPA:n roolia fysiologisessa ja immunopatologisessa kunnossa (EAA-malli) estämällä tPA: n toiminnan geneettisessä (muse puutteellinen tPA) tai farmakologisessa (anti-GLUN1-vasta-aineiden käyttö). Immuunivasteen (LT, B-lymfosyytit (LB) ja dendriottiset solut (DC)) fenotyyppisille ja toiminnallisille muutoksille lymfoidi- ja aivoelimissä on erityistä kiinnostusta myeliinipeptidien ja Tregin LT-spesifisiin vaikuttavuus- tai alapopulaatioihin. Tämän saavuttamiseksi luonnonvaraisen, tPA-/-AAE:n aiheuttamasta pernasta, hermosolmusta ja aivoista mekaanisesti eristettyjä eri leukosyyttipopulaatioita luonnehditaan virtaussytometriassa käyttäen erityisiä akkuja. LT:n antigeenispesifisyys ja toiminnot (proliferaatio ja sytokiinin tuotanto) analysoidaan myös sytotometrisillä tekniikoilla. Samanaikaisesti luonnehdimme leukosyyttien ilmentymistä reseptoreissa, jotka ovat vuorovaikutuksessa tPA:n kanssa, mukaan lukien NMDA-reseptori. Tämä tutkimus antaa paremman käsityksen tPA:n roolista mukautuvassa immuniteetissa ja timanssitoleranssin perusmekanismissa. Tämän tutkimuksen tietoja käytetään myös MS-tautien ja yleisemmin autoimmuunipatologioiden hoitostrategioiden kehittämiseen. (Finnish)
11 August 2022
0 references
Stwardnienie rozsiane (MS) jest chorobą neurodegeneracyjną ze składnikami zapalnymi i autoimmunologicznymi. W tej patologii opisano zaburzenie odpowiedzi immunologicznej z niedoborem funkcjonalnym regulatorów komórek T (Treg), których rolą jest kontrolowanie aktywacji chorobotwórczego autoreactive LT na obrzeżach. Aktywator tkanek plazminogenu (t-PA) jest proteazą serynową o funkcjach pleotropowych. TPA bierze udział w fibrynolizie, przeżyciu neuronów i stanach zapalnych. Dane z literatury pokazują rolę tPA w negatywnym doborze tynkowym, mechanizm tolerancji immunologicznej, który indukuje apoptozę LT o wysokiej samoreaktywności. Z drugiej strony, w modelu eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia (EAE) blisko MS, badania z niedoborem myszy w t-PA sugerują ochronną rolę tej cząsteczki w późnej fazie choroby. W naszym laboratorium opracowaliśmy przeciwciało (Ac) blokujące interakcję między tPA a podjednostką GlUN1 receptora NMDA, która ogranicza ewolucję EAE na wczesnym etapie. Nasz projekt ma na celu zbadanie roli tPA w stanie fizjologicznym i immunopatologicznym (model EAA) poprzez blokowanie działania tPA w genetycznym (muzie niedostatecznym dla tPA) lub farmakologicznym (stosowanie naszych przeciwciał anty-GLUN1). W narządach limfoidalnych i mózgowych zmiany fenotypowe i funkcjonalne leukocytów biorących udział w odpowiedzi immunologicznej (limfocyty L, limfocyty B (LB) i komórki dendrytyczne (DC)) będą charakteryzowały się szczególnym zainteresowaniem subpopulacjami działania swoistego czynnika LT peptydów mielinowych i Treg. Aby to osiągnąć, różne populacje leukocytów mechanicznie odizolowane od śledziony, zwojów i mózgów dzikich, wywołanych tPA/-AAE lub nie zostaną scharakteryzowane w cytometrii przepływu przy użyciu specyficznych kwasów Ac. Specyfika antygenowa i funkcje LT (proliferacja i produkcja cytokiny) będą również analizowane za pomocą technik cytometrii. Jednocześnie charakteryzujemy ekspresję leukocytów receptorów oddziałujących z tPA, w tym receptora NMDA. Badanie to zapewni lepsze zrozumienie roli tPA w odporności adaptacyjnej oraz w podstawowym mechanizmie tolerancji grasowej. Informacje z tego badania będą również wykorzystywane do opracowania strategii terapeutycznych w SM i bardziej ogólnie w patologii autoimmunologicznych. (Polish)
11 August 2022
0 references
