Regulation of neutrophil and platelet function by miR-146a in NETosis; consequences on thrombogenesis and therapeutic potential (Q3157119)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3157119 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Regulation of neutrophil and platelet function by miR-146a in NETosis; consequences on thrombogenesis and therapeutic potential |
Project Q3157119 in Spain |
Statements
90,227.2 Euro
0 references
112,000.0 Euro
0 references
80.56 percent
0 references
1 January 2018
0 references
31 March 2021
0 references
FUNDACION PARA LA FORMACION E INVESTIGACION SANITARIAS DE LA REGION DE MURCIA (FFIS)
0 references
Mir-146a, un miRNA expresado mayoritariamente en células inflamatorias, podría jugar un papel activo en el desarrollo de procesos aterotrombóticos. Los objetivos de este proyecto son (i) determinar el papel de miR-146a en el proceso de NETosis y cómo rs2431697, miR-SNP presente en el gen que codifica este miRNA y que reduce sus niveles, puede influir en el desarrollo de trombosis en pacientes con patologia pro-trombótica, (ii) investigar la contribución de miR-146a plaquetario como nexo entre NETosis y trombosis y finalmente (iii) evaluar la potencial acción terapéutica de miR-146a en aterotrombosis. Para ello, analizaremos el efecto de la deficiencia de mir-146a en la capacidad intrínseca de los neutrófilos para formar NET empleando un modelo murino deficiente para este miRNA y también un modelo celular humano deficiente en miR-146a generado por CRISPR-cas9. Valoraremos diferentes marcadores de NETosis (DNA, histona 3 citrulinada) tras activación de neutrófilos purificados con PMA. Estudiaremos el impacto de rs2431697 en la formación de NET en neutrófilos de pacientes con fibrilación auricular y pacientes con artritis reumatoide. Realizaremos estudios de asociación entre marcadores plasmáticos de NETosis (DNA, elastasa, mieloperoxidasa, ROS) y la presencia de rs2431697 en el desarrollo de eventos trombóticos en estas cohortes. Valoraremos la función plaquetaria en ratones deficientes en miR-146a y el impacto en la formación de NET in vivo en ratones miR-146a-/- y en pacientes. Investigaremos nuevas dianas de miR-146a en plaquetas y neutrófilos implicadas en la formación de NET por RNA-seq comparando la expresión de transcritos de muestras de ratones miR-146a-/- vs. WT. Finalmente, estudiaremos el efecto de la sobreexpresión sistémica de miR-146a en dos modelos de ratones: (i) modelo de aterosclerosis donde estudiaremos regresión de la placa tras 16 semanas de dieta grasa y (ii) reducción de la trombosis arterial en modelo trombosis carotídea inducida por FeCl3d (Spanish)
0 references
Mir-146a, a miRNA expressed mostly in inflammatory cells, could play an active role in the development of atherothrombotic processes. The objectives of this project are (i) to determine the role of miR-146a in the NETosis process and how rs2431697, miR-SNP present in the gene that encodes this miRNA and which reduces its levels, can influence the development of thrombosis in patients with pro-thrombotic pathology, (ii) investigate the contribution of miR-146a platelet as a nexus between NETosis and thrombosis and finally evaluate the potential therapeutic action of miR-146a in atherothrombosis. To do this, we will analyse the effect of mir-146a deficiency on the intrinsic capacity of neutrophils to form NET using a deficient murine model for this miRNA and also a human cell model deficient in miR-146a generated by CRISPR-cas9. We will evaluate different markers of NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) after activation of neutrophils purified with PMA. We will study the impact of rs2431697 on the formation of NET in neutrophils in patients with atrial fibrillation and patients with rheumatoid arthritis. We will conduct association studies between plasma markers of NETosis (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) and the presence of rs2431697 in the development of thrombotic events in these cohorts. We will assess platelet function in miR-146a deficient mice and the impact on in vivo NET formation in miR-146a-/- mice and in patients. We will investigate new miR-146a targets in platelets and neutrophils involved in the formation of NET by RNA-seq by comparing the expression of transcripts from miR-146a-/- vs. WT mice samples. Finally, we will study the effect of systemic overexpression of miR-146a on two models of mice: (I) atherosclerosis model where we will study plaque regression after 16 weeks of fat diet and (ii) reduction of arterial thrombosis in FeCl3d-induced carotid thrombosis model (English)
12 October 2021
0.5888780070915526
0 references
Le MIR-146a, un miRNA exprimé principalement dans les cellules inflammatoires, pourrait jouer un rôle actif dans le développement des processus athérothrombotiques. Les objectifs de ce projet sont (i) de déterminer le rôle de miR-146a dans le processus de NETosis et comment rs2431697, miR-SNP présent dans le gène qui code ce miRNA et qui réduit ses niveaux, peut influencer le développement de la thrombose chez les patients atteints de pathologie prothrombotique, (ii) étudier la contribution de miR-146a plaquet comme un lien entre la NETosis et la thrombose et enfin évaluer l’action thérapeutique potentielle de miR-146a dans l’athérothrombose. Pour ce faire, nous allons analyser l’effet de la carence mir-146a sur la capacité intrinsèque des neutrophiles à former NET à l’aide d’un modèle murin déficient pour ce miRNA et aussi d’un modèle cellulaire humain déficient en miR-146a généré par CRISPR-cas9. Nous évaluerons différents marqueurs de NETosis (ADN, histone 3 cytrulinée) après activation des neutrophiles purifiés avec PMA. Nous étudierons l’impact de la rs2431697 sur la formation de NET dans les neutrophiles chez les patients atteints de fibrillation auriculaire et chez les patients atteints de polyarthrite rhumatoïde. Nous réaliserons des études d’association entre les marqueurs plasmatiques de la NETosis (ADN, élastase, myeloperoxydase, ROS) et la présence de rs2431697 dans le développement d’événements thrombotiques dans ces cohortes. Nous évaluerons la fonction plaquettaire chez les souris déficientes miR-146a et l’impact sur la formation in vivo de NET chez les souris miR-146a-/- et chez les patients. Nous étudierons de nouvelles cibles miR-146a dans les plaquettes et les neutrophiles impliqués dans la formation de NET par RNA-seq en comparant l’expression des transcriptions d’échantillons de souris miR-146a-/- vs WT. Enfin, nous étudierons l’effet de la surexpression systémique de miR-146a sur deux modèles de souris: (I) modèle d’athérosclérose où nous étudierons la régression de la plaque après 16 semaines de régime gras et (ii) la réduction de la thrombose artérielle dans le modèle de thrombose carotide induite par le FeCl3d (French)
