OLIGONUCLEOTIDES IN HYBRID NANOSYSTEMS FOR LOCAL AND SYSTEMIC ROUTE-LED THERAPIES (Q3159460)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3159460 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | OLIGONUCLEOTIDES IN HYBRID NANOSYSTEMS FOR LOCAL AND SYSTEMIC ROUTE-LED THERAPIES |
Project Q3159460 in Spain |
Statements
146,216.39 Euro
0 references
181,500.0 Euro
0 references
80.56 percent
0 references
1 January 2019
0 references
30 September 2022
0 references
UNIVERSIDAD DE LA LAGUNA
0 references
LA VERSATILIDAD DE LOS NANOSISTEMAS LOS CONVIERTE EN NANOPATAFORMAS POTENCIALMENTE UTILES PARA DIRIGIR AGENTES TERAPEUTICAS A PRACTICAMENTE CUALQUIER CELULA O TEJIDO DEL ORGANISMO. EL RETO EN ESTE PROYECTO ES DISEÑAR, ELABORAR Y CARACTERIZAR (IN VITRO-IN VIVO) NANOSISTEMAS HIBRIDOS LIPIDO-POLIMERICOS PARA ADMINISTRACION SISTEMICA Y LOCAL COMO TRANSPORTADORES ESPECIFICOS DE OLIGONUCLEOTIDOS (GAPMERS). LOS MODELOS DE ENFERMEDAD ELEGIDOS SON OSTEOPOROSIS (OP) Y EL LEYOMIOMA UTERINO (LU), YA QUE LAS NANOPARTICULAS (NPS), DESPUES DE LA INYECCION INTRAVENOSA (IV), TRANSPORTAN EL OLIGONUCLEOTIDO A LAS CELULAS MADRE MESENQUIMALES (MSC) PARA AUMENTAR LA FORMACION OSEA Y POR ADMINISTRACION LOCAL A LAS CELULAS MADRE SOMATICAS (SSC) IMPLICADAS EN LA GENERACION DEL TUMOR UTERINO. SE PROPONE LA TECNICA DE MICROFLUIDICA COMO ALTERNATIVA A LOS METODOS CONVENCIONALES DE DOBLE EMULSION PARA LA PREPARACION DE NPS. PARA CONSEGUIR UN TRANSPORTE SELECTIVO, LA SUPERFICIE DE LAS NPS SE DECORA CON LIGADOS PARA EVITAR LA OPSONIZACION Y DIRIGIR EL GAPMER A SU LUGAR DE ACCION. POR TANTO, SE SELECCIONAN LOS LIGANDOS, SE OPTIMIZA EL PROCEDIMIENTO DE UNION Y SE DETERMINA LA CINETICA DE DESORCION. LAS NPS SON CARACTERIZADAS EN CUANTO A TAMAÑO, POLIDISPERSIDAD, POTENCIAL Z, COMPOSICION DE CADA CAPA Y DE SU SUPERFICIE, INTEGRIDAD, EFICACIA DE ENCAPSULACION DE LOS GAPMERS Y CONDICIONES DE LIOFILIZACION. LOS GAPMERS SE SELECCIONAN DE ACUERDO CON LA EFICACIA MOSTRADA EN CULTIVOS DE MSC DE RATON (RMSC) Y EN CULTIVOS DE CELULAS DERIVADAS DE LU, RESPECTIVAMENTE. SE COMPRUEBA LA EFICACIA IN VITRO Y LA CITOTOXICIDAD DE LAS GAPMER-NPS ASI COMO SU BIODISTRIBUCION INTRACELULAR. EL EFECTO OSTEOGENICO DE LAS MMSC TRANSFECTADAS Y LA CITOTOXICIDAD DE LAS NPS PARA OP SE TESTA EN CULTIVOS DE RMSC. EL EFECTO ANTITUMORAL EN UL, SE EVALUA EN CULTIVOS EX-VIVO DE CORTES DE TUMOR DE PACIENTES. LA EVALUACION DE GAPMER-NPS INVISIBLES FUNCIONALIZADAS CON UN APTAMERO ESPECIFICO PARA HUESO, SE LLEVA A CABO EN RATONES HEMBRA OSTEOPOROTICAS. EN PRIMER LUGAR, SE REALIZAN LOS ENSAYOS DE BIODISTRIBUCION MARCANDO LOS COMPONENETES DE LAS NPS CON DIFERENTES RADIOISOTOPOS PARA SU LOCALIZACION DESPUES DE SU ADMINISTRACION IV. EL EFECTO OSTEOGENICO DE LAS NP SE VALORA EN RATONAS VIVAS OSTEOPOROTICAS MEDIANTE DENSITOMETRIA ANTES Y DURANTE EL PERIODO DE TRATAMIENTO Y MEDIANTE ANALISIS HISTOLOGICOS AL FINALIZAR EL EXPERIMENTO UNA VEZ SACRIFICADO EL ANIMAL. SIMULTANEAMENTE, EL EFECTO IN VIVO DE LA INYECCION INTRATUMORAL DE LAS GAPMER-NPS DESARROLLADAS PARA UL SOLAS O EN COMBINACION CON NP ENCAPSULANDO FARMACOS CON POTENCIALES APLICACIONES EN LEIMOMAS POR VIA LOCAL, SE EVALUAN EN UN MODELO DE XENOINJERTO DESARROLLADO EN RATON. EL TIEMPO DE PERMANENCIA DE LAS NPS EN EL TUMOR SE MIDE EXTERNAMENTE DESPUES DE LA INYECCION INTRATUMORAL DE NPS MARCADAS CON UN RADIOISOTOPO EN RATONES VIVOS. LA EFICACIA DEL NANOSISTEMA SE VALORA CONTROLANDO EL TAMAÑO DEL TUMOR POR ECOGRAFIA MIENTRAS QUE UNA VEZ SACRIFICADO EL ANIMAL SE REALIZAN LOS ANALISIS HISTOPATOLOGICOS DE TUMOR Y ORGANOS PRINCIPALES COMO MEDIDA DE EFICACIA Y TOXICIDAD. LOS RESULTADOS IN VIVO PERMITEN ESTABLECER UN REGIMEN DE DOSIFICACION RACIONAL, SEGURO Y EFICAZ TANTO PARA LAS NPS POR VIA IV COMO INTRATUMORAL. POR ULTIMO, PARA DESARROLLAR UNA NANO-FORMULACION POTENCIALMENTE TRANSFERIBLE A LA INDUSTRIA O A LA CLINICA, PROPONEMOS EL DESARROLLO DE UN NANOSISTEMA PARA GAPMERS CON UN APTAMERO ESPECIFICO PARA EL TEJIDO OSEO HUMANO UTIL PARA LA OP. (Spanish)
0 references
TUNEABLE PROPERTY OF NANOSYSTEMS MAKES THEM A PROMISING NANOPLATAFORM TO DELIVER THERAPEUTIC AGENTS TO VIRTUALLY EVERY TYPE OF CELL OF AN ORGANISM. THE CHALLENGE OF THIS PROJECT IS TO DESIGN, MANUFACTURE AND CHARACTERIZE (IN VITRO-IN VIVO) HYBRID LIPID-POLYMERIC NANOSYSTEMS AS CARRIERS OF OLIGONUCLEOTIDES (GAPMERS) TO TARGET CELLS BY SYSTEMIC AND LOCAL ADMINISTRATION. OSTEOPOROSIS AND UTERINE LEYOMIOMA (OP AND UL), AS DISEASE MODELS, ARE PROPOSED. THEREFORE, THE NPS, AFTER INTRAVENOUS (IV) INJECTION, TRANSPORT THE OLIGONUCLEOTIDE TO THE MESENCHYMAL STEM CELLS (MSC) TO INCREASE BONE FORMATION AND BY LOCAL ADMINISTRATION TO THE SOMATIC STEM CELLS (SSC) INVOLVED IN THE GENERATION OF THE UTERINE TUMOR. TO PREPARE LIPID-POLYMERIC NPS FOR GAPMERS ENCAPSULATION MICROFLUIDICS TECHNIQUE IS PROPOSED AS AN ALTERNATIVE TO THE CONVENTIONAL DOUBLE EMULSION METHODS. THE DECORATED LIPID-PLGA-NPS TARGETED DELIVERY AND OPSONIZATION AVOIDANCE INCLUDES SELECTION OF LIGANDS, OPTIMIZATION OF THE LINKAGE PROCEDURE AND LIGAND DESORPTION KINETICS ANALYSIS. NPS CHARACTERIZATION CONSISTS IN SIZE, POLYDISPERSITY, Z-POTENTIAL, LAYER AND SURFACE COMPOSITION, INTEGRITY, GAPMERS ENCAPSULATION EFFICACY (EE) AND SETTING LYOPHILISATION CONDITIONS. GAPMERS TO SILENCE CANDIDATE GENES INVOLVED IN OP AND UL ARE SELECTED ACCORDING TO THE EFFICIENCY SHOWN IN MICE MSC (MMSC) CULTURE AND IN UL-DERIVED CELLS, RESPECTIVELY. THE IN VITRO EFFICACY, INTRACELLULAR TRAFFICKING AND SAFETY OF THE GAPMER SELECTED ENCAPSULATED IN THE NPS ARE TESTED. IN VITRO OSTEOGENIC POTENTIAL OF TRANSFECTED MMSC AND CITOTOXICITY OF THE NPS FOR OP ARE TESTED IN MMSC CULTURES. TO CHECK THE ANTI-PROLIFERATIVE EFFECT OF THE NPS FOR THE UL EX VIVO CULTURES OF PATIENT DERIVED TISSUE SLICES WOULD BE USED. TO EVALUATE IN VIVO THE NANO-FORMULATION FOR OP, SELECTED GAPMERS ENCAPSULATED IN STEALTH NPS FUNCTIONALIZED WITH AN APTAMER FOR BONE TARGETED, THE EXPERIMENT ARE CARRIED OUT IN OSTEOPOROTIC FEMALE MICE (OVARIECTOMY AND DEXAMETHASONE). FIRST, BIODISTRIBUTION ASSAYS USING DIFFERENT RADIOISOTOPES HAVE TO BE CARRIED OUT FOR NPS LOCALIZATION AFTER IV ADMINISTRATION. TEST THE OSTEOGENIC EFFECT OF NPS IN SHAM AND OSTEOPOROTIC MICE BY DENSITOMETRIY OF THE ALIVE ANIMAL BEFORE AND DURING THE PERIOD OF INJECTIONS OF NPS AND BY HYSTOLOGICAL ANALYZES IN SACRIFICED ANIMALS. SIMULTANEOUSLY, IN VIVO EFFECT OF INTRATUMORAL INJECTION OF THE DEVELOPED GAPMER-NPS FOR UL ALONE OR IN COMBINATION WITH DRUG-NPS IS TESTED IN PATIENT-DERIVED XENOGRAFT MOUSE MODEL OF UL. NPS RESIDENCE TIME IN THE TUMOR SITE IS EXTERNALLY MEASURED AFTER INTRATUMORAL INJECTION OF RADIOLABELLED NPS IN ALIVE MICE. IN VIVO EFFICACY OF THE NPS IS DETECTED BY MONITORING THE TUMOR GROWTH WITH HIGH-RESOLUTION ULTRASOUND IMAGING. IN ADDITION, IN SACRIFICED ANIMALS, HISTOPATHOLOGICAL ANALYZES OF TUMORS AND MAJOR ORGANS GIVE ALSO A MEASURE OF THE EFFICACY AND TOXICITY. THE IN VIVO EXPERIMENTS WOULD PERMIT TO ESTABLISH A RATIONAL, EFFICACY AND SAFETY DOSAGE REGIMEN BY IV (OP) AND INTRATUMORAL (UL) ROUTES. LASTLY, TO DEVELOP A HIGH POTENTIAL TRANSFER NANO-FORMULATION TO THE INDUSTRY OR CLINIC WE PROPOSE THE DEVELOPMENT OF AN APTAMER SPECIFIC FOR HUMAN BONE TISSUE BY CELL-SELEX. TESTING OF THE ABILITY OF THE APTAMERS FOR DIRECTING NPS TO HUMAN CELLS IN CULTURE. TEST OF THE EFFECT OF NPS CARRYING THE HUMAN APTAMER AND THE SELECTED PAIR OF GAPMERS ON BONE FORMATION IN HMSC ISOLATED FROM OP PATIENTS. (English)
0.3906775470074607
0 references
LA POLYVALENCE DES NANOSYSTÈMES LES REND NANOPATAFORMS POTENTIELLEMENT UTILES POUR ORIENTER LES AGENTS THÉRAPEUTIQUES VERS PRATIQUEMENT N’IMPORTE QUELLE CELLULE OU TISSU DANS L’ORGANISME. LE DÉFI DE CE PROJET EST DE CONCEVOIR, DÉVELOPPER ET CARACTÉRISER (IN VITRO-IN VIVO) LES NANOSYSTÈMES HYBRIDES LIPIDIQUES-POLYMÈRES POUR L’ADMINISTRATION SYSTÉMIQUE ET LOCALE EN TANT QUE CONVOYEURS OLIGONUCLÉOTIDES SPÉCIFIQUES (GAPMERS). LES MODÈLES DE MALADIE SÉLECTIONNÉS SONT L’OSTÉOPOROSE (OP) ET LA LEYOMIOMA UTÉRINE (LU), PUISQUE LE NANOPARTICULAE (NPS), APRÈS INJECTION INTRAVEINEUSE (IV), TRANSPORTE OLIGONUCLEOTIDO VERS LES CELLULES SOUCHES MÉSENCHYMIQUES (CSM) POUR AUGMENTER LA FORMATION OSSEUSE ET L’ADMINISTRATION LOCALE AUX CELLULES SOUCHES SOMATIQUES (SSC) IMPLIQUÉES DANS LA PRODUCTION DE TUMEURS UTÉRINES. LA TECHNIQUE MICROFLUIDIQUE EST PROPOSÉE COMME ALTERNATIVE AUX MÉTHODES CONVENTIONNELLES DE DOUBLE ÉMULSION POUR LA PRÉPARATION DES NPS. AFIN D’OBTENIR UN TRANSPORT SÉLECTIF, LA SURFACE DU NPS EST ORNÉE DE LIENS POUR ÉVITER L’OPSONISATION ET DIRIGER LE GAPMER VERS SON LIEU D’ACTION. PAR CONSÉQUENT, LES LIGANDS SONT SÉLECTIONNÉS, LA PROCÉDURE DE L’UNION EST OPTIMISÉE ET LA DESORCION CINÉMATOGRAPHIQUE EST DÉTERMINÉE. LES NPS SONT CARACTÉRISÉS EN TERMES DE TAILLE, DE POLYDISPERSITÉ, DE POTENTIEL Z, DE COMPOSITION DE CHAQUE COUCHE ET DE SA SURFACE, D’INTÉGRITÉ, D’EFFICACITÉ D’ENCAPSULATION DES GAPMERS ET DE CONDITIONS DE LYOPHILISATION. LES GAPMERS SONT SÉLECTIONNÉS EN FONCTION DE L’EFFICACITÉ DÉMONTRÉE DANS LES CULTURES DE RATON MSC (RMSC) ET DANS LES CULTURES DE CELLULES DÉRIVÉES DE LU, RESPECTIVEMENT. L’EFFICACITÉ IN VITRO ET LA CYTOTOXICITÉ DU GAPMER-NPS ET DE LEUR BIODISTRIBUCTION INTRACELLULAIRE SONT VÉRIFIÉES. L’EFFET OSTÉOGÉNIQUE DU MMSCS TRANSFECTÉ ET LA CYTOTOXICITÉ DE L’OP NPS SONT TESTÉS EN CULTURES RMSC. L’EFFET ANTITUMORAL DE L’UL EST ÉVALUÉ DANS LES CULTURES EX-VIVO DE COUPURES TUMORALES CHEZ LES PATIENTS. L’ÉVALUATION DU GAPMER-NPS INVISIBLE FONCTIONNALISÉ AVEC UN APTAMERO SPÉCIFIQUE POUR L’OS, EST RÉALISÉE CHEZ DES SOURIS FEMELLES OSTÉOPOROTIQUES. EN PREMIER LIEU, LES TESTS DE BIODISTRIBUTION SONT EFFECTUÉS EN NOTANT LES COMPOSITIONS NPS AVEC DIFFÉRENTS RADIOISOTOPOS POUR LEUR LOCALISATION APRÈS L’ADMINISTRATION IV. L’EFFET OSTÉOGÈNE DE LA PNS EST ÉVALUÉ CHEZ DES SOURIS OSTÉOPOROSES VIVANTES PAR DENSITOMETRIA AVANT ET PENDANT LA PÉRIODE DE TRAITEMENT ET PAR ANALYSE HISTOLOGIQUE À LA FIN DE L’EXPÉRIENCE APRÈS L’ABATTAGE DE L’ANIMAL. SIMULTANÉMENT, L’EFFET IN VIVO DE L’INJECTION INTRATUMORALE DE GAPMER-NPS DÉVELOPPÉ POUR L’UL SEUL OU EN ASSOCIATION AVEC DES PHARMACOS ENCAPSULATEURS DE NP AVEC DES APPLICATIONS POTENTIELLES DANS LE LOCAL VIA LEIMOMAS EST ÉVALUÉ DANS UN MODÈLE DE XÉNOGREFFE DÉVELOPPÉ CHEZ RATON. LE TEMPS DE SÉJOUR DE NPS DANS LA TUMEUR EST MESURÉ À L’EXTÉRIEUR APRÈS L’INJECTION INTRATUMORALE DE NPS MARQUÉE AVEC RADIOISOTOPO CHEZ DES SOURIS VIVANTES. L’EFFICACITÉ DU NANOSYSTÈME EST ÉVALUÉE EN CONTRÔLANT LA TAILLE DE LA TUMEUR PAR ÉCHOGRAPHIE ALORS QU’UNE FOIS L’ANIMAL ABATTU, DES ANALYSES HISTOPATHOLOGIQUES DE LA TUMEUR ET DES PRINCIPAUX ORGANES SONT EFFECTUÉES COMME MESURE DE L’EFFICACITÉ ET DE LA TOXICITÉ. LES RÉSULTATS IN VIVO PERMETTENT L’ÉTABLISSEMENT D’UN RÉGIME POSOLOGIQUE RATIONNEL, SÛR ET EFFICACE À LA FOIS PAR VOIE INTRATUMORALE ET PAR VOIE INTRATUMORALE. ENFIN, POUR DÉVELOPPER UNE NANOFORMULATION POTENTIELLEMENT TRANSFÉRABLE À L’INDUSTRIE OU À LA CLINIQUE, NOUS PROPOSONS LE DÉVELOPPEMENT D’UN NANOSYSTÈME POUR GAPMERS AVEC UN APTAMERO SPÉCIFIQUE POUR LES TISSUS OSSEUX HUMAINS UTILE POUR L’OP. (French)