A sclerosis multiplex (MS) gyulladásos és autoimmun komponensekkel rendelkező neurodegeneratív betegség. Ebben a patológiában a T-sejt szabályozók (Treg) funkcionális hiányával rendelkező immunválasz zavart mutatunk be, amelynek szerepe a patogén autoreaktív LT periféria aktiválásának szabályozása. A plazminogén aktivátor (t-PA) pleotrop funkciókkal rendelkező szerinproteáz. A TPA fibrinolízisben, neuron túlélésben és gyulladásban vesz részt. A szakirodalmi adatok azt mutatják, hogy a tPA szerepet játszik a negatív thymiás szelekcióban, egy immuntolerancia mechanizmusban, amely magas önreaktivitású LT apoptózist indukál. Másrészt az SM-hez közeli kísérleti autoimmun encephalomyelitis (EAE) modelljében a t-PA-ban hiányos egerekkel végzett vizsgálatok arra utalnak, hogy e molekula védő szerepet játszik a betegség késői szakaszában. Laboratóriumunkban kifejlesztettünk egy antitestet (Ac), amely blokkolja a tPA és az NMDA receptor GlUN1 alegysége közötti kölcsönhatást, ami korai szakaszban korlátozza az EAE fejlődését. Projektünk célja a tPA fiziológiai és immunopatológiai állapotokban (EAA modell) betöltött szerepének tanulmányozása a tPA genetikai (tPA-hiányos) vagy farmakológiai (anti-GLUN1 antitestek) hatásának gátlásával. A limfoid és agyi szervekben az immunválaszban részt vevő leukociták fenotípusos és funkcionális változásait (LT, B limfociták (LB) és dendritikus sejtek (DC)) különös érdeklődés jellemzi a myelin-peptidek LT-specifikus effektor szubpopulációi és a Treg iránt. Ennek elérése érdekében a különböző leukocitapopulációkat mechanikusan izoláltak a vad, tPA-/-AAE indukált vagy nem indukált, a léptől, az idegdúcoktól és az agytól mechanikusan izolált különböző leukocita populációk specifikus Acs alkalmazásával áramlási citometriával jellemezhetők. Az LT antigén specifikusságát és funkcióit (proliferáció és citokintermelés) citometriás technikákkal is elemezni fogják. Ezzel párhuzamosan jellemezzük a tPA-val kölcsönhatásba lépő receptorok leukociták általi kifejeződését, beleértve az NMDA receptort is. Ez a tanulmány jobban meg fogja érteni a tPA szerepét az adaptív immunitásban és a timikus tolerancia alapvető mechanizmusában. Az ebből a vizsgálatból származó információkat terápiás stratégiák kidolgozására is felhasználják a tagállamokban és általánosabban az autoimmun betegségekben. (Hungarian)
11 August 2022
0 references
Roztroušená skleróza (MS) je neurodegenerativní onemocnění se zánětlivými a autoimunitními složkami. V této patologii je popsána porucha imunitní odpovědi s funkčním nedostatkem regulátorů T- buněk (Treg), jejichž úlohou je kontrolovat aktivaci patogenní autoreaktivní LT na periferii. Plazminogen tkáňový aktivátor (t-PA) je serinová proteáza s pleotropními funkcemi. TPA se podílí na fibrinolýze, přežití neuronů a zánětu. Údaje z literatury ukazují roli tPA v negativním thymickém selekci, což je mechanismus imunitní tolerance, který indukuje LT apoptózu s vysokou sebereaktivitou. Na druhé straně, v modelu experimentální autoimunitní encefalomyelitidy (EAE) v blízkosti MS, studie s myší s nedostatkem t-PA naznačují ochrannou roli této molekuly v pozdní fázi onemocnění. V naší laboratoři jsme vyvinuli protilátky (Ac) blokující interakci mezi tPA a GlUN1 podjednotkou NMDA receptoru, která omezuje vývoj EAE v rané fázi. Cílem našeho projektu je studovat roli tPA ve fyziologickém a imunopatologickém stavu (model EAA) blokováním účinku tPA v genetickém (muze deficitu pro tPA) nebo farmakologickém (použití našich anti-GLUN1 protilátek). V lymfoidních a mozkových orgánech budou fenotypové a funkční změny leukocytů podílejících se na imunitní odpovědi (LT, B lymfocyty (LB) a dendritické