4 December 2021
0 references
MIR-146a, eine meist in entzündlichen Zellen ausgedrückte miRNA, könnte eine aktive Rolle bei der Entwicklung atherothrombotischer Prozesse spielen. Die Ziele dieses Projekts sind (i) die Rolle von miR-146a im NETosis-Prozess zu bestimmen und wie rs2431697, miR-SNP im Gen vorhanden ist, das diese miRNA kodiert und ihr Niveau reduziert, die Thromboseentwicklung bei Patienten mit prothrombotischer Pathologie beeinflussen kann, (ii) den Beitrag von miR-146a Thrombose als Nexus zwischen NETosis und Thrombose untersuchen und schließlich die mögliche therapeutische Wirkung von miR-146a in der Atherothrombose untersuchen. Um dies zu tun, werden wir die Wirkung von Mir-146a-Mangel auf die intrinsische Fähigkeit von Neutrophilen, NET zu bilden, mit einem mangelhaften Murinmodell für diese miRNA und auch ein menschliches Zellmodell analysieren, das in miR-146a von CRISPR-cas9 erzeugt wurde. Wir werden verschiedene Marker von NETosis (DNA, Histon 3 cytrulinated) nach Aktivierung von Neutrophilen, die mit PMA gereinigt wurden, bewerten. Wir werden die Auswirkungen von rs2431697 auf die Bildung von NET bei Neutrophilen bei Patienten mit Vorhofflimmern und Patienten mit rheumatoider Arthritis untersuchen. Wir werden Assoziationsstudien zwischen Plasmamarkern von NETosis (DNA, Elastase, Myeloperoxidase, ROS) und dem Vorhandensein von rs2431697 in der Entwicklung thrombotischer Ereignisse in diesen Kohorten durchführen. Wir werden die Thrombozytenfunktion bei miR-146a mangelhaften Mäusen und den Einfluss auf die in vivo NET-Formation bei miR-146a-/- Mäusen und bei Patienten bewerten. Wir werden neue miR-146a-Ziele in Thrombozyten und Neutrophilen untersuchen, die an der Bildung von NET durch RNA-seq beteiligt sind, indem wir den Ausdruck von Transkripten aus miR-146a-/- vs. WT Mäusenproben vergleichen. Schließlich werden wir die Auswirkungen der systemischen Überexpression von miR-146a auf zwei Modelle von Mäusen untersuchen: (I) Atherosklerose-Modell, bei dem wir Plaque-Regression nach 16 Wochen Fettdiät und (ii) Reduktion der arteriellen Thrombose im FeCl3d-induzierten Carotisthrombose-Modell untersuchen (German)
9 December 2021
0 references
MIR-146a, een miRNA die meestal in ontstekingscellen wordt uitgedrukt, kan een actieve rol spelen in de ontwikkeling van atherotrombotische processen. De doelstellingen van dit project zijn (i) de rol van miR-146a in het NETosis-proces te bepalen en hoe rs2431697, miR-SNP aanwezig is in het gen dat dit miRNA codeert en de niveaus ervan verlaagt, de ontwikkeling van trombose kan beïnvloeden bij patiënten met pro-trombotische pathologie, (ii) de bijdrage van miR-146a bloedplaatjes als een nexus tussen NETosis en trombose kan onderzoeken en ten slotte de mogelijke therapeutische werking van miR-146a in atherothrombosis kan evalueren. Om dit te doen, zullen we het effect van mir-146a-deficiëntie analyseren op de intrinsieke capaciteit van neutrofielen om NET te vormen met behulp van een gebrekkig murinemodel voor dit miRNA-model en ook een menselijk celmodel dat tekortschiet in miR-146a dat wordt gegenereerd door CRISPR-cas9. We zullen verschillende markers van NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) evalueren na activering van neutrofielen gezuiverd met PMA. We zullen de impact van rs2431697 op de vorming van NET in neutrofielen onderzoeken bij patiënten met atriumfibrilleren en patiënten met reumatoïde artritis. We zullen associatiestudies uitvoeren tussen plasmamarkers van NETosis (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) en de aanwezigheid van rs2431697 in de ontwikkeling van trombotische voorvallen in deze cohorten. We zullen de bloedplaatjesfunctie bij miR-146a-deficiënte muizen en de impact op in vivo NET-vorming bij miR-146a-/- muizen en bij patiënten beoordelen. We zullen nieuwe miR-146a doelen in bloedplaatjes en neutrofielen die betrokken zijn bij de vorming van NET door RNA-seq onderzoeken door vergelijking van de expressie van transcripten van miR-146a-/- versus WT muizen monsters. Tot slot zullen we het effect van systemische overexpressie van miR-146a op twee modellen van muizen bestuderen: (I) atherosclerose model waarbij we plaque regressie zullen bestuderen na 16 weken vet dieet en (ii) vermindering van arteriële trombose in FeCl3d-geïnduceerde carotide trombose model (Dutch)
17 December 2021
0 references