4 December 2021
0 references
DIE VIELSEITIGKEIT VON NANOSYSTEMEN MACHT SIE NANOPATAFORMS POTENZIELL NÜTZLICH, UM THERAPEUTISCHE WIRKSTOFFE AUF PRAKTISCH JEDE ZELLE ODER GEWEBE IM KÖRPER ZU LENKEN. DIE HERAUSFORDERUNG IN DIESEM PROJEKT BESTEHT DARIN, (IN VITRO-IN VIVO) LIPIDPOLYMERE HYBRIDE NANOSYSTEME FÜR DIE SYSTEMISCHE UND LOKALE VERWALTUNG ALS SPEZIFISCHE OLIGONUKLEOTIDFÖRDERER (GAPMERS) ZU ENTWERFEN, ZU ENTWICKELN UND ZU CHARAKTERISIEREN. DIE AUSGEWÄHLTEN KRANKHEITSMODELLE SIND OSTEOPOROSE (OP) UND UTERIN LEYOMIOMA (LU), SEIT DEN NANOPARTICULAE (NPS) NACH INTRAVENÖSER INJEKTION (IV), TRANSPORTIEREN OLIGONUCLEOTIDO ZU DEN MESENCHYMALEN STAMMZELLEN (MSC), UM DIE KNOCHENBILDUNG UND DIE LOKALE VERWALTUNG DER SOMATISCHEN STAMMZELLEN (SSC) ZU ERHÖHEN, DIE AN DER ENTSTEHUNG VON GEBÄRMUTTERTUM BETEILIGT SIND. DIE MIKROFLUIDISCHE TECHNIK WIRD ALS ALTERNATIVE ZU HERKÖMMLICHEN DOPPELEMULSIONSMETHODEN ZUR HERSTELLUNG VON NPS VORGESCHLAGEN. UM SELEKTIVEN TRANSPORT ZU ERREICHEN, IST DIE OBERFLÄCHE DES NPS MIT VERBINDUNGEN VERZIERT, UM OPSONISIERUNG ZU VERMEIDEN UND DEN GAPMER AN SEINEN WIRKUNGSORT ZU LENKEN. DAHER WERDEN LIGANDEN AUSGEWÄHLT, DAS UNIONSVERFAHREN OPTIMIERT UND DER FILMISCHE BEORCION BESTIMMT. DIE NPS ZEICHNEN SICH DURCH GRÖSSE, POLYDISPERSITÄT, Z-POTENTIAL, ZUSAMMENSETZUNG JEDER SCHICHT UND IHRER OBERFLÄCHE, INTEGRITÄT, VERKAPSELUNGSEFFIZIENZ VON GAPMERS UND GEFRIERTROCKNUNGSBEDINGUNGEN AUS. GAPMERS WERDEN ENTSPRECHEND DER WIRKSAMKEIT AUSGEWÄHLT, DIE IN RATON MSC (RMSC) KULTUREN BZW. LU-DERIVE ZELLKULTUREN GEZEIGT WIRD. DIE WIRKSAMKEIT UND ZYTOTOXIZITÄT VON GAPMER-NPS UND DEREN INTRAZELLULÄRER BIODISTRIBUCTION WERDEN GEPRÜFT. DIE OSTEOGENE WIRKUNG VON TRANSFECTED MMSCS UND DIE ZYTOTOXIZITÄT VON OP NPS WERDEN IN RMSC-KULTUREN GETESTET. DER ANTITUMOREFFEKT IN UL WIRD IN EX-VIVO-KULTUREN VON TUMORSCHNITTEN BEI PATIENTEN UNTERSUCHT. DIE AUSWERTUNG UNSICHTBARER GAPMER-NPS, DIE MIT EINEM SPEZIFISCHEN APTAMERO FÜR KNOCHEN FUNKTIONALISIERT WERDEN, WIRD BEI OSTEOPOROTISCHEN MÄUSEN DURCHGEFÜHRT. IN ERSTER LINIE WERDEN BIOVERTEILUNGSTESTS DURCHGEFÜHRT, INDEM DIE NPS-ZUSAMMENSETZUNGEN MIT VERSCHIEDENEN RADIOISOTOPOS FÜR IHREN STANDORT NACH VERABREICHUNG IV GEKENNZEICHNET WERDEN. DIE OSTEOGENIC WIRKUNG VON PNS WIRD BEI LEBENDEN OSTEOPOROTISCHEN MÄUSEN VON DENSITOMETRIA VOR UND WÄHREND DER BEHANDLUNGSPHASE SOWIE DURCH HISTOLOGISCHE ANALYSE AM ENDE DES EXPERIMENTS NACH DER SCHLACHTUNG DES TIERES UNTERSUCHT. GLEICHZEITIG WIRD DER IN-VIVO-EFFEKT DER INTRATUMORALEN INJEKTION VON GAPMER-NPS, DIE ALLEIN FÜR UL ENTWICKELT WURDE, ODER IN KOMBINATION MIT NP, DIE PHARMACOS MIT POTENTIELLEN ANWENDUNGEN IM LOKALEN ÜBER LEIMOMAS UMFASSEN, IN EINEM IN RATON ENTWICKELTEN XENOGRAFT-MODELL AUSGEWERTET. NACH INTRATUMORALER INJEKTION VON NPS, DIE MIT RADIOISOTOPO BEI LEBENDEN MÄUSEN MARKIERT IST, WIRD DIE ZEIT DES NPS-AUFENTHALTS IM TUMOR EXTERN GEMESSEN. DIE WIRKSAMKEIT DES NANOSYSTEMS WIRD BEWERTET, INDEM DIE GRÖSSE DES TUMORS DURCH ULTRASCHALL KONTROLLIERT WIRD, WÄHREND NACH DER SCHLACHTUNG DES TIERES HISTOPATHOLOGISCHE ANALYSEN VON TUMOR UND HAUPTORGANEN ALS MASS FÜR WIRKSAMKEIT UND TOXIZITÄT DURCHGEFÜHRT WERDEN. DIE IN-VIVO-ERGEBNISSE ERMÖGLICHEN DIE EINRICHTUNG EINES RATIONALEN, SICHEREN UND WIRKSAMEN DOSIERUNGSSCHEMAS SOWOHL FÜR IV ALS AUCH FÜR INTRATUMORALE PSCS. UM SCHLIESSLICH EINE NANOFORMULIERUNG ZU ENTWICKELN, DIE AUF DIE INDUSTRIE ODER DIE KLINIK ÜBERTRAGBAR IST, SCHLAGEN WIR DIE ENTWICKLUNG EINES NANOSYSTEMS FÜR GAPMERS MIT EINEM SPEZIFISCHEN APTAMERO FÜR MENSCHLICHES KNOCHENGEWEBE VOR, DAS FÜR OP NÜTZLICH IST. (German)
9 December 2021
0 references
DE VEELZIJDIGHEID VAN NANOSYSTEMS MAAKT HEN NANOPATAFORMS POTENTIEEL NUTTIG OM THERAPEUTISCHE MIDDELEN NAAR PRAKTISCH OM HET EVEN WELKE CEL OF WEEFSEL IN HET LICHAAM TE LEIDEN. DE UITDAGING IN DIT PROJECT IS HET ONTWERPEN, ONTWIKKELEN EN KARAKTERISEREN (IN VITRO-IN VIVO) LIPIDE-POLYMEER HYBRIDE NANOSYSTEMS VOOR SYSTEMISCHE EN LOKALE ADMINISTRATIE ALS SPECIFIEKE OLIGONUCLEOTIDE TRANSPORTBANDEN (GAPMERS). DE GESELECTEERDE ZIEKTEMODELLEN ZIJN OSTEOPOROSE (OP) EN BAARMOEDER LEYOMIOMA (LU), SINDS DE NANOPARTICULAE (NPS), NA INTRAVENEUZE INJECTIE (IV), TRANSPORT OLIGONUCLEOTIDO NAAR DE MESENCHYMALE STAMCELLEN (MSC) OM DE BOTVORMING EN LOKALE TOEDIENING TE VERHOGEN NAAR DE SOMATISCHE STAMCELLEN (SSC) DIE BETROKKEN ZIJN BIJ DE GENERATIE VAN BAARMOEDERTUMOR. DE MICROFLUÏDISCHE TECHNIEK WORDT VOORGESTELD ALS ALTERNATIEF VOOR CONVENTIONELE DUBBELE-EMULSIEMETHODEN VOOR DE BEREIDING VAN NPS. OM SELECTIEF VERVOER TE BEREIKEN, IS HET OPPERVLAK VAN DE NPS VERSIERD MET VERBINDINGEN OM OPSONISATIE TE VOORKOMEN EN DE GAPMER NAAR ZIJN PLAATS VAN HANDELEN TE LEIDEN. DAAROM WORDEN LIGANDEN GESELECTEERD, WORDT DE UNIEPROCEDURE GEOPTIMALISEERD EN WORDT DE FILMISCHE DESORCION BEPAALD. DE NPS WORDEN GEKENMERKT IN TERMEN VAN GROOTTE, POLYDISPERSITEIT, Z POTENTIEEL, SAMENSTELLING VAN ELKE LAAG EN HET OPPERVLAK, INTEGRITEIT, INKAPSELING EFFICIËNTIE VAN GAPMERS EN VRIESDROGEN OMSTANDIGHEDEN. GAPMERS WORDEN GESELECTEERD OP BASIS VAN DE WERKZAAMHEID GETOOND IN RESPECTIEVELIJK RATON MSC (RMSC) EN LU-DERIEVE CELCULTUREN. DE IN VITRO WERKZAAMHEID EN CYTOTOXICITEIT VAN GAPMER-NPS EN HUN INTRACELLULAIRE BIODISTRIBUCTIE WORDEN GECONTROLEERD. HET OSTEOGENE EFFECT VAN GETRANSFECTEERDE MMSCS EN DE CYTOTOXICITEIT VAN OP NPS WORDT GETEST IN RMSC CULTUREN. HET ANTITUMOREFFECT IN UL WORDT GEËVALUEERD IN EX-VIVOCULTUREN VAN TUMORBESNOEIINGEN BIJ PATIËNTEN. DE EVALUATIE VAN ONZICHTBARE GAPMER-NPS GEFUNCTIONALISEERD MET EEN SPECIFIEKE APTAMERO VOOR BOT, WORDT UITGEVOERD BIJ OSTEOPOROTISCHE VROUWELIJKE MUIZEN. IN DE EERSTE PLAATS WORDEN BIODISTRIBUTIETESTS UITGEVOERD DOOR DE NPS-SAMENSTELLINGEN TE MARKEREN MET VERSCHILLENDE RADIOISOTOPOS VOOR HUN LOCATIE NA TOEDIENING IV. HET OSTEOGENE EFFECT VAN PNS WORDT GEËVALUEERD BIJ LEVENDE OSTEOPOROTISCHE MUIZEN DOOR DENSITOMETRIA VÓÓR EN TIJDENS DE BEHANDELINGSPERIODE EN DOOR HISTOLOGISCHE ANALYSE AAN HET EINDE VAN HET EXPERIMENT NADAT HET DIER IS GESLACHT. TEGELIJKERTIJD WORDT HET IN-VIVO-EFFECT VAN INTRATUMORALE INJECTIE VAN GAPMER-NPS ONTWIKKELD VOOR UL ALLEEN OF IN COMBINATIE MET NP ENCAPSULATING PHARMACOS MET MOGELIJKE TOEPASSINGEN IN LOKAAL VIA LEIMOMAS GEËVALUEERD IN EEN MODEL VAN XENOGRAFT ONTWIKKELD IN RATON. DE TIJD VAN HET VERBLIJF VAN NPS IN DE TUMOR WORDT EXTERN GEMETEN NA INTRATUMORALE INJECTIE VAN NPS GEMARKEERD MET RADIOISOTOPO IN LEVENDE MUIZEN. DE EFFECTIVITEIT VAN HET NANOSYSTEEM WORDT BEOORDEELD DOOR DE GROOTTE VAN DE TUMOR TE CONTROLEREN DOOR ECHOGRAFIE, TERWIJL ZODRA HET DIER IS GESLACHT, HISTOPATHOLOGISCHE ANALYSES VAN TUMOR EN BELANGRIJKSTE ORGANEN WORDEN UITGEVOERD ALS MAATSTAF VOOR WERKZAAMHEID EN TOXICITEIT. DE IN-VIVO RESULTATEN MAKEN HET MOGELIJK EEN RATIONEEL, VEILIG EN EFFECTIEF DOSERINGSREGIME VAST TE STELLEN VOOR ZOWEL VIA IV ALS INTRATUMORALE PSC’S. TOT SLOT, OM EEN NANO-FORMULERING MOGELIJK OVERDRAAGBAAR NAAR DE INDUSTRIE OF DE KLINIEK TE ONTWIKKELEN, STELLEN WE DE ONTWIKKELING VOOR VAN EEN NANOSYSTEEM VOOR GAPMERS MET EEN SPECIFIEKE APTAMERO VOOR MENSELIJK BOTWEEFSEL NUTTIG VOOR OP. (Dutch)
17 December 2021
0 references
LA VERSATILITÀ DEI NANOSYSTEMS LI RENDE NANOPATAFORMS POTENZIALMENTE UTILI PER INDIRIZZARE GLI AGENTI TERAPEUTICI PRATICAMENTE A QUALSIASI CELLULA O TESSUTO DEL CORPO. LA SFIDA DI QUESTO PROGETTO È LA PROGETTAZIONE, LO SVILUPPO E LA CARATTERIZZAZIONE (IN VITRO-IN VIVO) DI NANOSISTEMI IBRIDI LIPIDI-POLIMERICI PER L'AMMINISTRAZIONE SISTEMICA E LOCALE COME TRASPORTATORI SPECIFICI DI OLIGONUCLEOTIDE (GAPMERS). I MODELLI DI MALATTIA SELEZIONATI SONO OSTEOPOROSI (OP) E LEYOMIOMA UTERINO (LU), DAL NANOPARTICULAE (NPS), DOPO INIEZIONE ENDOVENOSA (IV), TRASPORTARE OLIGONUCLEOTIDO ALLE CELLULE STAMINALI MESENCHIMALI (MSC) PER AUMENTARE LA FORMAZIONE OSSEA E LA SOMMINISTRAZIONE LOCALE ALLE CELLULE STAMINALI SOMATICHE (SSC) COINVOLTE NELLA GENERAZIONE DI TUMORE UTERINO. LA TECNICA MICROFLUIDICA È PROPOSTA COME ALTERNATIVA AI METODI CONVENZIONALI A DOPPIA EMULSIONE PER LA PREPARAZIONE DI NPS. AL FINE DI OTTENERE UN TRASPORTO SELETTIVO, LA SUPERFICIE DEL NPS È DECORATA CON COLLEGAMENTI PER EVITARE L'OPSONIZZAZIONE E INDIRIZZARE IL GAPMER AL SUO LUOGO DI AZIONE. PERTANTO, VENGONO SELEZIONATI I LEGANTI, LA PROCEDURA DELL'UNIONE È OTTIMIZZATA E VIENE DETERMINATA LA DESORCION CINEMATOGRAFICA. I NPS SONO CARATTERIZZATI IN TERMINI DI DIMENSIONI, POLIDISPERITÀ, POTENZIALE Z, COMPOSIZIONE DI OGNI STRATO E DELLA SUA SUPERFICIE, INTEGRITÀ, EFFICIENZA DI INCAPSULAMENTO DEI GAPMERS E CONDIZIONI DI CONGELAMENTO. I GAPMERS SONO SELEZIONATI IN BASE ALL'EFFICACIA MOSTRATA RISPETTIVAMENTE NELLE COLTURE DI RATON MSC (RMSC) E NELLE COLTURE CELLULARI DI ORIGINE LU. L'EFFICACIA IN VITRO E LA CITOTOSSICITÀ DI GAPMER-NPS E LA LORO BIODISTRIBUCTION INTRACELLULARE SONO CONTROLLATE. L'EFFETTO OSTEOGENICO DELLA MMSCS TRANSFETTATA E LA CITOTOSSICITÀ DI OP NPS SONO TESTATI IN COLTURE RMSC. L'EFFETTO ANTITUMORALE IN UL È VALUTATO NELLE COLTURE EX-VIVO DI TAGLI TUMORALI NEI PAZIENTI. LA VALUTAZIONE DI GAPMER-NPS INVISIBILE FUNZIONALIZZATA CON UN APTAMERO SPECIFICO PER LE OSSA, VIENE EFFETTUATA IN TOPI OSTEOPOROTICI FEMMINILI. IN PRIMO LUOGO, I TEST DI BIODISTRIBUZIONE VENGONO ESEGUITI MARCANDO LE COMPOSIZIONI NPS CON RADIOISOTOPOS DIFFERENTI PER LA LORO UBICAZIONE DOPO LA SOMMINISTRAZIONE IV. L'EFFETTO OSTEOGENICO DEL PNS È VALUTATO NEI TOPI OSTEOPOROTICI VIVI DA DENSITOMETRIA PRIMA E DURANTE IL PERIODO DI TRATTAMENTO E MEDIANTE ANALISI ISTOLOGICA AL TERMINE DELL'ESPERIMENTO DOPO LA MACELLAZIONE DELL'ANIMALE. CONTEMPORANEAMENTE, L'EFFETTO IN VIVO DELL'INIEZIONE INTRATUMORALE DI GAPMER-NPS SVILUPPATO PER UL DA SOLO O IN COMBINAZIONE CON PN CHE INCAPSULANO PHARMACOS CON POTENZIALI APPLICAZIONI IN LOCALE TRAMITE LEIMOMAS È VALUTATO IN UN MODELLO DI XENOGRAFT SVILUPPATO A RATON. IL TEMPO DI PERMANENZA DELLA NPS NEL TUMORE VIENE MISURATO ESTERNAMENTE DOPO L'INIEZIONE INTRATUMORALE DI NPS CONTRASSEGNATA CON RADIOISOTOPO IN TOPI VIVI. L'EFFICACIA DEL NANOSISTEMA È VALUTATA CONTROLLANDO LE DIMENSIONI DEL TUMORE MEDIANTE ULTRASUONI MENTRE UNA VOLTA CHE L'ANIMALE È STATO MACELLATO, LE ANALISI ISTOPATOLOGICHE DEL TUMORE E DEGLI ORGANI PRINCIPALI SONO ESEGUITE COME MISURA DI EFFICACIA E TOSSICITÀ. I RISULTATI IN VIVO CONSENTONO DI STABILIRE UN REGIME POSOLOGICO RAZIONALE, SICURO ED EFFICACE SIA PER I PSC PER VIA ENDOVENOSA CHE INTRATUMORALE. INFINE, PER SVILUPPARE UNA NANOFORMULAZIONE POTENZIALMENTE TRASFERIBILE ALL'INDUSTRIA O ALLA CLINICA, PROPONIAMO LO SVILUPPO DI UN NANOSISTEMA PER GAPMERS CON UNO SPECIFICO APTAMERO PER IL TESSUTO OSSEO UMANO UTILE PER L'OP. (Italian)