buňky (DC)) charakterizovány se zvláštním zájmem o LT-specifické efektorové subpopulace myelinových peptidů a Treg. Aby toho bylo dosaženo, budou různé populace leukocytů mechanicky izolované od sleziny, ganglií a mozků divokých, tPA-/--- AAE- indukovaných nebo ne, charakterizovány v průtokové cytometrii pomocí specifických Acs. Antigenní specifičnost a funkce LT (proliferace a tvorba cytokinů) budou rovněž analyzovány cytometrickými technikami. Současně charakterizujeme expresi leukocytů receptorů interagujících s tPA, včetně NMDA receptoru. Tato studie poskytne lepší pochopení úlohy tPA v adaptivní imunitě a v základním mechanismu tymitické tolerance. Informace z této studie budou také použity k rozvoji terapeutických strategií v MS a obecněji v autoimunních patologiích. (Czech)
11 August 2022
0 references
Multiplā skleroze (MS) ir neirodeģeneratīva slimība ar iekaisuma un autoimūnām sastāvdaļām. Imūnās atbildes reakcijas traucējumi ir aprakstīti šajā patoloģijā ar funkcionālu T-šūnu regulatoru (Treg) deficītu, kura uzdevums ir kontrolēt patogēnās autoreaktīvās LT aktivāciju perifērijā. Plazminogēna audu aktivators (t-PA) ir serīna proteāze ar pleotropām funkcijām. TPA ir iesaistīts fibrinolīzē, neironu izdzīvošanā un iekaisumā. Literatūras dati liecina par tPA lomu negatīvās aizkrūts dziedzera selekcijā, imūnās tolerances mehānismā, kas izraisa LT apoptozi ar augstu pašreaktivitāti. No otras puses, eksperimentālā autoimūnā encefalomielīta (EAE) modelī, kas tuvs MS, pētījumi ar pelēm ar t-PA trūkumu liecina par šīs molekulas aizsargājošo lomu slimības vēlīnā fāzē. Mūsu laboratorijā mēs izstrādājām antivielu (Ac), kas bloķē mijiedarbību starp tPA un NMDA receptora GlUN1 apakšvienību, kas ierobežo EAE attīstību agrīnā stadijā. Mūsu projekta mērķis ir izpētīt tPA lomu fizioloģiskā un imunopatoloģiskā stāvoklī (EAA modelis), bloķējot tPA darbību ģenētiskajā (muse deficīts tPA) vai farmakoloģiski (izmantojot mūsu anti-GLUN1 antivielas). Limfoīdos un smadzeņu orgānos imūnreakcijā iesaistīto leikocītu fenotipiskās un funkcionālās izmaiņas (LT, B limfocīti (LB) un dendritiskās šūnas (DC)) tiks raksturotas ar īpašu interesi par mielīna peptīdu un Treg specifisko LT efektoru apakšpopulāciju. Lai to panāktu, dažādas leikocītu populācijas, kas mehāniski izolētas no savvaļas, tPA-/-AAE izraisītas vai neinducētas liesas, ganglijas un smadzenes, tiks raksturotas plūsmas citometrijā, izmantojot specifisku Acs. LT antigēnu specifiskumu un funkcijas (izplatīšana un citokīnu ražošana) analizēs arī ar citometrijas metodēm. Paralēli mēs raksturojam leikocītu ekspresiju receptoriem, kas mijiedarbojas ar tPA, tostarp NMDA receptoriem. Šis pētījums sniegs labāku izpratni par tPA lomu adaptīvajā imunitātē un pamatmehānismā timikā toleranci. Šajā pētījumā iegūto informāciju izmantos arī, lai izstrādātu terapeitiskas stratēģijas MS un, vispārīgāk, autoimūnās patoloģijās. (Latvian)
11 August 2022
0 references
Is galar neurodegenerative é scléaróis iolrach (MS) le comhpháirteanna athlastacha agus autoimmune. Déantar cur síos ar neamhord freagartha imdhíonachta sa phaiteolaíocht seo le easnamh feidhmiúil rialtóirí T-cheall (Treg) a bhfuil ról acu gníomhachtú LT uathoibríoch pataigineach a rialú san imeall. Is protease serine é activator fíochán Plasminogen (t-PA) le feidhmeanna pleotropic. Tá TPA páirteach i fibrinolysis, marthanais néaróin agus athlasadh. Léiríonn sonraí litríochta ról tPA i roghnú diúltach thymic, meicníocht caoinfhulaingt imdhíonachta a spreagann LT apoptosis le féin-imoibríocht ard. Ar an láimh eile, sa mhúnla d’einceifealaimiailíteas autoimmune