DEVELOPMENT OF TOOLS FOR THE STUDY OF GENICAS FUNCTIONS INVOLVED IN THE REGULATION OF POLYPHENISMS IN APHIDS (Q3190938)

From EU Knowledge Graph
Revision as of 17:32, 7 March 2024 by DG Regio (talk | contribs) (‎Added qualifier: readability score (P590521): 0.4216738672873599)
Jump to navigation Jump to search
Project Q3190938 in Spain
Language Label Description Also known as
English
DEVELOPMENT OF TOOLS FOR THE STUDY OF GENICAS FUNCTIONS INVOLVED IN THE REGULATION OF POLYPHENISMS IN APHIDS
Project Q3190938 in Spain

    Statements

    0 references
    57,055.98 Euro
    0 references
    104,786.0 Euro
    0 references
    54.45 percent
    0 references
    1 January 2019
    0 references
    30 September 2022
    0 references
    UNIVERSIDAD DE VALENCIA
    0 references

    39°31'49.15"N, 0°26'46.54"W
    0 references
    46980
    0 references
    LOS PULGONES SON INSECTOS CHUPADORES DE SAVIA DE LAS PLANTAS CONOCIDOS INTERNACIONALMENTE POR LAS PERDIDAS ECONOMICAS QUE ALGUNAS ESPECIES PLAGA PROVOCAN COMO CONSECUENCIA DE SU PRESENCIA EN LOS CULTIVOS. ADEMAS, LOS PULGONES PRESENTAN UNA SERIE DE CARACTERISTICAS EN SUS CICLOS DE VIDA QUE LOS HACE PARTICULARMENTE INTERESANTES PARA EL ESTUDIO DE DIFERENTES ASPECTOS DE SU BIOLOGIA, COMO SON LOS VARIADOS POLIFENISMOS EXHIBIDOS. DESDE EL AÑO 2010 SE ENCUENTRA DISPONIBLE PARA LA COMUNIDAD CIENTIFICA EL GENOMA DEL PULGON MODELO ACYRTHOSIPHON PISUM. LA DISPONIBILIDAD DE ESTE Y OTROS GENOMAS ES CRUCIAL PARA ABORDAR EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES QUE CONTROLAN DIFERENTES ASPECTOS DE LA BIOLOGIA DE ESTOS INSECTOS. COMO RESULTADO DE NUESTRAS INVESTIGACIONES PREVIAS, HEMOS IDENTIFICADO Y CARACTERIZADO UNA BATERIA DE GENES CANDIDATOS A PARTICIPAR EN EL CONTROL DE LA INDUCCION DE LA FASE SEXUAL (EQUIVALENTE A LA DIAPAUSA DE OTROS INSECTOS) EN PULGONES. TAMBIEN HEMOS IDENTIFICADO GENES APARENTEMENTE IMPLICADOS EN UN POLIFENISMO RELACIONADO CON LA MIRMECOFILIA EN EL PULGON PARACLETUS CIMICIFORMIS. SIN EMBARGO, LA PARTICIPACION DE ALGUNOS DE ESTOS GENES EN LOS POLIFENISMOS MENCIONADOS NO HA QUEDADO TODAVIA DEMOSTRADA POR LA CARENCIA DE UN METODO ROBUSTO QUE PERMITA EL ESTUDIO DE FUNCIONES GENICAS EN PULGONES, LO QUE CONDICIONA EL AVANCE EN ESTOS ESTUDIOS. UNA HERRAMIENTA UTIL EN LA CARACTERIZACION DE FUNCIONES GENICAS, QUE EN OTROS INSECTOS SE VIENE UTILIZANDO CON EXITO, ES EL SILENCIAMIENTO GENICO MEDIANTE RNA DE INTERFERENCIA (RNAI). ALGUNOS TRABAJOS HAN PUESTO DE MANIFIESTO LA DIFICULTAD DE IMPLEMENTAR RNAI EN PULGONES USANDO LAS TECNICAS HABITUALES BASADAS EN PROPORCIONAR UN DSRNA COMPLEMENTARIO DE UN FRAGMENTO DEL GEN A SILENCIAR A TRAVES DE DIETAS ARTIFICIALES O MEDIANTE MICROINYECCION. LA METODOLOGIA CRISPR/CAS TAMBIEN SE ESTA USANDO CON EXITO EN ESTUDIOS SOBRE FUNCIONES GENICAS DE DIFERENTES INSECTOS. EN ESTE PROYECTO PLANTEAMOS EL DESARROLLO DE DOS TIPOS DE HERRAMIENTAS PARA ESTUDIAR FUNCIONES GENICAS EN PULGONES. POR UN LADO, SE PLANTEA DESARROLLAR UNA METODOLOGIA RNAI ALTERNATIVA. SE TRATA DE GARANTIZAR EL SUMINISTRO CONTINUO DEL DSRNA NECESARIO PARA ACTIVAR EL RNAI MEDIANTE SU INCLUSION EN UN VIRUS VEGETAL QUE INFECTA A LA PLANTA DE LA QUE EL PULGON SE ALIMENTA DE MANERA NATURAL. ESTA TECNICA, DENOMINADA VIGS (VIRUS INDUCED GENE SILENCING), ES UNA HERRAMIENTA UTILIZADA EN EL SILENCIAMIENTO DE GENES DE PLANTAS. EN SEGUNDO LUGAR, PRETENDEMOS DESARROLLAR LA METODOLOGIA CRISPR/CAS EN PULGONES. ADEMAS DE INVESTIGAR LA EXTENSION DE ESTAS TECNICAS A LOS PULGONES, INVESTIGAREMOS EL PAPEL DE LOS GENES CANDIDATOS QUE HEMOS IDENTIFICADO HASTA LA FECHA EN LOS PROCESOS EN LOS QUE PRESUNTAMENTE PARTICIPAN. DE MANERA COLATERAL, EVALUAREMOS LA UTILIDAD DEL SILENCIAMIENTO DE GENES DE LA RUTA DE SINTESIS DE CAROTENOIDES, EXCLUSIVOS DE PULGONES, EN EL CONTROL DE SUS POBLACIONES. EL EXITO DEL PROYECTO PROPORCIONARA HERRAMIENTAS PARA ESTUDIAR NUMEROSOS GENES DE INTERES ASI COMO UNA POSIBLE NUEVA ESTRATEGIA SEGURA DE LUCHA CONTRA ESPECIES PLAGA BASADA EN PLANTAS TRANSGENICAS PARA FRAGMENTOS DE GENES DE PULGONES. (Spanish)
    0 references
    APHIDS ARE PLANT SAP-SUCKING INSECTS KNOWN WORLDWIDE FOR THE ECONOMIC LOSSES CAUSED BY SOME PEST SPECIES AS A RESULT OF THEIR PRESENCE IN CROP PLANTS. IN ADDITION, APHIDS HAVE A NUMBER OF CHARACTERISTICS IN THEIR LIFE CYCLES THAT MAKE THEM PARTICULARLY INTERESTING TO STUDY DIFFERENT ASPECTS OF THEIR BIOLOGY, SUCH AS THE VARIOUS POLYPHENISMS DISPLAYED. SINCE 2010 THE GENOME OF THE MODEL APHID ACYRTHOSIPHON PISUM IS AVAILABLE TO THE SCIENTIFIC COMMUNITY. THE AVAILABILITY OF THIS AND OTHER GENOMES IS CRUCIAL FOR THE STUDY OF THE MOLECULAR MECHANISMS THAT CONTROL DIFFERENT ASPECTS OF THE BIOLOGY OF THESE INSECTS. AS A RESULT OF OUR PREVIOUS INVESTIGATIONS, WE HAVE IDENTIFIED AND CHARACTERIZED A BATTERY OF CANDIDATE GENES TO PARTICIPATE IN THE CONTROL OF THE INDUCTION OF THE SEXUAL PHASE (EQUIVALENT TO THE DIAPAUSE OF OTHER INSECTS) IN APHIDS. WE HAVE ALSO IDENTIFIED GENES APPARENTLY IMPLICATED IN A POLYPHENISM RELATED TO MYRMECOFILIA IN THE APHID PARACLETUS CIMICIFORMIS. HOWEVER, THE PARTICIPATION OF SOME OF THESE GENES IN THE MENTIONED POLYPHENISMS HAS NOT YET BEEN DEMONSTRATED BY THE LACK OF A ROBUST METHOD THAT ALLOWS THE STUDY OF GENE FUNCTIONS IN APHIDS, WHICH CONDITIONS THE PROGRESS IN THESE STUDIES. A USEFUL TOOL FOR THE CHARACTERIZATION OF GENE FUNCTIONS, THAT HAS BEEN SUCCESSFULLY USED IN OTHER INSECTS, IS GENE SILENCING THROUGH RNA INTERFERENCE (RNAI). SOME STUDIES HAVE HIGHLIGHTED THE DIFFICULTY OF IMPLEMENTING RNAI IN APHIDS USING STANDARD TECHNIQUES BASED ON PROVIDING A DSRNA COMPLEMENTARY OF A FRAGMENT OF THE TARGET GENE BY MEANS OF ARTIFICIAL DIETS OR THROUGH MICROINJECTION. THE CRISPR / CAS METHODOLOGY IS ALSO BEING USED SUCCESSFULLY IN STUDIES ON GENE FUNCTIONS OF DIFFERENT INSECTS. IN THIS PROJECT WE PROPOSE THE DEVELOPMENT OF TWO TYPES OF TOOLS TO STUDY GENE FUNCTIONS IN APHIDS. ON ONE SIDE, THIS PROJECT PROPOSES AN ALTERNATIVE RNAI METHODOLOGY WHICH CONSISTS IN PROVIDING A CONTINUOUS SUPPLY OF THE DSRNA REQUIRED TO TRIGGER THE RNAI BY INCLUDING IT IN A PLANT VIRUS THAT INFECTS THE PLANT THE APHID NATURALLY FEEDS ON. THIS TECHNIQUE, CALLED VIGS (VIRUS INDUCED GENE SILENCING), IS A TOOL SUCCESSFULLY USED IN THE SILENCING OF PLANT GENES. SECONDLY, WE INTEND TO DEVELOP THE CRISPR / CAS METHODOLOGY IN APHIDS. IN ADDITION TO INVESTIGATING THE EXTENSION OF THESE TECHNIQUES TO APHIDS, WE WILL INVESTIGATE THE ROLE OF CANDIDATE GENES THAT WE HAVE IDENTIFIED SO FAR IN THE PROCESSES IN WHICH THEY ALLEGEDLY PARTICIPATE. IN A COLLATERAL WAY, WE INTEND TO EVALUATE THE USEFULNESS OF SILENCING GENES INVOLVED IN THE SYNTHESIS OF CAROTENOIDS, WHICH ARE EXCLUSIVE TO APHIDS, IN THE CONTROL OF THEIR POPULATIONS. THE SUCCESS OF THE PROJECT WILL PROVIDE A TOOL TO STUDY MANY APHID GENES OF INTEREST AND A NEW AND SAFE PEST CONTROL STRATEGY BASED ON TRANSGENIC PLANTS FOR FRAGMENTS OF APHID GENES. (English)
    0.4216738672873599
    0 references
    LES PUCERONS SONT DES INSECTES DE SUCEURS DE PLANTES CONNUS À L’ÉCHELLE INTERNATIONALE POUR LES PERTES ÉCONOMIQUES QUE CERTAINES ESPÈCES NUISIBLES CAUSENT EN RAISON DE LEUR PRÉSENCE DANS LES CULTURES. EN OUTRE, LES PUCERONS PRÉSENTENT UNE SÉRIE DE CARACTÉRISTIQUES DANS LEURS CYCLES DE VIE QUI LES RENDENT PARTICULIÈREMENT INTÉRESSANTS POUR L’ÉTUDE DE DIFFÉRENTS ASPECTS DE LEUR BIOLOGIE, TELS QUE LES POLYPHÉNISMES VARIÉS PRÉSENTÉS. DEPUIS 2010, LE GÉNOME DE L’ACYRTHOSIPHON PISUM MODÈLE PULGON EST À LA DISPOSITION DE LA COMMUNAUTÉ. LA DISPONIBILITÉ DE CE GÉNOME ET D’AUTRES GÉNOMES EST CRUCIALE POUR ÉTUDIER LES MÉCANISMES MOLÉCULAIRES QUI CONTRÔLENT DIFFÉRENTS ASPECTS DE LA BIOLOGIE DE CES INSECTES. À LA SUITE DE NOS RECHERCHES PRÉCÉDENTES, NOUS AVONS IDENTIFIÉ ET CARACTÉRISÉ UNE BATTERIE DE GÈNES CANDIDATS POUR PARTICIPER AU CONTRÔLE DE L’INCITATION À LA PHASE SEXUELLE (ÉQUIVALENT À LA DIAPAUSE D’AUTRES INSECTES) CHEZ LES PUCERONS. NOUS AVONS ÉGALEMENT IDENTIFIÉ DES GÈNES APPAREMMENT IMPLIQUÉS DANS UN POLYPHÉNISME LIÉ À LA MYRMECOPHILIE DANS LE PULGON PARACLETUS CIMICIFORMIS. CEPENDANT, LA PARTICIPATION DE CERTAINS DE CES GÈNES AUX POLYPHÉNISMES SUSMENTIONNÉS N’A PAS ENCORE ÉTÉ DÉMONTRÉE PAR L’ABSENCE D’UNE MÉTHODE ROBUSTE PERMETTANT L’ÉTUDE DES FONCTIONS DE GENICAS CHEZ LES PUCERONS, CE QUI CONDITIONNE L’AVANCEMENT DE CES ÉTUDES. UN OUTIL UTILE DANS LA CARACTÉRISATION DES FONCTIONS GENICAS, QUI A ÉTÉ UTILISÉ AVEC SUCCÈS CHEZ D’AUTRES INSECTES, EST LE SILENCIEUX GÉNIQUE PAR ARN D’INTERFÉRENCE (ARNI). CERTAINS TRAVAUX ONT RÉVÉLÉ LA DIFFICULTÉ DE METTRE EN ŒUVRE L’ARNI CHEZ LES PUCERONS À L’AIDE DES TECHNIQUES HABITUELLES BASÉES SUR LA FOURNITURE D’UN ARNS COMPLÉMENTAIRE