16 January 2022
0 references
NANOSYSTEMSI HÄÄLESTATAV OMADUS MUUDAB NEED PALJULUBAVAKS NANOPLATAFORMIKS, ET TOIMETADA TERAPEUTILISI AINEID PEAAEGU IGAT TÜÜPI ORGANISMI RAKKUDESSE. SELLE PROJEKTI ÜLESANNE ON KAVANDADA, TOOTA JA ISELOOMUSTADA (IN VITRO-IN VIVO) HÜBRIIDLIPIIDIDE JA POLÜMEERSETE NANOSÜSTEEMIDE KANDJAID OLIGONUKLEOTIIDIDE (GAPMERS) KANDJATENA, ET SÜSTEEMSED JA KOHALIKUD ASUTUSED SAAKSID RAKKE SIHTIDA. TEHAKSE ETTEPANEK OSTEOPOROOSI JA EMAKA LEYOMIOMA (OP JA UL) KUI HAIGUSMUDELITE KOHTA. SEETÕTTU KANNAB NPS PÄRAST INTRAVENOOSSET (IV) SÜSTIMIST OLIGONUKLEOTIIDI MESENHÜÜMI TÜVIRAKKUDESSE (MSC), ET SUURENDADA LUU MOODUSTUMIST, JA KOHALIKU MANUSTAMISE KAUDU EMAKAKASVAJA TEKKIMISES OSALEVATELE SOMAATILISTELE TÜVIRAKKUDELE (SSC). LIPIIDIDE JA POLÜMEERILISE NPS-I ETTEVALMISTAMISEKS GAPMERSI KAPSELDAMISEKS PAKUTAKSE ALTERNATIIVINA TAVAPÄRASTELE TOPELTEMULSIOONIMEETODITELE. KAUNISTATUD LIPIIDIDE-PLGA-NPS-I SIHIPÄRANE KOHALETOIMETAMINE JA OPSONISATSIOONI VÄLTIMINE HÕLMAB LIGANDITE VALIMIST, SIDUMISE PROTSEDUURI OPTIMEERIMIST JA LIGANDI DESORPTSIOONI KINEETIKA ANALÜÜSI. NPS ISELOOMUSTUS KOOSNEB SUURUSEST, POLÜDISPERSIIVSUSEST, Z-POTENTSIAALSEST, KIHILISE JA PINNA KOOSTISEST, TERVIKLIKKUSEST, GAPMERSI KAPSELDUMISEFEKTIIVSUSEST (EE) JA LÜOFILISEERIMISE TINGIMUSTE KEHTESTAMISEST. OP-S JA UL-IS OSALEVATE KANDIDAATGEENIDE VAIGISTAMISEKS VALITAKSE VASTAVALT HIIRTE MSC (MMSC) KULTUURILE JA UL-ST SAADUD RAKKUDELE NÄIDATUD EFEKTIIVSUSELE. TESTITAKSE NPS-I KAPSELDATUD GAPMERI IN VITRO EFEKTIIVSUST, INTRATSELLULAARSET KAUBANDUST JA OHUTUST. MMSC KULTUURIDES UURITAKSE TRANSFEKTSIOONITUD MMSC IN VITRO TEEGEENSUST JA NPS-I TSITOTOKSILISUST OP SUHTES. ET KONTROLLIDA NPS-I PROLIFERATIIVSET TOIMET UL EX VIVO PATSIENTIDE KOELÕIKUDE KULTUURIDELE, KASUTATAKSE PATSIENDIST SAADUD KOELÕIKUDE PROLIFERATIIVSET TOIMET. ET HINNATA IN VIVO NANO-FORMULATSIOONI OP JAOKS, MIS ON VALITUD GAPMERS, MIS ON KAPSELDATUD VARJATUD NPS-IGA, MIS ON FUNKTSIONEERITUD APTAMIINIGA SUUNATUD LUU JAOKS, VIIAKSE KATSE LÄBI OSTEOPOROOSI EMASTEL HIIRTEL (OVARIEKTOOMIA JA DEKSAMETASOON). ESITEKS TULEB PÄRAST IV MANUSTAMIST TEHA UUTE PSÜHHOAKTIIVSETE AINETE LOKALISEERIMISEKS BIOJAOTUMISKATSED, MILLES KASUTATAKSE ERINEVAID RADIOISOTOOPE. TESTIB NPS-I OSTEOGEENSET TOIMET FIKTIIVSETEL JA OSTEOPOROOTILISTEL HIIRTEL ELUSLOOMA DENSITOMETRIY ABIL ENNE NPS-I SÜSTIMIST JA SELLE AJAL NING HYSTOLOGICALI ANALÜÜSIDEGA SURMATUD LOOMADEL. SAMAL AJAL TESTITAKSE ARENDATUD GAPMER- NPS-I KASVAJASISESE SÜSTI IN VIVO TOIMET AINULT UL- UL-LE VÕI KOMBINATSIOONIS RAVIMIGA NPS PATSIENDIST SAADUD UL- KSENOGRAFT-HIIRE MUDELIS. NPS-I RESIDENTSUSAEGA KASVAJAKOHAS MÕÕDETAKSE VÄLISELT PÄRAST RADIOMÄRGISTATUD NPS-I KASVAJASISEST SÜSTI ELUSATEL HIIRTEL. NPS-I IN VIVO EFEKTIIVSUS TUVASTATAKSE KASVAJA KASVU JÄLGIMISEGA KÕRGRESOLUTSIOONIGA ULTRAHELIUURINGU ABIL. LISAKS SURMATUD LOOMADEL ANNAVAD KASVAJATE JA PEAMISTE ELUNDITE HISTOPATOLOOGILISED ANALÜÜSID KA TÕHUSUSE JA TOKSILISUSE MÕÕTMISE. IN VIVO KATSED VÕIMALDAKSID KINDLAKS MÄÄRATA RATSIONAALSE, EFEKTIIVSUSE JA OHUTUSE ANNUSTAMISSKEEMI IV (OP) JA KASVAJASISESE (UL) KAUDU. LÕPUKS, ET ARENDADA VÄLJA SUURE POTENTSIAALIGA NANOFORMULATSIOON TÖÖSTUSELE VÕI KLIINIKULE, TEEME ETTEPANEKU TÖÖTADA RAKU-SELEXI ABIL VÄLJA INIMESE LUUKOELE OMANE APTAMER. KATSETAMINE APTAMERITE VÕIME KOHTA SUUNATA NPS INIMESE RAKKUDESSE KULTUURIS. INIMESE APTAMEERI JA VALITUD GAPMERSI PAARI TOIME TEST NPS- I TOIME KOHTA OP-PATSIENTIDEST ISOLEERITUD HMSC LUU MOODUSTUMISELE. (Estonian)
4 August 2022
0 references
PRITAIKOMA NANOSYSTEMS SAVYBĖ LEIDŽIA JIEMS PERSPEKTYVIĄ NANOPLATAFORM PRISTATYTI TERAPINIUS AGENTUS BEVEIK VISŲ TIPŲ ORGANIZMO LĄSTELĖMS. ŠIO PROJEKTO UŽDAVINYS – PROJEKTUOTI, GAMINTI IR APIBŪDINTI (IN VITRO-IN VIVO) HIBRIDINES LIPIDŲ POLIMERINES NANOSISTEMAS KAIP OLIGONUKLEOTIDŲ (GAPMERS) NEŠIKLIUS, SIEKIANT NUKREIPTI LĄSTELES SISTEMINIU IR VIETOS LYGIU. OSTEOPOROZĖ IR GIMDOS LEYOMIOMA (OP IR UL), KAIP LIGOS MODELIAI, YRA SIŪLOMI. TODĖL PO INTRAVENINĖS (IV) INJEKCIJOS NPS PERNEŠA OLIGONUKLEOTIDĄ Į MEZENCHIMINES KAMIENINES LĄSTELES (MSC), KAD PADIDINTŲ KAULŲ SUSIDARYMĄ, IR VIETOS ADMINISTRAVIMO BŪDU Į SOMATINES KAMIENINES LĄSTELES (SSC), SUSIJUSIAS SU GIMDOS NAVIKO GENERAVIMU. SIEKIANT PARUOŠTI LIPIDŲ-POLIMERINES NPS GAPMERS INKAPSULIACIJOS MIKROSKYSČIŲ METODUI, SIŪLOMA ALTERNATYVA ĮPRASTINIAMS DVIGUBOS EMULSIJOS METODAMS. DEKORUOTAS LIPIDŲ-PLGA-NPS TIKSLINIS PRISTATYMAS IR OPSONIZACIJOS VENGIMAS APIMA LIGANDŲ PARINKIMĄ, SUSIEJIMO PROCEDŪROS OPTIMIZAVIMĄ IR LIGANDO DESORBCIJOS KINETIKOS ANALIZĘ. NPS APIBŪDINIMAS SUSIDEDA IŠ DYDŽIO, POLIDISPERSIŠKUMO, Z POTENCIALO, SLUOKSNIO IR PAVIRŠIAUS SUDĖTIES, VIENTISUMO, GAPMERS INKAPSULIACIJOS VEIKSMINGUMO (EE) IR LIOFILIZACIJOS SĄLYGŲ NUSTATYMO. GAPMERS NUTILDYTI KANDIDATINIUS GENUS, DALYVAUJANČIUS OP IR UL, PARENKAMI PAGAL EFEKTYVUMĄ, RODOMĄ ATITINKAMAI PELIŲ MSC (MMSC) KULTŪROJE IR UL GAUTOSE LĄSTELĖSE. TIRIAMAS GAPMER, ATRINKTO Į NPS, VEIKSMINGUMAS IN VITRO, INTRALĄSTELINĖ PREKYBA IR SAUGUMAS. OSTEOGENINIS TRANSFEKUOTO MMSC IR CITOTOKSINIO NPS POVEIKIO OP POVEIKIS IN VITRO TIRIAMAS MMSC KULTŪROSE. SIEKIANT PATIKRINTI ANTI-PROLIFERACINĮ NPS POVEIKĮ UL IŠ PACIENTO GAUTŲ AUDINIŲ GRIEŽINĖLIŲ UL KULTŪROMS, REIKĖTŲ NAUDOTI. SIEKIANT ĮVERTINTI OP NANOFORMULIACIJĄ IN VIVO, ATRINKTI GAPMERS, ĮTERPTI Į SLAPTAS NPS, FUNKCIONUOJANČIAS SU TIKSLINIU KAULŲ APTAMERU, EKSPERIMENTAS ATLIEKAMAS SU OSTEOPOROZE PELIŲ PATELĖMS (OVARIEKTOMIJA IR DEKSAMETAZONAS). PIRMA, BIOPASKIRSTYMO TYRIMAI, NAUDOJANT SKIRTINGUS RADIOIZOTOPUS, TURI BŪTI ATLIEKAMI NPS LOKALIZAVIMUI PO INTRAVENINIO GYDYMO. PRIEŠ NPS INJEKCIJĄ IR JOS METU, TAIP PAT HYSTOLOGICAL ANALIZĖS SU NUMARINTAIS GYVŪNAIS METU, TESTUOKITE NPS OSTEOGENINĮ POVEIKĮ FIZINĖMS IR OSTEOPOROZINĖMS PELĖMS, KURIAS ATLIKO GYVAS GYVŪNAS. TUO PAČIU METU IŠ PACIENTO GAUTO KSENOTRANSPLANTATO UL MODELIO UL IN VIVO POVEIKIS IN VIVO NUSTATYTAS GAPMER-NPS INJEKCIJOMS, SKIRIANT VIEN VR ARBA KARTU SU VAISTINIU PREPARATU-NPS. NPS BUVIMO NAVIKO VIETOJE LAIKAS MATUOJAMAS IŠORIŠKAI PO RADIOAKTYVIAI ŽYMĖTOSIOS NPS INJEKCIJOS Į NAVIKO VIETĄ GYVOMS PELĖMS. NPS VEIKSMINGUMAS IN VIVO NUSTATOMAS STEBINT NAVIKO AUGIMĄ NAUDOJANT DIDELĖS SKIRIAMOSIOS GEBOS ULTRAGARSINĮ VAIZDĄ. BE TO, NUMARINTUOSE GYVŪNUOSE HISTOPATOLOGINĖ NAVIKŲ IR PAGRINDINIŲ ORGANŲ ANALIZĖ TAIP PAT SUTEIKIA VEIKSMINGUMO IR TOKSIŠKUMO MATĄ. EKSPERIMENTAI IN VIVO LEISTŲ NUSTATYTI RACIONALŲ, VEIKSMINGUMO IR SAUGUMO DOZAVIMO REŽIMĄ Į VENĄ (OP) IR INTRANAVIKINĮ (UL) BŪDU. GALIAUSIAI, SIEKIANT SUKURTI DIDELĮ POTENCIALĄ PERDUOTI NANOFORMULIACIJĄ PRAMONEI AR KLINIKAI, MES SIŪLOME SUKURTI ŽMOGAUS KAULINIAM AUDINIUI SPECIFINĮ APTAMERĄ LĄSTELIŲ-SELEX. APTAMERIŲ GEBĖJIMO NUKREIPTI NPM Į ŽMOGAUS LĄSTELES KULTŪROS SRITYJE TYRIMAS. NPS, NEŠANČIŲ ŽMOGAUS APTAMERĄ, IR PASIRINKTOS GAPMERS POROS POVEIKIO KAULŲ SUSIDARYMUI HMSC, IZOLIUOTAME NUO OP PACIENTŲ, TESTAS. (Lithuanian)
4 August 2022
0 references
PODESIVO SVOJSTVO NANOSUSTAVA ČINI IH OBEĆAVAJUĆIM NANOPLATAFORM-OM ZA ISPORUKU TERAPIJSKIH SREDSTAVA GOTOVO SVIM VRSTAMA STANICA ORGANIZMA. IZAZOV OVOG PROJEKTA JE PROJEKTIRANJE, PROIZVODNJA I KARAKTERIZACIJA (IN VITRO-IN VIVO) HIBRIDNIH LIPIDNOPOLIMERNIH NANOSUSTAVA KAO NOSITELJA OLIGONUKLEOTIDA (GAPMERS) DO CILJANIH STANICA SISTEMSKE I LOKALNE UPRAVE. PREDLAŽU SE OSTEOPOROZA I MATERNICA LEYOMIOMA (OP I UL), KAO MODELI BOLESTI. STOGA NPS, NAKON INTRAVENSKE (IV) INJEKCIJE, PRENOSI OLIGONUKLEOTID U MESENHIMALNE MATIČNE STANICE (MSC) KAKO BI SE POVEĆALO STVARANJE KOSTIJU I LOKALNOM PRIMJENOM SOMATSKIH MATIČNIH STANICA (SSC) UKLJUČENIH U STVARANJE TUMORA MATERNICE. ZA PRIPREMU LIPIDNO-POLIMERNIH NPS-A ZA GAPMERS ENKAPSULACIJSKE MIKROFLUIDNE TEHNIKE PREDLAŽE SE KAO ALTERNATIVA KONVENCIONALNIM METODAMA DVOSTRUKE EMULZIJE. UREĐENA CILJANA ISPORUKA LIPIDA-PLGA-NPS I IZBJEGAVANJE OPSONIZACIJE UKLJUČUJE ODABIR LIGANDA, OPTIMIZACIJU POSTUPKA POVEZIVANJA I ANALIZU KINETIKE LIGAND DESORPCIJE. NPS KARAKTERIZACIJA SASTOJI SE OD VELIČINE, POLIDISPERZNOSTI, Z-POTENCIJALA, SLOJA I POVRŠINSKOG SASTAVA, INTEGRITETA, UČINKOVITOSTI GAPMERS ENKAPSULACIJE (EE) I POSTAVLJANJA LIOFILIZACIJSKIH STANJA. GAPMERS ZA UTIŠANJE GENA KANDIDATA UKLJUČENIH U OP I UL ODABIRU SE U SKLADU S UČINKOVITOŠĆU PRIKAZANOM U MIŠEVIMA MSC (MMSC) KULTURI, ODNOSNO U STANICAMA DOBIVENIH IZ UL-A. ISPITUJU SE DJELOTVORNOST IN VITRO, UNUTARSTANIČNA TRGOVINA I SIGURNOST ODABRANOG GAPMER-A U NPS-U. OSTEOGENSKI POTENCIJAL TRANSFECTIRANOG MMSC-A I CITOTOKSIČNOST NPS-A ZA OP TESTIRAJU SE IN VITRO U KULTURAMA MMSC-A. KAKO BI SE PROVJERIO ANTI-PROLIFERATIVNI UČINAK NPS-A ZA UL EX VIVO KULTURE TKIVA DOBIVENIH OD BOLESNIKA, KORISTIT ĆE SE. KAKO BI SE IN VIVO PROCIJENILA NANO FORMULACIJA ZA OP, ODABRANI GAPMERS ENKAPSULIRANI U STEALTH NPS FUNKCIONALIZIRAN S APTAMEROM ZA CILJNE KOSTI, EKSPERIMENT SE PROVODI NA MIŠEVIMA OSTEOPOROZE (OVARIEKTOMIJA I DEKSAMETAZON). PRVO, BIODISTRIBUCIJSKI TESTOVI U KOJIMA SE UPOTREBLJAVAJU RAZLIČITI RADIOIZOTOPI MORAJU SE PROVESTI ZA LOKALIZACIJU NOVIH PSIHOAKTIVNIH TVARI NAKON INTRAVENSKE PRIMJENE. TESTIRATI OSTEOGENSKI UČINAK NPS-A NA LAŽNIM I OSTEOPOROTIČNIM MIŠEVIMA DENSITOMETRIY ŽIVOJ ŽIVOTINJI PRIJE I TIJEKOM RAZDOBLJA INJEKCIJA NPS-A I HYSTOLOGICAL ANALIZAMA U USMRĆENIH ŽIVOTINJA. ISTODOBNO SE IN VIVO UČINAK INTRATUMORALNE INJEKCIJE RAZVIJENOG GAPMER-NPS-A ZA SAMO UL ILI U KOMBINACIJI S LIJEKOM-NPS TESTIRA NA MODELU XENOGRAFT MIŠA DOBIVENOM OD BOLESNIKA U UL-U. NPS VRIJEME ZADRŽAVANJA NA MJESTU TUMORA MJERI SE IZVANA NAKON INTRATUMORALNE INJEKCIJE RADIOAKTIVNO OBILJEŽENIH NOVIH PSIHOAKTIVNIH TVARI U ŽIVIH MIŠEVA. IN VIVO DJELOTVORNOST NPS-A OTKRIVA SE PRAĆENJEM RASTA TUMORA ULTRAZVUKOM VISOKE RAZLUČIVOSTI. OSIM TOGA, U ŽRTVOVANIM ŽIVOTINJAMA, HISTOPATOLOŠKE ANALIZE TUMORA I GLAVNIH ORGANA TAKOĐER DAJU MJERU UČINKOVITOSTI I TOKSIČNOSTI. IN VIVO POKUSI OMOGUĆILI BI UTVRĐIVANJE RACIONALNOG, DJELOTVORNOG I SIGURNOSNOG REŽIMA DOZIRANJA PREMA IV (OP) I INTRATUMORALNOM (UL) PUTU. KONAČNO, ZA RAZVOJ VISOKOG POTENCIJALA PRIJENOSA NANO-FORMULACIJE U INDUSTRIJU ILI KLINIKU PREDLAŽEMO RAZVOJ APTAMERA SPECIFIČNOG ZA LJUDSKO KOŠTANO TKIVO STANICA-SELEX. ISPITIVANJE SPOSOBNOSTI APTAMERA ZA USMJERAVANJE NOVIH PSIHOAKTIVNIH TVARI NA LJUDSKE STANICE U KULTURI. TEST UČINKA NPS-A KOJI NOSE LJUDSKI APTAMER I ODABRANI PAR GAPMERS-A NA STVARANJE KOSTIJU U HMSC IZOLIRANOM IZ OP BOLESNIKA. (Croatian)
4 August 2022
0 references