turgnamhach (EAE) gar do MS, tugann staidéir le lucha easnamhach in t-PA ról cosanta an mhóilín seo le fios i gcéim déanach an ghalair. Inár saotharlann, d’fhorbraíomar antasubstaint (Ac) ag cur bac ar an idirghníomhaíocht idir tPA agus fo-aonad GlUN1 de ghabhdóir NMDA a chuireann teorainn le héabhlóid EAE ag céim luath. Tá sé mar aidhm ag ár dtionscadal staidéar a dhéanamh ar ról tPA i riocht fiseolaíoch agus imdhíon-eolaíochta (múnla EA) trí ghníomhaíocht tPA a bhlocáil i géiniteach (easpa míshásaimh le haghaidh tPA) nó cógaseolaíochta (úsáid ár n-antasubstaintí frith-GLUN1). Sna horgáin limfeach agus inchinne, beidh spéis ar leith ag athruithe feinitíopacha agus feidhmiúla na leukocytes a bhfuil baint acu leis an bhfreagairt imdhíonachta (LT, limficítí B (LB) agus cealla dendritic (DC)) go háirithe i bhfodhaonraí éifeachta-shonracha de pheptídí myelin, agus Crann. Chun é sin a bhaint amach, déanfar na daonraí leukocyte éagsúla atá scoite amach go meicniúil ón spleen, ón nganglóir agus ón inchinn fhiáin, tPA-/----AAE-spreagtha nó nach bhfuil, a shaintréithriú i gcíteaiméadracht sreafa ag baint úsáide as Acs sonracha. Déanfar anailís freisin ar shainiúlacht antaigineach agus ar fheidhmeanna LT (iomadú agus táirgeadh cíteacáin) trí theicnící cíteaiméadrachta. Ag an am céanna, tréithrímid an léiriú ag leukocytes gabhdóirí a bhíonn ag idirghníomhú le TPA, lena n-áirítear gabhdóir NMDA. Cuirfidh an staidéar seo tuiscint níos fearr ar ról TPA i díolúine oiriúnaitheach, agus i meicníocht bhunúsach na caoinfhulaingthe thymic. Úsáidfear an fhaisnéis ón staidéar seo freisin chun straitéisí teiripeacha a fhorbairt sna Ballstáit agus ar bhonn níos ginearálta i bpaiteolaíochtaí uath-imdhíonachta. (Irish)
11 August 2022
0 references
Multipla skleroza (MS) je nevrodegenerativna bolezen z vnetnimi in avtoimunskimi komponentami. Bolezen imunskega odziva je opisana v tej patologiji s funkcionalnim pomanjkanjem T-celic regulatorjev (Treg), katerih vloga je nadzor aktivacije patogene avtoreaktivne LT na obrobju. Aktivator tkiva plazminogena (t-PA) je serinska proteaza s pleotropnimi funkcijami. TPA sodeluje pri fibrinolizi, preživetju nevrona in vnetju. Literaturni podatki kažejo vlogo tPA pri negativni timični selekciji, mehanizmu imunske tolerance, ki povzroča apoptozo LT z visoko samoreaktivnostjo. Po drugi strani pa v modelu eksperimentalnega avtoimunskega encefalomielitisa (EAE) blizu MS študije s pomanjkljivimi mišimi pri t-PA kažejo zaščitno vlogo te molekule v pozni fazi bolezni. V našem laboratoriju smo razvili protitelesa (Ac), ki blokirajo interakcijo med tPA in podenoto GlUN1 receptorja NMDA, ki omejuje razvoj EAE v zgodnji fazi. Naš projekt je namenjen preučevanju vloge tPA v fiziološkem in imunopatološkem stanju (model EAA) z zaviranjem delovanja tPA v genetskem (muse pomanjkljivo za tPA) ali farmakološkem (uporaba naših anti-GLUN1 protiteles). V limfoidnih in možganskih organih bodo fenotipske in funkcionalne spremembe levkocitov, ki sodelujejo pri imunskem odzivu (LT, B limfociti (LB) in dendritične celice (DC)), označene s posebnim zanimanjem za LT-specifične efektorske podpopulacije mielinskih peptidov in Treg. Da bi to dosegli, bodo različne populacije levkocitov, mehansko izolirane od vranice, ganglijev in možganov divjih, tPA/--AAE povzročene ali ne, opredeljene v citometriji pretoka z uporabo specifičnih Acs. S citometrijskimi tehnikami se bo analizirala tudi antigenska specifičnost in funkcije LT (širjenje in proizvodnja citokinov). Hkrati označujemo izražanje receptorjev, ki medsebojno delujejo s tPA, vključno z receptorjem NMDA, s pomočjo levkocitov. Ta študija bo zagotovila boljše razumevanje vloge tPA pri prilagodljivi imunosti in v temeljnem mehanizmu timske tolerance. Informacije iz te študije se bodo uporabljale tudi za razvoj terapevtskih strategij pri MS in bolj splošno pri avtoimunskih patologijah. (Slovenian)