D’UN FRAGMENT DU GÈNE AU SILENCE PAR VOIE ALIMENTAIRE ARTIFICIELLE OU PAR MICRO-INYECCION. LA MÉTHODOLOGIE CRISPR/CAS EST ÉGALEMENT UTILISÉE AVEC SUCCÈS DANS LES ÉTUDES SUR LES FONCTIONS GENICAS DE DIFFÉRENTS INSECTES. DANS CE PROJET, NOUS PROPOSONS LE DÉVELOPPEMENT DE DEUX TYPES D’OUTILS POUR ÉTUDIER LES FONCTIONS GENICAS DANS LES PUCERONS. D’UNE PART, IL EST PROPOSÉ D’ÉLABORER UNE AUTRE MÉTHODE RNAI. L’OBJECTIF EST D’ASSURER L’APPROVISIONNEMENT CONTINU DE L’ARND NÉCESSAIRE À L’ACTIVATION DE L’ARNI PAR SON INCLUSION DANS UN VIRUS VÉGÉTAL QUI INFECTE LA PLANTE À PARTIR DE LAQUELLE LE PULGON SE NOURRIT NATURELLEMENT. CETTE TECHNIQUE, APPELÉE VIGS (SILENCE DE GÈNE INDUITE PAR LE VIRUS), EST UN OUTIL UTILISÉ DANS LE SILENCIEUX DES GÈNES VÉGÉTAUX. DEUXIÈMEMENT, NOUS AVONS L’INTENTION DE DÉVELOPPER LA MÉTHODE CRISPR/CAS DANS LES PUCERONS. EN PLUS D’ÉTUDIER L’EXTENSION DE CES TECHNIQUES AUX PUCERONS, NOUS ÉTUDIERONS LE RÔLE DES GÈNES CANDIDATS QUE NOUS AVONS IDENTIFIÉS À CE JOUR DANS LES PROCESSUS DANS LESQUELS ILS SERAIENT IMPLIQUÉS. DE FAÇON COLLATÉRALE, NOUS ÉVALUERONS L’UTILITÉ DE RÉDUIRE AU SILENCE LES GÈNES DE LA VOIE DES CAROTÉNOÏDES, À L’EXCLUSION DES PUCERONS, POUR CONTRÔLER LEURS POPULATIONS. LE SUCCÈS DU PROJET FOURNIRA DES OUTILS POUR ÉTUDIER DE NOMBREUX GÈNES D’INTÉRÊT AINSI QU’UNE NOUVELLE STRATÉGIE SÉCURITAIRE POUR LUTTER CONTRE LES ESPÈCES NUISIBLES BASÉES SUR DES PLANTES TRANSGÉNIQUES POUR LES FRAGMENTS DE GÈNES DES PUCERONS. (French)
    4 December 2021
    0 references
    BLATTLÄUSE SIND SAP-SAUGEN INSEKTEN VON PFLANZEN, DIE INTERNATIONAL FÜR DIE WIRTSCHAFTLICHEN VERLUSTE BEKANNT SIND, DIE EINIGE SCHÄDLINGE AUFGRUND IHRES VORHANDENSEINS IN KULTUREN VERURSACHEN. DARÜBER HINAUS PRÄSENTIEREN BLATTLÄUSE EINE REIHE VON MERKMALEN IN IHREN LEBENSZYKLEN, DIE SIE BESONDERS INTERESSANT FÜR DIE ERFORSCHUNG VERSCHIEDENER ASPEKTE IHRER BIOLOGIE MACHEN, WIE Z. B. DIE VIELFÄLTIGEN POLYPHENISMEN, DIE AUSGESTELLT WURDEN. SEIT 2010 IST DAS GENOM DES ACYRTHOSIPHON PISUM MODELLS PULGON FÜR DIE GEMEINSCHAFT VERFÜGBAR. DIE VERFÜGBARKEIT DIESER UND ANDERER GENOME IST ENTSCHEIDEND FÜR DIE ERFORSCHUNG MOLEKULARER MECHANISMEN, DIE VERSCHIEDENE ASPEKTE DER BIOLOGIE DIESER INSEKTEN KONTROLLIEREN. ALS ERGEBNIS UNSERER BISHERIGEN FORSCHUNG HABEN WIR EINE BATTERIE VON GENKANDIDATEN IDENTIFIZIERT UND CHARAKTERISIERT, UM AN DER KONTROLLE DER SEXUELLEN PHASENANREIZUNG (ENTSPRECHEND DER DIAPAUSE ANDERER INSEKTEN) IN BLATTLÄSEN TEILZUNEHMEN. WIR HABEN AUCH GENE IDENTIFIZIERT, DIE OFFENBAR AN EINEM POLYPHENISMUS IM ZUSAMMENHANG MIT MYRMECOPHILIE IM PULGON PARACLETUS CIMICIFORMIS BETEILIGT SIND. DIE BETEILIGUNG EINIGER DIESER GENE AN DEN OBEN GENANNTEN POLYPHENISMEN WURDE JEDOCH NOCH NICHT DURCH DAS FEHLEN EINER ROBUSTEN METHODE BELEGT, DIE DIE UNTERSUCHUNG VON GENICAS-FUNKTIONEN BEI BLATTLÄUSEN ERMÖGLICHT, WELCHE BEDINGUNGEN IN DIESEN STUDIEN VORANSCHREITEN. EIN NÜTZLICHES WERKZEUG BEI DER CHARAKTERISIERUNG VON GENICAS-FUNKTIONEN, DIE BEI ANDEREN INSEKTEN ERFOLGREICH EINGESETZT WURDEN, IST DIE GENIC SILENCING DURCH INTERFERENZ RNA (RNAI). EINIGE WERKE HABEN GEZEIGT, DASS ES SCHWIERIG IST, RNAI IN BLATTLÄSEN MIT DEN ÜBLICHEN TECHNIKEN ZU IMPLEMENTIEREN, DIE AUF DER BEREITSTELLUNG EINER ERGÄNZENDEN DSRNA EINES FRAGMENTS DES GENS BASIEREN, UM DURCH KÜNSTLICHE ERNÄHRUNG ODER DURCH MIKROINYECCION ZUM SCHWEIGEN ZU KOMMEN. DIE CRISPR/CAS-METHODIK WIRD AUCH IN STUDIEN ZU GENICAS-FUNKTIONEN VERSCHIEDENER INSEKTEN ERFOLGREICH EINGESETZT. IN DIESEM PROJEKT SCHLAGEN WIR DIE ENTWICKLUNG VON ZWEI ARTEN VON WERKZEUGEN VOR, UM GENICAS-FUNKTIONEN IN BLATTLÄUSEN ZU UNTERSUCHEN. EINERSEITS WIRD VORGESCHLAGEN, EINE ALTERNATIVE RNAI-METHODIK ZU ENTWICKELN. ZIEL IST ES, DIE KONTINUIERLICHE VERSORGUNG MIT DEM ZUR AKTIVIERUNG DES RNAI ERFORDERLICHEN DSRNAI DURCH DIE AUFNAHME IN EIN PFLANZENVIRUS ZU GEWÄHRLEISTEN, DAS DIE PFLANZE INFIZIERT, AUS DER SICH DER PULGON SELBST ERNÄHRT. DIESE TECHNIK, GENANNT VIGS (VIRUSINDUZIERTES GENSCHALLEN), IST EIN WERKZEUG, DAS BEI DER SILENTIERUNG VON PFLANZENGENEN VERWENDET WIRD. ZWEITENS WOLLEN WIR DIE CRISPR/CAS-METHODE IN BLATTLÄUSEN ENTWICKELN. NEBEN DER UNTERSUCHUNG DER AUSDEHNUNG DIESER TECHNIKEN AUF BLATTLÄUSE WERDEN WIR DIE ROLLE DER KANDIDATEN GENE UNTERSUCHEN, DIE WIR BISHER IN DEN PROZESSEN IDENTIFIZIERT HABEN, AN DENEN SIE ANGEBLICH BETEILIGT SIND. GEMEINSAM WERDEN WIR DIE NÜTZLICHKEIT DES SCHWEIGENS VON GENEN AUS DEM CAROTINOIDENWEG, AUSSCHLIESSLICH VON BLATTLÄUSEN, BEI DER KONTROLLE IHRER POPULATIONEN BEWERTEN. DER ERFOLG DES PROJEKTS WIRD WERKZEUGE ZUR UNTERSUCHUNG ZAHLREICHER GENE VON INTERESSE SOWIE EINE MÖGLICHE NEUE SICHERE STRATEGIE ZUR BEKÄMPFUNG VON SCHÄDLINGEN AUF DER GRUNDLAGE TRANSGENER PFLANZEN FÜR FRAGMENTE VON BLATTLÄUSE BIETEN. (German)
    9 December 2021
    0 references
    BLADLUIZEN ZIJN SAP ZUIGENDE INSECTEN VAN PLANTEN DIE INTERNATIONAAL BEKEND ZIJN OM DE ECONOMISCHE VERLIEZEN DIE SOMMIGE PLAAGSOORTEN VEROORZAKEN ALS GEVOLG VAN HUN AANWEZIGHEID IN GEWASSEN. BOVENDIEN PRESENTEREN BLADLUIZEN EEN REEKS KENMERKEN IN HUN LEVENSCYCLI DIE HEN BIJZONDER INTERESSANT MAKEN VOOR DE STUDIE VAN VERSCHILLENDE ASPECTEN VAN HUN BIOLOGIE, ZOALS DE GEVARIEERDE POLYPHENISMEN TENTOONGESTELD. SINDS 2010 IS HET GENOOM VAN HET ACYRTHOSIPHON PISUM MODEL PULGON BESCHIKBAAR VOOR DE GEMEENSCHAP. DE BESCHIKBAARHEID VAN DEZE EN ANDERE GENOOM IS CRUCIAAL VOOR DE STUDIE VAN MOLECULAIRE MECHANISMEN DIE VERSCHILLENDE ASPECTEN VAN DE BIOLOGIE VAN DEZE INSECTEN BEHEERSEN. ALS GEVOLG VAN ONS VORIGE ONDERZOEK HEBBEN WE EEN REEKS GENENKANDIDATEN GEÏDENTIFICEERD EN GEKARAKTERISEERD OM DEEL TE NEMEN AAN DE CONTROLE VAN SEKSUELE FASEAANSPORING (GELIJKWAARDIG AAN DE DIAPAUZE VAN ANDERE INSECTEN) IN BLADLUIZEN. WE HEBBEN OOK GENEN GEÏDENTIFICEERD DIE BLIJKBAAR BETROKKEN ZIJN BIJ EEN POLYPHENISME GERELATEERD AAN MYRMECOPHILIA IN DE PULGON PARACLETUS CIMICIFORMIS. DE DEELNAME VAN SOMMIGE VAN DEZE GENEN AAN DE BOVENGENOEMDE POLYPHENISMEN IS ECHTER NOG NIET AANGETOOND DOOR HET ONTBREKEN VAN EEN ROBUUSTE METHODE DIE DE STUDIE VAN GENICAS-FUNCTIES IN BLADLUIZEN MOGELIJK MAAKT, WAARBIJ DE VOORTGANG VAN DEZE STUDIES WORDT BEPAALD. EEN NUTTIG HULPMIDDEL BIJ DE KARAKTERISERING VAN GENICAS-FUNCTIES, DIE IN ANDERE INSECTEN MET SUCCES ZIJN GEBRUIKT, IS DE GENIC GELUIDDEMPING DOOR INTERFERENTIE RNA (RNAI). SOMMIGE WERKEN HEBBEN DE MOEILIJKHEID ONTHULD OM RNAI IN BLADLUIZEN TE IMPLEMENTEREN DIE DE GEBRUIKELIJKE TECHNIEKEN GEBRUIKEN DIE OP HET VERSTREKKEN VAN EEN COMPLEMENTAIR DSRNA VAN EEN FRAGMENT VAN HET GEN WORDEN GEBASEERD OM DOOR KUNSTMATIGE DIËTEN OF DOOR MICROINYECCION TE ZWIJGEN. DE CRISPR/CAS-METHODOLOGIE WORDT OOK MET SUCCES GEBRUIKT IN STUDIES NAAR GENICAS-FUNCTIES VAN VERSCHILLENDE INSECTEN. IN DIT PROJECT STELLEN WE DE ONTWIKKELING VAN TWEE SOORTEN INSTRUMENTEN VOOR OM GENICAS-FUNCTIES IN BLADLUIZEN TE BESTUDEREN. ENERZIJDS WORDT VOORGESTELD EEN ALTERNATIEVE RNAI-METHODE TE ONTWIKKELEN. HET DOEL IS OM DE CONTINUE TOEVOER VAN DE DSRNA DIE NODIG IS OM DE RNAI TE ACTIVEREN DOOR DE OPNAME ERVAN IN EEN PLANTENVIRUS DAT DE PLANT INFECTEERT WAARUIT DE PULGON ZICH OP NATUURLIJKE WIJZE VOEDT. DEZE TECHNIEK, GENAAMD VIGS (VIRUS GEÏNDUCEERDE GEN GELUIDDEMPING), IS EEN HULPMIDDEL DAT WORDT GEBRUIKT BIJ HET TOT ZWIJGEN BRENGEN VAN PLANTENGENEN. TEN TWEEDE ZIJN WE VAN PLAN DE CRISPR/CAS-METHODE IN BLADLUIZEN TE ONTWIKKELEN. NAAST HET ONDERZOEKEN VAN DE UITBREIDING VAN DEZE TECHNIEKEN TOT BLADLUIZEN, ZULLEN WE DE ROL ONDERZOEKEN VAN DE KANDIDAAT-GENEN DIE WE TOT OP HEDEN HEBBEN GEÏDENTIFICEERD IN DE PROCESSEN WAARIN ZE NAAR VERLUIDT BETROKKEN ZIJN. ONDERPAND ZULLEN WE HET NUT VAN HET TOT ZWIJGEN BRENGEN VAN GENEN VAN DE CAROTENOÏDENROUTE, EXCLUSIEF BLADLUIZEN, EVALUEREN BIJ HET BEHEERSEN VAN HUN POPULATIES. HET SUCCES VAN HET PROJECT ZAL INSTRUMENTEN BIEDEN OM TAL VAN INTERESSANTE GENEN TE BESTUDEREN, EVENALS EEN MOGELIJKE NIEUWE VEILIGE STRATEGIE VOOR DE BESTRIJDING VAN PLAAGORGANISMEN OP BASIS VAN TRANSGENE PLANTEN VOOR FRAGMENTEN VAN BLADLUIZEN. (Dutch)
    17 December 2021
    0 references