Η ΣΥΝΤΟΝΙΣΜΈΝΗ ΙΔΙΌΤΗΤΑ ΤΩΝ NANOSYSTEMS ΤΟΥΣ ΚΑΘΙΣΤΆ ΜΙΑ ΠΟΛΛΆ ΥΠΟΣΧΌΜΕΝΗ NANOPLATAFORM ΓΙΑ ΝΑ ΠΑΡΑΔΏΣΕΙ ΘΕΡΑΠΕΥΤΙΚΟΎΣ ΠΑΡΆΓΟΝΤΕΣ ΣΕ ΣΧΕΔΌΝ ΚΆΘΕ ΤΎΠΟ ΚΥΤΤΆΡΟΥ ΕΝΌΣ ΟΡΓΑΝΙΣΜΟΎ. Η ΠΡΌΚΛΗΣΗ ΑΥΤΟΎ ΤΟΥ ΈΡΓΟΥ ΕΊΝΑΙ Ο ΣΧΕΔΙΑΣΜΌΣ, Η ΚΑΤΑΣΚΕΥΉ ΚΑΙ Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΌΣ (IN VITRO-IN VIVO) ΥΒΡΙΔΙΚΏΝ ΝΑΝΟΣΥΣΤΗΜΆΤΩΝ ΛΙΠΙΔΊΩΝ-ΠΟΛΥΜΕΡΏΝ ΩΣ ΦΟΡΈΩΝ ΟΛΙΓΓΟΝΟΥΚΛΕΩΤΙΔΊΩΝ (GAPMERS) ΓΙΑ ΤΗΝ ΣΤΌΧΕΥΣΗ ΚΥΤΤΆΡΩΝ ΑΠΌ ΣΥΣΤΗΜΙΚΉ ΚΑΙ ΤΟΠΙΚΉ ΔΙΟΊΚΗΣΗ. ΠΡΟΤΕΊΝΟΝΤΑΙ ΟΣΤΕΟΠΌΡΩΣΗ ΚΑΙ LEYOMIOMA ΤΗΣ ΜΉΤΡΑΣ (OP ΚΑΙ UL), ΩΣ ΜΟΝΤΈΛΑ ΑΣΘΕΝΕΙΏΝ. ΩΣ ΕΚ ΤΟΎΤΟΥ, Η NPS, ΜΕΤΆ ΑΠΌ ΕΝΔΟΦΛΈΒΙΑ ΈΝΕΣΗ (IV), ΜΕΤΑΦΈΡΕΙ ΤΗΝ ΟΛΙΓΟΝΟΥΚΛΕΟΤΊΔΗ ΣΤΑ ΜΕΣΕΓΧΥΜΑΤΙΚΆ ΒΛΑΣΤΟΚΎΤΤΑΡΑ (MSC) ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΎΞΗΣΗ ΤΟΥ ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΟΎ ΤΩΝ ΟΣΤΏΝ ΚΑΙ ΜΕ ΤΟΠΙΚΉ ΧΟΡΉΓΗΣΗ ΣΤΑ ΣΩΜΑΤΙΚΆ ΒΛΑΣΤΟΚΎΤΤΑΡΑ (SSC) ΠΟΥ ΕΜΠΛΈΚΟΝΤΑΙ ΣΤΗΝ ΠΑΡΑΓΩΓΉ ΤΟΥ ΌΓΚΟΥ ΤΗΣ ΜΉΤΡΑΣ. ΓΙΑ ΤΗΝ ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΊΑ ΤΩΝ ΛΙΠΙΔΊΩΝ-ΠΟΛΥΜΕΡΏΝ NPS ΓΙΑ ΤΗΝ ΤΕΧΝΙΚΉ ΜΙΚΡΟΡΕΥΣΤΟΠΟΊΗΣΗΣ ΕΝΘΥΛΆΚΩΣΗΣ GAPMERS ΠΡΟΤΕΊΝΕΤΑΙ ΩΣ ΕΝΑΛΛΑΚΤΙΚΉ ΛΎΣΗ ΣΤΙΣ ΣΥΜΒΑΤΙΚΈΣ ΜΕΘΌΔΟΥΣ ΔΙΠΛΟΎ ΓΑΛΑΚΤΏΜΑΤΟΣ. ΤΟ ΔΙΑΚΟΣΜΗΜΈΝΟ ΛΙΠΊΔΙΟ-PLGA-NPS ΣΤΟΧΕΥΜΈΝΗ ΠΑΡΆΔΟΣΗ ΚΑΙ ΑΠΟΦΥΓΉ OPSONIZATION ΠΕΡΙΛΑΜΒΆΝΕΙ ΕΠΙΛΟΓΉ ΤΩΝ ΣΥΝΔΈΣΜΩΝ, ΒΕΛΤΙΣΤΟΠΟΊΗΣΗ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΊΑΣ ΣΎΝΔΕΣΗΣ ΚΑΙ LIGAND ΕΚΡΌΦΗΣΗ ΚΙΝΗΤΙΚΉ ΑΝΆΛΥΣΗ. Ο ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΌΣ NPS ΑΠΟΤΕΛΕΊΤΑΙ ΣΕ ΜΈΓΕΘΟΣ, ΠΟΛΥΔΙΑΣΠΟΡΌΤΗΤΑ, Z-ΔΥΝΑΜΙΚΌ, ΣΤΙΒΆΔΑ ΚΑΙ ΕΠΙΦΑΝΕΙΑΚΉ ΣΎΝΘΕΣΗ, ΑΚΕΡΑΙΌΤΗΤΑ, ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑ ΕΝΘΥΛΆΚΩΣΗΣ GAPMERS (EE) ΚΑΙ ΡΎΘΜΙΣΗ ΣΥΝΘΗΚΏΝ ΛΥΟΦΙΛΟΠΟΊΗΣΗΣ. ΤΑ GAPMERS ΓΙΑ ΝΑ ΦΙΜΏΣΟΥΝ ΤΑ ΥΠΟΨΉΦΙΑ ΓΟΝΊΔΙΑ ΠΟΥ ΣΥΜΜΕΤΈΧΟΥΝ ΣΕ OP ΚΑΙ UL ΕΠΙΛΈΓΟΝΤΑΙ ΣΎΜΦΩΝΑ ΜΕ ΤΗΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑ ΠΟΥ ΦΑΊΝΕΤΑΙ ΣΤΗΝ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΑ ΠΟΝΤΙΚΙΏΝ MSC (MMSC) ΚΑΙ ΣΤΑ ΚΎΤΤΑΡΑ ΠΟΥ ΠΡΟΈΡΧΟΝΤΑΙ ΑΠΌ UL, ΑΝΤΊΣΤΟΙΧΑ. ΔΟΚΙΜΆΖΟΝΤΑΙ Η ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑ IN VITRO, Η ΕΝΔΟΚΥΤΤΑΡΙΚΉ ΔΙΑΚΊΝΗΣΗ ΚΑΙ Η ΑΣΦΆΛΕΙΑ ΤΗΣ ΕΠΙΛΕΓΜΈΝΗΣ GAPMER ΕΓΚΙΒΩΤΙΣΜΈΝΗΣ ΣΤΙΣ NPS. ΤΟ IN VITRO ΟΣΤΕΟΓΌΝΟ ΔΥΝΑΜΙΚΌ ΤΩΝ ΜΕΤΑΜΟΛΥΣΜΈΝΩΝ MMSC ΚΑΙ ΤΗΣ ΚΙΤΟΤΟΞΙΚΌΤΗΤΑΣ ΤΩΝ NPS ΓΙΑ ΕΠ ΥΠΟΒΆΛΛΟΝΤΑΙ ΣΕ ΔΟΚΙΜΈΣ ΣΕ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΕΣ MMSC. ΓΙΑ ΝΑ ΕΛΕΓΧΘΕΊ Η ΑΝΤΙ-ΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΤΙΚΉ ΕΠΊΔΡΑΣΗ ΤΩΝ NPS ΓΙΑ ΤΙΣ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΕΣ UL EX VIVO ΤΩΝ ΦΈΤΕΣ ΙΣΤΏΝ ΠΟΥ ΠΡΟΈΡΧΟΝΤΑΙ ΑΠΌ ΑΣΘΕΝΕΊΣ. ΓΙΑ ΝΑ ΑΞΙΟΛΟΓΗΘΕΊ IN VIVO Η ΝΑΝΟ-ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΌΣ ΓΙΑ ΤΟ OP, ΕΠΙΛΕΓΜΈΝΑ GAPMERS ΕΓΚΙΒΩΤΙΣΜΈΝΑ ΣΕ ΜΥΣΤΙΚΉ NPS ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΚΉ ΜΕ ΈΝΑ APTAMER ΓΙΑ ΤΑ ΟΣΤΆ ΣΤΟΧΕΥΜΈΝΑ, ΤΟ ΠΕΊΡΑΜΑ ΔΙΕΞΆΓΕΤΑΙ ΣΕ ΟΣΤΕΟΠΟΡΩΤΙΚΆ ΘΗΛΥΚΆ ΠΟΝΤΊΚΙΑ (OVARIECTOMY ΚΑΙ DEXAMETHASONE). ΠΡΏΤΟΝ, ΟΙ ΔΟΚΙΜΑΣΊΕΣ ΒΙΟΔΙΑΝΟΜΉΣ ΠΟΥ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΟΎΝ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΆ ΡΑΔΙΟΪΣΌΤΟΠΑ ΠΡΈΠΕΙ ΝΑ ΔΙΕΞΆΓΟΝΤΑΙ ΓΙΑ ΤΟΠΙΚΟΠΟΊΗΣΗ NPS ΜΕΤΆ ΤΗ ΧΟΡΉΓΗΣΗ IV. ΔΟΚΙΜΆΣΤΕ ΤΗΝ ΟΣΤΕΟΓΕΝΕΤΙΚΉ ΔΡΆΣΗ ΤΩΝ NPS ΣΕ ΕΙΚΟΝΙΚΆ ΚΑΙ ΟΣΤΕΟΠΟΡΩΤΙΚΆ ΠΟΝΤΊΚΙΑ ΜΕ DENSITOMETRIY ΤΟΥ ΖΩΝΤΑΝΟΎ ΖΏΟΥ ΠΡΙΝ ΚΑΙ ΚΑΤΆ ΤΗ ΔΙΆΡΚΕΙΑ ΤΗΣ ΠΕΡΙΌΔΟΥ ΤΩΝ ΕΝΈΣΕΩΝ NPS ΚΑΙ ΜΕ ΑΝΑΛΎΣΕΙΣ HYSTOLOGICAL ΣΕ ΘΥΣΙΑΣΜΈΝΑ ΖΏΑ. ΤΑΥΤΌΧΡΟΝΑ, IN VIVO ΕΠΊΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΕΝΔΟΟΓΚΟΛΟΓΙΚΉΣ ΈΓΧΥΣΗΣ ΤΟΥ ΑΝΑΠΤΥΓΜΈΝΟΥ GAPMER-NPS ΓΙΑ UL ΜΌΝΟ Ή ΣΕ ΣΥΝΔΥΑΣΜΌ ΜΕ ΦΆΡΜΑΚΟ-NPS ΕΞΕΤΆΖΕΤΑΙ ΣΤΟ ΥΠΟΜΟΝΕΤΙΚΌ-ΠΑΡΑΓΌΜΕΝΟ ΠΡΌΤΥΠΟ ΠΟΝΤΙΚΙΏΝ XENOGRAFT ΤΟΥ UL. Ο ΧΡΌΝΟΣ ΠΑΡΑΜΟΝΉΣ NPS ΣΤΟ ΣΗΜΕΊΟ ΤΟΥ ΌΓΚΟΥ ΜΕΤΡΆΤΑΙ ΕΞΩΤΕΡΙΚΆ ΜΕΤΆ ΤΗΝ ΕΝΔΟΟΓΚΙΚΉ ΈΓΧΥΣΗ ΡΑΔΙΟΣΗΜΑΣΜΈΝΩΝ NPS ΣΕ ΖΩΝΤΑΝΟΎΣ ΠΟΝΤΙΚΟΎΣ. IN VIVO ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑ ΤΗΣ NPS ΑΝΙΧΝΕΎΕΤΑΙ ΜΕ ΤΗΝ ΠΑΡΑΚΟΛΟΎΘΗΣΗ ΤΗΣ ΑΝΆΠΤΥΞΗΣ ΤΟΥ ΌΓΚΟΥ ΜΕ ΥΠΕΡΗΧΟΓΡΆΦΗΜΑ ΥΨΗΛΉΣ ΑΝΆΛΥΣΗΣ ΑΠΕΙΚΌΝΙΣΗ. ΕΠΙΠΛΈΟΝ, ΣΕ ΘΥΣΙΑΣΜΈΝΑ ΖΏΑ, ΙΣΤΟΠΑΘΟΛΟΓΙΚΈΣ ΑΝΑΛΎΣΕΙΣ ΌΓΚΩΝ ΚΑΙ ΣΗΜΑΝΤΙΚΏΝ ΟΡΓΆΝΩΝ ΔΊΝΟΥΝ ΕΠΊΣΗΣ ΈΝΑ ΜΈΤΡΟ ΤΗΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑΣ ΚΑΙ ΤΗΣ ΤΟΞΙΚΌΤΗΤΑΣ. ΤΑ ΠΕΙΡΆΜΑΤΑ IN VIVO ΘΑ ΕΠΈΤΡΕΠΑΝ ΤΗΝ ΚΑΘΙΈΡΩΣΗ ΕΝΌΣ ΟΡΘΟΛΟΓΙΚΟΎ ΣΧΉΜΑΤΟΣ ΔΌΣΗΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΌΤΗΤΑΣ ΚΑΙ ΑΣΦΆΛΕΙΑΣ ΑΠΌ IV (OP) ΚΑΙ ΕΝΔΟΟΓΚΙΚΈΣ (UL) ΔΙΑΔΡΟΜΈΣ. ΤΈΛΟΣ, ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΆΠΤΥΞΗ ΕΝΌΣ ΥΨΗΛΟΎ ΔΥΝΑΜΙΚΟΎ ΜΕΤΑΦΟΡΆΣ ΝΑΝΟ-ΣΎΝΘΕΣΗΣ ΣΤΗ ΒΙΟΜΗΧΑΝΊΑ Ή ΤΗΝ ΚΛΙΝΙΚΉ ΠΡΟΤΕΊΝΟΥΜΕ ΤΗΝ ΑΝΆΠΤΥΞΗ ΕΝΌΣ APTAMER ΕΙΔΙΚΆ ΓΙΑ ΤΟΝ ΑΝΘΡΏΠΙΝΟ ΟΣΤΙΚΌ ΙΣΤΌ ΑΠΌ ΚΥΤΤΑΡΙΚΌ-SELEX. ΔΟΚΙΜΉ ΤΗΣ ΙΚΑΝΌΤΗΤΑΣ ΤΩΝ ΕΠΤΑΜΟΡΊΩΝ ΝΑ ΚΑΤΕΥΘΎΝΟΥΝ NPS ΣΕ ΑΝΘΡΏΠΙΝΑ ΚΎΤΤΑΡΑ ΣΕ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΑ. ΔΟΚΙΜΉ ΤΗΣ ΕΠΊΔΡΑΣΗΣ ΤΩΝ NPS ΠΟΥ ΦΈΡΟΥΝ ΤΟ ΑΝΘΡΏΠΙΝΟ APTAMER ΚΑΙ ΤΟ ΕΠΙΛΕΓΜΈΝΟ ΖΕΎΓΟΣ GAPMERS ΣΤΟΝ ΣΧΗΜΑΤΙΣΜΌ ΟΣΤΏΝ ΣΕ HMSC ΠΟΥ ΑΠΟΜΟΝΏΝΟΝΤΑΙ ΑΠΌ ΑΣΘΕΝΕΊΣ ΜΕ OP. (Greek)
4 August 2022
0 references
LADITEĽNÁ VLASTNOSŤ NANOSYSTÉMOV Z NICH ROBÍ SĽUBNÝ NANOPLATAFORM, KTORÝ DODÁVA TERAPEUTICKÉ LÁTKY PRAKTICKY KAŽDÉMU TYPU BUNKY ORGANIZMU. VÝZVOU TOHTO PROJEKTU JE NAVRHNÚŤ, VYROBIŤ A CHARAKTERIZOVAŤ (IN VITRO-IN VIVO) HYBRIDNÉ LIPIDOVO-POLYMÉRNE NANOSYSTÉMY AKO NOSIČE OLIGONUKLEOTIDOV (GAPMERS) S CIEĽOM ZAMERAŤ SA NA BUNKY SYSTÉMOVOU A MIESTNOU ADMINISTRATÍVOU. AKO MODELY OCHORENIA SA NAVRHUJÚ OSTEOPORÓZA A MATERNICOVÁ LEYOMIOMA (OP A UL). PRETO NPS PO INTRAVENÓZNEJ (IV) INJEKCII TRANSPORTUJE OLIGONUKLEOTID DO MEZENCHYMÁLNYCH KMEŇOVÝCH BUNIEK (MSC) NA ZVÝŠENIE TVORBY KOSTÍ A LOKÁLNYM PODANÍM DO SOMATICKÝCH KMEŇOVÝCH BUNIEK (SSC) ZAPOJENÝCH DO TVORBY NÁDORU MATERNICE. NA PRÍPRAVU LIPIDOVO-POLYMÉRNEHO NPS PRE GAPMERS SA NAVRHUJE TECHNIKA ZAPUZDRENIA MIKROFLUIDOV AKO ALTERNATÍVA K KONVENČNÝM METÓDAM DVOJITEJ EMULZIE. ZDOBENÉ LIPID-PLGA-NPS CIELENÉ DODANIE A VYHÝBANIE SA OPSONIZÁCII ZAHŔŇA VÝBER LIGANDOV, OPTIMALIZÁCIU POSTUPU PREPOJENIA A ANALÝZU LIGANDOVEJ DESORPČNEJ KINETIKY. CHARAKTERIZÁCIA NPS POZOSTÁVA Z VEĽKOSTI, POLYDISPERZITY, Z-POTENCIÁLU, VRSTVY A POVRCHOVÉHO ZLOŽENIA, INTEGRITY, ÚČINNOSTI ZAPUZDRENIA GAPMERS (EE) A NASTAVENIA PODMIENOK LYOFILIZÁCIE. GAPMERS NA UMLČANIE KANDIDÁTSKYCH GÉNOV ZAPOJENÝCH DO OP A UL SA VYBERAJÚ PODĽA ÚČINNOSTI ZOBRAZENEJ V KULTÚRE MYŠÍ MSC (MMSC) A V BUNKÁCH ODVODENÝCH Z UL. TESTUJE SA ÚČINNOSŤ IN VITRO, INTRACELULÁRNE OBCHODOVANIE A BEZPEČNOSŤ GAPMER VYBRANÉHO ZAPUZDRENÉHO V NPS. IN VITRO SA V KULTÚRACH MMSC TESTUJE OSTEOGÉNNY POTENCIÁL TRANSFIKOVANÉHO MMSC A CITOTOXICITA NPS PRE OP. NA KONTROLU ANTIPROLIFERATÍVNEHO ÚČINKU NPS NA KULTÚRY EX VIVO UL ZÍSKANÉ PACIENTMI BY SA POUŽILI TKANIVOVÉ PLÁTKY. NA VYHODNOTENIE NANOFORMULÁCIE PRE OP IN VIVO, VYBRANEJ GAPMERS ZAPUZDRENEJ V STEALTH NPS FUNKCIONALIZOVANEJ APTAMEROM PRE CIELENÉ KOSTI, SA EXPERIMENT VYKONÁVA U OSTEOPOROTICKÝCH MYŠÍ (OVARIEKTÓMIA A DEXAMETAZÓN). PO PRVÉ, TESTY BIODISTRIBÚCIE S POUŽITÍM RÔZNYCH RÁDIOIZOTOPOV SA MUSIA VYKONAŤ NA LOKALIZÁCIU NPS PO I.V. PODANÍ. TESTOVAŤ OSTEOGÉNNY ÚČINOK NPS U SIMULOVANÝCH A OSTEOPOROTICKÝCH MYŠÍ POMOCOU DENSITOMETRIY ŽIVÉHO ZVIERAŤA PRED A POČAS OBDOBIA INJEKCIÍ NPS A HYSTOLOGICALÝCH ANALÝZ U USMRTENÝCH ZVIERAT. SÚČASNE SA IN VIVO ÚČINOK INTRATUMORÁLNEJ INJEKCIE VYVINUTÉHO GAPMER-NPS PRE UL SAMOSTATNE ALEBO V KOMBINÁCII S LIEKOM-NPS TESTUJE NA PACIENTSKOM XENOGRAFTOVOM MYŠOM MODELI UL. DOBA REZISTENCIE NPS V MIESTE NÁDORU SA EXTERNE MERIA PO INTRATUMORÁLNEJ INJEKCII RÁDIOAKTÍVNE ZNAČENÉHO NPS U ŽIVÝCH MYŠÍ. IN VIVO ÚČINNOSŤ NPS JE DETEKOVANÁ MONITOROVANÍM RASTU NÁDORU POMOCOU ULTRAZVUKOVÉHO ZOBRAZOVANIA S VYSOKÝM ROZLÍŠENÍM. OKREM TOHO, U OBETOVANÝCH ZVIERAT, HISTOPATOLOGICKÉ ANALÝZY NÁDOROV A HLAVNÝCH ORGÁNOV POSKYTUJÚ TIEŽ MIERU ÚČINNOSTI A TOXICITY. POKUSY IN VIVO BY UMOŽNILI STANOVIŤ RACIONÁLNY REŽIM, ÚČINNOSŤ A BEZPEČNOSŤ DÁVKOVANIA PODĽA IV (OP) A INTRATUMORÁLNYCH (UL) CIEST. NAKONIEC, ABY SME VYVINULI VYSOKÝ POTENCIÁL PRENOSU NANOFORMULÁCIE DO PRIEMYSLU ALEBO KLINIKY, NAVRHUJEME VÝVOJ APTAMÉRU ŠPECIFICKÉHO PRE ĽUDSKÉ KOSTNÉ TKANIVO BUNKOU-SELEX. TESTOVANIE SCHOPNOSTI APTAMÉROV NA NASMEROVANIE NPS NA ĽUDSKÉ BUNKY V KULTÚRE. TEST ÚČINKU NPS NESÚCEHO ĽUDSKÝ APTAMER A VYBRANÝ PÁR GAPMERS NA TVORBU KOSTÍ V HMSC IZOLOVANOM OD OP PACIENTOV. (Slovak)
4 August 2022
0 references
VIRITETTÄVÄ OMINAISUUS NANOSYSTEMS TEKEE NIISTÄ LUPAAVA NANOPLATAFORM TOIMITTAA TERAPEUTTISIA AINEITA LÄHES KAIKENLAISIA SOLUN ORGANISMIN. TÄMÄN HANKKEEN HAASTEENA ON SUUNNITELLA, VALMISTAA JA LUONNEHTIA (IN VITRO-IN VIVO) HYBRIDI LIPIDI-POLYMEERISET NANOJÄRJESTELMÄT OLIGONUKLEOTIDIEN (GAPMERS) KANTAJIKSI SYSTEEMISEN JA PAIKALLISEN HALLINNON KOHDISTAMISEKSI SOLUIHIN. OSTEOPOROOSIA JA KOHDUN LEYOMIOMAA (OP JA UL) EHDOTETAAN SAIRAUDEN MALLEIKSI. SIKSI NPS SIIRTÄÄ OLIGONUKLEOTIDIN SUONENSISÄISEN (IV) INJEKTION JÄLKEEN MESENKYMAALISEN KANTASOLUIHIN (MSC) LUUNMUODOSTUKSEN LISÄÄMISEKSI JA PAIKALLISESTI KOHDUN KASVAIMEN SYNTYMISEEN OSALLISTUVILLE SOMAATTISILLE KANTASOLUILLE (SSC). LIPIDIPOLYMEERISEN NPS:N VALMISTAMISTA GAPMERS-KAPSELOINTIMIKROFLUIDIIKKATEKNIIKKAA VARTEN EHDOTETAAN VAIHTOEHTONA PERINTEISILLE KAKSOISEMULSIOMENETELMILLE. KORISTELTU LIPIDI-PLGA-NPS KOHDENNETTU TOIMITUS- JA OPSONISAATION VÄLTTÄMINEN SISÄLTÄÄ LIGANDIEN VALINNAN, SIDOSMENETTELYN OPTIMOINNIN JA LIGANDIN DESORPTIOKINETIIKAN ANALYYSIN. NPS-KARAKTERISOINTI KOOSTUU KOOSTA, POLYDISPERSITEETISTÄ, Z-POTENTIAALISTA, KERROS- JA PINTAKOOSTUMUKSESTA, EHEYDESTÄ, GAPMERS-KAPSELITEHOSTA (EE) JA KYLMÄKUIVAUSOLOSUHTEIDEN ASETTAMISESTA. GAPMERS VAIENTAA OP:SSA JA UL:SSA MUKANA OLEVAT EHDOKASGEENIT VALITAAN TEHON MUKAAN, JOKA ON OSOITETTU HIIRILLÄ MSC-VILJELYSSÄ (MMSC) JA UL-JOHDETUISSA SOLUISSA. NPS:SSÄ KAPSELOIDUN GAPMERIN TEHO, SOLUNSISÄINEN LAITON KAUPPA JA TURVALLISUUS TESTATAAN. INTERFEKTOIDUN MMSC:N IN VITRO OSTEOGEENISTA POTENTIAALIA JA OP:N NPS:N SITOTOKSISUUTTA TESTATAAN MMSC-VILJELMISSÄ. NPS:N ANTIPROLIFERATIIVISEN VAIKUTUKSEN TARKISTAMISEKSI POTILASPERÄISTEN KUDOSVIIPALEIDEN UL EX VIVO -VILJELMISSÄ KÄYTETTÄISIIN. JOTTA VOIDAAN ARVIOIDA IN VIVO TOIMENPIDEOHJELMAN NANOFORMULAATIO, VALITTU GAPMERS KAPSELOITU VARKAIN NPS:ÄÄN, JOKA ON TOIMINNALLINEN APTAMEERILLA LUUN KOHTEENA OLEVALLE LUULLE, KOE SUORITETAAN OSTEOPOROOTTISILLA NAARASHIIRILLÄ (MUUNINEKTOMIA JA DEKSAMETASONI). ENSINNÄKIN ERI RADIOISOTOOPPIA KÄYTTÄVIÄ BIODIVERSITEETTITESTEJÄ ON TEHTÄVÄ NPS:N LOKALISOINTIA VARTEN LASKIMONSISÄISEN ANNON JÄLKEEN. TESTATAAN NPS:N OSTEOGEENINEN VAIKUTUS LUME- JA OSTEOPOROOTTISIIN HIIRIIN ELÄVÄN ELÄIMEN DENSITOMETRIY:N AVULLA ENNEN NPS-INJEKTIOTA JA SEN AIKANA SEKÄ HYSTOLOGICAL-ANALYYSILLÄ LOPETETUILLA ELÄIMILLÄ. SAMANAIKAISESTI IN VIVO-INJEKTION IN VIVO INJEKTOINNIN KEHITTYNYT GAPMER-NPS UL YKSIN TAI YHDESSÄ LÄÄKE-NPS TESTATAAN POTILAASTA PERÄISIN OLEVA KSENOGRAFT HIIRI MALLI UL. NPS VIIPYMÄAIKA KASVAINKOHDASSA MITATAAN ULKOISESTI SEN JÄLKEEN, KUN KASVAIMENSISÄINEN INJEKTOINTI RADIOAKTIIVISESTI MERKITTY NPS ELÄVILLÄ HIIRILLÄ. NPS: N TEHO IN VIVO HAVAITAAN SEURAAMALLA KASVAIMEN KASVUA KORKEAN RESOLUUTION ULTRAÄÄNIKUVAUKSELLA. LISÄKSI TEURASTETUILLA ELÄIMILLÄ KASVAINTEN JA TÄRKEIMPIEN ELINTEN HISTOPATOLOGISET ANALYYSIT ANTAVAT MYÖS TEHOKKUUDEN JA TOKSISUUDEN MITTAUKSEN. IN VIVO -KOKEIDEN AVULLA VOITAISIIN VAHVISTAA JÄRKIPERÄINEN, TEHOKAS JA TURVALLINEN ANNOSTUS LASKIMOON (OP) JA TUUMORINSISÄISIIN (UL) SUUNTIIN. LOPUKSI, KEHITTÄÄ SUURI POTENTIAALI SIIRTÄÄ NANO-FORMULAATIO TEOLLISUUDELLE TAI KLINIKALLE EHDOTAMME APTAMEERIN SPESIFINEN IHMISEN LUUKUDOKSEN SOLU-SELEX. APTAMERIEN KYVYN TESTAAMINEN NPS:N OHJAAMISEKSI IHMISEN SOLUIHIN VILJELMÄSSÄ. IHMISEN APTAMEERIA KANTAVAN NPS:N JA VALITUN GAPMERS-PARIN VAIKUTUS LUUN MUODOSTUMISEEN OP-POTILAISTA ERISTETYSSÄ HMSC-TUTKIMUKSESSA. (Finnish)