11 August 2022
0 references
Множествената склероза (МС) е невродегенеративно заболяване с възпалителни и автоимунни компоненти. Нарушение на имунния отговор е описано в тази патология с функционален дефицит на Т-клетъчните регулатори (Treg), чиято роля е да контролират активирането на патогенния автореактивен LT в периферията. Активаторът на плазменогенната тъкан (t-PA) е серинова протеаза с плеотропни функции. TPA участва във фибринолиза, преживяемост на невроните и възпаление. Литературните данни показват роля на tPA в отрицателната тимична селекция, механизъм за имунна толерантност, който предизвиква LT апоптоза с висока самореакция. От друга страна, в модела на експериментален автоимунен енцефаломиелит (EAE) в близост до МС, проучванията с мишки с дефицит на t-PA предполагат защитна роля на тази молекула в късната фаза на заболяването. В нашата лаборатория разработихме антитяло (Ac), което блокира взаимодействието между tPA и GlUN1 субединицата на NMDA рецептора, което ограничава еволюцията на EAE на ранен етап. Нашият проект има за цел да проучи ролята на ТРА във физиологичното и имунопатологичното състояние (модел на ИАА) чрез блокиране на действието на ТРА в генетичен (недостиг на муза за tPA) или фармакологичен (използване на нашите анти-GLUN1 антитела). В лимфоидните и мозъчните органи фенотипните и функционалните промени на левкоцитите, участващи в имунния отговор (LT, B лимфоцити (LB) и дендритни клетки (DC)) ще се характеризират с особен интерес към специфичните за LT ефекторни субпопулации на миелиновите пептиди и Treg. За да се постигне това, различните популации на левкоцитите, механично изолирани от далака, ганглиите и мозъците на дивите, предизвикани от tPA-/-AAE или не, ще се характеризират с поточна цитометрия, като се използват специфични Acs. Антигенната специфичност и функции на LT (разпространение и производство на цитокини) също ще бъдат анализирани чрез цитометрични техники. Успоредно с това ние характеризираме експресията на левкоцитите на рецепторите, взаимодействащи с tPA, включително NMDA рецептора. Това проучване ще осигури по-добро разбиране на ролята на tPA в адаптивния имунитет и в основния механизъм на тимична толерантност. Информацията от това проучване ще се използва и за разработване на терапевтични стратегии в МС и по-общо при автоимунни патологии. (Bulgarian)
11 August 2022
0 references
L-isklerożi multipla (MS) hija marda newrodeġenerattiva b’komponenti infjammatorji u awtoimmuni. Disturb ta’ rispons immuni huwa deskritt f’din il-patoloġija b’defiċjenza funzjonali tar-regolaturi taċ-ċelloli T (Treg) li r-rwol tagħhom huwa li jikkontrollaw l-attivazzjoni ta’ LT awtoreattiva patoġenika fil-periferija. Attivatur tat-tessut tal-plasminogen (t-PA) huwa serine protease b’funzjonijiet plewotropiċi. TPA hija involuta fil-fibrinoliżi, fis-sopravivenza tan-newroni u fl-infjammazzjoni. Id-dejta tal-letteratura turi rwol ta’ tPA f’għażla tirika negattiva, mekkaniżmu ta’ tolleranza immuni li jinduċi apoptożi LT b’reattività għolja. Min-naħa l-oħra, fil-mudell ta’ enċefalomjelite awtoimmuni sperimentali (EAE) qrib MS, studji fuq ġrieden b’defiċjenza ta’ t-PA jissuġġerixxu rwol protettiv ta’ din il-molekula fl-aħħar fażi tal-marda. Fil-laboratorju tagħna, żviluppajna antikorp (Ac) li jimblokka l-interazzjoni bejn tPA u s-subunità GlUN1 tar-riċettur