Il MIR-146a, un miRNA espresso principalmente nelle cellule infiammatorie, potrebbe svolgere un ruolo attivo nello sviluppo di processi aterotrombotici. Gli obiettivi di questo progetto sono (i) determinare il ruolo del miR-146a nel processo NETosis e come rs2431697, miR-SNP presente nel gene che codifica questo miRNA e che riduce i suoi livelli, può influenzare lo sviluppo della trombosi in pazienti con patologia pro-trombotica, (ii) studiare il contributo della piastrina miR-146a come un nesso tra NETosis e trombosi e infine valutare la potenziale azione terapeutica del miR-146a nell'aterotrombosi. Per fare questo, analizzeremo l'effetto della carenza di mir-146a sulla capacità intrinseca dei neutrofili di formare NET utilizzando un modello murino carente per questo miRNA e anche un modello cellulare umano carente in miR-146a generato da CRISPR-cas9. Valuteremo diversi marcatori di NETosis (DNA, istone 3 citrulinati) dopo l'attivazione dei neutrofili purificati con PMA. Studieremo l'impatto di rs2431697 sulla formazione di NET nei neutrofili in pazienti con fibrillazione atriale e pazienti con artrite reumatoide. Condurremo studi di associazione tra marcatori plasmatici di NETosis (DNA, elastasi, mieloperossidasi, ROS) e la presenza di rs2431697 nello sviluppo di eventi trombotici in queste coorti. Valuteremo la funzione piastrinica nei topi carenti miR-146a e l'impatto sulla formazione in vivo NET nei topi miR-146a-/- e nei pazienti. Esamineremo nuovi bersagli miR-146a in piastrine e neutrofili coinvolti nella formazione di NET da RNA-seq confrontando l'espressione delle trascrizioni dei campioni di topi miR-146a-/- vs. WT. Infine, studieremo l'effetto dell'eccessiva espressione sistemica del miR-146a su due modelli di topi: I) modello di aterosclerosi in cui studieremo la regressione della placca dopo 16 settimane di dieta grassa e (ii) riduzione della trombosi arteriosa nel modello di trombosi carotide indotta dal FeCl3d (Italian)
16 January 2022
0 references
Το MIR-146a, ένα miRNA που εκφράζεται κυρίως σε φλεγμονώδη κύτταρα, θα μπορούσε να διαδραματίσει ενεργό ρόλο στην ανάπτυξη αθηροθρομβωτικών διεργασιών. Οι στόχοι αυτού του έργου είναι (i) ο προσδιορισμός του ρόλου της miR-146a στη διαδικασία NETosis και ο τρόπος rs2431697, miR-SNP που υπάρχει στο γονίδιο που κωδικοποιεί αυτό το miRNA και το οποίο μειώνει τα επίπεδά του, μπορεί να επηρεάσει την ανάπτυξη θρόμβωσης σε ασθενείς με προθρομβωτική παθολογία, (ii) να διερευνήσει τη συμβολή της miR-146a ως συνδέσμου μεταξύ NETosis και θρόμβωσης και, τέλος, να αξιολογήσει τη δυνητική θεραπευτική δράση της miR-146a στην αθηροθρόμβωση. Για να γίνει αυτό, θα αναλύσουμε την επίδραση της ανεπάρκειας mir-146a στην εγγενή ικανότητα των ουδετερόφιλων να σχηματίσουν NET χρησιμοποιώντας ένα ελλιπές μοντέλο μυϊκής ουσίας για αυτό το miRNA και επίσης ένα ανθρώπινο κυτταρικό μοντέλο ελλιπές σε miR-146a που παράγεται από το CRISPR-cas9. Θα αξιολογήσουμε διαφορετικούς δείκτες NETosis (DNA, λιθόλιθος 3 cytrulinated) μετά την ενεργοποίηση των ουδετερόφιλων που καθαρίζονται με PMA. Θα μελετήσουμε την επίδραση του rs2431697 στο σχηματισμό του NET στα ουδετερόφιλα σε ασθενείς με κολπική μαρμαρυγή και σε ασθενείς με ρευματοειδή αρθρίτιδα. Θα διενεργήσουμε μελέτες συσχέτισης μεταξύ των δεικτών πλάσματος της NETosis (DNA, ελαστάση, μυελοπεροξειδάση, ROS) και της παρουσίας rs2431697 στην ανάπτυξη θρομβωτικών συμβάντων σε αυτές τις κοόρτες. Θα αξιολογήσουμε τη λειτουργία των αιμοπεταλίων σε ποντίκια με ανεπάρκεια miR-146a και τον αντίκτυπο στον σχηματισμό in vivo NET σε ποντίκια miR-146a-/- και σε ασθενείς. Θα διερευνήσουμε νέους στόχους miR-146a στα αιμοπετάλια και τα ουδετερόφιλα που εμπλέκονται στον σχηματισμό του NET από το RNA-seq συγκρίνοντας την έκφραση των μεταγραφών από δείγματα ποντικιών miR-146a-/- έναντι WT. Τέλος, θα μελετήσουμε την επίδραση της συστημικής υπερέκφρασης της miR-146a σε δύο μοντέλα ποντικιών: (I) μοντέλο αθηροσκλήρωσης όπου θα μελετήσουμε την παλινδρόμηση της πλάκας μετά από 16 εβδομάδες δίαιτας λίπους και (ii) μείωση της αρτηριακής θρόμβωσης στο μοντέλο θρόμβωσης της καρωτίδας που προκαλείται από FeCl3d (Greek)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, en miRNA udtrykt mest i inflammatoriske celler, kunne spille en aktiv rolle i udviklingen af aterotrombotiske processer. Formålet med dette projekt er (i) at bestemme miR-146a's rolle i NETosis-processen, og hvordan rs2431697, miR-SNP, der er til stede i det gen, der indkoder dette miRNA, og som reducerer dets niveauer, kan påvirke udviklingen af trombose hos patienter med protrombotisk patologi, (ii) undersøge bidraget fra miR-146a blodplade som en nexus mellem NETose og trombose og endelig vurdere den potentielle terapeutiske virkning af miR-146a ved aterotrombose. For at gøre dette vil vi analysere virkningen af mir-146a mangel på neutrofilers iboende evne til at danne NET ved hjælp af en mangelfuld murin model for denne miRNA og også en menneskelig cellemodel mangelfuld i miR-146a genereret af CRISPR-cas9. Vi vil evaluere forskellige markører for NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) efter aktivering af neutrofiler renset med PMA. Vi vil undersøge virkningen af rs2431697 på dannelsen af NET hos neutrofiler hos patienter med atrieflimren og patienter med reumatoid arthritis. Vi vil gennemføre associationsundersøgelser mellem plasmamarkører for NETose (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) og tilstedeværelsen af rs2431697 i udviklingen af trombotiske hændelser i disse kohorter. Vi vil vurdere trombocytfunktionen hos miR-146a mangelfulde mus og virkningen på in vivo NET dannelse i miR-146a-/- mus og hos patienter. Vi vil undersøge nye miR-146a mål i blodplader og neutrofiler involveret i dannelsen af NET ved RNA-seq ved at sammenligne ekspressionen af udskrifter fra miR-146a-/- vs. WT mus prøver. Endelig vil vi undersøge effekten af systemisk overekspression af miR-146a på to modeller af mus: Åreforkalkning model, hvor vi vil studere plak regression efter 16 ugers fedt kost og (ii) reduktion af arteriel trombose i FeCl3d-induceret carotid trombose model (Danish)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, joka on lähinnä tulehdussoluissa ilmaistu miRNA, voi olla aktiivinen rooli aterotromboottisten prosessien kehittämisessä. Tämän hankkeen tavoitteena on i) määrittää miR-146a:n rooli NETosis-prosessissa ja miten rs2431697, miR-SNP esiintyy tätä miRNA:ta koodaavassa geenissä, joka alentaa sen tasoa, voi vaikuttaa tromboosin kehittymiseen potilailla, joilla on protromboottinen patologia, ii) tutkia miR-146a -tromboosin vaikutusta NEToosin ja tromboosin välisenä yhtymäkohtana ja lopuksi arvioida miR-146a: n mahdollista terapeuttista vaikutusta