4 August 2022
0 references
DOSTROJONA WŁAŚCIWOŚĆ NANOSYSTEMS SPRAWIA, ŻE SĄ OBIECUJĄCĄ NANOPLATAFORM, KTÓRA DOSTARCZA ŚRODKI TERAPEUTYCZNE DO PRAKTYCZNIE KAŻDEGO RODZAJU KOMÓREK ORGANIZMU. WYZWANIEM TEGO PROJEKTU JEST ZAPROJEKTOWANIE, WYPRODUKOWANIE I SCHARAKTERYZOWANIE HYBRYDOWYCH NANOSYSTEMÓW LIPIDOWO-POLIMERYCZNYCH (IN VITRO-IN VIVO) JAKO NOŚNIKÓW OLIGONUKLEOTYDÓW (GAPMERS) W CELU UKIERUNKOWANIA KOMÓREK ZA POMOCĄ ADMINISTRACJI OGÓLNOUSTROJOWEJ I LOKALNEJ. PROPONUJE SIĘ OSTEOPOROZĘ I LEYOMIOMA MACICY (OP I UL), JAKO MODELE CHORÓB. DLATEGO NPS, PO WSTRZYKNIĘCIU DOŻYLNYM (IV), TRANSPORT OLIGONUKLEOTYDU DO MESENCHYMALNYCH KOMÓREK MACIERZYSTYCH (MSC) W CELU ZWIĘKSZENIA TWORZENIA KOŚCI I PRZEZ MIEJSCOWE PODAWANIE DO SOMATYCZNYCH KOMÓREK MACIERZYSTYCH (SSC) BIORĄCYCH UDZIAŁ W GENEROWANIU GUZA MACICY. JAKO ALTERNATYWĘ DLA KONWENCJONALNYCH METOD PODWÓJNEJ EMULSJI PROPONUJE SIĘ PRZYGOTOWANIE KWASU TŁUSZCZOWO-POLIMEROWEGO NPS DO STOSOWANIA TECHNIK MIKROFLUIDOWYCH W KAPSUŁKACH GAPMERS. ZDOBIONE LIPIDY-PLGA-NPS UKIERUNKOWANE DOSTARCZANIE I UNIKANIE OPSONIZACJI OBEJMUJE WYBÓR LIGANDÓW, OPTYMALIZACJĘ PROCEDURY ŁĄCZENIA I ANALIZĘ KINETYKI DESORPCJI LIGANDOWEJ. CHARAKTERYSTYKA NPS SKŁADA SIĘ Z WIELKOŚCI, POLIDYSPERSYCZNOŚCI, POTENCJAŁU Z, SKŁADU WARSTWY I POWIERZCHNI, INTEGRALNOŚCI, SKUTECZNOŚCI KAPSUŁKOWANIA GAPMERS (EE) I USTAWIENIA WARUNKÓW LIOFILIZACJI. GAPMERS W CELU WYCISZENIA GENÓW KANDYDUJĄCYCH UCZESTNICZĄCYCH W OP I UL SĄ WYBIERANE ZGODNIE Z WYDAJNOŚCIĄ POKAZANĄ ODPOWIEDNIO W HODOWLI MYSZY MSC (MMSC) I W KOMÓRKACH POCHODNYCH UL. BADA SIĘ SKUTECZNOŚĆ IN VITRO, HANDEL WEWNĄTRZKOMÓRKOWY I BEZPIECZEŃSTWO WYBRANYCH KAPSUŁEK GAPMER W NPS. IN VITRO POTENCJAŁ OSTEOGENNY TRANSFEKCJI MMSC I CYTOTOKSYCZNOŚĆ NPS DLA PO SĄ BADANE W KULTURACH MMSC. W CELU SPRAWDZENIA DZIAŁANIA ANTYPROLIFERACYJNEGO NPS DLA KULTUR UL EX VIVO W PLASTERKACH TKANEK POCHODZĄCYCH OD PACJENTÓW. W CELU OCENY IN VIVO NANOFORMULACJI DLA OP, WYBRANE GAPMERS ZAMKNIĘTE W UKRYCIU NPS FUNKCJONALIZOWANY Z APTAMEREM DLA KOŚCI DOCELOWYCH, EKSPERYMENT JEST PRZEPROWADZANY NA OSTEOPOROTYCZNYCH SAMIC MYSZY (OWARIEKTOMIA I DEKSAMETAZON). PO PIERWSZE, NALEŻY PRZEPROWADZIĆ TESTY BIODYSTRYBUCJI PRZY UŻYCIU RÓŻNYCH IZOTOPÓW PROMIENIOTWÓRCZYCH DLA LOKALIZACJI NPS PO PODANIU DOŻYLNYM. BADAĆ DZIAŁANIE OSTEOGENNE NPS U MYSZY POZOROWANYCH I OSTEOPOROTYCZNYCH PRZEZ DENSITOMETRIY ŻYWEGO ZWIERZĘCIA PRZED I W OKRESIE WSTRZYKNIĘĆ NPS ORAZ ANALIZ HYSTOLOGICAL U ZWIERZĄT PODDANYCH UŚMIERCENIU. JEDNOCZEŚNIE IN VIVO DZIAŁANIE DOTUMORALNEGO WSTRZYKNIĘCIA OPRACOWANEGO GAPMER-NPS W MONOTERAPII LUB W SKOJARZENIU Z LEKIEM-NPS JEST TESTOWANE W MODELU MYSZKI KSENOGRAFT POCHODNYM PACJENTA. CZAS PRZEBYWANIA NPS W MIEJSCU NOWOTWORU JEST ZEWNĘTRZNIE MIERZONY PO WEWNĄTRZNOWOTWOROWYM WSTRZYKNIĘCIU ZNAKOWANEGO RADIOIZOTOPEM NPS U ŻYWYCH MYSZY. SKUTECZNOŚĆ IN VIVO NPS JEST WYKRYWANA PRZEZ MONITOROWANIE WZROSTU GUZA ZA POMOCĄ OBRAZOWANIA ULTRADŹWIĘKOWEGO O WYSOKIEJ ROZDZIELCZOŚCI. PONADTO, W UŚMIERCONYCH ZWIERZĄT, ANALIZY HISTOPATOLOGICZNE NOWOTWORÓW I GŁÓWNYCH NARZĄDÓW DAJĄ RÓWNIEŻ MIARĘ SKUTECZNOŚCI I TOKSYCZNOŚCI. DOŚWIADCZENIA IN VIVO POZWOLIŁYBY NA USTALENIE RACJONALNEGO, SKUTECZNOŚCI I BEZPIECZEŃSTWA DAWKOWANIA DROGĄ IV (OP) I DOTUMORALNĄ (UL). WRESZCIE, W CELU OPRACOWANIA WYSOKIEGO POTENCJAŁU TRANSFERU NANO-FORMULACJI DO PRZEMYSŁU LUB KLINIKI PROPONUJEMY OPRACOWANIE APTAMERU SPECYFICZNEGO DLA LUDZKIEJ TKANKI KOSTNEJ PRZEZ KOMÓRKĘ SELEXA. BADANIE ZDOLNOŚCI APTAMERÓW DO KIEROWANIA NPS DO KOMÓREK LUDZKICH W KULTURZE. BADANIE WPŁYWU NPS PRZENOSZĄCEGO LUDZKI APTAMER I WYSELEKCJONOWANĄ PARĘ GAPMERS NA TWORZENIE KOŚCI W HMSC IZOLOWANYM OD PACJENTÓW Z PO. (Polish)
4 August 2022
0 references
A NANOSYSTEMS HANGOLHATÓ TULAJDONSÁGA ÍGÉRETES NANOPLATAFORM-OT TESZ LEHETŐVÉ, HOGY TERÁPIÁS SZEREKET SZÁLLÍTSON A SZERVEZET SZINTE MINDEN SEJTJÉNEK. A PROJEKT KIHÍVÁSA AZ (IN VITRO-IN VIVO) HIBRID LIPIDPOLIMER NANORENDSZEREK TERVEZÉSE, GYÁRTÁSA ÉS JELLEMZÉSE, MINT AZ OLIGONUKLEOTIDOK HORDOZÓI (GAPMERS) A CÉLSEJTEK SZISZTÉMÁS ÉS HELYI BEADÁSA RÉVÉN. AZ OSTEOPOROSIST ÉS A MÉH LEYOMIOMA-T (OP ÉS UL) BETEGSÉGMODELLKÉNT JAVASOLJÁK. EZÉRT AZ NPS INTRAVÉNÁS (IV.) INJEKCIÓ BEADÁSA UTÁN AZ OLIGONUKLEOTIDOT A CSONTKÉPZŐDÉS FOKOZÁSA ÉRDEKÉBEN A MESENCHYMÁLIS ŐSSEJTEKBE (MSC) ÉS A MÉHDAGANAT KIALAKULÁSÁBAN RÉSZT VEVŐ SZOMATIKUS ŐSSEJTEKBE (SSC) HELYI ALKALMAZÁSSAL SZÁLLÍTJA. A HAGYOMÁNYOS KETTŐS EMULZIÓS MÓDSZEREK ALTERNATÍVÁJAKÉNT JAVASOLT A LIPIDPOLIMER NPS GAPMERS-BE TÖRTÉNŐ BEÁGYAZÁSA MIKROFLUIDOK TECHNIKÁJÁNAK ELKÉSZÍTÉSE. A DÍSZÍTETT LIPID-PLGA-NPS CÉLZOTT SZÁLLÍTÁS ÉS OPSZONIZÁCIÓ ELKERÜLÉSE MAGÁBAN FOGLALJA A LIGANDOK KIVÁLASZTÁSÁT, A KAPCSOLATI ELJÁRÁS OPTIMALIZÁLÁSÁT ÉS A LIGAND DESZORPCIÓS KINETIKAI ANALÍZIST. AZ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOK JELLEMZÉSE A MÉRETBEN, A POLIDISZPERZITÁSBAN, A Z-POTENCIÁLBAN, A RÉTEG- ÉS FELÜLETÖSSZETÉTELBEN, AZ INTEGRITÁSBAN, A GAPMERS KAPSZULÁZÁS HATÁSOSSÁGÁBAN (EE) ÉS A LIOFILIZÁCIÓS FELTÉTELEK BEÁLLÍTÁSÁBAN ÁLL. AZ OP-BAN ÉS AZ UL-BAN RÉSZT VEVŐ JELÖLT GÉNEKET AZ MSC (MMSC) TENYÉSZETBEN, ILLETVE AZ UL-BÓL SZÁRMAZÓ SEJTEKBEN MUTATOTT HATÉKONYSÁG ALAPJÁN VÁLASZTJÁK KI. AZ NPS-BE BEVETT GAPMER IN VITRO HATÁSOSSÁGÁT, SEJTEN BELÜLI KERESKEDELMÉT ÉS BIZTONSÁGOSSÁGÁT TESZTELIK. A TRANSZFEKTÁLT MMSC IN VITRO OSTEOGEN POTENCIÁLJÁT ÉS AZ NPS OP-RA VONATKOZÓ CITOTOXICITÁSÁT MMSC-TENYÉSZETEKBEN VIZSGÁLJÁK. AZ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOK ANTIPROLIFERATÍV HATÁSÁNAK ELLENŐRZÉSÉRE A BETEGBŐL SZÁRMAZÓ SZÖVETSZELETEK UL EX VIVO TENYÉSZETEIRE KERÜL SOR. AZ OP NANOFORMULÁCIÓJÁNAK IN VIVO ÉRTÉKELÉSÉHEZ KIVÁLASZTOTT GAPMERS-EK, AMELYEK CSONT CÉLZOTT APTAMERREL ELLÁTOTT LOPAKODÓ NPS-BEN VANNAK BEÁGYAZVA, A KÍSÉRLETET OSTEOPOROTIKUS NŐI EGEREKEN (OVARIECTOMIA ÉS DEXAMETAZON) VÉGZIK. ELŐSZÖR IS AZ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOK LOKALIZÁCIÓJÁHOZ KÜLÖNBÖZŐ RADIOIZOTÓPOKAT ALKALMAZÓ BIOELOSZTÁSI VIZSGÁLATOKAT KELL VÉGEZNI AZ IV. BEADÁST KÖVETŐEN. AZ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOK OSTEOGEN HATÁSÁNAK VIZSGÁLATA ÁL- ÉS CSONTRITKULÁSOS EGEREKBEN AZ ÉLŐ ÁLLAT DENSITOMETRIY-JÁN KERESZTÜL AZ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOK INJEKCIÓZÁSA ELŐTT ÉS ALATT, VALAMINT AZ ELPUSZTÍTOTT ÁLLATOK HYSTOLOGICAL ANALÍZISE. EZZEL EGYIDEJŰLEG A KIFEJLESZTETT GAPMER-NPS INTRATUMORÁLIS INJEKCIÓJÁNAK IN VIVO HATÁSÁT ÖNMAGÁBAN VAGY GYÓGYSZER-NPS KOMBINÁCIÓBAN TESZTELIK AZ UL BETEGBŐL SZÁRMAZÓ XENOGRAFT EGÉR MODELLJÉBEN. AZ NPS TARTÓZKODÁSI IDEJÉT A TUMOR HELYÉN KÜLSŐLEG MÉRIK A RADIOIZOTÓPPAL JELÖLT NPS ÉLŐ EGEREKBE TÖRTÉNŐ INTRATUMORÁLIS INJEKCIÓJA UTÁN. AZ NPS IN VIVO HATÁSOSSÁGÁT A TUMOR NÖVEKEDÉSÉNEK NAGY FELBONTÁSÚ ULTRAHANGOS KÉPALKOTÁSSAL TÖRTÉNŐ MEGFIGYELÉSÉVEL LEHET KIMUTATNI. EZEN TÚLMENŐEN AZ FELÁLDOZOTT ÁLLATOKNÁL A TUMOROK ÉS A FŐBB SZERVEK KÓRSZÖVETTANI ELEMZÉSE SZINTÉN MÉRI A HATÉKONYSÁGOT ÉS A TOXICITÁST. AZ IN VIVO KÍSÉRLETEK LEHETŐVÉ TENNÉK, HOGY IV (OP) ÉS INTRATUMORALIS (UL) MÓDOKON ÉSSZERŰ, HATÁSOSSÁGI ÉS BIZTONSÁGOSSÁGI ADAGOLÁSI RENDET ÁLLAPÍTSANAK MEG. VÉGÜL, HOGY KIFEJLESSZÜNK EGY NAGY POTENCIÁLIS TRANSZFER NANO-FORMULÁCIÓT AZ IPARBA VAGY A KLINIKÁRA, JAVASOLJUK EGY, AZ EMBERI CSONTSZÖVETRE JELLEMZŐ APTAMER KIFEJLESZTÉSÉT A SEJT-SELEX SEGÍTSÉGÉVEL. AZ APTAMEREK AZON KÉPESSÉGÉNEK VIZSGÁLATA, HOGY AZ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOKAT A TENYÉSZETBEN LÉVŐ EMBERI SEJTEKRE IRÁNYÍTSÁK. A HUMÁN APTAMERT ÉS A KIVÁLASZTOTT GAPMERS-T HORDOZÓ ÚJ PSZICHOAKTÍV ANYAGOK CSONTKÉPZŐDÉSRE GYAKOROLT HATÁSÁNAK VIZSGÁLATA OP-BETEGEKBŐL IZOLÁLT HMSC-BEN. (Hungarian)
4 August 2022
0 references
LADITELNÁ VLASTNOST NANOSYSTEMS Z NICH DĚLÁ SLIBNÝ NANOPLATAFORM DODÁVAT TERAPEUTICKÉ LÁTKY PRAKTICKY KAŽDÉMU TYPU BUŇKY ORGANISMU. ÚKOLEM TOHOTO PROJEKTU JE NAVRHNOUT, VYRÁBĚT A CHARAKTERIZOVAT (IN VITRO-IN VIVO) HYBRIDNÍ NANOSYSTÉMY LIPID-POLYMERŮ JAKO NOSIČE OLIGONUKLEOTIDŮ (GAPMERS) PRO CÍLENÉ BUŇKY SYSTÉMOVOU A MÍSTNÍ SPRÁVOU. NAVRHUJE SE OSTEOPORÓZA A DĚLOŽNÍ LEYOMIOMA (OP A UL), JAKO MODELY ONEMOCNĚNÍ. PROTO NPS PO INTRAVENÓZNÍ INJEKCI (IV) TRANSPORTUJE OLIGONUKLEOTID DO MESENCHYMÁLNÍCH KMENOVÝCH BUNĚK (MSC) KE ZVÝŠENÍ TVORBY KOSTÍ A LOKÁLNÍM PODÁNÍM DO SOMATICKÝCH KMENOVÝCH BUNĚK (SSC) ZAPOJENÝCH DO GENEROVÁNÍ DĚLOŽNÍHO NÁDORU. PRO PŘÍPRAVU LIPID-POLYMERNÍCH NPS PRO TECHNIKU ZAPOUZDŘENÍ MIKROFLUIDIKY GAPMERS SE NAVRHUJE ALTERNATIVA KONVENČNÍCH METOD DVOJITÉ EMULZE. ZDOBENÉ LIPIDOVÉ-PLGA-NPS CÍLENÉ DODÁVKY A VYHÝBÁNÍ SE OPSONIZACI ZAHRNUJE VÝBĚR LIGANDŮ, OPTIMALIZACI POSTUPU SPOJENÍ A ANALÝZU DESORPČNÍ KINETIKY LIGANDU. CHARAKTERIZACE NPS SE SKLÁDÁ Z VELIKOSTI, POLYDISPERZITY, Z-POTENCIÁLU, SLOŽENÍ VRSTVY A POVRCHU, INTEGRITY, GAPMERS ZAPOUZDŘENÍ ÚČINNOSTI (EE) A NASTAVENÍ PODMÍNEK LYOFILIZACE. GAPMERS K UMLČENÍ POTENCIÁLNÍCH GENŮ ZAPOJENÝCH DO OP A UL JSOU VYBÍRÁNY PODLE ÚČINNOSTI UVEDENÉ V KULTUŘE MSC (MMSC) MYŠÍ A V BUŇKÁCH ODVOZENÝCH Z UL. TESTUJE SE ÚČINNOST IN VITRO, INTRACELULÁRNÍ OBCHODOVÁNÍ A BEZPEČNOST GAPMER VYBRANÉHO ZAPOUZDŘENÉHO V NPS. IN VITRO OSTEOGENNÍ POTENCIÁL TRANSFEKOVANÉHO MMSC A CITOTOXICITY NPS PRO OP SE TESTUJÍ V KULTURÁCH MMSC. KE KONTROLE ANTIPROLIFERATIVNÍHO ÚČINKU NPS PRO KULTURY UL EX VIVO U PLÁTKŮ TKÁNĚ ODVOZENÝCH Z PACIENTA BY SE POUŽILY. K VYHODNOCENÍ NANOFORMULACÍ PRO OP IN VIVO, VYBRANÝCH GAPMERS ZAPOUZDŘENÝCH V STEALTH NPS FUNKČNÍM S APTAMEREM PRO CÍLOVOU KOST, SE EXPERIMENT PROVÁDÍ U OSTEOPOROTICKÝCH SAMIC MYŠÍ (OVARIEKTOMIE A DEXAMETHASON). ZA PRVÉ, BIODISTRIBUČNÍ ZKOUŠKY POUŽÍVAJÍCÍ RŮZNÉ RADIOIZOTOPY MUSÍ BÝT PROVEDENY PRO LOKALIZACI NPS PO I.V. PODÁNÍ. OTESTUJTE OSTEOGENNÍ ÚČINEK NPS U PŘEDSTÍRANÝCH A OSTEOPOROTICKÝCH MYŠÍ DENSITOMETRIY ŽIVÉHO ZVÍŘETE PŘED A V PRŮBĚHU INJEKCÍ NPS A HYSTOLOGICKÝCH ANALÝZ U UTRACENÝCH ZVÍŘAT. SOUČASNĚ JE IN VIVO ÚČINEK INTRATUMORÁLNÍ INJEKCE VYVINUTÉHO GAPMER-NPS PRO UL SAMOTNÝ NEBO V KOMBINACI S LÉKEM NPS TESTOVÁN NA PACIENTOVĚ MODELU XENOGRAFTU UL. DOBA POBYTU NPS V MÍSTĚ NÁDORU JE EXTERNĚ MĚŘENA PO INTRATUMORÁLNÍ INJEKCI RADIOAKTIVNĚ ZNAČENÉ NPS U ŽIVÝCH MYŠÍ. IN VIVO ÚČINNOST NPS JE DETEKOVÁNA SLEDOVÁNÍM RŮSTU NÁDORU POMOCÍ ULTRAZVUKOVÉHO ZOBRAZOVÁNÍ S VYSOKÝM ROZLIŠENÍM. KROMĚ TOHO, U OBĚTÍ ZVÍŘAT, HISTOPATOLOGICKÉ ANALÝZY NÁDORŮ A HLAVNÍCH ORGÁNŮ TAKÉ MĚŘÍ ÚČINNOST A TOXICITU. POKUSY IN VIVO BY UMOŽNILY STANOVIT RACIONÁLNÍ, ÚČINNÝ A BEZPEČNÝ DÁVKOVACÍ REŽIM POMOCÍ IV (OP) A INTRATUMORÁLNÍCH (UL) CEST. A KONEČNĚ, ABYCHOM VYVINULI VYSOKÝ POTENCIÁL PŘENOSU NANOFORMULACÍ DO PRŮMYSLU NEBO KLINIKY, NAVRHUJEME VÝVOJ APTAMERU SPECIFICKÉHO PRO LIDSKOU KOSTNÍ TKÁŇ BUŇKOU-SELEX. TESTOVÁNÍ SCHOPNOSTI APTAMERŮ SMĚROVAT NPS NA LIDSKÉ BUŇKY V KULTUŘE. TEST ÚČINKU NPS NESOUCÍHO LIDSKÝ APTAMER A VYBRANÝ PÁR GAPMERS NA TVORBU KOSTÍ U HMSC IZOLOVANÝCH Z OP PACIENTŮ. (Czech)