    GLI AFIDI SONO SAP SUCCHIANDO INSETTI DI PIANTE CONOSCIUTE A LIVELLO INTERNAZIONALE PER LE PERDITE ECONOMICHE CHE ALCUNE SPECIE PARASSITARIE CAUSANO A CAUSA DELLA LORO PRESENZA NELLE COLTURE. INOLTRE, GLI AFIDI PRESENTANO UNA SERIE DI CARATTERISTICHE NEI LORO CICLI DI VITA CHE LI RENDONO PARTICOLARMENTE INTERESSANTI PER LO STUDIO DI DIVERSI ASPETTI DELLA LORO BIOLOGIA, COME I VARI POLIFENISMI ESPOSTI. DAL 2010 IL GENOMA DELL'ACYRTHOSIPHON PISUM MODELLO PULGON È DISPONIBILE PER LA COMUNITÀ. LA DISPONIBILITÀ DI QUESTO E DI ALTRI GENOMI È FONDAMENTALE PER AFFRONTARE LO STUDIO DEI MECCANISMI MOLECOLARI CHE CONTROLLANO DIVERSI ASPETTI DELLA BIOLOGIA DI QUESTI INSETTI. COME RISULTATO DELLA NOSTRA PRECEDENTE RICERCA, ABBIAMO IDENTIFICATO E CARATTERIZZATO UNA BATTERIA DI GENI CANDIDATI PER PARTECIPARE AL CONTROLLO DELL'INDUZIONE DI FASE SESSUALE (EQUIVALENTE ALLA DIAPAUSA DI ALTRI INSETTI) NEGLI AFIDI. ABBIAMO ANCHE IDENTIFICATO GENI APPARENTEMENTE COINVOLTI IN UN POLIFENISMO LEGATO ALLA MIRMECOFILIA NEL PULGON PARACLETUS CIMICIFORMIS. TUTTAVIA, LA PARTECIPAZIONE DI ALCUNI DI QUESTI GENI AI POLIFENISMI DI CUI SOPRA NON È STATA ANCORA DIMOSTRATA DALLA MANCANZA DI UN METODO ROBUSTO CHE CONSENTA LO STUDIO DELLE FUNZIONI DI GENICAS NEGLI AFIDI, CHE CONDIZIONANO I PROGRESSI IN QUESTI STUDI. UNO STRUMENTO UTILE NELLA CARATTERIZZAZIONE DELLE FUNZIONI DI GENICAS, CHE IN ALTRI INSETTI È STATO UTILIZZATO CON SUCCESSO, È IL SILENZIAMENTO GENETICO PER INTERFERENZA RNA (RNAI). ALCUNE OPERE HANNO RIVELATO LA DIFFICOLTÀ DI IMPLEMENTARE RNAI NEGLI AFIDI UTILIZZANDO LE TECNICHE USUALI BASATE SUL FORNIRE UN DSRNA COMPLEMENTARE DI UN FRAMMENTO DEL GENE PER TACERE ATTRAVERSO DIETE ARTIFICIALI O MICROINYECCION. LA METODOLOGIA CRISPR/CAS VIENE UTILIZZATA CON SUCCESSO ANCHE NEGLI STUDI SULLE FUNZIONI DI GENICAS DI DIVERSI INSETTI. IN QUESTO PROGETTO PROPONIAMO LO SVILUPPO DI DUE TIPI DI STRUMENTI PER STUDIARE LE FUNZIONI DI GENICAS NEGLI AFIDI. DA UN LATO, SI PROPONE DI SVILUPPARE UNA METODOLOGIA RNAI ALTERNATIVA. L'OBIETTIVO È QUELLO DI GARANTIRE L'APPROVVIGIONAMENTO CONTINUO DEL DSRNA NECESSARIO PER ATTIVARE L'RNAI MEDIANTE LA SUA INCLUSIONE IN UN VIRUS VEGETALE CHE INFETTA LA PIANTA DA CUI IL PULGON SI NUTRE NATURALMENTE. QUESTA TECNICA, CHIAMATA VIGS (VIRUS INDOTTO GENE SILENZIAMENTO), È UNO STRUMENTO UTILIZZATO NEL SILENZIAMENTO DEI GENI VEGETALI. IN SECONDO LUOGO, INTENDIAMO SVILUPPARE IL METODO CRISPR/CAS NEGLI AFIDI. OLTRE A STUDIARE L'ESTENSIONE DI QUESTE TECNICHE AGLI AFIDI, INDAGHEREMO IL RUOLO DEI GENI CANDIDATI CHE ABBIAMO IDENTIFICATO FINO AD OGGI NEI PROCESSI IN CUI SONO PRESUMIBILMENTE COINVOLTI. IN MODO COLLATERALE, VALUTEREMO L'UTILITÀ DEI GENI SILENZIANTI DALLA VIA DEI CAROTENOIDI, ESCLUSI GLI AFIDI, NEL CONTROLLARE LE LORO POPOLAZIONI. IL SUCCESSO DEL PROGETTO FORNIRÀ STRUMENTI PER STUDIARE NUMEROSI GENI DI INTERESSE E UNA POSSIBILE NUOVA STRATEGIA SICURA PER COMBATTERE LE SPECIE PARASSITARIE BASATE SU PIANTE TRANSGENICHE PER FRAMMENTI DI GENI AFIDI. (Italian)
    16 January 2022
    0 references
    ΟΙ ΑΦΊΔΕΣ ΕΊΝΑΙ ΈΝΤΟΜΑ ΦΥΤΏΝ ΠΟΥ ΑΠΟΡΡΟΦΟΎΝ SAP ΣΕ ΌΛΟ ΤΟΝ ΚΌΣΜΟ ΓΙΑ ΤΙΣ ΟΙΚΟΝΟΜΙΚΈΣ ΑΠΏΛΕΙΕΣ ΠΟΥ ΠΡΟΚΑΛΟΎΝΤΑΙ ΑΠΌ ΟΡΙΣΜΈΝΑ ΕΊΔΗ ΕΠΙΒΛΑΒΏΝ ΟΡΓΑΝΙΣΜΏΝ ΩΣ ΑΠΟΤΈΛΕΣΜΑ ΤΗΣ ΠΑΡΟΥΣΊΑΣ ΤΟΥΣ ΣΕ ΦΥΤΆ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΑΣ. ΕΠΙΠΛΈΟΝ, ΟΙ ΑΦΊΔΕΣ ΈΧΟΥΝ ΜΙΑ ΣΕΙΡΆ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΏΝ ΣΤΟΥΣ ΚΎΚΛΟΥΣ ΖΩΉΣ ΤΟΥΣ ΠΟΥ ΤΟΥΣ ΚΆΝΟΥΝ ΙΔΙΑΊΤΕΡΑ ΕΝΔΙΑΦΈΡΟΝ ΝΑ ΜΕΛΕΤΉΣΟΥΝ ΔΙΆΦΟΡΕΣ ΠΤΥΧΈΣ ΤΗΣ ΒΙΟΛΟΓΊΑΣ ΤΟΥΣ, ΌΠΩΣ ΟΙ ΔΙΆΦΟΡΟΙ ΠΟΛΥΦΑΙΝΙΣΜΟΊ ΠΟΥ ΕΜΦΑΝΊΖΟΝΤΑΙ. ΑΠΌ ΤΟ 2010 ΤΟ ΓΟΝΙΔΊΩΜΑ ΤΟΥ ΜΟΝΤΈΛΟΥ APHID ACYRTHOSIPHON PISUM ΕΊΝΑΙ ΔΙΑΘΈΣΙΜΟ ΣΤΗΝ ΕΠΙΣΤΗΜΟΝΙΚΉ ΚΟΙΝΌΤΗΤΑ. Η ΔΙΑΘΕΣΙΜΌΤΗΤΑ ΑΥΤΟΎ ΚΑΙ ΆΛΛΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΜΆΤΩΝ ΕΊΝΑΙ ΖΩΤΙΚΉΣ ΣΗΜΑΣΊΑΣ ΓΙΑ ΤΗ ΜΕΛΈΤΗ ΤΩΝ ΜΟΡΙΑΚΏΝ ΜΗΧΑΝΙΣΜΏΝ ΠΟΥ ΕΛΈΓΧΟΥΝ ΔΙΆΦΟΡΕΣ ΠΤΥΧΈΣ ΤΗΣ ΒΙΟΛΟΓΊΑΣ ΑΥΤΏΝ ΤΩΝ ΕΝΤΌΜΩΝ. ΩΣ ΑΠΟΤΈΛΕΣΜΑ ΤΩΝ ΠΡΟΗΓΟΎΜΕΝΩΝ ΕΡΕΥΝΏΝ ΜΑΣ, ΕΝΤΟΠΊΣΑΜΕ ΚΑΙ ΧΑΡΑΚΤΗΡΊΣΑΜΕ ΜΙΑ ΣΕΙΡΆ ΥΠΟΨΉΦΙΩΝ ΓΟΝΙΔΊΩΝ ΓΙΑ ΝΑ ΣΥΜΜΕΤΆΣΧΟΥΝ ΣΤΟΝ ΈΛΕΓΧΟ ΤΗΣ ΕΠΑΓΩΓΉΣ ΤΗΣ ΣΕΞΟΥΑΛΙΚΉΣ ΦΆΣΗΣ (ΙΣΟΔΎΝΑΜΗ ΜΕ ΤΗΝ ΔΙΆΠΑΥΣΗ ΆΛΛΩΝ ΕΝΤΌΜΩΝ) ΣΤΙΣ ΑΦΊΔΕΣ. ΈΧΟΥΜΕ ΕΠΊΣΗΣ ΑΝΑΓΝΩΡΊΣΕΙ ΓΟΝΊΔΙΑ ΠΟΥ ΠΡΟΦΑΝΏΣ ΕΜΠΛΈΚΟΝΤΑΙ ΣΕ ΈΝΑΝ ΠΟΛΥΦΑΙΝΙΣΜΌ ΠΟΥ ΣΧΕΤΊΖΕΤΑΙ ΜΕ ΤΟ MYRMECOFILIA ΣΤΟ APHID PARACLETUS CIMICIFORMIS. ΩΣΤΌΣΟ, Η ΣΥΜΜΕΤΟΧΉ ΟΡΙΣΜΈΝΩΝ ΑΠΌ ΑΥΤΆ ΤΑ ΓΟΝΊΔΙΑ ΣΤΟΥΣ ΠΡΟΑΝΑΦΕΡΘΈΝΤΕΣ ΠΟΛΥΦΑΙΝΙΣΜΟΎΣ ΔΕΝ ΈΧΕΙ ΑΚΌΜΗ ΑΠΟΔΕΙΧΘΕΊ ΑΠΌ ΤΗΝ ΈΛΛΕΙΨΗ ΜΙΑΣ ΙΣΧΥΡΉΣ ΜΕΘΌΔΟΥ ΠΟΥ ΝΑ ΕΠΙΤΡΈΠΕΙ ΤΗ ΜΕΛΈΤΗ ΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΑΚΏΝ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΏΝ ΣΤΙΣ ΑΦΊΔΕΣ, ΓΕΓΟΝΌΣ ΠΟΥ ΚΑΘΟΡΊΖΕΙ ΤΗΝ ΠΡΌΟΔΟ ΣΕ ΑΥΤΈΣ ΤΙΣ ΜΕΛΈΤΕΣ. ΈΝΑ ΧΡΉΣΙΜΟ ΕΡΓΑΛΕΊΟ ΓΙΑ ΤΟΝ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΌ ΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΑΚΏΝ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΏΝ, ΠΟΥ ΈΧΕΙ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΕΊ ΜΕ ΕΠΙΤΥΧΊΑ ΣΕ ΆΛΛΑ ΈΝΤΟΜΑ, ΕΊΝΑΙ ΤΟ ΓΟΝΙΔΙΑΚΌ ΣΙΓΑΣΤΉΡΑ ΜΈΣΩ ΤΩΝ ΠΑΡΕΜΒΟΛΏΝ RNA (RNAI). ΟΡΙΣΜΈΝΕΣ ΜΕΛΈΤΕΣ ΈΧΟΥΝ ΚΑΤΑΔΕΊΞΕΙ ΤΗ ΔΥΣΚΟΛΊΑ ΕΦΑΡΜΟΓΉΣ ΤΟΥ RNAI ΣΕ ΑΦΊΔΕΣ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΏΝΤΑΣ ΠΡΌΤΥΠΕΣ ΤΕΧΝΙΚΈΣ ΠΟΥ ΒΑΣΊΖΟΝΤΑΙ ΣΤΗΝ ΠΑΡΟΧΉ ΕΝΌΣ DSRNA ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΌ ΕΝΌΣ ΘΡΑΎΣΜΑΤΟΣ ΤΟΥ ΓΟΝΙΔΊΟΥ-ΣΤΌΧΟΥ ΜΈΣΩ ΤΕΧΝΗΤΉΣ ΔΙΑΤΡΟΦΉΣ Ή ΜΈΣΩ ΜΙΚΡΟΕΝΈΣΕΩΝ. Η ΜΕΘΟΔΟΛΟΓΊΑ CRISPR/CAS ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΕΊΤΑΙ ΕΠΊΣΗΣ ΜΕ ΕΠΙΤΥΧΊΑ ΣΕ ΜΕΛΈΤΕΣ ΣΧΕΤΙΚΆ ΜΕ ΤΙΣ ΓΟΝΙΔΙΑΚΈΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΊΕΣ ΤΩΝ ΔΙΑΦΌΡΩΝ ΕΝΤΌΜΩΝ. ΣΕ ΑΥΤΌ ΤΟ ΈΡΓΟ ΠΡΟΤΕΊΝΟΥΜΕ ΤΗΝ ΑΝΆΠΤΥΞΗ ΔΎΟ ΤΎΠΩΝ ΕΡΓΑΛΕΊΩΝ ΓΙΑ ΤΗ ΜΕΛΈΤΗ ΤΩΝ ΓΟΝΙΔΙΑΚΏΝ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΏΝ ΣΕ ΑΦΊΔΕΣ. ΑΠΌ ΤΗ ΜΊΑ ΠΛΕΥΡΆ, ΤΟ ΈΡΓΟ ΑΥΤΌ ΠΡΟΤΕΊΝΕΙ ΜΙΑ ΕΝΑΛΛΑΚΤΙΚΉ ΜΕΘΟΔΟΛΟΓΊΑ RNAI, Η ΟΠΟΊΑ ΣΥΝΊΣΤΑΤΑΙ ΣΤΗΝ ΠΑΡΟΧΉ ΣΥΝΕΧΟΎΣ ΠΡΟΣΦΟΡΆΣ ΤΟΥ DSRNA ΠΟΥ ΑΠΑΙΤΕΊΤΑΙ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΝΕΡΓΟΠΟΊΗΣΗ ΤΟΥ RNAI, ΕΝΤΆΣΣΟΝΤΆΣ ΤΟ ΣΕ ΈΝΑΝ ΙΌ ΦΥΤΏΝ ΠΟΥ ΜΟΛΎΝΕΙ ΤΟ ΦΥΤΌ ΑΠΌ ΤΟ ΟΠΟΊΟ ΤΡΈΦΕΤΑΙ ΦΥΣΙΚΆ Η ΑΦΊΔΑ. ΑΥΤΉ Η ΤΕΧΝΙΚΉ, ΠΟΥ ΟΝΟΜΆΖΕΤΑΙ VIGS (ΠΡΟΚΑΛΟΎΜΕΝΗ ΑΠΌ ΙΟΎΣ ΓΟΝΙΔΙΑΚΉ ΣΙΓΑΣΤΉΡΑΣ), ΕΊΝΑΙ ΈΝΑ ΕΡΓΑΛΕΊΟ ΠΟΥ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΕΊΤΑΙ ΜΕ ΕΠΙΤΥΧΊΑ ΣΤΗ ΣΙΓΑΣΤΉΡΑ ΤΩΝ ΦΥΤΙΚΏΝ ΓΟΝΙΔΊΩΝ. ΔΕΎΤΕΡΟΝ, ΣΚΟΠΕΎΟΥΜΕ ΝΑ ΑΝΑΠΤΎΞΟΥΜΕ ΤΗ ΜΕΘΟΔΟΛΟΓΊΑ CRISPR/CAS ΣΤΙΣ ΑΦΊΔΕΣ. ΕΚΤΌΣ ΑΠΌ ΤΗ ΔΙΕΡΕΎΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΠΈΚΤΑΣΗΣ ΑΥΤΏΝ ΤΩΝ ΤΕΧΝΙΚΏΝ ΣΤΙΣ ΑΦΊΔΕΣ, ΘΑ ΔΙΕΡΕΥΝΉΣΟΥΜΕ ΤΟ ΡΌΛΟ ΤΩΝ ΥΠΟΨΉΦΙΩΝ ΓΟΝΙΔΊΩΝ ΠΟΥ ΈΧΟΥΜΕ ΑΝΑΓΝΩΡΊΣΕΙ ΜΈΧΡΙ ΣΤΙΓΜΉΣ ΣΤΙΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΊΕΣ ΣΤΙΣ ΟΠΟΊΕΣ ΕΙΚΆΖΕΤΑΙ ΌΤΙ ΣΥΜΜΕΤΈΧΟΥΝ. ΜΕ ΠΑΡΆΠΛΕΥΡΟ ΤΡΌΠΟ, ΣΚΟΠΕΎΟΥΜΕ ΝΑ ΑΞΙΟΛΟΓΉΣΟΥΜΕ ΤΗ ΧΡΗΣΙΜΌΤΗΤΑ ΤΩΝ ΣΙΓΑΣΤΉΡΩΝ ΓΟΝΙΔΊΩΝ ΠΟΥ ΕΜΠΛΈΚΟΝΤΑΙ ΣΤΗ ΣΎΝΘΕΣΗ ΤΩΝ ΚΑΡΟΤΕΝΟΕΙΔΏΝ, ΤΑ ΟΠΟΊΑ ΕΊΝΑΙ ΑΠΟΚΛΕΙΣΤΙΚΆ ΓΙΑ ΤΙΣ ΑΦΊΔΕΣ, ΣΤΟΝ ΈΛΕΓΧΟ ΤΩΝ ΠΛΗΘΥΣΜΏΝ ΤΟΥΣ. Η ΕΠΙΤΥΧΊΑ ΤΟΥ ΈΡΓΟΥ ΘΑ ΑΠΟΤΕΛΈΣΕΙ ΈΝΑ ΕΡΓΑΛΕΊΟ ΓΙΑ ΤΗ ΜΕΛΈΤΗ ΠΟΛΛΏΝ ΓΟΝΙΔΊΩΝ ΑΦΙΔΏΝ ΠΟΥ ΠΑΡΟΥΣΙΆΖΟΥΝ ΕΝΔΙΑΦΈΡΟΝ ΚΑΙ ΜΙΑ ΝΈΑ ΚΑΙ ΑΣΦΑΛΉ ΣΤΡΑΤΗΓΙΚΉ ΚΑΤΑΠΟΛΈΜΗΣΗΣ ΤΩΝ ΠΑΡΑΣΊΤΩΝ ΜΕ ΒΆΣΗ ΤΑ ΔΙΑΓΟΝΙΔΙΑΚΆ ΦΥΤΆ ΓΙΑ ΘΡΑΎΣΜΑΤΑ ΓΟΝΙΔΊΩΝ ΑΦΙΔΏΝ. (Greek)
    18 August 2022
    0 references
    BLADLUS ER PLANTER SAP-SUGENDE INSEKTER KENDT PÅ VERDENSPLAN FOR ØKONOMISKE TAB FORÅRSAGET AF VISSE SKADEDYRARTER SOM FØLGE AF DERES TILSTEDEVÆRELSE I AFGRØDEPLANTER. DESUDEN HAR BLADLUS EN RÆKKE KARAKTERISTIKA I DERES LIVSCYKLUS, DER GØR DEM SÆRLIGT INTERESSANTE AT STUDERE FORSKELLIGE ASPEKTER AF DERES BIOLOGI, SÅSOM DE FORSKELLIGE POLYPHENISMER VISES. SIDEN 2010 HAR GENOMET I MODELBLADLUSEN ACYRTHOSIPHON PISUM VÆRET TILGÆNGELIGT FOR DET VIDENSKABELIGE FÆLLESSKAB. TILGÆNGELIGHEDEN AF DETTE OG ANDRE GENOMER ER AFGØRENDE FOR UNDERSØGELSEN AF DE MOLEKYLÆRE MEKANISMER, DER STYRER FORSKELLIGE ASPEKTER AF DISSE INSEKTERS BIOLOGI. SOM ET RESULTAT AF VORES TIDLIGERE UNDERSØGELSER, HAR VI IDENTIFICERET OG KARAKTERISERET ET BATTERI AF KANDIDATGENER TIL AT DELTAGE I KONTROLLEN AF INDUKTION AF DEN SEKSUELLE FASE (SVARENDE TIL DIAPAUSE AF ANDRE INSEKTER) I BLADLUS. VI HAR OGSÅ IDENTIFICERET GENER, DER TILSYNELADENDE ER IMPLICERET I EN POLYPHENISME RELATERET TIL MYRMECOFILIA I BLADLUS PARACLETUS CIMICIFORMIMIS. NOGLE AF DISSE GENERS DELTAGELSE I DE NÆVNTE POLYPHENISMER ER IMIDLERTID ENDNU IKKE BLEVET PÅVIST AF MANGLEN PÅ EN ROBUST METODE, DER GØR DET MULIGT AT UNDERSØGE GENFUNKTIONER I BLADLUS, HVILKET GØR FREMSKRIDTET I DISSE UNDERSØGELSER BETINGET. ET NYTTIGT VÆRKTØJ TIL KARAKTERISERING AF GENFUNKTIONER, DER MED SUCCES ER BLEVET ANVENDT I ANDRE INSEKTER, ER GENHÆMNING GENNEM RNA-INTERFERENS (RNAI). NOGLE UNDERSØGELSER HAR VIST, AT DET ER VANSKELIGT AT IMPLEMENTERE RNAI I BLADLUS VED HJÆLP AF STANDARDTEKNIKKER, DER ER BASERET PÅ ET DSRNA-KOMPLEMENT AF ET FRAGMENT AF MÅLGENET VED HJÆLP AF KUNSTIGE KOSTVANER ELLER VED MIKROINJEKTION. CRISPR/CAS-METODEN ANVENDES OGSÅ MED SUCCES I UNDERSØGELSER AF FORSKELLIGE INSEKTERS GENFUNKTIONER. I DETTE PROJEKT FORESLÅR VI UDVIKLING AF TO TYPER VÆRKTØJER TIL AT STUDERE GENFUNKTIONER I BLADLUS. PÅ DEN ENE SIDE FORESLÅR DETTE PROJEKT EN ALTERNATIV RNAI-METODOLOGI, SOM BESTÅR I AT LEVERE EN KONTINUERLIG FORSYNING AF DEN DSRNA, DER ER NØDVENDIG FOR AT UDLØSE RNAI, VED AT INKLUDERE DEN I EN PLANTEVIRUS, DER INFICERER DEN PLANTE, BLADLUSEN NATURLIGT LEVER AF. DENNE TEKNIK, KALDET VIGS (VIRUS INDUCERET GENHÆMNING), ER ET VÆRKTØJ, DER MED SUCCES ANVENDES TIL AT DÆMPE PLANTEGENER. FOR DET ANDET HAR VI TIL HENSIGT AT UDVIKLE CRISPR/CAS-METODEN I BLADLUS. UD OVER AT UNDERSØGE UDVIDELSEN AF DISSE TEKNIKKER TIL BLADLUS, VIL VI UNDERSØGE ROLLEN SOM KANDIDATGENER, SOM VI HIDTIL HAR IDENTIFICERET I DE PROCESSER, SOM DE ANGIVELIGT DELTAGER I. PÅ EN ANDEN MÅDE AGTER VI AT VURDERE NYTTEN AF AT STANDSE GENER, DER ER INVOLVERET I SYNTESEN AF CAROTENOIDER, SOM ER EKSKLUSIVT TIL BLADLUS, I KONTROLLEN MED DERES POPULATIONER. PROJEKTETS SUCCES VIL VÆRE ET REDSKAB TIL UNDERSØGELSE AF MANGE BLADLUSGENER AF INTERESSE OG EN NY OG SIKKER SKADEDYRSBEKÆMPELSESSTRATEGI BASERET PÅ TRANSGENE PLANTER FOR FRAGMENTER AF BLADLUSGENER. (Danish)