NMDA li jillimita l-evoluzzjoni tal-EAE fi stadju bikri. Il-proġett tagħna għandu l-għan li jistudja r-rwol tat-TPA fil-kundizzjoni fiżjoloġika u immunopatoloġika (mudell tal-EAA) billi jimblokka l-azzjoni tat-tPA f’ambjent ġenetiku (nuqqas ta’ magna għat-tPA) jew farmakoloġiku (l-użu tal-antikorpi tagħna kontra l-GLUN1). Fl-organi limfojdi u tal-moħħ, bidliet fenotipiċi u funzjonali tal-lewkoċiti involuti fir-rispons immunitarju (LT, B lymphocytes (LB) u ċelluli dendritiċi (DC)) ser ikunu kkaratterizzati b’interess partikolari fis-subpopolazzjonijiet ta’ effettur speċifiku għal LT ta’ peptidi tal-majelin, u Treg. Biex jinkiseb dan, il-popolazzjonijiet differenti ta’ lewkoċiti iżolati mekkanikament mill-milsa, mill-ganglija u mill-imħuħ tas-selvaġġ, indotti mit-tPA-/-AAE jew le se jiġu kkaratterizzati f’ċitometrija tal-fluss bl-użu ta’ Acs speċifiċi. L-ispeċifiċità antiġenika u l-funzjonijiet ta’ LT (proliferazzjoni u produzzjoni ta’ ċitokini) se jiġu analizzati wkoll permezz ta’ tekniki ta’ ċitometrija. B’mod parallel, aħna nikkaratterizzaw l-espressjoni minn lewkoċiti ta’ riċetturi li jinteraġixxu ma’ tPA, inkluż ir-riċettur NMDA. Dan l-istudju se jipprovdi fehim aħjar tar-rwol tat-tPA fl-immunità adattiva, u fil-mekkaniżmu fundamentali tat-tolleranza timika. L-informazzjoni minn dan l-istudju se tintuża wkoll biex jiġu żviluppati strateġiji terapewtiċi fl-SM u b’mod aktar ġenerali f’patoloġiji awtoimmuni. (Maltese)
11 August 2022
0 references
A esclerose múltipla (MS) é uma doença neurodegenerativa com componentes inflamatórios e autoimunes. Um distúrbio da resposta imune é descrito nesta patologia com uma deficiência funcional de reguladores de células T (Treg), cujo papel é controlar a ativação de LT autoreativo patogênico na arrabaldes. O ativador tecidual de plasminogênio (t-PA) é uma serina protease com funções pleotrópicas. O TPA está envolvido na fibrinólise, na sobrevivência dos neurónios e na inflamação. Os dados da literatura mostram um papel do tPA na seleção tímica negativa, um mecanismo de tolerância imunológica que induz a apoptose de LT com alta autorreatividade. Por outro lado, no modelo de encefalomielite autoimune experimental próximo à SM, estudos com camundongos deficientes em t-PA sugerem um papel protetor desta molécula na fase tardia da doença. Em nosso laboratório, desenvolvemos um anticorpo (Ac) que bloqueia a interação entre tPA e a subunidade GlUN1 do recetor NMDA que limita a evolução da EAE em um estágio inicial. Nosso projeto tem como objetivo estudar o papel do tPA na condição fisiológica e imunopatológica (modelo EEA) bloqueando a ação do tPA em uma genética (mause deficiente para tPA) ou farmacológica (uso de nossos anticorpos anti-GLUN1). Nos órgãos linfoides e cerebrais, as alterações fenotípicas e funcionais dos leucócitos envolvidos na resposta imunitária (LT, linfócitos B (LB) e células dendríticas (DC)) serão caracterizadas com especial interesse nas subpopulações efetoras específicas do LT dos peptídeos de mielina e Treg. Para isso, as diferentes populações de leucócitos isoladas mecanicamente do baço, gânglios e cérebros de selvagens, induzidos por tPA/-AAE ou não serão caracterizadas na citometria de fluxo usando Acs específicos. A especificidade e as funções antigênicas da LT (proliferação e produção de citocinas) também serão analisadas por técnicas de citometria. Paralelamente, caracterizamos a expressão por leucócitos de recetores que interagem com tPA, incluindo o recetor NMDA. Este estudo proporcionará uma melhor compreensão do papel da ATT na imunidade adaptativa e no mecanismo fundamental da tolerância tímica. As informações deste estudo também serão utilizadas para desenvolver estratégias terapêuticas na SM e, de forma mais geral, em patologias autoimunes. (Portuguese)