4 August 2022
0 references
NANOSYSTEMS PIELĀGOJAMĀ ĪPAŠĪBA PADARA TOS PAR DAUDZSOLOŠU NANOPLATAFORM, KAS NODROŠINA TERAPEITISKUS LĪDZEKĻUS PRAKTISKI VISIEM ORGANISMA ŠŪNU VEIDIEM. ŠĀ PROJEKTA UZDEVUMS IR IZSTRĀDĀT, RAŽOT UN RAKSTUROT (IN VITRO-IN VIVO) HIBRĪDU LIPĪDU-POLIMĒRU NANOSYSTEMS KĀ OLIGONUKLEOTĪDU NESĒJUS (GAPMERS), LAI MĒRĶĒTU ŠŪNAS AR SISTĒMISKAS UN VIETĒJAS PĀRVALDES PALĪDZĪBU. TIEK IEROSINĀTA OSTEOPOROZE UN DZEMDES LEYOMIOMA (OP UN UL) KĀ SLIMĪBAS MODEĻI. TĀDĒĻ NPS PĒC INTRAVENOZAS (IV) INJEKCIJAS TRANSPORTĒ OLIGONUKLEOTĪDU UZ MESENHIMĀLAJĀM CILMES ŠŪNĀM (MSC), LAI PALIELINĀTU KAULU VEIDOŠANOS UN LOKĀLI IEVADĪTU SOMATISKAJĀS CILMES ŠŪNĀS (SSC), KAS IESAISTĪTAS DZEMDES AUDZĒJA VEIDOŠANĀ. LAI SAGATAVOTU LIPĪDU POLIMĒRU NPS GAPMERS IEKAPSULĒŠANAS MIKROFLUIDĪDU METODEI, TIEK PIEDĀVĀTA ALTERNATĪVA TRADICIONĀLAJĀM DUBULTĀS EMULSIJAS METODĒM. DEKORĒTĀ LIPĪDU-PLGA-NPS MĒRĶTIECĪGĀ PIEGĀDE UN IZVAIRĪŠANĀS NO OPSONIZĀCIJAS IETVER LIGANDU IZVĒLI, SASAISTES PROCEDŪRAS OPTIMIZĀCIJU UN LIGANDU DESORBCIJAS KINĒTIKAS ANALĪZI. NPS RAKSTURO LIELUMU, POLIDISPERSIJU, Z POTENCIĀLU, SLĀŅA UN VIRSMAS SASTĀVU, INTEGRITĀTI, GAPMERS IEKAPSULĒŠANAS EFEKTIVITĀTI (EE) UN LIOFILIZĀCIJAS APSTĀKĻU NOTEIKŠANU. GAPMERS, LAI APKLUSINĀTU KANDIDĀTGĒNUS, KAS IESAISTĪTI OP UN UL, TIEK ATLASĪTI ATBILSTOŠI EFEKTIVITĀTEI, KAS PARĀDĪTA ATTIECĪGI PELĒM MSC (MMSC) KULTŪRĀ UN UL ATVASINĀTAJĀS ŠŪNĀS. IN VITRO PĀRBAUDA NPS IEKAPSULĒTĀ GAPMER EFEKTIVITĀTI, INTRACELULĀRO TIRDZNIECĪBU UN DROŠUMU. IN VITRO MMSC TRANSFECTED MMSC UN NPS CITOTOKSICITĀTI OP TESTĒ MMSC KULTŪRĀS. LAI PĀRBAUDĪTU NPS ANTIPROLIFERATĪVO IETEKMI UZ UL EX VIVO KULTŪRĀM NO PACIENTA ATVASINĀTU AUDU ŠĶĒLĒS, IZMANTO. LAI NOVĒRTĒTU IN VIVO OP NANOFORMULĀCIJU, ATLASĪTUS GAPMERS, KAS IEKAPSULĒTI STEALTĀ NPS, KAS DARBOJAS AR APTAMERU MĒRĶA KAULU NOTEIKŠANAI, EKSPERIMENTS TIEK VEIKTS AR OSTEOPOROTISKĀM PEĻU MĀTĪTĒM (OVARIEKTOMIJU UN DEKSAMETAZONU). PIRMKĀRT, PĒC I.V. IEVADĪŠANAS JĀVEIC NPS LOKALIZĀCIJAS BIOIZKLIEDES TESTI, IZMANTOJOT DAŽĀDUS RADIOIZOTOPUS. PIRMS NPS INJEKCIJAS UN HYSTOLOGICAL ANALĪZĒM NONĀVĒTIEM DZĪVNIEKIEM TESTĒ NPS OSTEOGĒNISKO IEDARBĪBU UZ IMITĀCIJĀM UN OSTEOPOROTISKAJĀM PELĒM, KO VEIC DZĪVA DZĪVNIEKA DENSITOMETRIY. VIENLAIKUS IN VIVO IEDARBĪBA, KO RADA IZSTRĀDĀTĀ GAPMER-NPS INTRATUMORĀLA INJEKCIJA UL VAI KOMBINĀCIJĀ AR ZĀLĒM- NPS, TIEK PĀRBAUDĪTA NO PACIENTA IEGŪTAM KSENOTRANSPLANTĀTA PELES MODELIM UL. NPS UZTURĒŠANĀS LAIKS AUDZĒJA VIETĀ ĀRĒJI TIEK MĒRĪTS PĒC RADIOAKTĪVI IEZĪMĒTAS NPS INTRATUMORĀLAS INJEKCIJAS DZĪVĀM PELĒM. NPS EFEKTIVITĀTI IN VIVO NOSAKA, UZRAUGOT AUDZĒJA AUGŠANU AR AUGSTAS IZŠĶIRTSPĒJAS ULTRASKAŅAS ATTĒLVEIDOŠANU. TURKLĀT NONĀVĒTIEM DZĪVNIEKIEM AUDZĒJU UN GALVENO ORGĀNU HISTOPATOLOĢISKĀS ANALĪZES SNIEDZ ARĪ EFEKTIVITĀTES UN TOKSICITĀTES MĒRU. IN VIVO EKSPERIMENTI ĻAUTU NOTEIKT RACIONĀLU, IEDARBĪGUMA UN DROŠĪBAS DOZĒŠANAS SHĒMU, IZMANTOJOT I.V. (OP) UN INTRATUMORĀLOS (UL) CEĻUS. VISBEIDZOT, LAI ATTĪSTĪTU AUGSTU IESPĒJAMO NANO-VEIDOJUMU PĀRNESI UZ NOZARI VAI KLĪNIKU, MĒS IEROSINĀM IZSTRĀDĀT APTAMERU, KAS RAKSTURĪGS CILVĒKA KAULU AUDIEM AR ŠŪNU-SELEX. TESTĒŠANA PAR APTAMERU SPĒJU VIRZĪT NPS UZ CILVĒKA ŠŪNĀM KULTŪRĀ. NPS, KAS NĒSĀ CILVĒKA APTAMERU, UN IZVĒLĒTĀ GAPMERS PĀRA IETEKMES PĀRBAUDE UZ KAULU VEIDOŠANOS HMSC, KAS IZOLĒTA NO OP PACIENTIEM. (Latvian)
4 August 2022
0 references
DÉANANN MAOIN THUNEABLE NANACHÓRAS IAD NANOPLATAFORM TUAR DÓCHAIS INTI CHUN GNÍOMHAIRÍ TEIRIPEACHA A SHEACHADADH CHUIG BEAGNACH GACH CINEÁL CILLE D’ORGÁNACH. IS É DÚSHLÁN AN TIONSCADAIL SEO NÁ NANACHÓRAIS LIPID-PHOLAIMÉIREACHA HIBRIDEACHA (IN VITRO-IN VIVO) A DHEARADH, A MHONARÚ AGUS A THRÉITHRIÚ MAR IOMPRÓIRÍ OLAGONUCLEOTIDES (GAPMERS) CHUN DÍRIÚ AR CHEALLA TRÍ RIARACHÁN SISTÉAMACH AGUS ÁITIÚIL. OISTÉAPÓRÓIS AGUS ÚTARACH LEYOMIOMA (OP AGUS UL), MAR MHÚNLAÍ GALAR, ATÁ BEARTAITHE. DÁ BHRÍ SIN, TAR ÉIS INSTEALLADH INFHÉITHEACH (IV), AN OLIGONUCLEOTIDE A IOMPAR CHUIG NA GASCHEALLA MESENCHYMAL (MSC) CHUN FOIRMIÚ CNÁMH A MHÉADÚ AGUS TRÍ RIARACHÁN ÁITIÚIL DO NA GASCHEALLA SÓMACHA (SSC) A BHAINEANN LE GINIÚINT AN MEALL ÚTARACH. A ULLMHÚ NPS LIPID-POLYMERIC DO GAPMERS ENCAPSULATION TÁ TEICNÍC MICROFLUIDICS BEARTAITHE MAR MHALAIRT AR NA MODHANNA EIBLEACHT DÚBAILTE TRAIDISIÚNTA. ÁIRÍTEAR AR AN SEACHADADH SPRIOCDHÍRITHE AGUS SEACHAINT OPSONAITHE LIPID-PLGA-NPS ROGHNÚ LIGANDS, LEAS IOMLÁN A BHAINT AS AN NÓS IMEACHTA NASC AGUS ANAILÍS CINÉITIC LIGAND ASAITHE. IS ÉARD ATÁ I TRÉITHRIÚ NPS I MÉID, POLYDISPERSITY, Z-ACMHAINNEACHT, CISEAL AGUS COMHDHÉANAMH DROMCHLA, SLÁINE, GAPMERS ÉIFEACHTÚLACHT ENCAPSULATION (EE) AGUS COINNÍOLLACHA LYOPHILIZATION LEAGAN SÍOS. GAPMERS CHUN TOSTA GÉINTE IARRTHÓRA A BHFUIL BAINT ACU LE OP AGUS UL A ROGHNÚ DE RÉIR NA HÉIFEACHTÚLACHTA A THAISPEÁNTAR I LUCHA MSC (MMSC) CULTÚR AGUS I GCEALLA UL-DÍORTHAITHE, FAOI SEACH. DÉANTAR ÉIFEACHTÚLACHT IN VITRO, GÁINNEÁIL IONCHEALLACH AGUS SÁBHÁILTEACHT GAPMER ROGHNAITHE ATÁ CUIMSITHE SA SSN A THÁSTÁIL. DÉANTAR CUMAS OISTÉIGINEACH IN VITRO MMSC AGUS CITOTOXICITY AN NPS LE HAGHAIDH OP A THÁSTÁIL I GCULTÚIR MMSC. CHUN SEICEÁIL A DHÉANAMH AR AN ÉIFEACHT FRITH-PROLIFERATIVE AN NPS DO NA SAOTHRÁIN EX VIVO UL DE SLISNÍ FÍOCHÁN DÍORTHAITHE OTHAR A BHEADH A ÚSÁID. CHUN MEASTÓIREACHT A DHÉANAMH IN VIVO AR AN NANA-FHOIRMLIÚ LE HAGHAIDH OP, ROGHNAITHE GAPMERS CUIMSITHE I STEALTH NPS FEIDHMIÚIL LE APTAMER LE HAGHAIDH CNÁMH SPRIOCDHÍRITHE, DÉANTAR AN TURGNAMH I LUCHA BAINEANN OSTEOPOROTIC (OVARIECTOMY AGUS DEXAMETHASONE). AR AN GCÉAD DUL SÍOS, NÍ MÓR MEASÚNACHTAÍ BITHDHÁILEACHÁIN A BHAINEANN ÚSÁID AS RAIDISEATÓIP ÉAGSÚLA A DHÉANAMH LE HAGHAIDH LOGÁNÚ SSN TAR ÉIS RIARACHÁN IV. TÁSTÁIL ÉIFEACHT OISTÉIGINEACH NPS I LUCHA SHAM AGUS OISTÉAPORÓISEACHA AG DENSITOMETRIY AN AINMHÍ BEO ROIMH AGUS LE LINN NA TRÉIMHSE INSTEALLTAÍ NPS AGUS TRÍ ANAILÍSÍ HYSTOLOGICAL IN AINMHITHE ÍOBAIRTTE. AG AN AM CÉANNA, DÉANTAR AN ÉIFEACHT IN VIVO AR INSTEALLADH INTUMORAL AN GAPMER-NPS FORBARTHA DO OL INA N-AONAR NÓ I GCOMHCHEANGAL LE DRUGAÍ-NPS A THÁSTÁIL I SAMHAIL LUCH XENOGRAFT A DHÍORTHAÍTEAR Ó OTHAIR DE OL. DÉANTAR AM CÓNAITHE NPS SA LÁITHREÁN MEALL A THOMHAS GO SEACHTRACH TAR ÉIS INSTEALLADH INTRATUMORAL DE NPS RADAILIPÉADAITHE I LUCHA BEO. IN VIVO ÉIFEACHTÚLACHT AN NPS AIMSÍTEAR TRÍ MHONATÓIREACHT A DHÉANAMH AR AN BHFÁS MEALL LE ÍOMHÁÚ ULTRAFHUAIME ARDTAIFIGH. INA THEANNTA SIN, IN AINMHITHE ÍOBAIRT, TUGANN ANAILÍSÍ HISTEAPAITEOLAÍOCHA SIADAÍ AGUS MÓRORGÁN TOMHAS AR ÉIFEACHTÚLACHT AGUS AR THOCSAINEACHT FREISIN. CHEADÓDH NA TURGNAIMH IN VIVO CÓRAS DÁILEOIGE RÉASÚNACH, ÉIFEACHTÚLACHTA AGUS SÁBHÁILTEACHTA A BHUNÚ TRÍ BHEALAÍ IV (OP) AGUS INTRATUMORAL (UL). AR DEIREADH, CHUN NANA-FHOIRMLIÚ AISTRITHE FÉIDEARTHA A FHORBAIRT DON TIONSCAL NÓ DON CHLINIC MOLAIMID FORBAIRT APTAMER AR LEITH LE HAGHAIDH FÍOCHÁN CNÁMH DAONNA AG CILLE-SELEX. TÁSTÁIL AR CHUMAS NA N-APTAMERS CHUN SSN A THREORÚ CHUIG CEALLA DAONNA SA CHULTÚR. TÁSTÁIL AR ÉIFEACHT NPS AG IOMPAR AN APTAMER DAONNA AGUS AN PÉIRE ROGHNAITHE GAPMERS AR FHOIRMIÚ CNÁMH I HMSC SCOITE AMACH Ó OTHAIR OP. (Irish)
4 August 2022
0 references
NASTAVLJIVA LASTNOST NANOSISTEMOV JIH NAREDI OBETAVNEGA NANOPLATAFORM, DA DOSTAVI TERAPEVTSKA SREDSTVA V SKORAJ VSE VRSTE CELIC ORGANIZMA. IZZIV TEGA PROJEKTA JE ZASNOVATI, IZDELATI IN OPREDELITI (IN VITRO-IN VIVO) HIBRIDNE LIPIDNO-POLIMERNE NANOSISTEME KOT NOSILCE OLIGONUKLEOTIDOV (GAPMERS) ZA CILJANJE CELIC S SISTEMSKO IN LOKALNO UPRAVO. KOT MODELA BOLEZNI STA PREDLAGANA OSTEOPOROZA IN ZDRAVILO LEYOMIOMA (OP IN UL) MATERNICE. ZATO NPS PO INTRAVENSKI (I.V.) INJEKCIJI PRENAŠA OLIGONUKLEOTID V MESENHIMSKE MATIČNE CELICE (MSC) ZA POVEČANJE TVORBE KOSTI IN Z LOKALNO UPORABO V SOMATSKE MATIČNE CELICE (SSC), KI SODELUJEJO PRI TVORBI TUMORJA MATERNICE. ZA PRIPRAVO LIPIDNO-POLIMERNIH NPS ZA GAPMERS INKAPSULACIJO MIKROFLUIDIKOV JE PREDLAGANA KOT ALTERNATIVA OBIČAJNIM METODAM DVOJNE EMULZIJE. OKRAŠENA CILJNA DOSTAVA LIPIDOV-PLGA-NPS IN IZOGIBANJE OPSONIZACIJI VKLJUČUJE IZBIRO LIGANDOV, OPTIMIZACIJO POSTOPKA POVEZOVANJA IN ANALIZO KINETIKE LIGANDOV DESORPCIJE. KARAKTERIZACIJA NPS JE SESTAVLJENA IZ VELIKOSTI, POLIDISPERZIJE, Z-POTENCIALNE SESTAVE, SESTAVE PLASTI IN POVRŠINE, CELOVITOSTI, UČINKOVITOSTI INKAPSULACIJE GAPMERS (EE) IN NASTAVITEV POGOJEV LIOFILIZACIJE. GAPMERS ZA UTIŠANJE KANDIDATNIH GENOV, VKLJUČENIH V OP IN UL, SO IZBRANI GLEDE NA UČINKOVITOST, PRIKAZANO V KULTURI MIŠJEGA MSC (MMSC) OZIROMA V CELICAH, PRIDOBLJENIH Z UL. TESTIRAJO SE UČINKOVITOST IN VITRO, ZNOTRAJCELIČNA TRGOVINA IN VARNOST IZBRANEGA GAPMER V NPS. IN VITRO OSTEOGENI POTENCIAL TRANSFEKIRANEGA MMSC IN CITOTOKSIČNOST NPS ZA OP SE PRESKUŠATA V KULTURAH MMSC. ZA PREVERJANJE ANTIPROLIFERATIVNEGA UČINKA NPS ZA KULTURE UL EX VIVO REZINE TKIVA, PRIDOBLJENE IZ BOLNIKA, BI SE UPORABIL ANTIPROLIFERATIVNI UČINEK NPS. DA BI IN VIVO OCENILI NANOFORMULACIJO ZA OP, IZBRANI GAPMERS INKAPSULIRANI V PRIKRITI NPS, FUNKCIONALIZIRANI Z APTAMEROM ZA TARČO KOSTI, SE POSKUS IZVAJA PRI OSTEOPOROTIČNIH MIŠIH (OVARIEKTOMIJA IN DEKSAMETAZON). PRVIČ, PO INTRAVENSKI APLIKACIJI JE TREBA OPRAVITI BIODISTRIBUCIJSKE TESTE Z UPORABO RAZLIČNIH RADIOAKTIVNIH IZOTOPOV ZA LOKALIZACIJO NPS. PRESKUSITE OSTEOGENI UČINEK NPS PRI NAVIDEZNIH IN OSTEOPOROTIČNIH MIŠIH Z DENSITOMETRIY PRI ŽIVI ŽIVALI PRED IN MED INJICIRANJEM NPS TER Z ANALIZAMI HYSTOLOGICAL PRI ŽRTVOVANIH ŽIVALIH. HKRATI SE IN VIVO UČINEK INTRATUMORALNE INJEKCIJE RAZVITEGA GAPMER-NPS ZA SAMO ZM ALI V KOMBINACIJI Z ZDRAVILOM NPS TESTIRA NA MODELU MIŠJE KSENOGRAFT, PRIDOBLJENEGA IZ BOLNIKA, Z UL. ČAS ZADRŽEVANJA NPS NA MESTU TUMORJA SE MERI OD ZUNAJ PO INTRATUMORALNI INJEKCIJI RADIOAKTIVNO OZNAČENEGA NPS PRI ŽIVIH MIŠIH. UČINKOVITOST NPS IN VIVO JE ZAZNANA S SPREMLJANJEM RASTI TUMORJA Z ULTRAZVOČNIM SLIKANJEM Z VISOKO LOČLJIVOSTJO. POLEG TEGA PRI ŽRTVOVANIH ŽIVALIH HISTOPATOLOŠKE ANALIZE TUMORJEV IN GLAVNIH ORGANOV DAJEJO TUDI MERILO UČINKOVITOSTI IN TOKSIČNOSTI. POSKUSI IN VIVO BI OMOGOČILI VZPOSTAVITEV RACIONALNEGA, UČINKOVITEGA IN VARNOSTNEGA REŽIMA ODMERJANJA PO INTRATUMORSKIH (OP) IN INTRATUMORALNIH (UL) POTEH. NAZADNJE, ZA RAZVOJ VISOKO POTENCIALNEGA PRENOSA NANOFORMULACIJE V INDUSTRIJO ALI KLINIKO PREDLAGAMO RAZVOJ APTAMARJA, SPECIFIČNEGA ZA ČLOVEŠKO KOSTNO TKIVO S CELIČNIM SELEXOM. PRESKUŠANJE SPOSOBNOSTI APTAMERJEV ZA USMERJANJE NPS V ČLOVEŠKE CELICE V KULTURI. TEST UČINKA NPS, KI PRENAŠAJO HUMANI APTAMER IN IZBRANI PAR GAPMERS, NA TVORBO KOSTI PRI HMSC, IZOLIRANIH OD BOLNIKOV Z OP. (Slovenian)
4 August 2022
0 references