    18 August 2022
    0 references
    KIRVOT OVAT KASVEJA SAP IMEVIÄ HYÖNTEISIÄ, JOTKA TUNNETAAN MAAILMANLAAJUISESTI TALOUDELLISISTA MENETYKSISTÄ, JOITA JOILLEKIN TUHOLAISLAJEILLE AIHEUTUU NIIDEN ESIINTYMISESTÄ KASVIKASVEISSA. LISÄKSI KIRVOJEN ELINKAARESSA ON USEITA OMINAISUUKSIA, JOTKA TEKEVÄT NIISTÄ ERITYISEN MIELENKIINTOISIA TUTKIA BIOLOGIAN ERI NÄKÖKOHTIA, KUTEN ERI POLYFENISMEJA. VUODESTA 2010 LÄHTIEN APHID ACYRTHOSIPHON PISUM -MALLIN GENOMI ON OLLUT TIETEELLISEN YHTEISÖN KÄYTETTÄVISSÄ. TÄMÄN JA MUIDEN GENOMIEN SAATAVUUS ON RATKAISEVAN TÄRKEÄÄ TUTKITTAESSA MOLEKYYLIMEKANISMEJA, JOTKA OHJAAVAT NÄIDEN HYÖNTEISTEN BIOLOGIAN ERI NÄKÖKOHTIA. AIEMPIEN TUTKIMUSTEN TULOKSENA OLEMME TUNNISTANEET JA LUONNEHTINEET EHDOKASGEENIEN AKKUA OSALLISTUMAAN SEKSUAALISEN VAIHEEN INDUKTION VALVONTAAN (VASTAA MUIDEN HYÖNTEISTEN DIAPAUSIA) KIRVOISSA. OLEMME MYÖS TUNNISTANEET GEENEJÄ, JOTKA ILMEISESTI OVAT SEKAANTUNEET MYRMECOFILIAAN LIITTYVÄÄN POLYFENISMIIN APHID PARACLETUS CIMICIFORMISISSA. JOIDENKIN NÄIDEN GEENIEN OSALLISTUMISTA EDELLÄ MAINITTUIHIN POLYFENISMEIHIN EI KUITENKAAN OLE VIELÄ OSOITETTU, KOSKA EI OLE OLEMASSA VANKKAA MENETELMÄÄ, JOKA MAHDOLLISTAISI GEENITOIMINTOJEN TUTKIMISEN KIRVOISSA, MIKÄ EHTONA NÄIDEN TUTKIMUSTEN ETENEMISELLE. HYÖDYLLINEN TYÖKALU GEENITOIMINTOJEN KARAKTERISOINTIIN, JOTA ON KÄYTETTY ONNISTUNEESTI MUISSA HYÖNTEISISSÄ, ON GEENIEN VAIMENNUS RNA-HÄIRIÖIDEN (RNAI) KAUTTA. JOISSAKIN TUTKIMUKSISSA ON KOROSTETTU, ETTÄ ON VAIKEAA TOTEUTTAA RNAI KIRVOISSA KÄYTTÄEN TAVANOMAISIA TEKNIIKOITA, JOTKA PERUSTUVAT KOHDEGEENIN FRAGMENTIN DSRNA-LISÄOSAN TARJOAMISEEN KEINOTEKOISEN RUOKAVALION TAI MIKROINJEKTION AVULLA. CRISPR/CAS-MENETELMÄÄ KÄYTETÄÄN MENESTYKSEKKÄÄSTI MYÖS ERI HYÖNTEISTEN GEENITOIMINTOJA KOSKEVISSA TUTKIMUKSISSA. TÄSSÄ HANKKEESSA EHDOTAMME KAHDENLAISIA TYÖKALUJA GEENITOIMINTOJEN TUTKIMISEEN KIRVOISSA. TOISAALTA TÄSSÄ HANKKEESSA EHDOTETAAN VAIHTOEHTOISTA RNAI-MENETELMÄÄ, JOSSA TARJOTAAN JATKUVASTI DSRNA:TA, JOKA TARVITAAN RNAIN LAUKAISEMISEKSI SISÄLLYTTÄMÄLLÄ SE KASVIVIRUKSEEN, JOKA TARTUTTAA KIRVOJEN LUONTAISESTI RUOKKIMAAN KASVIA. TÄMÄ TEKNIIKKA, NIMELTÄÄN VIGS (VIRUKSEN AIHEUTTAMA GEENIEN ÄÄNENVAIMENNUS), ON TYÖKALU, JOTA KÄYTETÄÄN ONNISTUNEESTI KASVIGEENIEN ÄÄNENVAIMENNUS. TOISEKSI AIOMME KEHITTÄÄ CRISPR/CAS-MENETELMÄÄ KIRVOJEN OSALTA. SEN LISÄKSI, ETTÄ TUTKIMME NÄIDEN TEKNIIKOIDEN LAAJENTAMISTA KIRVOIHIN, TUTKIMME EHDOKASGEENIEN ROOLIA, JOTKA OLEMME TÄHÄN MENNESSÄ TUNNISTANEET PROSESSEISSA, JOIHIN NE VÄITETYSTI OSALLISTUVAT. SIVUTOIMISESTI AIOMME ARVIOIDA KAROTENOIDIEN SYNTEESIIN LIITTYVIEN GEENIEN, JOTKA OVAT YKSINOMAAN KIRVOJA, HYÖDYLLISYYTTÄ NIIDEN POPULAATIOIDEN HALLINNASSA. HANKKEEN ONNISTUMINEN TARJOAA TYÖKALUN MONIEN KIINNOSTAVIEN KIRVOJEN GEENIEN TUTKIMISEEN JA UUDEN JA TURVALLISEN TUHOLAISTORJUNTASTRATEGIAN, JOKA PERUSTUU TRANSGEENISIIN KASVEIHIN KIRVOJEN GEENIEN FRAGMENTEILLE. (Finnish)
    18 August 2022
    0 references
    L-AFIDI HUMA INSETTI LI JSERRĦU L-SAP MAGĦRUFA MADWAR ID-DINJA GĦAT-TELF EKONOMIKU KKAWŻAT MINN XI SPEĊIJIET TA’ ORGANIŻMI TA’ ĦSARA BĦALA RIŻULTAT TAL-PREŻENZA TAGĦHOM FIL-PJANTI TAL-GĦELEJJEL. BARRA MINN HEKK, L-AFIDI GĦANDHOM GĦADD TA’ KARATTERISTIĊI FIĊ-ĊIKLI TAL-ĦAJJA TAGĦHOM LI JAGĦMLUHOM PARTIKOLARMENT INTERESSANTI LI JISTUDJAW ASPETTI DIFFERENTI TAL-BIJOLOĠIJA TAGĦHOM, BĦALL-POLIFENIŻMI VARJI MURIJA. MILL-2010 IL-ĠENOMA TAL-MUDELL APHID ACYRTHOSIPHON PISUM HIJA DISPONIBBLI GĦALL-KOMUNITÀ XJENTIFIKA. ID-DISPONIBBILTÀ TA’ DAN IL-ĠENOMI U OĦRAJN HIJA KRUĊJALI GĦALL-ISTUDJU TAL-MEKKANIŻMI MOLEKULARI LI JIKKONTROLLAW ASPETTI DIFFERENTI TAL-BIJOLOĠIJA TA’ DAWN L-INSETTI. BĦALA RIŻULTAT TA ‘L-INVESTIGAZZJONIJIET PREĊEDENTI TAGĦNA, AĦNA IDENTIFIKAJNA U KKARATTERIZZAT BATTERIJA TA’ ĠENI KANDIDATI BIEX JIPPARTEĊIPAW FIL-KONTROLL TA ‘L-INDUZZJONI TAL-FAŻI SESSWALI (EKWIVALENTI GĦALL-DIAPAUSE TA’ INSETTI OĦRA) FIL APHIDS. IDENTIFIKAJNA WKOLL ĠENI APPARENTEMENT IMPLIKATI F’POLIFENIŻMU RELATAT MA’ MYRMECOFILIA FL-APHID PARACLETUS CIMICIFORMIS. MADANKOLLU, IL-PARTEĊIPAZZJONI TA ‘XI WĦUD MINN DAWN IL-ĠENI FIL-POLIFENIŻMI MSEMMIJA GĦADHA MA NTWERIETX MIN-NUQQAS TA’ METODU ROBUST LI JIPPERMETTI L-ISTUDJU TA ‘FUNZJONIJIET TAL-ĠENI FL-AFIDI, LI KUNDIZZJONIJIET IL-PROGRESS F’DAWN L-ISTUDJI. GĦODDA UTLI GĦALL-KARATTERIZZAZZJONI TAL-FUNZJONIJIET TAL-ĠENI, LI ĠIET UŻATA B’SUĊĊESS F’INSETTI OĦRA, HIJA S-SAJLENSER TAL-ĠENI PERMEZZ TAL-INTERFERENZA TAL-RNA (RNAI). XI STUDJI ENFASIZZAW ID-DIFFIKULTÀ TAL-IMPLIMENTAZZJONI TAL-RNA F’AFIDI BL-UŻU TA’ TEKNIKI STANDARD IBBAŻATI FUQ IL-PROVVEDIMENT TA’ KOMPLEMENT TAD-DSRNA TA’ FRAMMENT TAL-ĠENE FIL-MIRA PERMEZZ TA’ DIETI ARTIFIĊJALI JEW PERMEZZ TA’ MIKROINJEZZJONI. IL-METODOLOĠIJA CRISPR/CAS QED TINTUŻA WKOLL B’SUĊĊESS FI STUDJI DWAR IL-FUNZJONIJIET TAL-ĠENI TA’ INSETTI DIFFERENTI. F’DAN IL-PROĠETT NIPPROPONU L-IŻVILUPP TA’ ŻEWĠ TIPI TA’ GĦODOD GĦALL-ISTUDJU TAL-FUNZJONIJIET TAL-ĠENI FL-AFIDI. MINN NAĦA WAĦDA, DAN IL-PROĠETT JIPPROPONI METODOLOĠIJA RNAI ALTERNATTIVA LI TIKKONSISTI FIL-PROVVISTA KONTINWA TAD-DSRNA MEĦTIEĠA BIEX TISKATTA L-RNA BILLI TIĠI INKLUŻA F’VIRUS TAL-PJANTI LI JINFETTA L-PJANTA LI L-AFIDI B’MOD NATURALI JIEKOL FUQHA. DIN IT-TEKNIKA, IMSEJĦA VIGS (IS-SAJLENSER TAL-ĠENE INDOTTA MILL-VIRUS), HIJA GĦODDA UŻATA B’SUĊĊESS FIS-SAJLENSER TAL-ĠENI TAL-PJANTI. IT-TIENI NETT, BIĦSIEBNA NIŻVILUPPAW IL-METODOLOĠIJA CRISPR/CAS FL-AFIDI. MINBARRA LI TINVESTIGA L-ESTENSJONI TA ‘DAWN IT-TEKNIKI GĦALL-AFIDI, AĦNA SE TINVESTIGA R-RWOL TA’ ĠENI KANDIDATI LI AĦNA IDENTIFIKAJNA S’ISSA FIL-PROĊESSI LI FIHOM HUMA ALLEGATAMENT JIPPARTEĊIPAW. B’MOD KOLLATERALI, GĦANDNA L-INTENZJONI LI NEVALWAW L-UTILITÀ TAL-ĠENI TAS-SAJLENSER INVOLUTI FIS-SINTEŻI TAL-KAROTENOJDI, LI HUMA ESKLUSSIVI GĦALL-AFIDI, FIL-KONTROLL TAL-POPOLAZZJONIJIET TAGĦHOM. IS-SUĊĊESS TAL-PROĠETT SE JIPPROVDI GĦODDA BIEX JIĠU STUDJATI ĦAFNA ĠENI APHID TA’ INTERESS U STRATEĠIJA ĠDIDA U SIKURA GĦALL-KONTROLL TAL-ORGANIŻMI TA’ ĦSARA BBAŻATA FUQ PJANTI TRANSĠENIĊI GĦAL FRAMMENTI TA’ ĠENI APHID. (Maltese)
    18 August 2022
    0 references
    LAPUTIS IR AUGU SAP NEPIEREDZĒJUŠI KUKAIŅI, KAS PAZĪSTAMI VISĀ PASAULĒ PAR EKONOMISKIEM ZAUDĒJUMIEM, KO DAŽĀM KAITĒKĻU SUGĀM RADA TO KLĀTBŪTNE KULTŪRAUGU AUGOS. TURKLĀT LAPUTĪM IR VAIRĀKAS ĪPAŠĪBAS SAVOS DZĪVES CIKLOS, KAS PADARA TOS ĪPAŠI INTERESANTUS PĒTĪT DAŽĀDUS TO BIOLOĢIJAS ASPEKTUS, PIEMĒRAM, DAŽĀDOS PARĀDĪTOS POLIFENISMUS. KOPŠ 2010. GADA APHID ACYRTHOSIPHON PISUM MODEĻA GENOMS IR PIEEJAMS ZINĀTNISKAJAI KOPIENAI. ŠĪ UN CITU GENOMU PIEEJAMĪBA IR BŪTISKA MOLEKULĀRO MEHĀNISMU IZPĒTEI, KAS KONTROLĒ DAŽĀDUS ŠO KUKAIŅU BIOLOĢIJAS ASPEKTUS. MŪSU IEPRIEKŠĒJO PĒTĪJUMU REZULTĀTĀ MĒS ESAM IDENTIFICĒJUŠI UN RAKSTUROJUŠI KANDIDĀTGĒNU AKUMULATORU, LAI PIEDALĪTOS SEKSUĀLĀS FĀZES (LĪDZVĒRTĪGS CITU KUKAIŅU DIAPAUZES) INDUKCIJAS KONTROLEI LAPUTĪM. MĒS ESAM ARĪ IDENTIFICĒJUŠI GĒNUS, KAS ACĪMREDZOT IESAISTĪTI POLIFENISMĀ, KAS SAISTĪTS AR MYRMECOFILIA LAPUTU PARACLETUS CIMICIFORMIS. TOMĒR DAŽU ŠO GĒNU DALĪBA MINĒTAJOS POLIFENISMOS VĒL NAV PIERĀDĪTA, JO TRŪKST STINGRAS METODES, KAS ĻAUTU PĒTĪT GĒNU FUNKCIJAS LAPUTĪM, KAS IETEKMĒ ŠO PĒTĪJUMU PROGRESU. NODERĪGS RĪKS GĒNU FUNKCIJU RAKSTUROŠANAI, KAS IR VEIKSMĪGI IZMANTOTS CITOS INSEKTOS, IR GĒNU KLUSINĀŠANA, IZMANTOJOT RNS TRAUCĒJUMUS (RNAI). DAŽOS PĒTĪJUMOS IR UZSVĒRTAS GRŪTĪBAS, KAS SAISTĪTAS AR RNAI IZMANTOŠANU LAPUTĪM, IZMANTOJOT STANDARTA METODES, KURU PAMATĀ IR MĒRĶA GĒNA FRAGMENTA PAPILDINĀŠANA AR MĀKSLĪGĀS DIĒTAS VAI MIKROINJEKCIJAS PALĪDZĪBU. CRISPR/CAS METODOLOĢIJU VEIKSMĪGI IZMANTO ARĪ PĒTĪJUMOS PAR DAŽĀDU KUKAIŅU GĒNU FUNKCIJĀM. ŠAJĀ PROJEKTĀ MĒS IEROSINĀM IZSTRĀDĀT DIVU VEIDU INSTRUMENTUS, LAI PĒTĪTU GĒNU FUNKCIJAS LAPUTĪM. NO VIENAS PUSES, ŠAJĀ PROJEKTĀ IR IEROSINĀTA ALTERNATĪVA RNAI METODIKA, KAS IETVER NEPĀRTRAUKTU DSRNS PIEGĀDI, KAS NEPIECIEŠAMA RNAI IEDARBINĀŠANAI, IEKĻAUJOT TO AUGU VĪRUSOS, KAS INFICĒ AUGU LAPUTI, AR KURU DABISKI BAROJAS LAPUTIS. ŠĪ METODE, KO SAUC PAR VIGS (VĪRUSU IZRAISĪTA GĒNU KLUSINĀŠANA), IR LĪDZEKLIS, KO VEIKSMĪGI IZMANTO AUGU GĒNU KLUSINĀŠANĀ. OTRKĀRT, MĒS PLĀNOJAM IZSTRĀDĀT CRISPR/CAS METODOLOĢIJU LAPUTĪM. PAPILDUS IZPĒTEI PAR ŠO METOŽU ATTIECINĀŠANU UZ LAPUTĪM MĒS PĒTĪSIM KANDIDĀTGĒNU LOMU, KO MĒS LĪDZ ŠIM ESAM IDENTIFICĒJUŠI PROCESOS, KUROS VIŅI, IESPĒJAMS, PIEDALĀS. PAPILDUS MĒS PLĀNOJAM NOVĒRTĒT TO KLUSINĀŠANAS GĒNU LIETDERĪBU, KAS IESAISTĪTI KAROTINOĪDU SINTĒZĒ, KAS IR EKSKLUZĪVI LAPUTĪM, TO POPULĀCIJU KONTROLĒ. PROJEKTA PANĀKUMI NODROŠINĀS RĪKU DAUDZU INTERESĒJOŠO LAPUTU GĒNU IZPĒTEI UN JAUNU UN DROŠU KAITĒKĻU APKAROŠANAS STRATĒĢIJU, KAS BALSTĪTA UZ TRANSGĒNIEM AUGIEM LAPUTU GĒNU FRAGMENTIEM. (Latvian)