aterotromboosin yhteydessä. Tätä varten analysoimme mir-146a -puutoksen vaikutusta neutrofiilien luontaiseen kykyyn muodostaa NET käyttäen tämän miRNA:n puutteellista hiiren mallia ja myös CRISPR-cas9: n tuottamaa ihmisen solumallia, joka on puutteellinen miR-146a: ssa. Arvioimme erilaisia NETosis-markkereita (DNA, histone 3 sytrulinoitu) PMA: lla puhdistettujen neutrofiilien aktivoinnin jälkeen. Tutkimme rs2431697:n vaikutusta NET:n muodostumiseen neutrofiilien hoidossa eteisvärinäpotilailla ja nivelreumapotilailla. Teemme NEToosin plasmamarkkerien (DNA, elastaasi, myeloperoksidaasi, ROS) ja rs2431697:n välisiä yhteystutkimuksia näiden kohorttien tromboottisten tapahtumien kehittymisessä. Arvioimme verihiutaleiden toimintaa miR-146a-puutteisilla hiirillä ja vaikutusta in vivo NET -muodostukseen miR-146a-/- hiirillä ja potilailla. Tutkimme uusia miR-146a-kohteita verihiutaleissa ja neutrofiilit, jotka osallistuvat NET: n muodostumiseen RNA-seq:n avulla vertaamalla miR-146a-/- vs. WT hiirnäytteiden transkriptioiden ilmentymistä. Lopuksi tutkimme miR-146a: n systeemisen yliilmaisun vaikutusta kahteen hiirmalliin: I) ateroskleroosimalli, jossa tutkimme plakin regressiota 16 viikon rasvaruokavalion jälkeen ja ii) valtimotromboosin vähenemistä FeCl3d-indusoimassa karotiditromboosimallissa (Finnish)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNA espressa l-aktar f’ċelluli infjammatorji, jista’ jkollha rwol attiv fl-iżvilupp ta’ proċessi aterotrombotiċi. L-għanijiet ta’ dan il-proġett huma (i) li jiddetermina r-rwol ta’ miR-146a fil-proċess ta’ NETosis u kif rs2431697, miR-SNP preżenti fil-ġene li jikkodifika din il-miRNA u li jnaqqas il-livelli tagħha, jista’ jinfluwenza l-iżvilupp ta’ trombożi f’pazjenti b’patoloġija protrombotika, (ii) jinvestiga l-kontribuzzjoni tal-plejtlits miR-146a bħala rabta bejn in-NETosis u t-trombożi u finalment jevalwa l-azzjoni terapewtika potenzjali ta’ miR-146a f’aterotrombożi. Biex nagħmlu dan, se nanalizzaw l-effett tan-nuqqas mir-146a fuq il-kapaċità intrinsika tan-newtrofili li jiffurmaw NET bl-użu ta’ mudell murine defiċjenti għal din il-miRNA u wkoll mudell ta’ ċelloli tal-bniedem defiċjenti f’miR-146a ġġenerat minn CRISPR-cas9. Aħna se nevalwaw markaturi differenti ta ‘NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) wara l- attivazzjoni ta’ newtrofili ppurifikati b’ PMA. Se nistudjaw l-impatt ta’ rs2431697 fuq il-formazzjoni ta’ NET fin-newtrofili f’pazjenti b’fibrillazzjoni atrijali u pazjenti b’artrite rewmatojde. Aħna ser inwettqu studji ta ‘assoċjazzjoni bejn markaturi tal- plażma ta’ NETosis (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) u l- preżenza ta ‘rs2431697 fl- iżvilupp ta’ avvenimenti trombotiċi f’ dawn il- koorti. Aħna ser nivvalutaw il-funzjoni tal-plejtlits fi ġrieden b’defiċjenza ta’ miR-146a u l-impatt fuq il-formazzjoni NET in vivo fil-ġrieden miR-146a-/- u fil-pazjenti. Se ninvestigaw miri ġodda ta’ miR-146a fil-plejtlits u n-newtrofili involuti fil-formazzjoni ta’ NET mill-RNA-seq billi nqabblu l-espressjoni tat-traskrizzjonijiet minn kampjuni ta’ ġrieden miR-146a-/- vs. WT. Fl-aħħar nett, se nistudjaw l-effett ta’ espressjoni żejda sistemika ta’ miR-146a fuq żewġ mudelli ta’ ġrieden: (I) mudell ta’ aterosklerożi fejn ser nistudjaw ir-rigressjoni tal-plakka wara 16-il ġimgħa ta’ dieta ta’ xaħam u (ii) tnaqqis ta’ trombożi arterjali fil-mudell tat-trombożi karotid indotta minn FeCl3d (Maltese)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNS, kas galvenokārt izpaužas iekaisuma šūnās, varētu aktīvi piedalīties aterotrombotisko procesu attīstībā. Šā projekta mērķi ir i) noteikt miR-146a lomu NETozes procesā un to, kā rs2431697, miR-SNP ir gēnā, kas kodē šo miRNS un kas samazina tā līmeni, var ietekmēt trombozes attīstību pacientiem ar protrombotisku patoloģiju, ii) pētīt miR-146a trombocītu kā saiknes starp NETozi un trombozi devumu un visbeidzot novērtēt miR-146a terapeitisko iedarbību aterotrombozes gadījumā. Lai to izdarītu, mēs analizēsim mir-146a deficīta ietekmi uz neitrofilo leikocītu iekšējo spēju veidot NET, šim miRNS izmantojot nepilnīgu peļu modeli, kā arī CRISPR-cas9 radītajam cilvēka šūnu modelim ar trūkumiem miR-146a. Mēs izvērtēsim dažādus NETozes marķierus (DNS, histone 3 cytrulinated) pēc ar PMA attīrītu neitrofilu aktivācijas. Mēs pētīsim rs2431697 ietekmi uz NET veidošanos neitrofilo leikocītos pacientiem ar priekškambaru mirdzēšanu un pacientiem ar reimatoīdo artrītu. Mēs veiksim asociācijas pētījumus starp NETozes plazmas marķieriem (DNS, elastāze, mieloperoksidāze, ROS) un rs2431697 klātbūtni trombotisku notikumu attīstībā šajās kohortās. Mēs novērtēsim trombocītu funkciju ar miR-146a deficītu pelēm un ietekmi uz in vivo NET veidošanos miR-146a-/- pelēm un pacientiem. Mēs izmeklēsim jaunus miR-146a mērķus trombocītiem un neitrofiliem, kas iesaistīti NET veidošanā ar RNS-seq, salīdzinot stenogrammu izteiksmi no miR-146a-/- pret WT pelēm. Visbeidzot, mēs pētīsim miR-146a sistēmiskās pārmērīgas ekspresijas ietekmi uz diviem pelēm: (I) aterosklerozes modelis, kurā mēs pētīsim perēkļveida regresiju pēc 16 nedēļu ilgas tauku diētas un ii) arteriālās trombozes samazināšanos FeCl3d izraisītās karotiskās trombozes modelī (Latvian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNA vyjadrená väčšinou v zápalových bunkách, by mohla zohrávať aktívnu úlohu pri vývoji aterotrombotických procesov. Cieľom tohto projektu je (i) určiť úlohu miR-146a v procese NETosis a ako rs2431697, miR-SNP prítomný v géne, ktorý kóduje túto miRNA a ktorý znižuje jej hladiny, môže ovplyvniť vývoj trombózy u pacientov s protrombotickej patológie, (ii) skúmať prínos miR-146a krvných doštičiek ako nexus medzi NETosis a trombózou a nakoniec vyhodnotiť potenciálny terapeutický účinok miR-146a pri aterotrombóze. Na tento účel budeme analyzovať vplyv nedostatku mir-146a na vnútornú schopnosť neutrofilov tvoriť NET pomocou nedostatočného myšieho modelu pre túto miRNA a tiež s nedostatkom ľudského bunkového modelu v miR-146a