НАСТРОЙВАЕМИ СВОЙСТВА НА NANOSYSTEMS ГИ ПРАВИ ОБЕЩАВАЩ NANOPLATAFORM ДА ДОСТАВЯТ ТЕРАПЕВТИЧНИ СРЕДСТВА НА ПОЧТИ ВСЕКИ ТИП КЛЕТКИ НА ОРГАНИЗМА. ПРЕДИЗВИКАТЕЛСТВОТО НА ТОЗИ ПРОЕКТ Е ДА СЕ ПРОЕКТИРАТ, ПРОИЗВЕЖДАТ И ХАРАКТЕРИЗИРАТ (IN VITRO-IN VIVO) ХИБРИДНИ ЛИПИДНОПОЛИМЕРНИ НАНОСИСТЕМИ КАТО НОСИТЕЛИ НА ОЛИГОНУКЛЕОТИДИ (GAPMERS) ЗА НАСОЧВАНЕ НА КЛЕТКИТЕ ЧРЕЗ СИСТЕМНО И ЛОКАЛНО ПРИЛОЖЕНИЕ. ПРЕДЛАГАТ СЕ ОСТЕОПОРОЗА И МАТОЧНА LEYOMIOMA (OP И UL), КАТО МОДЕЛИ НА ЗАБОЛЯВАНИЯ. ПОРАДИ ТОВА НПС, СЛЕД ИНТРАВЕНОЗНО (IV) ИНЖЕКТИРАНЕ, ПРЕНАСЯ ОЛИГОНУКЛЕОТИДА ДО МЕЗЕНХИМНИТЕ СТВОЛОВИ КЛЕТКИ (MSC) ЗА УВЕЛИЧАВАНЕ НА ОБРАЗУВАНЕТО НА КОСТИТЕ И ЧРЕЗ ЛОКАЛНО ПРИЛОЖЕНИЕ КЪМ СОМАТИЧНИТЕ СТВОЛОВИ КЛЕТКИ (SSC), УЧАСТВАЩИ В ГЕНЕРИРАНЕТО НА ТУМОРА НА МАТКАТА. ПРЕДЛАГА СЕ КАТО АЛТЕРНАТИВА НА КОНВЕНЦИОНАЛНИТЕ МЕТОДИ ЗА ДВОЙНА ЕМУЛСИЯ ДА СЕ ПОДГОТВИ ЛИПИДНО-ПОЛИМЕРНА NPS ЗА ТЕХНИКА ЗА МИКРОФЛУИДИ ЗА КАПСУЛИРАНЕ GAPMERS. УКРАСЕНАТА ЛИПИДНА-PLGA-NPS ЦЕЛЕВА ДОСТАВКА И ИЗБЯГВАНЕ НА ОПСОНИЗАЦИЯ ВКЛЮЧВА ИЗБОР НА ЛИГАНДИ, ОПТИМИЗИРАНЕ НА ПРОЦЕДУРАТА НА СВЪРЗВАНЕ И КИНЕТИКА НА ДЕСОРБЦИЯ НА ЛИГАНДА. ХАРАКТЕРИЗИРАНЕТО НА NPS СЕ СЪСТОИ В РАЗМЕР, ПОЛИДИСПЕРСНОСТ, Z-ПОТЕНЦИАЛ, СЛОЙ И ПОВЪРХНОСТЕН СЪСТАВ, ЦЯЛОСТ, ЕФИКАСНОСТ НА КАПСУЛИРАНЕ GAPMERS (EE) И ОПРЕДЕЛЯНЕ НА УСЛОВИЯТА НА ЛИОФИЛИЗАЦИЯ. GAPMERS ЗА ЗАГЛУШАВАНЕ НА КАНДИДАТ-ГЕНИТЕ, УЧАСТВАЩИ В ОП И UL, СЕ ПОДБИРАТ СПОРЕД ЕФЕКТИВНОСТТА, ПОКАЗАНА СЪОТВЕТНО В МИШКИ MSC (MMSC) И В КЛЕТКИ, ПОЛУЧЕНИ ОТ UL. ИЗСЛЕДВАТ СЕ IN VITRO ЕФИКАСНОСТТА, ВЪТРЕКЛЕТЪЧНИЯ ТРАФИК И БЕЗОПАСНОСТТА НА ИЗБРАНИЯ GAPMER КАПСУЛИРАН В НПВ. IN VITRO ОСТЕОГЕННИЯТ ПОТЕНЦИАЛ НА ТРАНСФЕКТИРАНИЯ MMSC И ЦИТОТОКСИЧНОСТТА НА NPS ЗА ОП СЕ ИЗПИТВАТ В MMSC КУЛТУРИ. ЗА ПРОВЕРКА НА АНТИПРОЛИФЕРАТИВНИЯ ЕФЕКТ НА NPS ЗА UL EX VIVO КУЛТУРИТЕ ОТ ТЪКАННИ РЕЗЕНИ, ПОЛУЧЕНИ ОТ ПАЦИЕНТА, СЕ ИЗПОЛЗВА. ЗА ДА СЕ ОЦЕНИ IN VIVO НАНО-ФОРМУЛАЦИЯТА ЗА ОП, ИЗБРАНИ GAPMERS КАПСУЛИРАНИ В СТЕЛТ NPS ФУНКЦИОНАЛЕН С АПТАМЕР ЗА КОСТНА ЦЕЛ, ЕКСПЕРИМЕНТЪТ СЕ ПРОВЕЖДА С ОСТЕОПОРОТИЧНИ ЖЕНСКИ МИШКИ (ОВАРИЕКТОМИЯ И ДЕКСАМЕТАЗОН). ПЪРВО, СЛЕД ИНТРАВЕНОЗНО ПРИЛОЖЕНИЕ ТРЯБВА ДА СЕ ИЗВЪРШАТ ИЗСЛЕДВАНИЯ ЗА БИОРАЗПРЕДЕЛЕНИЕ С ИЗПОЛЗВАНЕ НА РАЗЛИЧНИ РАДИОИЗОТОПИ ЗА ЛОКАЛИЗАЦИЯ НА НПВ. ИЗСЛЕДВАЙТЕ ОСТЕОГЕННИЯ ЕФЕКТ НА НПС ПРИ ФИКТИВНИ И ОСТЕОПОРОТИЧНИ МИШКИ ЧРЕЗ DENSITOMETRIY НА ЖИВО ЖИВОТНО ПРЕДИ И ПО ВРЕМЕ НА ИНЖЕКТИРАНЕТО НА NPS И ЧРЕЗ HYSTOLOGICAL АНАЛИЗИ ПРИ ПОЖЕРТВАНИ ЖИВОТНИ. ЕДНОВРЕМЕННО С ТОВА, IN VIVO ЕФЕКТЪТ НА ИНТРАТУМОРНОТО ИНЖЕКТИРАНЕ НА РАЗРАБОТЕНИЯ GAPMER-NPS ЗА UL САМОСТОЯТЕЛНО ИЛИ В КОМБИНАЦИЯ С ЛЕКАРСТВО-NPS СЕ ТЕСТВА ПРИ МОДЕЛ НА UL, ПОЛУЧЕН ОТ ПАЦИЕНТА. ВРЕМЕТО ЗА ПРЕБИВАВАНЕ НА NPS В МЯСТОТО НА ТУМОРА СЕ ИЗМЕРВА ВЪНШНО СЛЕД ИНТРАТУМОРАЛНО ИНЖЕКТИРАНЕ НА БЕЛЯЗАН НПВ ПРИ ЖИВИ МИШКИ. IN VIVO ЕФИКАСНОСТТА НА NPS СЕ ОТКРИВА ЧРЕЗ ПРОСЛЕДЯВАНЕ НА РАСТЕЖА НА ТУМОРА С УЛТРАЗВУКОВА ВИЗУАЛИЗИРАНЕ С ВИСОКА РАЗДЕЛИТЕЛНА СПОСОБНОСТ. ОСВЕН ТОВА ПРИ ПОЖЕРТВАНИ ЖИВОТНИ ХИСТОПАТОЛОГИЧНИТЕ АНАЛИЗИ НА ТУМОРИТЕ И ОСНОВНИТЕ ОРГАНИ СЪЩО ДАВАТ МЯРКА ЗА ЕФИКАСНОСТТА И ТОКСИЧНОСТТА. ЕКСПЕРИМЕНТИТЕ IN VIVO ЩЕ ПОЗВОЛЯТ ДА СЕ УСТАНОВИ РАЦИОНАЛЕН, ЕФИКАСЕН И БЕЗОПАСЕН РЕЖИМ НА ДОЗИРАНЕ ЧРЕЗ IV (OP) И ИНТРАТУМОРАЛНИ (UL) ПЪТИЩА. И НАКРАЯ, ЗА ДА СЕ РАЗВИЕ ГОЛЯМ ПОТЕНЦИАЛ ЗА ТРАНСФЕР НА НАНОФОРМУЛАЦИЯ В ИНДУСТРИЯТА ИЛИ КЛИНИКАТА, НИЕ ПРЕДЛАГАМЕ РАЗРАБОТВАНЕТО НА АПТАМЕР, СПЕЦИФИЧЕН ЗА ЧОВЕШКАТА КОСТНА ТЪКАН, ЧРЕЗ КЛЕТЪЧНО-СЕЛЕКС. ТЕСТВАНЕ НА СПОСОБНОСТТА НА АПТАМЕРИТЕ ЗА НАСОЧВАНЕ НА НПВ КЪМ ЧОВЕШКИ КЛЕТКИ В КУЛТУРА. ТЕСТ НА ЕФЕКТА НА НПС, ПРЕНАСЯЩ ЧОВЕШКИЯ АПТАМЕР И ИЗБРАНАТА ДВОЙКА GAPMERS ВЪРХУ ОБРАЗУВАНЕТО НА КОСТИ В HMSC, ИЗОЛИРАН ОТ ПАЦИЕНТИ С ОП. (Bulgarian)
4 August 2022
0 references
PROPRJETÀ SINTONIZZABBLI TA ‘NANOSYSTEMS JAGĦMILHOM NANOPLATAFORM PROMETTENTI LI JAGĦTI AĠENTI TERAPEWTIĊI LI PRATTIKAMENT KULL TIP TA’ ĊELLULA TA ‘ORGANIŻMU. L-ISFIDA TA’ DAN IL-PROĠETT HIJA LI JIDDISINJA, JIMMANIFATTURA U JIKKARATTERIZZA (IN VITRO-IN VIVO) NANOSISTEMI IBRIDI POLIMERIĊI LIPIDI BĦALA TRASPORTATURI TA’ OLIGONUKLEOTIDI (GAPMERS) BIEX JIMMIRAW IĊ-ĊELLOLI PERMEZZ TA’ AMMINISTRAZZJONI SISTEMIKA U LOKALI. L-OSTEOPOROŻI U L-UTRU LEYOMIOMA (OP U UL), BĦALA MUDELLI TA’ MARD, HUMA PROPOSTI. GĦALHEKK, L-NPS, WARA INJEZZJONI ĠOL-VINA (IV), ITTRASPORTA L-OLIGONUKLEOTIDE LEJN IĊ-ĊELLULI STAMINALI MESENKIMALI (MSC) BIEX IŻŻID IL-FORMAZZJONI TAL-GĦADAM U B’AMMINISTRAZZJONI LOKALI LEJN IĊ-ĊELLULI STAMINALI SOMATIĊI (SSC) INVOLUTI FIL-ĠENERAZZJONI TAT-TUMUR TAL-UTRU. BIEX TIPPREPARA NPS LIPID-POLYMERIC GĦAL TEKNIKA TA’ INKAPSULAMENT TA’ INKAPSULAMENT TA’ GAPMERS HIJA PROPOSTA BĦALA ALTERNATTIVA GĦALL-METODI KONVENZJONALI TA’ EMULSJONI DOPPJA. IL-KUNSINNA MMIRATA U L-EVITAR TAL-OPSONIZZAZZJONI DEKORATI TAL-LIPIDI-PLGA-NPS JINKLUDU L-GĦAŻLA TAL-LIGANDI, L-OTTIMIZZAZZJONI TAL-PROĊEDURA TA’ KONNESSJONI U L-ANALIŻI TAL-KINETIKA TAD-DESORBIMENT TAL-LIGAND. IL-KARATTERIZZAZZJONI TAL-NPS TIKKONSISTI FID-DAQS, IL-POLIDISPERSITÀ, IL-POTENZJAL Z, IL-KOMPOŻIZZJONI TAS-SAFF U TAS-SUPERFIĊJE, L-INTEGRITÀ, L-EFFIKAĊJA TAL-INKAPSULAMENT TAL-GAPMERS (EE) U L-ISSETTJAR TAL-KUNDIZZJONIJIET TAL-LIJOFILIZZAZZJONI. GAPMERS BIEX ISIKKTU ĠENI KANDIDATI INVOLUTI F’OP U UL JINTGĦAŻLU SKONT L-EFFIĊJENZA MURIJA FIL-KULTURA MSC (MMSC) TAL-ĠRIEDEN U FIĊ-ĊELLOLI DERIVATI MILL-UL, RISPETTIVAMENT. L-EFFIKAĊJA IN VITRO, IT-TRAFFIKAR INTRAĊELLULARI U S-SIGURTÀ TAL-GAPMER MAGĦŻUL INKAPSULAT FIS-SPĠ HUMA TTESTJATI. IL-POTENZJAL OSTEOĠENIKU IN VITRO TA’ MMSC TRANSFETTAT U Ċ-ĊITOTOSSIĊITÀ TAL-SPĠ GĦAL OP HUMA TTESTJATI F’KULTURI MMSC. BIEX JIĠI ĊĊEKKJAT L-EFFETT ANTI-PROLIFERATTIV TAL-NPS GĦALL-KULTURI UL EX VIVO TA’ FLIELI TA’ TESSUT DERIVAT MILL-PAZJENT GĦANDHOM JINTUŻAW. SABIEX TIĠI EVALWATA IN VIVO N-NANOFORMULAZZJONI GĦALL-PO, GAPMERS MAGĦŻULA INKAPSULATI F’SPĠ FUNZJONALIZZATI B’APTAMER GĦALL-GĦADAM FIL-MIRA, L-ESPERIMENT JITWETTAQ FI ĠRIEDEN FEMMINILI OSTEOPOROTIĊI (OVARIEKTOMIJA U DEXAMETHASONE). L-EWWEL, ASSAĠĠI TA’ BIJODISTRIBUZZJONI BL-UŻU TA’ ISOTOPI RADJUATTIVI DIFFERENTI GĦANDHOM JITWETTQU GĦAL-LOKALIZZAZZJONI TAL-SPĠ WARA AMMINISTRAZZJONI IV. ITTESTJA L-EFFETT OSTEOĠENIKU TA’ L-NPS FI ĠRIEDEN FINTA U OSTEOPOROTIĊI MINN DENSITOMETRIY TA’ L-ANNIMAL ĦAJ QABEL U WAQT IL-PERJODU TA’ INJEZZJONIJIET TA’ NPS U PERMEZZ TA’ ANALIŻI HYSTOLOGICAL F’ANNIMALI SAGRIFIKATI. FL-ISTESS ĦIN, L-EFFETT IN VIVO TA’ INJEZZJONI INTRATUMORALI TAL-GAPMER-NPS ŻVILUPPAT GĦAL UL WAĦDU JEW FLIMKIEN MA’ MEDIĊINA-NPS JIĠI TTESTJAT F’MUDELL TA’ ĠURDIEN TA’ UL TA’ XENOGRAFT DERIVAT MILL-PAZJENT. IL-ĦIN TA’ RESIDENZA TAL-NPS FIS-SIT TAT-TUMUR JITKEJJEL ESTERNAMENT WARA INJEZZJONI INTRATUMORALI TA’ NPS RADJUTIKKETTATI FI ĠRIEDEN ĦAJJIN. L-EFFIKAĊJA IN VIVO TAL-SPĠ TIĠI OSSERVATA PERMEZZ TA’ MONITORAĠĠ TAT-TKABBIR TAT-TUMUR B’IMMAĠNI ULTRASOUND B’RIŻOLUZZJONI GĦOLJA. BARRA MINN HEKK, F’ANNIMALI SAGRIFIKATI, L-ANALIŻI ISTOPATOLOĠIKA TAT-TUMURI U L-ORGANI EWLENIN JAGĦTU WKOLL KEJL TAL-EFFIKAĊJA U T-TOSSIĊITÀ. L-ESPERIMENTI IN VIVO JIPPERMETTU LI JIĠI STABBILIT REĠIM TA’ DOŻAĠĠ RAZZJONALI, TA’ EFFIKAĊJA U TA’ SIGURTÀ PERMEZZ TA’ ROTOT IV (OP) U INTRATUMORALI (UL). FL-AĦĦAR NETT, BIEX TIĠI ŻVILUPPATA NANOFORMULAZZJONI POTENZJALI GĦOLJA GĦALL-INDUSTRIJA JEW IL-KLINIKA, AĦNA NIPPROPONU L-IŻVILUPP TA’ APTAMER SPEĊIFIKU GĦAT-TESSUT TA’ L-GĦADAM UMAN PERMEZZ TA’ CELL-SELEX. L-ITTESTJAR TAL-KAPAĊITÀ TAL-APTAMINI LI JIDDERIEĠU L-SPĠ LEJN IĊ-ĊELLOLI UMANI FIL-KULTURA. TEST TAL-EFFETT TAL-NPS LI JĠORRU L-APTAMER UMAN U L-PAR MAGĦŻUL TA’ GAPMERS FUQ IL-FORMAZZJONI TAL-GĦADAM F’HMSC IŻOLAT MINN PAZJENTI OP. (Maltese)
4 August 2022
0 references
A propriedade tangível dos nanosistemas torna-os uma nanoplataforma promissora para entregar agentes terapêuticos a praticamente todos os tipos de células de um orgânico. O DESAFIO DO PRESENTE PROJECTO É CONCEBER, FABRICAR E CARACTERIZAR (IN VITRO-IN VIVO) NANOSSISTEMAS HÍBRIDOS POLÍMICOS COMO TRANSPORTADORES DE OLIGONUCLEOTIDES (GAPMERS) PARA CÉLULAS-ALVO POR ADMINISTRAÇÃO SISTEMÁTICA E LOCAL. PROPOSTA DE OSTEOPOROSE E LEIOMOMA UTERINO (OP E UL), COMO MODELOS DE DOENÇAS. Por conseguinte, o NPS, APÓS INJECÇÃO INTRAVENOSA (IV), TRANSPORTE O OLIGONUCLEOTIDE PARA AS CÉLULAS DO SISTEMA MESENQUÍMICO (MSC) PARA AUMENTAR A FORMAÇÃO BONE E POR ADMINISTRAÇÃO LOCAL PARA AS CÉLULAS DO SISTEMA SOMÁTICO (SSC) ENVOLVIDAS NA GERAÇÃO DO TUMOR UTERINO. A TÉCNICA MICROFLÍDICA DE ENCAPSULAÇÃO DE GAPMERS PARA PREPARAÇÃO DE NPS LIPID-POLÍMÉTICOS É PROPOSTA COMO ALTERNATIVA AOS MÉTODOS CONVENCIONAIS DE EMULSÃO DUPLA. A DECORATED LIPID-PLGA-NPS TARGETED DELIVERY AND OPSONIZATION AVOIDANCE INCLUI A SELEÇÃO DE LIGANDS, A OPTIMIZAÇÃO DO PROCEDIMENTO DE LIGAÇÃO E A ANÁLISE CINETICA DE LIGAND DESORPTION. A CARACTERIZAÇÃO DAS NSP CONSISTE NA COMPOSIÇÃO DE TAMANHO, POLIDISPERSIDADE, Z-POTENTIAL, PASSAGEM E SUPERFÍCIE, INTEGRIDADE, EFICÁCIA DE CAPSULAÇÃO DOS GAPMES (EE) E ESTABELECIMENTO DE CONDIÇÕES DE LIOFILILIZAÇÃO. GAPMERS PARA O SILÊNCIO DOS GÉNEROS CANDIDATOS ENVOLVIDOS EM OP E UL SÃO SELECIONADOS DE ACORDO COM A EFICIÊNCIA APRESENTADA NA CULTURA MICE MSC (MMSC) E EM CÉLULAS DERIVADAS, RESPECTIVAMENTE. A EFICIÊNCIA IN VITRO, O TRÁFICO INTRACELLULAR E A SEGURANÇA DO GAPMER SELECIONADO ENCAPSULADO NO NPS SÃO TESTADOS. O POTENCIAL OSTEOGENIC IN VITRO DA MMSC TRANSFECTADA E A CITOTOXICIDADE DAS NSP PARA PO SÃO TESTADOS EM CULTURAS MMSC. VERIFICAR O EFEITO ANTIPROLIFERATIVO DO NPS PARA AS CULTURAS UL EX VIVO DE TECIDOS DERIVADOS DE DOENTES SERÁ UTILIZADO. AVALIAR EM VIVO A NANOFORMULAÇÃO PARA O PO, GAPMEROS SELECIONADOS REALIZADOS EM NPS DE SATISFAÇÃO FUNCIONALIZADOS COM UM APTAMER PARA OBJECTIVOS BONE, A EXPERIÊNCIA É REALIZADA EM MICE FEMININO OSTEOPORÓTICO (OVARIECTOMIA E DEXAMETHASONE). PRIMEIRO, ASSAIOS DE BIODISTRIBUIÇÃO QUE UTILIZAM RADIOISÓTOPOS DIFERENTES DEVEM SER REALIZADOS PARA A LOCALIZAÇÃO DAS NSP APÓS IV ADMINISTRAÇÃO. ENSAIO DO EFEITO OSTEOGÉNICO DE NPS EM SHAM E MICE OSTEOPORÓTICO POR DENSITOMETRIA DO ANIMAL VIVO ANTES E DURANTE O PERÍODO DE INJECÇÕES DE NPS E POR ANÁLISES HISTOLÓGICAS EM ANIMAIS SACRIFICADOS. Ao mesmo tempo, em VIVO, o efeito da injecção intratumoral do GAPMER-NPS desenvolvido para UL sozinho ou em combinação com DRUG-NPS é testado no modelo XENOGRAFT MOUSE DE UL de origem paciente. O TEMPO DE RESIDÊNCIA NPS NO LOCAL DO TUMOR É MEDIDO EXTERNAMENTE APÓS A INJECÇÃO INTRATUMORAL DE NPS RADIOLABELLED EM MICE VIVO. A EFICIÊNCIA IN VIVO DO NPS É DETETADA MONITORIZANDO O CRESCIMENTO DO TUMOR COM IMAGEM DO ULTRASODO DE ALTA RESOLUÇÃO. Além disso, nos animais sacrificados, as análises histopatológicas dos tumeros e dos grandes organismos dão igualmente uma medida da eficácia e da toxicidade. A EXPERIMENTAÇÃO IN VIVO PERMITIRÁ ESTABELECER UM REGIME DE DOSAGEM RACIONAL, EFICIÁVEL E DE SEGURANÇA POR VIAS IV (OP) E INTRATUMORAL (UL). Ultimamente, para desenvolver uma NANO-FORMULAÇÃO DE TRANSFERÊNCIA ELEVADA PARA A INDÚSTRIA OU CLINIC, propomos o desenvolvimento de um APTAMER ESPECÍFICO PARA O TECIDO HUMANO BONE pela CELL-SELEX. ENSAIO DA CAPACIDADE DOS APTAMERS PARA A DIRECÇÃO DE NPS A CÉLULAS HUMANAS NA CULTURA. ENSAIO DO EFEITO DOS NSP QUE TRANSPORTAM O APTAMER HUMANO E O PAIR SELECIONADO DE GAPMERS EM FORMAÇÃO BONE EM HMSC ISOLADA DE PATIENTES OP. (Portuguese)