    18 August 2022
    0 references
    VOŠKY SÚ RASTLINNÝ HMYZ SAJÚCI SAP ZNÁMY NA CELOM SVETE PRE HOSPODÁRSKE STRATY SPÔSOBENÉ NIEKTORÝMI DRUHMI ŠKODCOV V DÔSLEDKU ICH PRÍTOMNOSTI V RASTLINÁCH PLODÍN. OKREM TOHO VOŠKY MAJÚ VO SVOJICH ŽIVOTNÝCH CYKLOCH NIEKOĽKO CHARAKTERISTÍK, KTORÉ ICH ROBIA OBZVLÁŠŤ ZAUJÍMAVÝMI PRE ŠTÚDIUM RÔZNYCH ASPEKTOV SVOJEJ BIOLÓGIE, AKO SÚ RÔZNE POLYFENIZMY ZOBRAZENÉ. OD ROKU 2010 JE GENÓM MODELU VOŠKY ACYRTHOSIPHON PISUM DOSTUPNÝ VEDECKÉMU SPOLOČENSTVU. DOSTUPNOSŤ TOHTO A ĎALŠÍCH GENÓMOV JE ROZHODUJÚCA PRE ŠTÚDIUM MOLEKULÁRNYCH MECHANIZMOV, KTORÉ KONTROLUJÚ RÔZNE ASPEKTY BIOLÓGIE TOHTO HMYZU. V DÔSLEDKU NAŠICH PREDCHÁDZAJÚCICH VYŠETROVANÍ SME IDENTIFIKOVALI A CHARAKTERIZOVALI BATÉRIU KANDIDÁTSKYCH GÉNOV NA ÚČASŤ NA KONTROLE INDUKCIE SEXUÁLNEJ FÁZY (EKVIVALENTNEJ DIAPAUZE INÉHO HMYZU) VO VOŠKACH. IDENTIFIKOVALI SME TIEŽ GÉNY, KTORÉ SA ZJAVNE PODIEĽALI NA POLYFENIZME SÚVISIACEJ S MYRMECOFILIOU VO VOŠKY PARACLETUS CIMICIFORMIS. ÚČASŤ NIEKTORÝCH Z TÝCHTO GÉNOV NA SPOMÍNANÝCH POLYFENIZMOCH VŠAK EŠTE NEBOLA PREUKÁZANÁ NEDOSTATKOM ROBUSTNEJ METÓDY, KTORÁ UMOŽŇUJE ŠTÚDIUM GÉNOVÝCH FUNKCIÍ VO VOŠKACH, ČO PODMIEŇUJE POKROK V TÝCHTO ŠTÚDIÁCH. UŽITOČNÝM NÁSTROJOM NA CHARAKTERIZÁCIU GÉNOVÝCH FUNKCIÍ, KTORÝ BOL ÚSPEŠNE POUŽITÝ V INOM HMYZE, JE TLMENIE GÉNOV PROSTREDNÍCTVOM INTERFERENCIE RNA (RNAI). NIEKTORÉ ŠTÚDIE POUKÁZALI NA ŤAŽKOSTI S IMPLEMENTÁCIOU RNAI VO VOŠKACH POMOCOU ŠTANDARDNÝCH TECHNÍK ZALOŽENÝCH NA POSKYTNUTÍ DSRNA KOMPLEMENTÁRNEHO FRAGMENTU CIEĽOVÉHO GÉNU PROSTREDNÍCTVOM UMELEJ STRAVY ALEBO MIKROINJEKCIOU. METODIKA CRISPR/CAS SA TIEŽ ÚSPEŠNE POUŽÍVA V ŠTÚDIÁCH GÉNOVÝCH FUNKCIÍ RÔZNEHO HMYZU. V TOMTO PROJEKTE NAVRHUJEME VÝVOJ DVOCH TYPOV NÁSTROJOV NA ŠTÚDIUM GÉNOVÝCH FUNKCIÍ VO VOŠKACH. NA JEDNEJ STRANE SA V TOMTO PROJEKTE NAVRHUJE ALTERNATÍVNA METODIKA RNAI, KTORÁ SPOČÍVA V POSKYTOVANÍ NEPRETRŽITEJ DODÁVKY DSRNA POTREBNEJ NA SPUSTENIE RNAI JEJ ZAHRNUTÍM DO RASTLINNÉHO VÍRUSU, KTORÝ INFIKUJE RASTLINU VOŠKY PRIRODZENE ŽIVIA. TÁTO TECHNIKA, NAZÝVANÁ VIGS (VÍRUSOM INDUKOVANÝ GÉN TLMENIE), JE NÁSTROJ ÚSPEŠNE POUŽÍVANÝ PRI TLMENÍ RASTLINNÝCH GÉNOV. PO DRUHÉ, MÁME V ÚMYSLE VYPRACOVAŤ METODIKU CRISPR/CAS VO VOŠKACH. OKREM VYŠETROVANIA ROZŠÍRENIA TÝCHTO TECHNÍK NA VOŠKY, BUDEME SKÚMAŤ ÚLOHU KANDIDÁTSKYCH GÉNOV, KTORÉ SME DOTERAZ IDENTIFIKOVALI V PROCESOCH, V KTORÝCH SA ÚDAJNE ZÚČASTŇUJÚ. VEDĽAJŠÍM SPÔSOBOM CHCEME VYHODNOTIŤ UŽITOČNOSŤ TLMIACICH GÉNOV ZAPOJENÝCH DO SYNTÉZY KAROTENOIDOV, KTORÉ SÚ VÝLUČNÉ PRE VOŠKY, PRI KONTROLE ICH POPULÁCIÍ. ÚSPECH PROJEKTU POSKYTNE NÁSTROJ NA ŠTÚDIUM MNOHÝCH ZAUJÍMAVÝCH GÉNOV VOŠIEK A NOVÚ A BEZPEČNÚ STRATÉGIU KONTROLY ŠKODCOV ZALOŽENÚ NA TRANSGÉNNYCH RASTLINÁCH PRE FRAGMENTY VOŠIEK GÉNOV. (Slovak)
    18 August 2022
    0 references
    IS ÉARD ATÁ IN APHIDS NÁ FEITHIDÍ SAP-SUCKING AR FUD AN DOMHAIN MAR GHEALL AR NA CAILLTEANAIS EACNAMAÍOCHA DE BHARR ROINNT SPEICEAS LOTNAIDÍ MAR THORADH AR A LÁITHREACHT I BPLANDAÍ BARR. INA THEANNTA SIN, TÁ ROINNT TRÉITHE AG APHIDS INA SAOLRÉ A FHÁGANN GO BHFUIL SIAD SUIMIÚIL GO HÁIRITHE CHUN STAIDÉAR A DHÉANAMH AR GHNÉITHE ÉAGSÚLA DÁ MBITHEOLAÍOCHT, MAR SHAMPLA AN POLYPHENISMS ÉAGSÚLA A THAISPEÁNTAR. ÓS RUD É 2010 IS É AN GENOME AN TSAMHAIL APHID ACYRTHOSIPHON PISUM AR FÁIL DON PHOBAL EOLAÍOCHTA. TÁ INFHAIGHTEACHT SEO AGUS GENOMES EILE RÍTHÁBHACHTACH CHUN STAIDÉAR A DHÉANAMH AR NA MEICNÍOCHTAÍ MÓILÍNEACHA A RIALAÍONN GNÉITHE ÉAGSÚLA DE BHITHEOLAÍOCHT NA BHFEITHIDÍ SEO. MAR THORADH AR ÁR N-IMSCRÚDUITHE ROIMHE SEO, NÍ MÓR DÚINN CEALLRAÍ GÉINTE IARRTHÓRA A AITHINT AGUS A SHAINTRÉITHRIÚ CHUN PÁIRT A GHLACADH I RIALÚ IONDUCHTAITHE NA CÉIME GNÉIS (COIBHÉISEACH LEIS AN DIAPAUSE FEITHIDÍ EILE) IN APHIDS. TÁIMID TAR ÉIS A AITHINT FREISIN GÉINTE COSÚIL GO BHFUIL BAINT ACU LE POLYPHENISM A BHAINEANN LE MYRMECOFILIA SA PARACLETUS APHID CIMICIFORMIS. MAR SIN FÉIN, NÍL RANNPHÁIRTÍOCHT ROINNT DE NA GÉINTE SEO SA POLYPHENISMS LUAITE LÉIRITHE GO FÓILL AG AN EASPA MODH LÁIDIR A CHEADAÍONN STAIDÉAR A DHÉANAMH AR FHEIDHMEANNA GÉINE IN APHIDS, A BHFUIL COINNÍOLLACHA AN DUL CHUN CINN SNA STAIDÉIR SEO. UIRLIS ÚSÁIDEACH CHUN FEIDHMEANNA GÉINE A THRÉITHRIÚ, A ÚSÁIDEADH GO RATHÚIL I BHFEITHIDÍ EILE, IS UIRLIS Í A TOSTA GÉINE TRÍ THRASNAÍOCHT RNA (RNAI). LEAGADH BÉIM I ROINNT STAIDÉAR AR AN DEACRACHT A BHAINEANN LE RNAI A CHUR CHUN FEIDHME IN AIFIDÍ TRÍ THEICNÍCÍ CAIGHDEÁNACHA A ÚSÁID BUNAITHE AR DSRNA A CHUR AR FÁIL A CHOMHLÁNAÍONN CUID DEN SPRIOCGHÉINE TRÍ AISTÍ BIA SAORGA NÓ TRÍ MHICRI-INSTEALLADH. TÁ MODHEOLAÍOCHT CRISPR/CAS Á HÚSÁID GO RATHÚIL FREISIN I STAIDÉIR AR FHEIDHMEANNA GÉINE FEITHIDÍ ÉAGSÚLA. SA TIONSCADAL SEO MOLAIMID FORBAIRT DHÁ CHINEÁL UIRLISÍ CHUN STAIDÉAR A DHÉANAMH AR FHEIDHMEANNA GÉINE IN APHIDS. AR THAOBH AMHÁIN, MOLTAR LEIS AN TIONSCADAL SEO MODHEOLAÍOCHT MHALARTACH RNAI ARB É ATÁ ANN SOLÁTHAR LEANÚNACH DEN DSRNA A CHUR AR FÁIL A THEASTAÍONN CHUN RNAI A SPREAGADH TRÍNA CHUR SAN ÁIREAMH I VÍREAS PLANDAÍ INA N-IONFHABHTAÍTEAR AN PLANDA GO NÁDÚRTHA. TÁ AN TEICNÍC, AR A DTUGTAR VIGS (VÍREAS SPREAGTHA TOSTA GÉINE), UIRLIS A ÚSÁIDTEAR GO RATHÚIL I TOSTA NA GÉINTE PLANDAÍ. AR AN DARA DUL SÍOS, TÁ SÉ I GCEIST AGAINN MODHEOLAÍOCHT CRISPR/CAS A FHORBAIRT IN APHIDS. CHOMH MAITH LE HIMSCRÚDÚ A DHÉANAMH AR LEATHNÚ NA DTEICNÍCÍ SEO CHUN APHIDS, DÉANFAIMID IMSCRÚDÚ AR RÓL NA NGÉINTE IARRTHÓRA ATÁ AITHEANTA AGAINN GO DTÍ SEO SNA PRÓISIS INA LÍOMHNAÍTEAR GO BHFUIL SIAD RANNPHÁIRTEACH. AR BHEALACH COMHTHAOBHACHTA, TÁ SÉ AR INTINN AGAINN MEASTÓIREACHT A DHÉANAMH AR AN ÁISIÚLACHT A BHAINEANN LE GÉINTE TOSTA A BHFUIL BAINT ACU LE SINTÉIS CAROTENOIDS, ATÁ EISIACH DO NA HAIFIDÍ, I RIALÚ A NDAONRAÍ. CUIRFIDH RATH AN TIONSCADAIL UIRLIS AR FÁIL CHUN STAIDÉAR A DHÉANAMH AR GO LEOR GÉINTE SPÉISE APHID AGUS STRAITÉIS RIALAITHE LOTNAIDÍ NUA AGUS SÁBHÁILTE BUNAITHE AR PHLANDAÍ TRASGHINEACHA LE HAGHAIDH BLÚIRÍ DE GHÉINTE AIFIDÍ. (Irish)
    18 August 2022
    0 references
    MŠICE JSOU ROSTLINNÝ HMYZ SAJÍCÍ SAP ZNÁMÝ PO CELÉM SVĚTĚ PRO HOSPODÁŘSKÉ ZTRÁTY ZPŮSOBENÉ NĚKTERÝMI DRUHY ŠKŮDCŮ V DŮSLEDKU JEJICH PŘÍTOMNOSTI V ROSTLINÁCH PLODIN. MŠICE NAVÍC MAJÍ VE SVÝCH ŽIVOTNÍCH CYKLECH ŘADU CHARAKTERISTIK, KTERÉ JE ČINÍ OBZVLÁŠTĚ ZAJÍMAVÝMI PRO STUDIUM RŮZNÝCH ASPEKTŮ JEJICH BIOLOGIE, JAKO JSOU RŮZNÉ ZOBRAZENÉ POLYFENISMY. OD ROKU 2010 JE PRO VĚDECKOU KOMUNITU K DISPOZICI GENOM MODELU APHID ACYRTHOSIPHON PISUM. DOSTUPNOST TOHOTO A DALŠÍCH GENOMŮ JE ZÁSADNÍ PRO STUDIUM MOLEKULÁRNÍCH MECHANISMŮ, KTERÉ ŘÍDÍ RŮZNÉ ASPEKTY BIOLOGIE TOHOTO HMYZU. V DŮSLEDKU NAŠICH PŘEDCHOZÍCH VYŠETŘOVÁNÍ JSME IDENTIFIKOVALI A CHARAKTERIZOVALI BATERII POTENCIÁLNÍCH GENŮ, KTERÉ SE PODÍLEJÍ NA KONTROLE INDUKCE SEXUÁLNÍ FÁZE (EKVIVALENTNÍ DIAPAUZE JINÉHO HMYZU) U MŠIC. TAKÉ JSME IDENTIFIKOVALI GENY, KTERÉ JSOU ZŘEJMĚ ZAPLETENY DO POLYFENISMU SOUVISEJÍCÍHO S MYRMECOFILIA V AFID PARACLETUS CIMICIFORMIS. ÚČAST NĚKTERÝCH TĚCHTO GENŮ VE ZMÍNĚNÝCH POLYFENISMECH VŠAK DOSUD NEBYLA PROKÁZÁNA ABSENCÍ ROBUSTNÍ METODY, KTERÁ UMOŽŇUJE STUDIUM GENOVÝCH FUNKCÍ MŠIC, COŽ PODMIŇUJE POKROK V TĚCHTO STUDIÍCH. UŽITEČNÝM NÁSTROJEM PRO CHARAKTERIZACI GENOVÝCH FUNKCÍ, KTERÝ BYL ÚSPĚŠNĚ POUŽIT U JINÉHO HMYZU, JE UMLČOVÁNÍ GENŮ PROSTŘEDNICTVÍM RNA INTERFERENCE (RNAI). NĚKTERÉ STUDIE POUKÁZALY NA OBTÍŽNOST IMPLEMENTACE RNAI U MŠIC POMOCÍ STANDARDNÍCH TECHNIK ZALOŽENÝCH NA POSKYTNUTÍ DSRNA KOMPLEMENTÁRNÍHO FRAGMENTU CÍLOVÉHO GENU POMOCÍ UMĚLÉ STRAVY NEBO MIKROINJEKCE. METODIKA CRISPR/CAS SE TAKÉ ÚSPĚŠNĚ POUŽÍVÁ VE STUDIÍCH GENOVÝCH FUNKCÍ RŮZNÉHO HMYZU. V TOMTO PROJEKTU NAVRHUJEME VÝVOJ DVOU TYPŮ NÁSTROJŮ PRO STUDIUM GENOVÝCH FUNKCÍ MŠIC. NA JEDNÉ STRANĚ TENTO PROJEKT NAVRHUJE ALTERNATIVNÍ METODIKU RNAI, KTERÁ SPOČÍVÁ V ZAJIŠTĚNÍ NEPŘETRŽITÉHO ZÁSOBOVÁNÍ DSRNA, KTERÉ JE NEZBYTNÉ K AKTIVACI RNAI, TÍM, ŽE JE ZAHRNE DO ROSTLINNÉHO VIRU, KTERÝ ROSTLINU INFIKUJE AFÁDA PŘIROZENĚ SE ŽIVÍ. TATO TECHNIKA, NAZÝVANÁ VIGS (VIREM INDUKOVANÉ GENOVÉ TLUMENÍ), JE NÁSTROJ ÚSPĚŠNĚ POUŽÍVANÝ PŘI UMLČOVÁNÍ ROSTLINNÝCH GENŮ. ZA DRUHÉ, MÁME V ÚMYSLU VYVINOUT METODIKU CRISPR/CAS U MŠIC. KROMĚ ZKOUMÁNÍ ROZŠÍŘENÍ TĚCHTO TECHNIK NA MŠICE PROZKOUMÁME ÚLOHU POTENCIÁLNÍCH GENŮ, KTERÉ JSME DOSUD IDENTIFIKOVALI V PROCESECH, NA KTERÝCH SE ÚDAJNĚ PODÍLEJÍ. VEDLEJŠÍM ZPŮSOBEM HODLÁME VYHODNOTIT UŽITEČNOST UMLČENÍ GENŮ ZAPOJENÝCH DO SYNTÉZY KAROTENOIDŮ, KTERÉ JSOU VÝHRADNÍ PRO MŠICE, PŘI KONTROLE JEJICH POPULACÍ. ÚSPĚCH PROJEKTU POSKYTNE NÁSTROJ PRO STUDIUM MNOHA UŽITEČNÝCH GENŮ A NOVOU A BEZPEČNOU STRATEGII BOJE PROTI ŠKŮDCŮM ZALOŽENOU NA TRANSGENNÍCH ROSTLINÁCH PRO FRAGMENTY APHID GENŮ. (Czech)