generovanom CRISPR-cas9. Po aktivácii neutrofilov očistených s PMA vyhodnotíme rôzne markery NETosis (DNA, histón 3 cytrulinated). Budeme skúmať vplyv rs2431697 na tvorbu NET u neutrofilov u pacientov s fibriláciou predsiení a u pacientov s reumatoidnou artritídou. Uskutočníme asociačné štúdie medzi plazmatickými markermi NETózy (DNA, elastáza, myeloperoxidáza, ROS) a prítomnosťou rs2431697 vo vývoji trombotických príhod v týchto kohortách. Zhodnotíme funkciu krvných doštičiek u myší s nedostatkom miR-146a a vplyv na tvorbu NET in vivo u myší miR-146a-/- a u pacientov. Preskúmame nové ciele miR-146a v krvných doštičkách a neutrofiloch podieľajúcich sa na tvorbe NET RNA-seq porovnaním expresie transkriptov z miR-146a-/- vs. WT vzoriek myší. Nakoniec budeme študovať účinok systémovej nadmernej expresie miR-146a na dva modely myší: (I) model aterosklerózy, kde budeme študovať regresiu plaku po 16 týždňoch tučnej diéty a (ii) zníženie arteriálnej trombózy v modeli karotickej trombózy vyvolanej FeCl3d (Slovak)
17 August 2022
0 references
D’fhéadfadh Mir-146ú, miRNA a léirítear i gcealla athlastacha den chuid is mó, ról gníomhach a imirt i bhforbairt próiseas atherothrombotic. Is iad cuspóirí an tionscadail seo (i) ról miR-146ú sa phróiseas netosis a chinneadh agus an chaoi a bhfuil rs2431697, miR-SNP sa ghéin a ionchódaíonn an miRNA seo agus a laghdaíonn a leibhéil, tionchar a imirt ar fhorbairt thrombóis in othair a bhfuil paiteolaíocht pro-thrombotic acu, (ii) imscrúdú a dhéanamh ar rannchuidiú miR-146ú mar nasc idir netosis agus thrombosis agus ar deireadh meastóireacht a dhéanamh ar ghníomhaíocht theiripeach féideartha miR-146ú in atherothrombosis. Chun seo a dhéanamh, déanfaimid anailís ar éifeacht easnamh mir-146ú ar chumas intreach neutrophils chun NET a fhoirmiú ag baint úsáide as samhail murine easnamhach don miRNA seo agus freisin samhail cille daonna easnamhach i miR-146ú a ghineann CRISPR-cas9. Déanfaimid meastóireacht marcóirí éagsúla de netosis (DNA, histone 3 citrilinated) tar éis gníomhachtú neutrophils íonaithe le PMA. Déanfaimid staidéar ar thionchar rs2431697 ar fhoirmiú NET i neutrophils in othair a bhfuil fibrillation atrial agus othair a bhfuil airtríteas réamatóideach acu. Déanfaimid staidéir chomhlachais idir marcóirí plasma netosis (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) agus rs2431697 i bhforbairt imeachtaí thrombotic sna cohóirt seo. Déanfaimid measúnú ar fheidhm pláitíní i miR-146ú lucha easnamhacha agus an tionchar ar fhoirmiú in vivo NET i miR-146ú-/- lucha agus in othair. Déanfaimid imscrúdú ar spriocanna nua miR-146ú i pláitíní agus neutrophils a bhfuil baint acu le foirmiú NET ag RNA-seq trí chomparáid a dhéanamh idir léiriú tras-scríbhinní ó miR-146ú-/- vs. samplaí lucha WT. Ar deireadh, déanfaimid staidéar ar éifeacht ró-léiriú córasach miR-146ú ar dhá mhúnla lucha: (I) Atherosclerosis samhail nuair a bheidh muid ag staidéar aischéimnithí plaic tar éis 16 seachtaine d’aiste bia saille agus (ii) laghdú thrombosis artaireach i múnla thrombosis FeCl3ú-spreagtha carotid (Irish)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNA vyjádřená převážně ve zánětlivých buňkách, by mohla hrát aktivní roli ve vývoji atherothrombotických procesů. Cílem tohoto projektu je (i) určit úlohu miR-146a v procesu NETózy a jak rs2431697, miR-SNP přítomná v genu, který kóduje tuto miRNA a která snižuje její hladiny, může ovlivnit vývoj trombózy u pacientů s protrombotickou patologií, ii) zkoumat přínos miR-146a krevních destiček jako spojitost mezi NETózou a trombózou a nakonec vyhodnotit potenciální terapeutický účinek miR-146a při aterothrombóze. Za tímto účelem budeme analyzovat vliv nedostatku mir-146a na vnitřní schopnost neutrofilů tvořit NET pomocí chybějícího myrového modelu pro tuto miRNA a také modelu lidských buněk s nedostatkem miR-146a generovaného CRISPR-cas9. Vyhodnotíme různé markery NETózy (DNA, histon 3 cytrulinované) po aktivaci neutrofilů čištěných PMA. Budeme zkoumat vliv rs2431697 na tvorbu NET u neutrofilů u pacientů s fibrilací síní a u pacientů s revmatoidní artritidou. Provedeme asociační studie mezi plazmatickými markery NETózy (DNA, elastáza, myeloperoxidáza, ROS) a přítomností rs2431697 ve vývoji trombotických příhod v těchto kohortách. Posoudíme funkci krevních destiček u myší s nedostatkem miR-146a a vliv na tvorbu in vivo NET u miR-146a-/- myší a u pacientů. Budeme zkoumat nové miR-146a cíle v krevních destičkách a neutrofilech zapojených do tvorby NET RNA-seq porovnáním exprese transkriptů z miR-146a-/- vs. WT myších vzorků. Nakonec budeme zkoumat vliv systémové nadměrné exprese miR-146a na dva modely myší: (I) model aterosklerózy, kde budeme studovat regresi plaku po 16 týdnech diety tuku a (ii) snížení arteriální trombózy u modelu karotické trombózy indukované FeCl3d (Czech)
17 August 2022
0 references
O MIR-146a, um miRNA expresso principalmente em células inflamatórias, poderia desempenhar um papel ativo no desenvolvimento de processos aterotrombóticos. Os objetivos deste projeto são (i) determinar o papel do miR-146a no processo de NETosis e como rs2431697, miR-SNP presente no gene que codifica este miRNA e que reduz seus níveis, pode influenciar o desenvolvimento de trombose em pacientes com patologia pró-trombótica, (ii) investigar a contribuição da plaqueta miR-146a como um nexo entre NETosis e trombose e, finalmente, avaliar a potencial ação terapêutica do miR-146a na aterotrombose. Para isso, analisaremos o efeito da deficiência de mir-146a na capacidade intrínseca de neutrófilos para formar NET usando um modelo murino deficiente para esse miRNA e também um modelo de célula humana deficiente em miR-146a gerado por CRISPR-cas9. Avaliaremos diferentes marcadores de NETosis (ADN, histona 3 citrulinizada) após ativação de neutrófilos purificados com PMA. Estudaremos o impacto do rs2431697 na formação de SNE em neutrófilos em pacientes com fibrilação atrial e pacientes com artrite reumatoide. Realizaremos estudos de