4 August 2022
0 references
TUNEABLE EGENSKAB AF NANOSYSTEMS GØR DEM TIL EN LOVENDE NANOPLATAFORM TIL AT LEVERE TERAPEUTISKE MIDLER TIL STORT SET ALLE TYPER AF CELLER I EN ORGANISME. UDFORDRINGEN MED DETTE PROJEKT ER AT UDFORME, FREMSTILLE OG KARAKTERISERE (IN VITRO-IN VIVO) HYBRID LIPIDPOLYMERE NANOSYSTEMER SOM BÆRERE AF OLIGONUCLEOTIDER (GAPMERS) MED HENBLIK PÅ AT MÅLRETTE CELLER GENNEM SYSTEMISK OG LOKAL ADMINISTRATION. OSTEOPOROSE OG UTERUS LEYOMIOMA (OP OG UL) FORESLÅS SOM SYGDOMSMODELLER. DERFOR TRANSPORTERER NPS, EFTER INTRAVENØS (IV) INJEKTION, OLIGONUCLEOTIDET TIL MESENKYMALE STAMCELLER (MSC) FOR AT ØGE KNOGLEDANNELSEN OG VED LOKAL ADMINISTRATION TIL DE SOMATISKE STAMCELLER (SSC), DER ER INVOLVERET I DANNELSEN AF LIVMODERTUMOREN. TIL FREMSTILLING AF LIPIDPOLYMER NPS TIL GAPMERS-INDKAPSLING FORESLÅS MIKROFLUIDTEKNIK SOM ET ALTERNATIV TIL DE KONVENTIONELLE DOBBELTE EMULSIONSMETODER. DEN DEKOREREDE LIPID-PLGA-NPS MÅLRETTET LEVERING OG OPSONISERING UNDGÅELSE OMFATTER UDVÆLGELSE AF LIGANDS, OPTIMERING AF LINKAGE PROCEDURE OG LIGAND DESORPTION KINETIK ANALYSE. NPS KARAKTERISERING BESTÅR I STØRRELSE, POLYDISPERSITET, Z-POTENTIEL, LAG- OG OVERFLADESAMMENSÆTNING, INTEGRITET, GAPMERS INDKAPSLINGSEFFEKTIVITET (EE) OG INDSTILLING AF FRYSETØRRENDE BETINGELSER. GAPMERS TIL TAVSHED AF KANDIDATGENER, DER ER INVOLVERET I OP OG UL, UDVÆLGES I OVERENSSTEMMELSE MED DEN EFFEKTIVITET, DER ER VIST I HENHOLDSVIS MUS MSC (MMSC) KULTUR OG I UL-AFLEDTE CELLER. IN VITRO-EFFEKTIVITETEN, INTRACELLULÆR MENNESKEHANDEL OG SIKKERHED AF DEN UDVALGTE GAPMER, DER ER INDKAPSLET I NPS, TESTES. IN VITRO- OSTEOGENE POTENTIALE FOR TRANSFICERET MMSC OG NPS' CITOTOKSICITET FOR OP TESTES I MMSC-KULTURER. TIL AT KONTROLLERE DEN ANTI-PROLIFERATIVE VIRKNING AF NPS FOR UL EX VIVO KULTURER AF PATIENT AFLEDT VÆV SKIVER VIL BLIVE ANVENDT. FOR AT EVALUERE IN VIVO NANOFORMULERINGEN FOR OP, UDVALGTE GAPMERS INDKAPSLET I STEALTH NPS FUNKTIONELT MED EN APTAMER TIL KNOGLEMÅL, UDFØRES EKSPERIMENTET MED OSTEOPOROTISKE HUNMUS (OVARIEKTOMI OG DEXAMETHASON). FOR DET FØRSTE SKAL BIODISTRIBUTIONSASSAYS, DER ANVENDER FORSKELLIGE RADIOISOTOPER, UDFØRES VED LOKALISERING AF NPS EFTER IV- ADMINISTRATION. TEST DEN OSTEOGENE VIRKNING AF NPS PÅ SHAM OG OSTEOPOROTISKE MUS VED DENSITOMETRIY AF DET LEVENDE DYR FØR OG UNDER INJEKTIONSPERIODEN MED NPS OG VED HYSTOLOGICAL-ANALYSER AF AFLIVEDE DYR. SAMTIDIG TESTES IN VIVO- EFFEKT AF INTRATUMORAL INJEKTION AF DEN UDVIKLEDE GAPMER-NPS FOR UL ALENE ELLER I KOMBINATION MED LÆGEMIDDEL-NPS I PATIENTBASERET XENOGRAFT MUSEMODEL AF UL. NPS OPHOLDSTID PÅ TUMORSTEDET MÅLES EKSTERNT EFTER INTRATUMORAL INJEKTION AF RADIOAKTIVT MÆRKET NPS HOS LEVENDE MUS. IN VIVO-EFFEKTEN AF NPS PÅVISES VED OVERVÅGNING AF TUMORVÆKSTEN MED ULTRALYDSBILLEDDANNELSE MED HØJ OPLØSNING. DESUDEN GIVER HISTOPATOLOGISKE ANALYSER AF TUMORER OG STØRRE ORGANER OGSÅ ET MÅL FOR EFFEKTIVITETEN OG TOKSICITETEN HOS OFREDE DYR. IN VIVO-FORSØGENE VILLE GØRE DET MULIGT AT ETABLERE ET RATIONELT, EFFEKTIVT OG SIKKERHEDSDOSISREGIME VED BRUG AF IV (OP) OG INTRATUMORAL (UL). ENDELIG, FOR AT UDVIKLE EN HØJ POTENTIEL OVERFØRSEL NANO-FORMULERING TIL INDUSTRIEN ELLER KLINIKKEN FORESLÅR VI UDVIKLING AF EN APTAMER SPECIFIK FOR HUMANT KNOGLEVÆV VED HJÆLP AF CELLE-SELEX. TEST AF APTAMERS EVNE TIL AT DIRIGERE NPS TIL MENNESKELIGE CELLER I KULTUR. TEST AF VIRKNINGEN AF NPS MED HUMAN APTAMER OG DET UDVALGTE GAPMERS-PAR PÅ KNOGLEDANNELSE I HMSC ISOLERET FRA OP-PATIENTER. (Danish)
4 August 2022
0 references
PROPRIETATEA AJUSTABILĂ A NANOSYSTEMS LE FACE UN NANOPLATAFORM PROMIȚĂTOR SĂ LIVREZE AGENȚI TERAPEUTICI ÎN APROAPE ORICE TIP DE CELULĂ A UNUI ORGANISM. PROVOCAREA ACESTUI PROIECT CONSTĂ ÎN PROIECTAREA, FABRICAREA ȘI CARACTERIZAREA NANOSISTEMELOR LIPIDICE HIBRIDE POLIMERICE HIBRIDE (IN VITRO-IN VIVO) CA PURTĂTORI AI OLIGONUCLEOTIDELOR (GAPMERS) PENTRU CELULELE ȚINTĂ DE CĂTRE ADMINISTRAȚIA SISTEMICĂ ȘI LOCALĂ. OSTEOPOROZA ȘI LEYOMIOMA UTERINĂ (OP ȘI LU), CA MODELE DE BOALĂ, SUNT PROPUSE. PRIN URMARE, NPS, DUPĂ INJECTAREA INTRAVENOASĂ (IV), TRANSPORTĂ OLIGONUCLEOTIDA LA CELULELE STEM MEZENCHIMALE (MSC) PENTRU A CREȘTE FORMAREA OSOASĂ ȘI PRIN ADMINISTRARE LOCALĂ LA CELULELE STEM SOMATICE (SSC) IMPLICATE ÎN GENERAREA TUMORII UTERINE. PENTRU A PREGĂTI NPS LIPID-POLIMERIC PENTRU GAPMERS ÎNCAPSULARE TEHNICA MICROFLUIDICS ESTE PROPUSĂ CA O ALTERNATIVĂ LA METODELE CONVENȚIONALE DE EMULSIE DUBLĂ. MODUL DECORAT DE LIVRARE ȘI EVITARE A OPSONIZĂRII LIPIDELOR-PLGA-NPS INCLUDE SELECTAREA LIGANZILOR, OPTIMIZAREA PROCEDURII DE LEGARE ȘI ANALIZA CINETICĂI DE DESORBȚIE A LIGANDULUI. CARACTERIZAREA NPS CONSTĂ ÎN DIMENSIUNE, POLIDISPERSITATE, POTENȚIALUL Z, COMPOZIȚIA STRATULUI ȘI A SUPRAFEȚEI, INTEGRITATEA, EFICACITATEA ÎNCAPSULARII GAPMERS (EE) ȘI STABILIREA CONDIȚIILOR DE LIOFILIZARE. GAPMERS PENTRU A REDUCE LA TĂCERE GENELE CANDIDATE IMPLICATE ÎN OP ȘI LU SUNT SELECTATE ÎN FUNCȚIE DE EFICIENȚA ARĂTATĂ ÎN CULTURA MSC (MMSC) ȘI, RESPECTIV, ÎN CELULELE DERIVATE DIN LN. SE TESTEAZĂ EFICACITATEA IN VITRO, TRAFICUL INTRACELULAR ȘI SIGURANȚA GAPMER SELECTAT ÎNCAPSULATE ÎN NPS. POTENȚIALUL OSTEOGENIC IN VITRO AL MMSC TRANSFECTAT ȘI CITOTOXICITATEA NPS PENTRU OP SUNT TESTATE ÎN CULTURI DE MMSC. PENTRU A VERIFICA EFECTUL ANTIPROLIFERATIV AL NPS PENTRU CULTURILE DE UL EX VIVO DE FELII DE ȚESUT DERIVATE DIN PACIENT, SE VOR UTILIZA. PENTRU A EVALUA IN VIVO NANOFORMULAȚIA PENTRU OP, GAPMERS SELECTATE ÎNCAPSULATE ÎN NPS STEALTH FUNCȚIONALIZAT CU UN APTAMER PENTRU OS VIZAT, EXPERIMENTUL SE EFECTUEAZĂ LA ȘOARECII OSTEOPOROTIC FEMELE (OVARIECTOMIE ȘI DEXAMETAZONĂ). ÎN PRIMUL RÂND, DUPĂ ADMINISTRAREA IV, TREBUIE EFECTUATE TESTE DE BIODISTRIBUȚIE UTILIZÂND DIFERIȚI RADIOIZOTOPI PENTRU LOCALIZAREA NPS. SE TESTEAZĂ EFECTUL OSTEOGENIC AL NPS LA ȘOARECII SIMULAȚI ȘI OSTEOPOROTICI PRIN DENSITOMETRIY AL ANIMALULUI VIU ÎNAINTE ȘI ÎN TIMPUL PERIOADEI DE INJECTARE A NPS ȘI PRIN ANALIZE HYSTOLOGICALE LA ANIMALELE SACRIFICATE. SIMULTAN, EFECTUL IN VIVO AL INJECȚIEI INTRAUMORALE A GAPMER-NPS DEZVOLTAT PENTRU LU ÎN MONOTERAPIE SAU ÎN ASOCIERE CU NPS MEDICAMENTOS ESTE TESTAT PE MODELUL DE LU XENOGRAFT DERIVAT DE PACIENT. TIMPUL DE REZIDENȚĂ NPS ÎN LOCUL TUMORII ESTE MĂSURAT EXTERN DUPĂ INJECTAREA INTRAUMORALĂ A NPS MARCAT RADIOACTIV LA ȘOARECII VII. EFICACITATEA IN VIVO A NPS ESTE DETECTATĂ PRIN MONITORIZAREA CREȘTERII TUMORII CU IMAGISTICĂ CU ULTRASUNETE DE ÎNALTĂ REZOLUȚIE. ÎN PLUS, LA ANIMALELE SACRIFICATE, ANALIZELE HISTOPATOLOGICE ALE TUMORILOR ȘI ALE ORGANELOR MAJORE DAU, DE ASEMENEA, O MĂSURĂ A EFICACITĂȚII ȘI TOXICITĂȚII. EXPERIMENTELE IN VIVO AR PERMITE STABILIREA UNUI REGIM DE DOZARE RAȚIONALĂ, DE EFICACITATE ȘI DE SIGURANȚĂ PE CĂI IV (OP) ȘI INTRAUMORAL (UL). ÎN CELE DIN URMĂ, PENTRU A DEZVOLTA UN POTENȚIAL RIDICAT DE TRANSFER NANO-FORMULARE CĂTRE INDUSTRIE SAU CLINICĂ, PROPUNEM DEZVOLTAREA UNUI APTAMER SPECIFIC ȚESUTULUI OSOS UMAN PRIN INTERMEDIUL CELULEI-SELEX. TESTAREA CAPACITĂȚII APTAMERILOR DE A DIRECȚIONA NPS CĂTRE CELULELE UMANE DIN CULTURĂ. TESTAREA EFECTULUI NPS CARE TRANSPORTĂ APTAMERUL UMAN ȘI PERECHEA SELECTATĂ DE GAPMERS ASUPRA FORMĂRII OSOASE ÎN HMSC IZOLATE DE LA PACIENȚII CU OP. (Romanian)
4 August 2022
0 references
AVSTÄMNINGSBAR EGENSKAP HOS NANOSYSTEMS GÖR DEM TILL EN LOVANDE NANOPLATAFORM FÖR ATT LEVERERA TERAPEUTISKA MEDEL TILL PRAKTISKT TAGET ALLA TYPER AV CELLER I EN ORGANISM. UTMANINGEN MED DETTA PROJEKT ÄR ATT UTFORMA, TILLVERKA OCH KARAKTERISERA (IN VITRO-IN VIVO) HYBRID LIPIDPOLYMERISKA NANOSYSTEM SOM BÄRARE AV OLIGONUKCLEOTIDES (GAPMERS) FÖR ATT RIKTA IN SIG PÅ CELLER GENOM SYSTEMISK OCH LOKAL ADMINISTRATION. OSTEOPOROS OCH LIVMODER LEYOMIOMA (OP OCH UL), SOM SJUKDOMSMODELLER, FÖRESLÅS. DÄRFÖR TRANSPORTERAR NPS, EFTER INTRAVENÖS (IV) INJEKTION, OLIGONUKLEOTID TILL DE MESENKYMALA STAMCELLERNA (MSC) FÖR ATT ÖKA BENBILDNINGEN OCH GENOM LOKAL ADMINISTRERING TILL SOMATISKA STAMCELLER (SSC) SOM ÄR INVOLVERADE I BILDANDET AV LIVMODERTUMÖREN. FÖR ATT FÖRBEREDA LIPIDPOLYMERIC NPS FÖR GAPMERS INKAPSLING MIKROFLUIDICS FÖRESLÅS SOM ETT ALTERNATIV TILL DE KONVENTIONELLA DUBBELEMULSIONSMETODERNA. DEN DEKORERADE LIPID-PLGA-NPS RIKTAD LEVERANS OCH OPSONIZATION UNDVIKANDE INKLUDERAR URVAL AV LIGANDER, OPTIMERING AV LÄNKPROCEDUREN OCH LIGAND DESORPTION KINETIK ANALYS. NPS-KARAKTERISERING BESTÅR I STORLEK, POLYDISPERSITET, Z-POTENTIAL, SKIKT- OCH YTSAMMANSÄTTNING, INTEGRITET, GAPMERS INKAPSLINGSEFFEKT (EE) OCH INSTÄLLNING AV FRYSTORKANDE FÖRHÅLLANDEN. GAPMERS FÖR ATT TYSTA KANDIDATGENER SOM ÄR INVOLVERADE I OP OCH UL VÄLJS ENLIGT DEN EFFEKTIVITET SOM VISAS I MSC-KULTUR (MMSC) OCH I UL-HÄRLEDDA CELLER. EFFEKTEN IN VITRO, INTRACELLULÄR TRAFFICKING OCH SÄKERHETEN HOS GAPMER-VALD INKAPSLING I NPS TESTAS. OSTEOGEN POTENTIAL IN VITRO AV TRANSFEKTERAD MMSC OCH CITOTOXICITET HOS NPS FÖR OP TESTAS I MMSC-KULTURER. FÖR ATT KONTROLLERA DEN ANTIPROLIFERATIVA EFFEKTEN AV NPS FÖR UL EX VIVO-KULTURER AV PATIENTHÄRLEDDA VÄVNADSSKIVOR SKULLE ANVÄNDAS. FÖR ATT IN VIVO UTVÄRDERA NANOFORMULERINGEN FÖR OP, UTVALDA GAPMERS INKAPSLADE I STEALTH NPS-FUNKTIONALISERADE MED EN APTAMER FÖR BENRIKTADE BEN, UTFÖRS EXPERIMENTET I OSTEOPOROTISKA HONMÖSS (OVARIEKTOMI OCH DEXAMETASON). FÖR DET FÖRSTA MÅSTE BIODISTRIBUTIONSTESTER MED OLIKA RADIOISOTOPER UTFÖRAS FÖR NPS-LOKALISERING EFTER IV-ADMINISTRERING. TESTA DEN OSTEOGENA EFFEKTEN AV NPS HOS FALSKA OCH OSTEOPOROTISKA MÖSS MED HJÄLP AV DENSITOMETRIY HOS DET LEVANDE DJURET FÖRE OCH UNDER INJEKTIONSPERIODEN AV NPS OCH GENOM HYSTOLOGICAL-ANALYSER PÅ AVLIVADE DJUR. SAMTIDIGT TESTAS IN VIVO-EFFEKTEN AV INTRATUMORAL INJEKTION AV DEN UTVECKLADE GAPMER-NPS FÖR UL ENSAMT ELLER I KOMBINATION MED LÄKEMEDLET NPS I PATIENTHÄRLEDD XENOGRAFTMUSMODELL AV UL. NPS UPPEHÅLLSTID I TUMÖREN MÄTS EXTERNT EFTER INTRATUMORAL INJEKTION AV RADIOAKTIVT MÄRKT NPS HOS LEVANDE MÖSS. IN VIVO-EFFEKTEN AV NPS DETEKTERAS GENOM ÖVERVAKNING AV TUMÖRTILLVÄXT MED HÖGUPPLÖST ULTRALJUDSAVBILDNING. DESSUTOM, I AVLIVADE DJUR, HISTOPATOLOGISKA ANALYSER AV TUMÖRER OCH STÖRRE ORGAN GER OCKSÅ ETT MÅTT PÅ EFFEKT OCH TOXICITET. IN VIVO-FÖRSÖKEN SKULLE GÖRA DET MÖJLIGT ATT FASTSTÄLLA EN RATIONELL, EFFEKT- OCH SÄKERHETSDOSERING MED IV (OP) OCH INTRATUMORALA (UL) VÄGAR. SLUTLIGEN, FÖR ATT UTVECKLA EN HÖG POTENTIELL ÖVERFÖRING NANOFORMULERING TILL INDUSTRIN ELLER KLINIKEN FÖRESLÅR VI UTVECKLINGEN AV EN APTAMER SPECIFIKT FÖR MÄNSKLIG BENVÄVNAD GENOM CELL-SELEX. TEST AV APTAMERS FÖRMÅGA ATT STYRA NPS TILL MÄNSKLIGA CELLER I KULTUR. TEST AV EFFEKTEN AV NPS SOM BÄR HUMANT APTAMER OCH DET VALDA PARET GAPMERS PÅ BENBILDNINGEN I HMSC ISOLERADE FRÅN OP-PATIENTER. (Swedish)
4 August 2022
0 references
San Cristóbal de La Laguna
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
RTI2018-097324-B-I00
0 references