11 August 2022
0 references
Multipel sklerose (MS) er en neurodegenerativ sygdom med inflammatoriske og autoimmune komponenter. En immunrespons lidelse er beskrevet i denne patologi med en funktionel mangel på T-celle regulatorer (Treg), hvis rolle er at styre aktiveringen af patogen autoreaktiv LT i periferien. Plasminogen væv aktivator (t-PA) er en serin protease med pleotrope funktioner. TPA er involveret i fibrinolyse, neuron overlevelse og inflammation. Litteraturdata viser en rolle af tPA i negativ thymisk udvælgelse, en immuntolerance mekanisme, der inducerer LT apoptose med høj selvreaktivitet. På den anden side, i modellen for eksperimentel autoimmun encephalomyelitis (EAE) tæt på MS, undersøgelser med mus mangler i t-PA tyder på en beskyttende rolle af dette molekyle i den sene fase af sygdommen. I vores laboratorium udviklede vi et antistof (Ac), der blokerer interaktionen mellem tPA og GlUN1-underenheden af NMDA-receptoren, der begrænser udviklingen af EAE på et tidligt tidspunkt. Vores projekt har til formål at undersøge tPA's rolle i fysiologisk og immunpatologisk tilstand (EAA-model) ved at blokere virkningen af tPA i en genetisk (musemangel for tPA) eller farmakologisk (brug af vores anti-GLUN1-antistoffer). I lymfe- og hjernens organer vil fænotypiske og funktionelle ændringer i leukocytterne, der er involveret i immunresponset (LT, B-lymfocytter (LB) og dendritiske celler (DC)) blive karakteriseret med særlig interesse i den LT-specifikke effekt eller subpopulationer af myelinpeptider og Treg. For at opnå dette vil de forskellige leukocytpopulationer, der mekanisk er isoleret fra milt, ganglier og hjerner hos vilde, tPA-/-AAE-inducerede eller ej, blive karakteriseret ved flowcytometri ved hjælp af specifikke esser. LT's antigene specificitet og funktioner (spredning og cytokinproduktion) vil også blive analyseret ved hjælp af cytometriteknikker. Parallelt karakteriserer vi ekspressionen ved leukocytter af receptorer, der interagerer med tPA, herunder NMDA-receptoren. Denne undersøgelse vil give en bedre forståelse af tPA's rolle i adaptiv immunitet og i den grundlæggende mekanisme for thymisk tolerance. Oplysningerne fra denne undersøgelse vil også blive anvendt til at udvikle terapeutiske strategier i MS og mere generelt i autoimmune patologier. (Danish)
11 August 2022
0 references
Scleroza multiplă (MS) este o boală neurodegenerativă cu componente inflamatorii și autoimune. O tulburare de răspuns imun este descrisă în această patologie cu o deficiență funcțională a regulatorilor celulelor T (Treg) al căror rol este de a controla activarea LT autoreactiv patogen la periferie. Activatorul tisular plasminogen (t-PA) este o serinprotează cu funcții pleotropice. TPA este implicat în fibrinoliză, supraviețuirea neuronilor și inflamație. Datele din literatura de specialitate arată un rol al tPA în selecția timică negativă, un mecanism de toleranță imună care induce apoptoza LT cu o autoreactivitate crescută. Pe de altă parte, în modelul encefalomielitei autoimune experimentale (EAE) aproape de SM, studiile cu șoareci deficitare în t-PA sugerează un rol protector al acestei molecule în faza târzie a bolii. În laboratorul nostru, am dezvoltat un anticorp (Ac) care blochează interacțiunea dintre tPA și subunitatea GlUN1 a receptorului NMDA care limitează evoluția EAE într-un stadiu incipient. Proiectul nostru își propune să studieze rolul tPA în starea fiziologică