associação entre marcadores plasmáticos de NETosis (ADN, elastase, mieloperoxidase, ERO) e a presença de rs2431697 no desenvolvimento de eventos trombóticos nessas coortes. Avaliaremos a função plaquetária em camundongos deficientes miR-146a e o impacto na formação de NET in vivo em camundongos miR-146a-/- e em pacientes. Investigaremos novos alvos miR-146a em plaquetas e neutrófilos envolvidos na formação de NET por RNA-seq comparando a expressão de transcrições de amostras de camundongos miR-146a-/- vs. WT. Finalmente, estudaremos o efeito da superexpressão sistêmica do miR-146a em dois modelos de camundongos: (I) modelo de aterosclerose onde estudaremos a regressão da placa após 16 semanas de dieta gorda e (ii) redução da trombose arterial no modelo de trombose carótida induzida por FeCl3d (Portuguese)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, peamiselt põletikulistes rakkudes väljendatud miRNA, võib etendada aktiivset rolli aterotrombootiliste protsesside arengus. Selle projekti eesmärgid on i) määrata miR-146a roll NEToosiprotsessis ja kuidas rs2431697, miR-SNP sisaldus geenis, mis kodeerib seda miRNA-d ja vähendab selle taset, võib mõjutada tromboosi arengut protrombootilise patoloogiaga patsientidel, ii) uurida miR-146a trombotsüütide panust NEToosi ja tromboosi vahelise seosena ning lõpuks hinnata miR-146a võimalikku terapeutilist toimet aterotromboosile. Selleks analüüsime mir-146a puudulikkuse mõju neutrofiilide sisemisele võimele moodustada NET, kasutades selle miRNA jaoks puudulikku hiiremudelit ja ka inimese rakumudelit, mis on puudulik CRISPR-cas9 loodud miR-146a-s. Pärast PMA-ga puhastatud neutrofiilide aktiveerimist hindame NEToosi erinevaid markereid (DNA, histone 3 cytrulinated). Me uurime rs2431697 mõju NET moodustumisele neutrofiilidel kodade virvenduse ja reumatoidartriidiga patsientidel. Me viime läbi seoseuuringuid NEToosi plasmamarkerite (DNA, elastaas, müeloperoksüdaasi, ROS) ja rs2431697 esinemise vahel tromboosinähtude tekkes nendes kohortides. Me hindame trombotsüütide funktsiooni miR-146a puudulikkusega hiirtel ja mõju in vivo NET moodustumisele miR-146a-/- hiirtel ja patsientidel. Uurime uusi miR-146a sihtmärke trombotsüütide ja neutrofiilide puhul, kes osalevad NET moodustumises RNA-seqi poolt, võrreldes miR-146a-/- vs. WT hiirte proovide transkriptsiooni. Lõpuks uurime miR-146a süsteemse üleekspressiooni mõju kahele hiirte mudelile: I) ateroskleroosi mudel, kus me uurime naastu regressiooni pärast 16-nädalast rasva dieeti ja ii) arteriaalse tromboosi vähenemist FeCl3d-indutseeritud karotiidtromboosi mudelis (Estonian)
17 August 2022
0 references
A MIR-146a, a főként gyulladásos sejtekben kifejezett miRNS aktív szerepet játszhat az aterotrombotikus folyamatok fejlesztésében. A projekt céljai a következők: i. a miR-146a NETosis folyamatában betöltött szerepének meghatározása, valamint annak meghatározása, hogy az rs2431697, miR-SNP jelen van a miRNS kódoló génben, és amely csökkenti annak szintjét, befolyásolhatja a trombózis kialakulását protrombotikus patológiában szenvedő betegeknél, ii. vizsgálja meg a miR-146a thrombocyta hozzájárulását a NETosis és a trombózis közötti kapcsolatként, és végül értékelje a miR-146a lehetséges terápiás hatását az atherothrombosisban. Ehhez elemezni fogjuk a mir-146a hiánynak a neutrofilek belső kapacitására gyakorolt hatását a NET létrehozására a miRNS hiányos murin modellje és a CRISPR-cas9 által generált miR-146a humán sejtmodell segítségével. A PMA-val tisztított neutrofilek aktiválása után értékeljük a NETosis különböző markereit (DNS, histone 3 cytrulinated). Az rs2431697-nek a neutrofilek képződésére gyakorolt hatását pitvarfibrillációban és reumatoid artritiszben szenvedő betegeknél fogjuk tanulmányozni. Asszociációs vizsgálatokat fogunk végezni a NETosis plazma markerei (DNS, elasztáz, myeloperoxidáz, ROS) és az rs2431697 jelenléte között a thromboticus események kialakulásában ezekben a kohorszokban. Értékeljük a miR-146a hiányos egerekben a thrombocyta funkciót és az in vivo NET képződésre gyakorolt hatást miR-146a-/- egerekben és betegekben. Új miR-146a célokat vizsgálunk a NET RNS-seq által történő képződésében részt vevő vérlemezkékben és neutrofilekben, összehasonlítva a miR-146a-/- miR-146a-/- és a WT egerekből származó átiratok expresszióját. Végül megvizsgáljuk a miR-146a szisztémás túlexpressziójának két egerre gyakorolt hatását: I. atherosclerosis modell, ahol 16 hetes zsírtartalmú étrend után fogjuk vizsgálni a plakk regressziót és ii. az artériás trombózis csökkenését FeCl3d-indukált carotis trombózis modellben (Hungarian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNA, изразена предимно в възпалителни клетки, може да играе активна роля в развитието на атеротромботични процеси. Целите на този проект са i) да се определи ролята на miR-146a в процеса на NETosis и как rs2431697, miR-SNP присъства в гена, който кодира тази miRNA и който намалява неговите нива, може да повлияе на развитието на тромбоза при пациенти с протромботична патология, ii) изследва приноса на miR-146a тромбоцит като връзка между нетозата и тромбозата и накрая оценява потенциалното терапевтично действие на miR-146a при атеротромбозата. За да направим това, ще анализираме ефекта на недостиг на Mir-146a върху присъщата способност на неутрофилите да образуват NET с помощта на модел с дефицит на мишината за тази miRNA, както и недостиг на човешки клетъчен модел в miR-146a, генериран от CRISPR-cas9. Ще оценим различните маркери на нетозата (ДНК, хистон 3 цитрулинат) след активиране на неутрофилите, пречистени с PMA. Ще проучим влиянието на rs2431697 върху образуването на NET при неутрофилите при пациенти с предсърдно мъждене и пациенти с ревматоиден артрит. Ще проведем проучвания за свързване между плазмените маркери на нетозата (ДНК, еластаза, миелопероксидаза, ROS) и наличието на rs2431697 в развитието на тромботични събития в тези кохорти. Ще оценим тромбоцитната функция при miR-146a дефицитни мишки и въздействието