    18 August 2022
    0 references
    OS PULGÕES SÃO INSETOS SUGADORES DE SAP CONHECIDOS EM TODO O MUNDO PELAS PERDAS ECONÔMICAS CAUSADAS POR ALGUMAS ESPÉCIES DE PRAGAS COMO RESULTADO DA SUA PRESENÇA EM PLANTAS AGRÍCOLAS. ALÉM DISSO, OS PULGÕES TÊM UMA SÉRIE DE CARACTERÍSTICAS EM SEUS CICLOS DE VIDA QUE OS TORNAM PARTICULARMENTE INTERESSANTES PARA ESTUDAR DIFERENTES ASPETOS DE SUA BIOLOGIA, COMO OS VÁRIOS POLIFENISMOS EXIBIDOS. DESDE 2010, O GENOMA DO PULGANTE MODELO ACYRTHOSIPHON PISUM ESTÁ DISPONÍVEL PARA A COMUNIDADE CIENTÍFICA. A DISPONIBILIDADE DESTE E DE OUTROS GENOMAS É CRUCIAL PARA O ESTUDO DOS MECANISMOS MOLECULARES QUE CONTROLAM DIFERENTES ASPETOS DA BIOLOGIA DESSES INSETOS. COMO RESULTADO DE NOSSAS INVESTIGAÇÕES ANTERIORES, IDENTIFICAMOS E CARACTERIZAMOS UMA PILHA DE GENES CANDIDATOS PARA PARTICIPAR DO CONTROLE DA INDUÇÃO DA FASE SEXUAL (EQUIVALENTE À DIAPAUSA DE OUTROS INSETOS) EM PULGÕES. TAMBÉM IDENTIFICAMOS GENES APARENTEMENTE IMPLICADOS EM UM POLIFENISMO RELACIONADO A MYRMECOFILIA NO AFÍDEO PARACLETUS CIMICIFORMIS. NO ENTANTO, A PARTICIPAÇÃO DE ALGUNS DESSES GENES NOS POLIFENISMOS MENCIONADOS AINDA NÃO FOI DEMONSTRADA PELA FALTA DE UM MÉTODO ROBUSTO QUE PERMITA O ESTUDO DAS FUNÇÕES GÊNICAS EM PULGÕES, O QUE CONDICIONA O PROGRESSO NESSES ESTUDOS. UMA FERRAMENTA ÚTIL PARA A CARACTERIZAÇÃO DE FUNÇÕES GÊNICAS, QUE TEM SIDO USADA COM SUCESSO EM OUTROS INSETOS, É O SILENCIAMENTO DO GENE ATRAVÉS DA INTERFERÊNCIA DO RNA (RNAI). ALGUNS ESTUDOS TÊM DESTACADO A DIFICULDADE DE IMPLEMENTAR RNAI EM PULGÕES USANDO TÉCNICAS PADRÃO BASEADAS EM FORNECER UM DSRNA COMPLEMENTAR DE UM FRAGMENTO DO GENE ALVO POR MEIO DE DIETAS ARTIFICIAIS OU POR MICROINJEÇÃO. A METODOLOGIA CRISPR/CAS TAMBÉM ESTÁ SENDO UTILIZADA COM SUCESSO EM ESTUDOS SOBRE FUNÇÕES GÊNICAS DE DIFERENTES INSETOS. NESTE PROJETO PROPOMOS O DESENVOLVIMENTO DE DOIS TIPOS DE FERRAMENTAS PARA ESTUDAR FUNÇÕES GENÉTICAS EM PULGÕES. POR UM LADO, ESTE PROJETO PROPÕE UMA METODOLOGIA ALTERNATIVA DE RNAI QUE CONSISTE EM FORNECER UM FORNECIMENTO CONTÍNUO DO DSRNA NECESSÁRIO PARA DESENCADEAR O RNAI, INCLUINDO-O NUM VÍRUS VEGETAL QUE INFETA A PLANTA EM QUE O PULGANTE SE ALIMENTA NATURALMENTE. ESTA TÉCNICA, CHAMADA VIGS (VÍRUS INDUZIDO GENE SILENCIAMENTO), É UMA FERRAMENTA USADA COM SUCESSO NO SILENCIAMENTO DE GENES DE PLANTAS. EM SEGUNDO LUGAR, PRETENDEMOS DESENVOLVER A METODOLOGIA CRISPR/CAS EM PULGÕES. ALÉM DE INVESTIGAR A EXTENSÃO DESSAS TÉCNICAS AOS PULGÕES, INVESTIGAREMOS O PAPEL DOS GENES CANDIDATOS QUE IDENTIFICAMOS ATÉ AGORA NOS PROCESSOS EM QUE ELES SUPOSTAMENTE PARTICIPAM. DE FORMA COLATERAL, PRETENDEMOS AVALIAR A UTILIDADE DE GENES SILENCIOSOS ENVOLVIDOS NA SÍNTESE DE CAROTENOIDES, QUE SÃO EXCLUSIVOS DOS PULGÕES, NO CONTROLE DE SUAS POPULAÇÕES. O SUCESSO DO PROJETO FORNECERÁ UMA FERRAMENTA PARA ESTUDAR MUITOS GENES PULGÕES DE INTERESSE E UMA NOVA E SEGURA ESTRATÉGIA DE CONTROLE DE PRAGAS BASEADA EM PLANTAS TRANSGÊNICAS PARA FRAGMENTOS DE GENES DE PULGÕES. (Portuguese)
    18 August 2022
    0 references
    LEHETÄIDE ON TAIME SAP-I IMETAVAD PUTUKAD, KEDA TUNTAKSE KOGU MAAILMAS MAJANDUSLIKU KAHJU POOLEST, MIDA PÕHJUSTAVAD MÕNED KAHJURID, MIS TULENEVAD NENDE ESINEMISEST PÕLLUKULTUURIDES. LISAKS LEHETÄIDE ON MITMEID OMADUSI OMA ELUTSÜKLITE, MIS MUUDAVAD NAD ERITI HUVITAV UURIDA ERINEVAID ASPEKTE OMA BIOLOOGIA, NAGU ERINEVATE POLÜFENISMID KUVATAKSE. ALATES 2010. AASTAST ON TEADLASTELE KÄTTESAADAV LEHETÄIDE ACYRTHOSIPHON PISUM’I GENOOMI. SELLE JA TEISTE GENOOMIDE KÄTTESAADAVUS ON VÄGA OLULINE, ET UURIDA MOLEKULAARMEHHANISME, MIS KONTROLLIVAD NENDE PUTUKATE BIOLOOGIA ERINEVAID ASPEKTE. TÄNU MEIE VARASEMATELE UURIMISTELE OLEME TUVASTANUD JA ISELOOMUSTANUD KANDIDAATGEENIDE AKU, ET OSALEDA LEHETÄIDE SUGUFAASI (MIS ON SAMAVÄÄRNE TEISTE PUTUKATE DIAPAUSIGA) INDUKTSIOONI KONTROLLIS. SAMUTI OLEME TUVASTANUD GEENID, MIS ON ILMSELT SEOTUD POLÜFENISMI SEOTUD MYRMECOFILIA LEHETÄIDE PARACLETUS CIMICIFORMIS. MÕNEDE NENDE GEENIDE OSALEMIST NIMETATUD POLÜFENISMIDES EI OLE SIISKI VEEL TÕESTATUD TUGEVA MEETODI PUUDUMISEGA, MIS VÕIMALDAKS UURIDA LEHETÄIDE GEENIFUNKTSIOONE, MIS TINGIB NENDE UURINGUTE EDENEMISE. KASULIK VAHEND GEENIFUNKTSIOONIDE ISELOOMUSTAMISEKS, MIDA ON EDUKALT KASUTATUD TEISTE PUTUKATE PUHUL, ON GEENI VAIGISTAMINE RNA SEGAMISE (RNAI) KAUDU. MÕNED UURINGUD ON NÄIDANUD, ET RNAI KASUTAMINE LEHETÄIDE PUHUL ON RASKE, KASUTADES STANDARDTEHNIKAID, MIS PÕHINEVAD SIHTGEENI FRAGMENDILE TÄIENDAVA DSRNA PAKKUMISEL KUNSTLIKU TOITUMISE VÕI MIKROSÜSTIMISE TEEL. CRISPR/CASI METOODIKAT KASUTATAKSE EDUKALT KA ERINEVATE PUTUKATE GEENIFUNKTSIOONIDE UURINGUTES. SELLES PROJEKTIS TEEME ETTEPANEKU ARENDADA KAHTE TÜÜPI VAHENDEID, ET UURIDA LEHETÄIDE GEENIFUNKTSIOONE. ÜHELT POOLT PAKUTAKSE KÄESOLEVAS PROJEKTIS VÄLJA ALTERNATIIVNE RNAI METOODIKA, MIS SEISNEB RNAI VALLANDAMISEKS VAJALIKU DSRNA PIDEVAS TARNIMISES, LISADES SELLE TAIMEVIIRUSESSE, MIS NAKATAB TAIME LEHETÄIDE LOODUSLIKULT TOIDAB. SEE MEETOD NIMEGA VIGS (VIIRUSE INDUTSEERITUD GEENI VAIGISTAMINE) ON VAHEND, MIDA KASUTATAKSE EDUKALT TAIMEGEENIDE VAIGISTAMISEL. TEISEKS KAVATSEME LEHETÄIDE PUHUL VÄLJA TÖÖTADA CRISPR/CASI METOODIKA. LISAKS NENDE MEETODITE LAIENDAMISE UURIMISELE LEHETÄIDE SUHTES UURIME KANDIDAATGEENIDE ROLLI, MILLE OLEME SENI KINDLAKS TEINUD PROTSESSIDES, MILLES NAD VÄIDETAVALT OSALEVAD. TAGAPLAANIL KAVATSEME HINNATA VAIGISTAVATE GEENIDE KASULIKKUST KAROTENOIDIDE SÜNTEESIS, MIS ON EKSKLUSIIVSED LEHETÄIDE OMA POPULATSIOONIDE KONTROLLI ALL. PROJEKTI EDU ANNAB VAHENDI PALJUDE HUVIPAKKUVATE LEHETÄIDE GEENIDE UURIMISEKS NING UUE JA OHUTU KAHJURITÕRJE STRATEEGIA, MIS PÕHINEB LEHETÄIDE GEENIDE FRAGMENTIDE TRANSGEENSETEL TAIMEDEL. (Estonian)
    18 August 2022
    0 references
    A LEVÉLTETVEK OLYAN NÖVÉNYI SAP-SZOPÓ ROVAROK, AMELYEK VILÁGSZERTE ISMERTEK AZ EGYES KÁRTEVŐ FAJOK ÁLTAL A NÖVÉNYNÖVÉNYEKBEN VALÓ JELENLÉTÜK MIATT OKOZOTT GAZDASÁGI VESZTESÉGEKRŐL. EZENKÍVÜL A LEVÉLTETVEK ÉLETCIKLUSUKBAN SZÁMOS JELLEMZŐVEL RENDELKEZNEK, AMELYEK KÜLÖNÖSEN ÉRDEKESSÉ TESZIK ŐKET A BIOLÓGIÁJUK KÜLÖNBÖZŐ ASPEKTUSAINAK TANULMÁNYOZÁSÁRA, MINT PÉLDÁUL A KÜLÖNBÖZŐ POLIFENIZMUSOK. 2010 ÓTA AZ ACYRTHOSIPHON PISUM MODELL GENOMJA ELÉRHETŐ A TUDOMÁNYOS KÖZÖSSÉG SZÁMÁRA. ENNEK ÉS MÁS GENOMOKNAK A RENDELKEZÉSRE ÁLLÁSA DÖNTŐ FONTOSSÁGÚ A ROVAROK BIOLÓGIÁJÁNAK KÜLÖNBÖZŐ ASPEKTUSAIT SZABÁLYOZÓ MOLEKULÁRIS MECHANIZMUSOK TANULMÁNYOZÁSÁHOZ. KORÁBBI VIZSGÁLATAINK EREDMÉNYEKÉNT AZONOSÍTOTTUK ÉS JELLEMEZTÜK A JELÖLT GÉNEKET, HOGY RÉSZT VEGYENEK A LEVÉLTETVEKBEN A SZEXUÁLIS FÁZIS INDUKCIÓJÁNAK ELLENŐRZÉSÉBEN (AMI EGYENÉRTÉKŰ MÁS ROVAROK DIAPAUSE-JÁVAL). AZONOSÍTOTTUNK OLYAN GÉNEKET IS, AMELYEK A LEVÉLTETŰ PARACLETUS CIMICIFORMIS-BAN TALÁLHATÓ MYRMECOFILIA-VAL KAPCSOLATOS POLIFENIZMUSBAN NYILVÁN ÉRINTETTEK. NÉHÁNY ILYEN GÉNNEK AZ EMLÍTETT POLIFENIZMUSOKBAN VALÓ RÉSZVÉTELÉT AZONBAN MÉG NEM IGAZOLTA EGY OLYAN ROBUSZTUS MÓDSZER HIÁNYA, AMELY LEHETŐVÉ TESZI A LEVÉLTETVEK GÉNFUNKCIÓINAK TANULMÁNYOZÁSÁT, AMI AZ EZEKBEN A VIZSGÁLATOKBAN ELÉRT HALADÁST FELTÉTELEKHEZ KÖTI. EGY HASZNOS ESZKÖZ A GÉNFUNKCIÓK JELLEMZÉSÉRE, AMELYET SIKERESEN ALKALMAZTAK MÁS ROVAROKBAN, AZ RNS INTERFERENCIA (RNAI) KERESZTÜLI GÉNCSENDELÉS. EGYES VIZSGÁLATOK RÁMUTATTAK ARRA, HOGY AZ RNAI-T A LEVÉLTETVEKBEN OLYAN STANDARD TECHNIKÁK ALKALMAZÁSÁVAL KELL VÉGREHAJTANI, AMELYEK A CÉLGÉN TÖREDÉKÉNEK DSRNS-T KIEGÉSZÍTŐ, MESTERSÉGES ÉTRENDDEL VAGY MIKROINJEKCIÓVAL TÖRTÉNŐ BIZTOSÍTÁSÁN ALAPULNAK. A CRISPR/CAS MÓDSZERTANT SIKERESEN ALKALMAZZÁK A KÜLÖNBÖZŐ ROVAROK GÉNFUNKCIÓIVAL KAPCSOLATOS VIZSGÁLATOKBAN IS. EBBEN A PROJEKTBEN KÉTFÉLE ESZKÖZ KIFEJLESZTÉSÉT JAVASOLJUK A LEVÉLTETVEK GÉNFUNKCIÓINAK TANULMÁNYOZÁSÁRA. EGYRÉSZT EZ A PROJEKT ALTERNATÍV RNAI-MÓDSZERT JAVASOL, AMELY AZ RNAI KIVÁLTÁSÁHOZ SZÜKSÉGES DSRNS FOLYAMATOS ELLÁTÁSÁT FOGLALJA MAGÁBAN EGY OLYAN NÖVÉNYVÍRUSBA, AMELY MEGFERTŐZI A LEVÉLTETVET TERMÉSZETES MÓDON TÁPLÁLT NÖVÉNYT. EZ A TECHNIKA, AZ ÚGYNEVEZETT VIGS (VÍRUS ÁLTAL INDUKÁLT GÉN SILENCING), EGY ESZKÖZ SIKERESEN HASZNÁLJÁK A HANGTOMPÍTÓ A NÖVÉNYI GÉNEK. MÁSODSZOR, SZÁNDÉKUNKBAN ÁLL FEJLESZTENI A CRISPR/CAS MÓDSZERTANT LEVÉLTETVEKBEN. EZEN TECHNIKÁK LEVÉLTETVEKRE VALÓ KITERJESZTÉSÉNEK VIZSGÁLATA MELLETT MEGVIZSGÁLJUK A JELÖLT GÉNEK SZEREPÉT IS, AMELYEKET EDDIG AZONOSÍTOTTUNK AZOKBAN A FOLYAMATOKBAN, AMELYEKBEN ÁLLÍTÓLAG RÉSZT VESZNEK. MELLÉKESEN SZÁNDÉKOZUNK ÉRTÉKELNI A KAROTINOIDOK SZINTÉZISÉBEN RÉSZT VEVŐ GÉNEK HASZNOSSÁGÁT, AMELYEK KIZÁRÓLAG A LEVÉLTETVEK, A POPULÁCIÓIK ELLENŐRZÉSE SORÁN. A PROJEKT SIKERE SZÁMOS ÉRDEKES LEVÉLTETVE-GÉNEK TANULMÁNYOZÁSÁRA SZOLGÁLÓ ESZKÖZT ÉS EGY ÚJ ÉS BIZTONSÁGOS KÁRTEVŐVÉDELMI STRATÉGIÁT BIZTOSÍT, AMELY A LEVÉLTETVEK TÖREDÉKEINEK TRANSZGENIKUS NÖVÉNYEKEN ALAPUL. (Hungarian)