și imunopatologică (modelul AEA) prin blocarea acțiunii tPA într-o genetică (deficit de reutilizare pentru tPA) sau farmacologică (utilizarea anticorpilor anti-GLUN1). În organele limfoide și cerebrale, modificările fenotipice și funcționale ale leucocitelor implicate în răspunsul imunitar (LT, limfocitele B (LB) și celulele dendritice (DC)) vor fi caracterizate cu un interes deosebit pentru subpopulațiile de peptide de mielină specifică pentru efectul LT și Treg. Pentru a realiza acest lucru, diferitele populații de leucocite izolate mecanic din splină, ganglioni și creiere sălbatice, induse sau nu de tPA-/-AAE vor fi caracterizate prin citometrie de flux utilizând Acs specifice. Specificitatea antigenică și funcțiile LT (proliferarea și producția de citokine) vor fi, de asemenea, analizate prin tehnici de citometrie. În paralel, caracterizăm expresia prin leucocite a receptorilor care interacționează cu tPA, inclusiv receptorul NMDA. Acest studiu va oferi o mai bună înțelegere a rolului tPA în imunitatea adaptivă și în mecanismul fundamental al toleranței timice. Informațiile din acest studiu vor fi, de asemenea, utilizate pentru a dezvolta strategii terapeutice în SM și, în general, în patologii autoimune. (Romanian)
11 August 2022
0 references
Multipel skleros (MS) är en neurodegenerativ sjukdom med inflammatoriska och autoimmuna komponenter. En immunsvarsstörning beskrivs i denna patologi med en funktionell brist på T-cellsregulatorer (Treg) vars roll är att kontrollera aktiveringen av patogen autoreaktiv LT i periferin. Plasminogen vävnadsaktivator (t-PA) är ett serinproteas med pleotropa funktioner. TPA är involverat i fibrinolys, neuronöverlevnad och inflammation. Litteraturdata visar en roll av tPA i negativt tymicurval, en immuntoleransmekanism som inducerar LT apoptos med hög självreaktivitet. Å andra sidan, i modellen av experimentell autoimmun encefalomyelit (EAE) nära MS, tyder studier med möss brist på t-PA på en skyddande roll av denna molekyl i den sena fasen av sjukdomen. I vårt laboratorium utvecklade vi en antikropp (Ac) som blockerar interaktionen mellan tPA och GlUN1-subenheten av NMDA-receptorn som begränsar utvecklingen av EAE i ett tidigt skede. Vårt projekt syftar till att studera rollen av tPA i fysiologiskt och immunpatologiskt tillstånd (EAA-modell) genom att blockera effekten av tPA i en genetisk (musbrist för tPA) eller farmakologisk (användning av våra anti-GLUN1-antikroppar). I lymf- och hjärnorganen kommer fenotypiska och funktionella förändringar av de leukocyter som är involverade i immunsvaret (LT, B-lymfocyter (LB) och dendritiska celler (DC)) att karakteriseras med särskilt intresse för de LT-specifika effekt- eller subpopulationerna av myelinpeptider och Treg. För att uppnå detta kommer de olika leukocytpopulationerna mekaniskt isolerade från mjälte, ganglier och hjärnor hos vilda, tPA-/-AAE-inducerade eller inte karakteriseras i flödescytometri med hjälp av specifika Acs. Den antigena specificiteten och funktionerna hos LT (spridning och cytokinproduktion) kommer också att analyseras med hjälp av cytometritekniker. Parallellt karakteriserar vi uttrycket av leukocyter av receptorer som interagerar med tPA, inklusive NMDA-receptorn. Denna studie kommer att ge en bättre förståelse för tPA:s roll i adaptiv immunitet och i den grundläggande mekanismen för tymisk tolerans. Informationen från denna studie kommer också att användas för att utveckla terapeutiska strategier i MS och mer allmänt i autoimmuna patologier. (Swedish)
11 August 2022
0 references
7 December 2023
0 references
Identifiers
15P03625
0 references