върху образуването in vivo NET при miR-146a-/- мишки и при пациенти. Ще изследваме нови мишки miR-146a в тромбоцитите и неутрофилите, участващи в образуването на NET от РНК-seq, като сравним експресията на преписи от miR-146a-/-- спрямо проби от WT мишки. И накрая, ще проучим ефекта от системното свръхизразяване на miR-146a върху два модела мишки: I) модел на атеросклероза, при който ще изучаваме регресията на плаката след 16 седмици на диета с мазнини и ii) намаляване на артериалната тромбоза при модел на индуцирана от FeCl3d каротидна тромбоза (Bulgarian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNR, daugiausia išreikšta uždegiminėse ląstelėse, galėtų vaidinti aktyvų vaidmenį kuriant aterotrombozinius procesus. Šio projekto tikslai yra i) nustatyti miR-146a vaidmenį NETozės procese ir kaip rs2431697, miR-SNP yra gene, kuris koduoja šią miRNR ir kuris sumažina jo kiekį, gali turėti įtakos trombozės vystymuisi pacientams, sergantiems trombozine patologija, ii) ištirti miR-146a trombocitų kaip NETozės ir trombozės tarpusavio ryšį ir galiausiai įvertinti galimą terapinį miR-146a poveikį aterotrombozei. Norėdami tai padaryti, mes analizuosime mir-146a trūkumo poveikį vidiniam neutrofilų gebėjimui formuoti NET, naudojant nepakankamą pelių modelį šiai miRNR ir taip pat žmogaus ląstelių modeliui, turinčiam miR-146a, kurį generuoja CRISPR-cas9. Mes įvertinsime skirtingus žymenis NETosis (DNR, histone 3 cytrulinated) po aktyvinimo neutrofilų išgrynintas PMA. Mes tirsime rs2431697 poveikį neutrofilų susidarymui prieširdžių virpėjimu sergantiems pacientams ir pacientams, sergantiems reumatoidiniu artritu. Mes atliksime NETozės (DNR, elastazės, mieloperoksidazės, ROS) plazmos žymenų ir rs2431697 buvimo trombozinių reiškinių šiose kohortose tyrimus. Mes įvertinsime trombocitų funkciją miR-146a pelėms su trūkumais ir poveikį in vivo NET susidarymui miR-146a/- pelėms ir pacientams. Mes tirsime naujus miR-146a taikinius trombocitų ir neutrofilų, dalyvaujančių formuojant NET RNR-seq, lyginant stenogramų iš miR-146a-/- ir WT pelių mėginių išraiška. Galiausiai mes tirsime sisteminio miR-146a raiškos poveikį dviem pelių modeliams: I) aterosklerozės modelis, pagal kurį mes tirsime plokštelių regresiją po 16 savaičių riebalų dietos ir ii) arterijų trombozės sumažėjimą FeCl3d sukeltos miego trombozės modelyje (Lithuanian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNK izražena uglavnom u upalnim stanicama, mogla bi imati aktivnu ulogu u razvoju aterotrombotskih procesa. Ciljevi ovog projekta su (i) odrediti ulogu miR-146a u procesu NETosis i kako rs2431697, miR-SNP prisutan u genu koji kodira ovu miRNK i koji smanjuje njegove razine, može utjecati na razvoj tromboze u bolesnika s protrombotskom patologijom, (ii) istražiti doprinos trombocita miR-146a kao neksusa između NEToze i tromboze te konačno procijeniti potencijalno terapijsko djelovanje miR-146a u aterotrombozi. Da bismo to učinili, analizirat ćemo učinak nedostatka mir-146a na intrinzični kapacitet neutrofila da formiraju NET pomoću manjkavog modela murina za ovu miRNA i također manjkavog modela ljudskih stanica u miR-146a koji generira CRISPR-cas9. Procijenit ćemo različite markere NETosis (DNK, histon 3 citrulinirani) nakon aktivacije neutrofila pročišćenih s PMA. Proučavat ćemo utjecaj rs2431697 na stvaranje NET-a kod neutrofila u bolesnika s fibrilacijom atrija i bolesnika s reumatoidnim artritisom. Provest ćemo asocijacijska ispitivanja između plazmatskih markera NEToze (DNK, elastaze, mijelooperoksidaze, ROS-a) i prisutnosti rs2431697 u razvoju trombotičkih događaja u tim kohortama. Procijenit ćemo funkciju trombocita u miševa s nedostatkom miR-146a i utjecaj na stvaranje in vivo NET-a u miR-146a-/- miševa i u bolesnika. Istražit ćemo nove ciljeve miR-146a u trombocita i neutrofila koji su uključeni u formiranje NET-a pomoću RNA-seqa usporedbom ekspresije transkripta iz uzoraka miševa miR-146a/- naspram WT. Konačno, proučavat ćemo učinak sistemske prekomjerne ekspresije miR-146a na dva modela miševa: (I) model ateroskleroze gdje ćemo proučavati regresiju plaka nakon 16 tjedana masne prehrane i (ii) smanjenje arterijske tromboze u FeCl3d-induciranom modelu karotidne tromboze (Croatian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, en miRNA uttryckt främst i inflammatoriska celler, kan spela en aktiv roll i utvecklingen av aterotrombotiska processer. Syftet med detta projekt är (i) att fastställa miR-146a roll i NETosis-processen och hur rs2431697, miR-SNP finns i genen som kodar detta miRNA och som minskar dess nivåer, kan påverka utvecklingen av trombos hos patienter med protrombotisk patologi, (ii) undersöka bidraget av miR-146a trombocyter som en nexus mellan NETos och trombos och slutligen utvärdera den potentiella terapeutiska effekten av miR-146a vid aterotrombos. För att göra detta kommer vi att analysera effekten av mir-146a-brist på neutrofilernas inneboende kapacitet att bilda NET med hjälp av en bristfällig murinmodell för detta miRNA och även en mänsklig cellmodell bristfällig i miR-146a som genereras av CRISPR-cas9. Vi kommer att utvärdera olika markörer av NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) efter aktivering av neutrofiler renade med PMA. Vi kommer att studera effekten av rs2431697 på bildandet av NET hos neutrofiler hos patienter med förmaksflimmer och patienter med reumatoid artrit. Vi kommer att genomföra sambandsstudier mellan plasmamarkörer av NETosis (DNA, elastas, myeloperoxidas, ROS) och närvaron av rs2431697 i utvecklingen av trombotiska händelser i dessa kohorter. Vi kommer att bedöma trombocytfunktionen hos miR-146a bristfälliga möss och effekten på in vivo NET-bildning i miR-146a-/-möss och hos patienter. Vi kommer att undersöka nya miR-146a-mål i trombocyter och neutrofiler som är involverade i bildandet av NET av RNA-seq genom att jämföra uttrycket av transkript från miR-146a-/- vs. WT-mössprov. Slutligen kommer vi att studera effekten av systemiskt överuttryck av miR-146a