    18 August 2022
    0 references
    ЛИСТНИТЕ ВЪШКИ СА РАСТИТЕЛНИ СМУЧЕЩИ SAP НАСЕКОМИ, ИЗВЕСТНИ В СВЕТОВЕН МАЩАБ С ИКОНОМИЧЕСКИТЕ ЗАГУБИ, ПРИЧИНЕНИ ОТ НЯКОИ ВИДОВЕ ВРЕДИТЕЛИ В РЕЗУЛТАТ НА ТЯХНОТО ПРИСЪСТВИЕ В РАСТИТЕЛНИТЕ РАСТЕНИЯ. ОСВЕН ТОВА ЛИСТНИТЕ ВЪШКИ ИМАТ РЕДИЦА ХАРАКТЕРИСТИКИ В СВОИТЕ ЖИЗНЕНИ ЦИКЛИ, КОИТО ГИ ПРАВЯТ ОСОБЕНО ИНТЕРЕСНИ ЗА ИЗУЧАВАНЕ НА РАЗЛИЧНИ АСПЕКТИ НА ТЯХНАТА БИОЛОГИЯ, КАТО НАПРИМЕР РАЗЛИЧНИТЕ ПОКАЗАНИ ПОЛИФЕНИЗМИ. ОТ 2010 Г. ГЕНОМЪТ НА МОДЕЛА ЛИСТНИ ВЪШКИ ACYRTHOSIPHON PISUM Е НА РАЗПОЛОЖЕНИЕ НА НАУЧНАТА ОБЩНОСТ. НАЛИЧИЕТО НА ТОЗИ И ДРУГИ ГЕНОМИ Е ОТ РЕШАВАЩО ЗНАЧЕНИЕ ЗА ИЗУЧАВАНЕТО НА МОЛЕКУЛЯРНИТЕ МЕХАНИЗМИ, КОИТО КОНТРОЛИРАТ РАЗЛИЧНИ АСПЕКТИ НА БИОЛОГИЯТА НА ТЕЗИ НАСЕКОМИ. В РЕЗУЛТАТ НА ПРЕДИШНИТЕ НИ ИЗСЛЕДВАНИЯ ИДЕНТИФИЦИРАХМЕ И ХАРАКТЕРИЗИРАХМЕ БАТЕРИЯ ОТ КАНДИДАТ ГЕНИ ЗА УЧАСТИЕ В КОНТРОЛА НА ИНДУКЦИЯТА НА ПОЛОВАТА ФАЗА (ЕКВИВАЛЕНТНА НА ДИАПАУЗАТА НА ДРУГИ НАСЕКОМИ) В ЛИСТНИТЕ ВЪШКИ. СЪЩО ТАКА ИДЕНТИФИЦИРАХМЕ ГЕНИ, ОЧЕВИДНО ЗАМЕСЕНИ В ПОЛИФЕНИЗЪМ, СВЪРЗАН С MYRMECOFILIA В ЛИСТНИ ВЪШКИ PARACLETUS CIMICIFORMIS. ВЪПРЕКИ ТОВА, УЧАСТИЕТО НА НЯКОИ ОТ ТЕЗИ ГЕНИ В СПОМЕНАТИТЕ ПОЛИФЕНИЗМИ ВСЕ ОЩЕ НЕ Е ДОКАЗАНО ОТ ЛИПСАТА НА СТАБИЛЕН МЕТОД, КОЙТО ПОЗВОЛЯВА ИЗУЧАВАНЕТО НА ГЕННИТЕ ФУНКЦИИ НА ЛИСТНИТЕ ВЪШКИ, КОЕТО ОБУСЛАВЯ НАПРЕДЪКА В ТЕЗИ ИЗСЛЕДВАНИЯ. ПОЛЕЗЕН ИНСТРУМЕНТ ЗА ХАРАКТЕРИЗИРАНЕ НА ГЕННИТЕ ФУНКЦИИ, КОЙТО Е БИЛ УСПЕШНО ИЗПОЛЗВАН ПРИ ДРУГИ НАСЕКОМИ, Е ГЕННОТО ЗАГЛУШАВАНЕ ЧРЕЗ СМУЩЕНИЯ В РНК (РНК). НЯКОИ ПРОУЧВАНИЯ ПОДЧЕРТАВАТ ТРУДНОСТТА ПРИ ПРИЛАГАНЕТО НА РНК В ЛИСТНИ ВЪШКИ, КАТО СЕ ИЗПОЛЗВАТ СТАНДАРТНИ ТЕХНИКИ, ОСНОВАНИ НА ОСИГУРЯВАНЕ НА DSRNA ДОПЪЛВАЩ ФРАГМЕНТ ОТ ПРИЦЕЛНИЯ ГЕН ЧРЕЗ ИЗКУСТВЕН ХРАНИТЕЛЕН РЕЖИМ ИЛИ ЧРЕЗ МИКРОИНЖЕКТИРАНЕ. МЕТОДОЛОГИЯТА CRISPR/CAS СЪЩО СЕ ИЗПОЛЗВА УСПЕШНО В ПРОУЧВАНИЯ НА ГЕННИТЕ ФУНКЦИИ НА РАЗЛИЧНИ НАСЕКОМИ. В ТОЗИ ПРОЕКТ ПРЕДЛАГАМЕ РАЗРАБОТВАНЕТО НА ДВА ВИДА ИНСТРУМЕНТИ ЗА ИЗУЧАВАНЕ НА ГЕННИТЕ ФУНКЦИИ НА ЛИСТНИТЕ ВЪШКИ. ОТ ЕДНА СТРАНА, ТОЗИ ПРОЕКТ ПРЕДЛАГА АЛТЕРНАТИВНА МЕТОДОЛОГИЯ ЗА РНК, КОЯТО СЕ СЪСТОИ В ОСИГУРЯВАНЕ НА НЕПРЕКЪСНАТО СНАБДЯВАНЕ С DSRNA, НЕОБХОДИМА ЗА ЗАДЕЙСТВАНЕТО НА РНК, ЧРЕЗ ВКЛЮЧВАНЕТО Ѝ В РАСТИТЕЛЕН ВИРУС, КОЙТО ЗАРАЗЯВА РАСТЕНИЕТО, С КОЕТО СЕ ХРАНИ ЕСТЕСТВЕНО. ТАЗИ ТЕХНИКА, НАРЕЧЕНА VIGS (ВИРУСНО ИНДУЦИРАНО ГЕННО ЗАГЛУШАВАНЕ), Е ИНСТРУМЕНТ, ИЗПОЛЗВАН УСПЕШНО В ЗАГЛУШАВАНЕТО НА РАСТИТЕЛНИТЕ ГЕНИ. ВТОРО, ВЪЗНАМЕРЯВАМЕ ДА РАЗРАБОТИМ МЕТОДОЛОГИЯТА CRISPR/CAS ЗА ЛИСТНИ ВЪШКИ. В ДОПЪЛНЕНИЕ КЪМ ПРОУЧВАНЕТО НА РАЗШИРЯВАНЕТО НА ТЕЗИ ТЕХНИКИ ВЪРХУ ЛИСТНИТЕ ВЪШКИ, ЩЕ ПРОУЧИМ РОЛЯТА НА КАНДИДАТ-ГЕНИТЕ, КОИТО СМЕ ИДЕНТИФИЦИРАЛИ ДОСЕГА В ПРОЦЕСИТЕ, В КОИТО СЕ ТВЪРДИ, ЧЕ УЧАСТВАТ. В ДОПЪЛНЕНИЕ, НИЕ ВЪЗНАМЕРЯВАМЕ ДА ОЦЕНИМ ПОЛЕЗНОСТТА НА ШУМОЗАГЛУШАВАЩИТЕ ГЕНИ, УЧАСТВАЩИ В СИНТЕЗА НА КАРОТЕНОИДИ, КОИТО СА ИЗКЛЮЧИТЕЛНО ЗА ЛИСТНИ ВЪШКИ, В КОНТРОЛА НА ТЕХНИТЕ ПОПУЛАЦИИ. УСПЕХЪТ НА ПРОЕКТА ЩЕ ОСИГУРИ ИНСТРУМЕНТ ЗА ПРОУЧВАНЕ НА МНОГО ИНТЕРЕСНИ ГЕНИ ЗА ЛИСТНИ ВЪШКИ И НОВА И БЕЗОПАСНА СТРАТЕГИЯ ЗА КОНТРОЛ НА ВРЕДИТЕЛИТЕ, ОСНОВАНА НА ТРАНСГЕННИ РАСТЕНИЯ ЗА ФРАГМЕНТИ ОТ ЛИСТНИ ГЕНИ. (Bulgarian)
    18 August 2022
    0 references
    AMARAI YRA AUGALŲ SAP ČIULPIAMIEJI VABZDŽIAI, ŽINOMI VISAME PASAULYJE DĖL EKONOMINIŲ NUOSTOLIŲ, KURIUOS SUKELIA KAI KURIOS KENKĖJŲ RŪŠYS DĖL JŲ BUVIMO AUGALUOSE. BE TO, AMARAI SAVO GYVENIMO CIKLUOSE TURI KELETĄ SAVYBIŲ, DĖL KURIŲ JIE YPAČ ĮDOMU STUDIJUOTI ĮVAIRIUS JŲ BIOLOGIJOS ASPEKTUS, TOKIUS KAIP ĮVAIRŪS RODOMI POLIFENIZMAI. NUO 2010 M. APHID ACYRTHOSIPHON PISUM MODELIO GENOMAS YRA PRIEINAMAS MOKSLO BENDRUOMENEI. ŠIO IR KITŲ GENOMŲ PRIEINAMUMAS YRA LABAI SVARBUS TIRIANT MOLEKULINIUS MECHANIZMUS, KURIE KONTROLIUOJA SKIRTINGUS ŠIŲ VABZDŽIŲ BIOLOGIJOS ASPEKTUS. KAIP MŪSŲ ANKSTESNIŲ TYRIMŲ REZULTATAS, MES NUSTATĖME IR APIBŪDINOME KANDIDATŲ GENŲ BATERIJĄ DALYVAUTI KONTROLIUOJANT LYTINĖS FAZĖS (LYGIAVERČIO KITŲ VABZDŽIŲ DIAPAUZEI) INDUKCIJOS AMARUOSE. MES TAIP PAT NUSTATĖME GENUS, AKIVAIZDŽIAI SUSIJUSIUS SU POLIFENIZMU, SUSIJUSIU SU MYRMECOFILIA AMARŲ PARACLETUS CIMICIFORMIS. TAČIAU KAI KURIŲ IŠ ŠIŲ GENŲ DALYVAVIMAS MINĖTUOSE POLIFENIZMUOSE DAR NEĮRODYTAS, NES TRŪKSTA TVIRTO METODO, KURIS LEISTŲ TIRTI GENŲ FUNKCIJAS AMARUOSE, O TAI SĄLYGOJA ŠIŲ TYRIMŲ PAŽANGĄ. NAUDINGA PRIEMONĖ GENŲ FUNKCIJOMS APIBŪDINTI, KURI BUVO SĖKMINGAI NAUDOJAMA KITUOSE VABZDŽIUOSE, YRA GENŲ NUSLOPINIMAS PER RNR TRUKDŽIUS (RNRI). KAI KURIE TYRIMAI PARODĖ, KAD SUNKU ĮGYVENDINTI RNAI AMARUOSE NAUDOJANT STANDARTINIUS METODUS, GRINDŽIAMUS TAIKINIO GENO FRAGMENTO PAPILDYMU DSRNR, NAUDOJANT DIRBTINĘ DIETĄ ARBA MIKROINJEKCIJĄ. CRISPR/CAS METODIKA TAIP PAT SĖKMINGAI NAUDOJAMA TIRIANT ĮVAIRIŲ VABZDŽIŲ GENŲ FUNKCIJAS. ŠIAME PROJEKTE SIŪLOME KURTI DVIEJŲ TIPŲ PRIEMONES, SKIRTAS GENŲ FUNKCIJOMS AMARUOSE TIRTI. VIENA VERTUS, ŠIAME PROJEKTE SIŪLOMA ALTERNATYVI RNRI METODIKA, KURIĄ TAIKANT BŪTŲ NUOLAT TIEKIAMA DSRNR, REIKALINGA RNR AKTYVUOTI, ĮTRAUKIANT JĄ Į AUGALO VIRUSĄ, KURIUO NATŪRALIAI MAITINAMAS AMARAS. ŠIS METODAS, VADINAMAS VIGS (VIRUSO SUKELTAS GENŲ SILPIMAS), YRA ĮRANKIS, SĖKMINGAI NAUDOJAMAS AUGALŲ GENŲ SILPIMUI. ANTRA, KETINAME PLĖTOTI CRISPR/CAS METODIKĄ AMARUOSE. BE TYRIMO ŠIŲ METODŲ TAIKYMO AMARAMS, MES IŠNAGRINĖSIME KANDIDATŲ GENŲ VAIDMENĮ, KURĮ IKI ŠIOL NUSTATĖME PROCESUOSE, KURIUOSE JIE TARIAMAI DALYVAUJA. BE ABEJO, MES KETINAME ĮVERTINTI SLOPINANČIŲ GENŲ, DALYVAUJANČIŲ KAROTINOIDŲ SINTEZĖJE, KURIE YRA IŠSKIRTINIAI AMARAI, NAUDĄ KONTROLIUOJANT JŲ POPULIACIJAS. PROJEKTO SĖKMĖ SUTEIKS PRIEMONĘ IŠTIRTI DAUGELĮ DOMINANČIŲ AMARŲ GENŲ IR NAUJĄ IR SAUGIĄ KENKĖJŲ KONTROLĖS STRATEGIJĄ, PAGRĮSTĄ TRANSGENINIAIS AUGALAIS, SKIRTAIS AMARŲ GENŲ FRAGMENTAMS. (Lithuanian)
    18 August 2022
    0 references
    LISNE UŠI SU BILJNI INSEKTI KOJI SIŠU SAP POZNATI DILJEM SVIJETA PO EKONOMSKIM GUBICIMA KOJE SU UZROKOVALE NEKE VRSTE ŠTETOČINA ZBOG NJIHOVE PRISUTNOSTI U BILJKAMA USJEVA. OSIM TOGA, LISNE UŠI U SVOJIM ŽIVOTNIM CIKLUSIMA IMAJU NIZ KARAKTERISTIKA KOJE IH ČINE POSEBNO ZANIMLJIVIMA ZA PROUČAVANJE RAZLIČITIH ASPEKATA SVOJE BIOLOGIJE, KAO ŠTO SU RAZLIČITI PRIKAZANI POLIFENIZMI. OD 2010. GENOM MODELA LISNE UŠI ACYRTHOSIPHON PISUM DOSTUPAN JE ZNANSTVENOJ ZAJEDNICI. DOSTUPNOST OVOG I DRUGIH GENOMA KLJUČNA JE ZA PROUČAVANJE MOLEKULARNIH MEHANIZAMA KOJI KONTROLIRAJU RAZLIČITE ASPEKTE BIOLOGIJE TIH INSEKATA. KAO REZULTAT NAŠIH PRETHODNIH ISTRAŽIVANJA, IDENTIFICIRALI SMO I OKARAKTERIZIRALI BATERIJU GENA KANDIDATA ZA SUDJELOVANJE U KONTROLI INDUKCIJE SPOLNE FAZE (JEDNAKO DIJAPAUZI DRUGIH INSEKATA) U LISNIM UŠIMA. TAKOĐER SMO IDENTIFICIRALI GENE KOJI SU NAVODNO UPLETENI U POLIFENIZAM VEZAN UZ MYRMECOFILIA U LISNOJ UŠI PARACLETUS CIMICIFORMIS. MEĐUTIM, SUDJELOVANJE NEKIH OD TIH GENA U SPOMENUTIM POLIFENIZMIMA JOŠ NIJE DOKAZANO NEDOSTATKOM ROBUSNE METODE KOJA OMOGUĆUJE PROUČAVANJE GENSKIH FUNKCIJA U LISNIM UŠIMA, ŠTO UVJETUJE NAPREDAK U TIM STUDIJAMA. KORISTAN ALAT ZA KARAKTERIZACIJU GENSKIH FUNKCIJA, KOJI SE USPJEŠNO KORISTI U DRUGIM INSEKTIMA, JE UTIŠAVANJE GENA KROZ RNK INTERFERENCIJU (RNAI). NEKE SU STUDIJE UKAZALE NA POTEŠKOĆE U PRIMJENI RNAI-A U LISNE UŠI PRIMJENOM STANDARDNIH TEHNIKA TEMELJENIH NA PRUŽANJU DSRNK KOMPLEMENTARNE FRAGMENTU CILJNOG GENA UMJETNOM PREHRANOM ILI MIKROINJEKCIJOM. CRISPR/CAS METODOLOGIJA SE TAKOĐER USPJEŠNO KORISTI U ISTRAŽIVANJIMA GENSKIH FUNKCIJA RAZLIČITIH INSEKATA. U OVOM PROJEKTU PREDLAŽEMO RAZVOJ DVIJU VRSTA ALATA ZA PROUČAVANJE GENSKIH FUNKCIJA U LISNIM UŠIMA. S JEDNE STRANE, OVIM SE PROJEKTOM PREDLAŽE ALTERNATIVNA RNAI METODOLOGIJA KOJA SE SASTOJI OD OSIGURAVANJA KONTINUIRANE OPSKRBE DSRNA-OM KOJA JE POTREBNA ZA POKRETANJE RNAI-A UKLJUČIVANJEM U BILJNI VIRUS KOJI ZARAZI BILJNU UŠNU UŠI PRIRODNOM HRANOM. OVA TEHNIKA, NAZVANA VIGS (VIRUS INDUCIRANO UTIŠANJE GENA), JE ALAT KOJI SE USPJEŠNO KORISTI ZA PRIGUŠIVANJE BILJNIH GENA. DRUGO, NAMJERAVAMO RAZVITI METODOLOGIJU CRISPR/CAS ZA LISNE UŠI. OSIM ISTRAŽIVANJA PROŠIRENJA TIH TEHNIKA NA LISNE UŠI, ISTRAŽIT ĆEMO ULOGU GENA KANDIDATA KOJE SMO DOSAD IDENTIFICIRALI U PROCESIMA U KOJIMA NAVODNO SUDJELUJU. NA KOLATERALAN NAČIN NAMJERAVAMO PROCIJENITI KORISNOST GENA ZA PRIGUŠIVANJE KOJI SU UKLJUČENI U SINTEZU KAROTENOIDA, KOJI SU ISKLJUČIVI ZA LISNE UŠI, U KONTROLI NJIHOVE POPULACIJE. USPJEHOM PROJEKTA OSIGURAT ĆE SE ALAT ZA PROUČAVANJE MNOGIH VAŽNIH GENA LISNIH UŠI TE NOVA I SIGURNA STRATEGIJA SUZBIJANJA ŠTETOČINA KOJA SE TEMELJI NA TRANSGENSKIM BILJKAMA ZA FRAGMENTE GENA LISNIH UŠI. (Croatian)
    18 August 2022
    0 references