på två modeller av möss: (I) aterosklerosmodell där vi kommer att studera plackregression efter 16 veckors fettdiet och (ii) minskning av arteriell trombos i FeCl3d-inducerad karotidtrombosmodell (Swedish)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, un miARN exprimat în principal în celulele inflamatorii, ar putea juca un rol activ în dezvoltarea proceselor aterotrombotice. Obiectivele acestui proiect sunt (i) determinarea rolului miR-146a în procesul NETosis și modul în care rs2431697, miR-SNP prezent în gena care codifică acest miARN și care reduce nivelurile sale, poate influența dezvoltarea trombozei la pacienții cu patologie protrombotică, (ii) investighează contribuția trombocitelor miR-146a ca o legătură între NEToză și tromboză și, în cele din urmă, evaluează acțiunea terapeutică potențială a miR-146a în aterotromboză. Pentru a face acest lucru, vom analiza efectul deficienței mir-146a asupra capacității intrinsece a neutrofilelor de a forma NET folosind un model murine deficitar pentru acest miARN și, de asemenea, un model de celule umane deficitar în miR-146a generat de CRISPR-cas9. Vom evalua diferiți markeri ai NETosis (ADN, histone 3 cytrulinated) după activarea neutrofilelor purificate cu PMA. Vom studia impactul rs2431697 asupra formării NET la neutrofile la pacienții cu fibrilație atrială și la pacienții cu artrită reumatoidă. Vom efectua studii de asociere între markerii plasmatici ai NETosis (ADN, elastază, mieloperoxidază, ROS) și prezența rs2431697 în dezvoltarea evenimentelor trombotice în aceste cohorte. Vom evalua funcția plachetară la șoarecii cu deficiențe miR-146a și impactul asupra formării NET in vivo la miR-146a-/- șoareci și la pacienți. Vom investiga noi ținte miR-146a în trombocitele și neutrofilele implicate în formarea NET de către ARN-seq, comparând expresia transcripțiilor din probele miR-146a-/- vs. WT șoareci. În cele din urmă, vom studia efectul supraexpresiei sistemice a miR-146a asupra a două modele de șoareci: (I) modelul aterosclerozei în care vom studia regresia plăcii după 16 săptămâni de dietă grasă și (ii) reducerea trombozei arteriale în modelul trombozei carotide induse de FeCl3d (Romanian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNA, izražena predvsem v vnetnih celicah, bi lahko imela aktivno vlogo pri razvoju aterotrombotičnih procesov. Cilji tega projekta so (i) določiti vlogo miR-146a v procesu NETosis in kako rs2431697, miR-SNP prisoten v genu, ki kodira to miRNA in ki zmanjšuje njene ravni, lahko vpliva na razvoj tromboze pri bolnikih s protrombotično patologijo, (ii) razišče prispevek miR-146a trombocitov kot povezave med NETozo in trombozo ter končno oceni morebitno terapevtsko delovanje miR-146a pri aterotrombozi. Da bi to naredili, bomo analizirali učinek pomanjkanja mir-146a na intrinzično sposobnost nevtrofilcev, da tvorijo NET z uporabo pomanjkljivega mironskega modela za to miRNA in tudi modela človeške celice, ki je pomanjkljiv pri miR-146a, ki ga ustvari CRISPR-cas9. Po aktivaciji nevtrofilcev, prečiščenih s PMA, bomo ocenili različne označevalce NEToze (DNA, histon 3 cytrulinated). Preučili bomo vpliv rs2431697 na nastanek NET pri nevtrofilcih pri bolnikih z atrijsko fibrilacijo in bolnikih z revmatoidnim artritisom. Izvedli bomo povezovalne študije med plazemskimi označevalci NEToze (DNA, elastaza, mieloperoksidaza, ROS) in prisotnostjo rs2431697 pri razvoju trombotičnih dogodkov v teh kohortah. Ocenili bomo delovanje trombocitov pri miših s pomanjkanjem miR-146a in vpliv na nastanek NET in vivo pri miR-146a/- miših in pri bolnikih. Raziskali bomo nove tarče miR-146a v trombocitih in nevtrofilcih, ki sodelujejo pri tvorbi NET z RNA-seq, s primerjavo izražanja transkriptov iz vzorcev miR-146a-/- in WT vzorcev miši. Na koncu bomo preučili učinek sistemskega prekomernega izražanja miR-146a na dva modela miši: (I) model ateroskleroze, pri katerem bomo preučevali regresijo plakov po 16 tednih maščobne diete in (ii) zmanjšanje arterijske tromboze v modelu karotidne tromboze, ki ga povzroča FeCl3d (Slovenian)
17 August 2022
0 references
MIR-146a, miRNA wyrażona głównie w komórkach zapalnych, może odgrywać aktywną rolę w rozwoju procesów miażdżycowych. Celem tego projektu jest (i) określenie roli miR-146a w procesie NETosis oraz w jaki sposób rs2431697, miR-SNP obecny w genie, który koduje ten miRNA i który obniża jego poziom, może wpływać na rozwój zakrzepicy u pacjentów z patologią prozambiczną, (ii) zbadać udział miR-146a płytek jako związku między NETosis a zakrzepicą i wreszcie ocenić potencjalne działanie terapeutyczne miR-146a w mirotrombozie. Aby to zrobić, przeanalizujemy wpływ niedoboru mir-146a na wewnętrzną zdolność neutrofilów do tworzenia NET przy użyciu wadliwego modelu myszki dla tego miRNA, a także niedoboru ludzkiego modelu komórek w miR-146a generowanego przez CRISPR-cas9. Ocenimy różne markery NETozy (DNA, histone 3 cytrulinowane) po aktywacji neutrofilów oczyszczonych PMA. Zbadamy wpływ rs2431697 na powstawanie NET u neutrofilów u pacjentów z migotaniem przedsionków i pacjentów z reumatoidalnym zapaleniem stawów. Przeprowadzimy badania skojarzeń pomiędzy markerami osocza NETozy (DNA, elastaza, mieloperoksydaza, ROS) a obecnością rs2431697 w rozwoju zdarzeń zakrzepowych w tych kohortach. Ocenimy czynność płytek u myszy z niedoborem miR-146a oraz wpływ na formację in vivo NET u myszy miR-146a-/- oraz u pacjentów. Zbadamy nowe cele miR-146a w płytkach i neutrofilach biorących udział w tworzeniu NET przez RNA-seq poprzez porównanie ekspresji transkryptów z próbek myszy miR-146a-/- vs. WT. Na koniec zbadamy wpływ ogólnoustrojowej nadekspresji miR-146a na dwa modele myszy: (I) model miażdżycy, w którym będziemy badać regresję płytki nazębnej po 16 tygodniach diety tłuszczowej oraz (ii) zmniejszenie zakrzepicy tętnic w modelu zakrzepicy szyjnej wywołanej przez FeCl3d (Polish)
17 August 2022
0 references
Murcia
0 references
20 December 2023
0 references
Identifiers
PI17_00051
0 references