    BLADLÖSS ÄR SAP-SUGANDE INSEKTER SOM ÄR KÄNDA ÖVER HELA VÄRLDEN FÖR DE EKONOMISKA FÖRLUSTER SOM ORSAKAS AV VISSA SKADEDJURSARTER TILL FÖLJD AV DERAS FÖREKOMST I GRÖDOR. DESSUTOM HAR BLADLÖSS ETT ANTAL EGENSKAPER I SINA LIVSCYKLER SOM GÖR DEM SÄRSKILT INTRESSANTA ATT STUDERA OLIKA ASPEKTER AV SIN BIOLOGI, SÅSOM DE OLIKA POLYFENISMER SOM VISAS. SEDAN 2010 FINNS GENOMET I MODELLEN APHID ACYRTHOSIPHON PISUM TILLGÄNGLIGT FÖR DEN VETENSKAPLIGA GEMENSKAPEN. TILLGÅNGEN TILL DETTA OCH ANDRA GENOM ÄR AVGÖRANDE FÖR ATT STUDERA DE MOLEKYLÄRA MEKANISMER SOM STYR OLIKA ASPEKTER AV DESSA INSEKTERS BIOLOGI. SOM ETT RESULTAT AV VÅRA TIDIGARE UNDERSÖKNINGAR HAR VI IDENTIFIERAT OCH KARAKTÄRISERAT ETT BATTERI AV KANDIDATGENER FÖR ATT DELTA I KONTROLLEN AV INDUKTIONEN AV DEN SEXUELLA FASEN (MOTSVARANDE DIAPAUSE AV ANDRA INSEKTER) I BLADLÖSS. VI HAR OCKSÅ IDENTIFIERAT GENER SOM SYNES VARA INBLANDADE I EN POLYFENISM RELATERAD TILL MYRMECOFILIA I BLADLÖSS PARACLETUS CIMICIFORMIS. DELTAGANDET AV NÅGRA AV DESSA GENER I DE NÄMNDA POLYFENISMERNA HAR DOCK ÄNNU INTE PÅVISATS GENOM AVSAKNADEN AV EN ROBUST METOD SOM MÖJLIGGÖR STUDIER AV GENFUNKTIONER I BLADLÖSS, VILKET VILLKORAR FRAMSTEGEN I DESSA STUDIER. ETT ANVÄNDBART VERKTYG FÖR KARAKTERISERING AV GENFUNKTIONER, SOM FRAMGÅNGSRIKT HAR ANVÄNTS I ANDRA INSEKTER, ÄR GENLJUDANDE GENOM RNA-INTERFERENS (RNAI). VISSA STUDIER HAR BELYST SVÅRIGHETEN ATT GENOMFÖRA RNAI I BLADLÖSS MED HJÄLP AV STANDARDTEKNIKER BASERADE PÅ ATT TILLHANDAHÅLLA EN DSRNA KOMPLEMENT TILL ETT FRAGMENT AV MÅLGENEN MED HJÄLP AV ARTIFICIELL DIET ELLER GENOM MIKROINJEKTION. CRISPR/CAS-METODEN ANVÄNDS OCKSÅ FRAMGÅNGSRIKT I STUDIER AV OLIKA INSEKTERS GENFUNKTIONER. I DETTA PROJEKT FÖRESLÅR VI UTVECKLING AV TVÅ TYPER AV VERKTYG FÖR ATT STUDERA GENFUNKTIONER I BLADLÖSS. Å ENA SIDAN FÖRESLÅR DETTA PROJEKT EN ALTERNATIV RNAI-METODIK SOM BESTÅR I ATT TILLHANDAHÅLLA EN KONTINUERLIG FÖRSÖRJNING AV DEN DSRNA SOM KRÄVS FÖR ATT UTLÖSA RNAI GENOM ATT INKLUDERA DEN I ETT VÄXTVIRUS SOM INFEKTERAR DEN VÄXT SOM BLADLÖSSEN NATURLIGT LIVNÄR SIG PÅ. DENNA TEKNIK, SOM KALLAS VIGS (VIRUSINDUCERAD GENDÄMPNING), ÄR ETT VERKTYG SOM FRAMGÅNGSRIKT ANVÄNDS FÖR ATT TYSTA VÄXTGENER. FÖR DET ANDRA AVSER VI ATT UTVECKLA CRISPR/CAS-METODEN I BLADLÖSS. FÖRUTOM ATT UNDERSÖKA UTVIDGNINGEN AV DESSA TEKNIKER TILL BLADLÖSS, KOMMER VI ATT UNDERSÖKA ROLLEN AV KANDIDATGENER SOM VI HITTILLS HAR IDENTIFIERAT I DE PROCESSER SOM DE PÅSTÅS DELTA I. PÅ ETT ANNAT SÄTT HAR VI FÖR AVSIKT ATT UTVÄRDERA NYTTAN AV TYSTANDE GENER SOM ÄR INVOLVERADE I SYNTESEN AV KAROTENOIDER, SOM ÄR EXKLUSIVA FÖR BLADLÖSS, I KONTROLLEN AV DERAS POPULATIONER. FRAMGÅNGEN MED PROJEKTET KOMMER ATT GE ETT VERKTYG FÖR ATT STUDERA MÅNGA BLADLÖSSGENER AV INTRESSE OCH EN NY OCH SÄKER SKADEDJURSBEKÄMPNINGSSTRATEGI BASERAD PÅ TRANSGENA VÄXTER FÖR FRAGMENT AV BLADLÖSSGENER. (Swedish)
    18 August 2022
    0 references
    AFIDELE SUNT INSECTE CARE SUGE SAP ÎN ÎNTREAGA LUME PENTRU PIERDERILE ECONOMICE CAUZATE DE UNELE SPECII DE DĂUNĂTORI CA URMARE A PREZENȚEI LOR ÎN PLANTELE DE CULTURĂ. ÎN PLUS, AFIDELE AU O SERIE DE CARACTERISTICI ÎN CICLURILE LOR DE VIAȚĂ CARE LE FAC DEOSEBIT DE INTERESANTE PENTRU A STUDIA DIFERITE ASPECTE ALE BIOLOGIEI LOR, CUM AR FI DIFERITELE POLIFENISME AFIȘATE. ÎNCEPÂND CU 2010, GENOMUL MODELULUI APHID ACYRTHOSIPHON PISUM ESTE DISPONIBIL PENTRU COMUNITATEA ȘTIINȚIFICĂ. DISPONIBILITATEA ACESTUI GENOM ȘI A ALTOR GENOMURI ESTE CRUCIALĂ PENTRU STUDIUL MECANISMELOR MOLECULARE CARE CONTROLEAZĂ DIFERITE ASPECTE ALE BIOLOGIEI ACESTOR INSECTE. CA URMARE A INVESTIGAȚIILOR NOASTRE ANTERIOARE, AM IDENTIFICAT ȘI CARACTERIZAT O BATERIE DE GENE CANDIDATE PENTRU A PARTICIPA LA CONTROLUL INDUCȚIEI FAZEI SEXUALE (ECHIVALENT CU DIAPAUZA ALTOR INSECTE) ÎN AFIDE. AM IDENTIFICAT, DE ASEMENEA, GENE APARENT IMPLICATE ÎNTR-UN POLIFENISM LEGAT DE MYRMECOFILIA ÎN AFIDA PARACLETUS CIMICIFORMIS. CU TOATE ACESTEA, PARTICIPAREA UNORA DINTRE ACESTE GENE LA POLIFENISMELE MENȚIONATE NU A FOST ÎNCĂ DEMONSTRATĂ DE LIPSA UNEI METODE ROBUSTE CARE SĂ PERMITĂ STUDIEREA FUNCȚIILOR GENETICE ÎN AFIDE, CEEA CE CONDIȚIONEAZĂ PROGRESUL ÎN ACESTE STUDII. UN INSTRUMENT UTIL PENTRU CARACTERIZAREA FUNCȚIILOR GENETICE, CARE A FOST UTILIZAT CU SUCCES LA ALTE INSECTE, ESTE REDUCEREA LA TĂCERE A GENELOR PRIN INTERFERENȚA ARN (ARN). UNELE STUDII AU EVIDENȚIAT DIFICULTATEA DE A IMPLEMENTA ARN ÎN AFIDE FOLOSIND TEHNICI STANDARD BAZATE PE FURNIZAREA UNUI DSARN COMPLEMENTAR UNUI FRAGMENT DE GENĂ ȚINTĂ PRIN INTERMEDIUL DIETELOR ARTIFICIALE SAU PRIN MICROINJECTARE. METODOLOGIA CRISPR/CAS ESTE, DE ASEMENEA, UTILIZATĂ CU SUCCES ÎN STUDIILE PRIVIND FUNCȚIILE GENETICE ALE DIFERITELOR INSECTE. ÎN ACEST PROIECT PROPUNEM DEZVOLTAREA A DOUĂ TIPURI DE INSTRUMENTE PENTRU STUDIEREA FUNCȚIILOR GENETICE ÎN AFIDE. PE DE O PARTE, ACEST PROIECT PROPUNE O METODOLOGIE ALTERNATIVĂ A ARNA, CARE CONSTĂ ÎN ASIGURAREA UNEI APROVIZIONĂRI CONTINUE CU DSARN NECESAR PENTRU DECLANȘAREA ARN, PRIN INCLUDEREA SA ÎNTR-UN VIRUS VEGETAL CARE INFECTEAZĂ PLANTA CU CARE SE HRĂNEȘTE ÎN MOD NATURAL AFIDA. ACEASTĂ TEHNICĂ, NUMITĂ VIGS (AMORTIZOR DE GENĂ INDUSĂ DE VIRUS), ESTE UN INSTRUMENT UTILIZAT CU SUCCES ÎN REDUCEREA LA TĂCERE A GENELOR PLANTELOR. ÎN AL DOILEA RÂND, INTENȚIONĂM SĂ DEZVOLTĂM METODOLOGIA CRISPR/CAS ÎN AFIDE. PE LÂNGĂ INVESTIGAREA EXTINDERII ACESTOR TEHNICI LA AFIDE, VOM INVESTIGA ROLUL GENELOR CANDIDATE PE CARE LE-AM IDENTIFICAT PÂNĂ ÎN PREZENT ÎN PROCESELE LA CARE SE PRESUPUNE CĂ PARTICIPĂ. ÎN MOD COLATERAL, INTENȚIONĂM SĂ EVALUĂM UTILITATEA GENELOR DE AMORTIZARE A ZGOMOTULUI IMPLICATE ÎN SINTEZA CAROTENOIDELOR, CARE SUNT EXCLUSIVE PENTRU AFIDE, ÎN CONTROLUL POPULAȚIILOR LOR. SUCCESUL PROIECTULUI VA OFERI UN INSTRUMENT PENTRU STUDIEREA MULTOR GENE AFIDE DE INTERES ȘI O STRATEGIE NOUĂ ȘI SIGURĂ DE COMBATERE A DĂUNĂTORILOR BAZATĂ PE PLANTE TRANSGENICE PENTRU FRAGMENTE DE GENE AFIDE. (Romanian)
    18 August 2022
    0 references
    LISTNE UŠI SO ŽUŽELKE, KI SESAJO RASTLINE SAP IN SO ZNANE PO VSEM SVETU PO GOSPODARSKIH IZGUBAH, KI JIH POVZROČAJO NEKATERE VRSTE ŠKODLJIVCEV ZARADI NJIHOVE PRISOTNOSTI V RASTLINAH. POLEG TEGA IMAJO LISTNE UŠI V SVOJIH ŽIVLJENJSKIH CIKLIH ŠTEVILNE ZNAČILNOSTI, ZARADI KATERIH SO ŠE POSEBEJ ZANIMIVE ZA PREUČEVANJE RAZLIČNIH VIDIKOV NJIHOVE BIOLOGIJE, KOT SO PRIKAZANI RAZLIČNI POLIFENIZMI. OD LETA 2010 JE GENOM MODELA UŠI ACYRTHOSIPHON PISUM NA VOLJO ZNANSTVENI SKUPNOSTI. RAZPOLOŽLJIVOST TEGA IN DRUGIH GENOMOV JE KLJUČNEGA POMENA ZA PREUČEVANJE MOLEKULARNIH MEHANIZMOV, KI NADZORUJEJO RAZLIČNE VIDIKE BIOLOGIJE TEH ŽUŽELK. KOT REZULTAT NAŠIH PREJŠNJIH PREISKAV SMO IDENTIFICIRALI IN OZNAČILI BATERIJO KANDIDATOVIH GENOV ZA SODELOVANJE PRI NADZORU INDUKCIJE SPOLNE FAZE (ENAKOVREDNO DIAPAVZI DRUGIH ŽUŽELK) V LISTNIH UŠI. IDENTIFICIRALI SMO TUDI GENE, KI SO OČITNO VPLETENI V POLIFENIZEM, POVEZAN Z MYRMECOFILIA V UŠI PARACLETUS CIMICIFORMIS. VENDAR PA SODELOVANJE NEKATERIH OD TEH GENOV V OMENJENIH POLIFENIZMIH ŠE NI BILO DOKAZANO S POMANJKANJEM ROBUSTNE METODE, KI OMOGOČA PREUČEVANJE GENSKIH FUNKCIJ V LISTNIH UŠI, KAR POGOJUJE NAPREDEK V TEH ŠTUDIJAH. UPORABNO ORODJE ZA KARAKTERIZACIJO GENSKIH FUNKCIJ, KI JE BILO USPEŠNO UPORABLJENO V DRUGIH ŽUŽELKAH, JE GENSKO UTIŠANJE Z RNK INTERFERENCO (RNAI). NEKATERE ŠTUDIJE SO POUDARILE TEŽAVE PRI UVAJANJU RNAI V LISTNE UŠI S STANDARDNIMI TEHNIKAMI, KI TEMELJIJO NA ZAGOTAVLJANJU DSRNK, KI DOPOLNJUJE FRAGMENT CILJNEGA GENA Z UMETNO PREHRANO ALI Z MIKROINJICIRANJEM. METODOLOGIJA CRISPR/CAS SE USPEŠNO UPORABLJA TUDI V ŠTUDIJAH O GENSKIH FUNKCIJAH RAZLIČNIH ŽUŽELK. V TEM PROJEKTU PREDLAGAMO RAZVOJ DVEH VRST ORODIJ ZA PREUČEVANJE GENSKIH FUNKCIJ V LISTNIH UŠI. NA ENI STRANI TA PROJEKT PREDLAGA ALTERNATIVNO METODOLOGIJO RNAI, KI VKLJUČUJE ZAGOTAVLJANJE NEPREKINJENE DOBAVE DSRNK, POTREBNE ZA SPROŽITEV RNAI, TAKO DA SE VKLJUČI V RASTLINSKI VIRUS, KI OKUŽI RASTLINO, NA KATERI SE UŠI NARAVNO HRANIJO. TA TEHNIKA, IMENOVANA VIGS (VIRUSNO INDUCIRANO GENSKO DUŠENJE), JE ORODJE, KI SE USPEŠNO UPORABLJA PRI UTIŠANJU RASTLINSKIH GENOV. DRUGIČ, NAMERAVAMO RAZVITI METODOLOGIJO CRISPR/CAS V LISTNIH UŠI. POLEG RAZISKOVANJA RAZŠIRITVE TEH TEHNIK NA LISTNE UŠI BOMO RAZISKALI VLOGO KANDIDATNIH GENOV, KI SMO JIH DO SEDAJ IDENTIFICIRALI V PROCESIH, V KATERIH NAJ BI SODELOVALI. NA STRANSKI NAČIN NAMERAVAMO OCENITI UPORABNOST UTIŠANJA GENOV, KI SODELUJEJO PRI SINTEZI KAROTENOIDOV, KI SO EKSKLUZIVNI ZA LISTNE UŠI, PRI NADZORU NJIHOVIH POPULACIJ. USPEH PROJEKTA BO ZAGOTOVIL ORODJE ZA PREUČEVANJE ŠTEVILNIH POMEMBNIH GENOV ZA UŠI TER NOVO IN VARNO STRATEGIJO ZA ZATIRANJE ŠKODLJIVCEV, KI TEMELJI NA TRANSGENIH RASTLINAH ZA FRAGMENTE GENOV UŠI. (Slovenian)
    18 August 2022
    0 references
    MSZYCE TO OWADY WYSYSAJĄCE SAP ZNANE NA CAŁYM ŚWIECIE ZE STRAT EKONOMICZNYCH SPOWODOWANYCH PRZEZ NIEKTÓRE GATUNKI SZKODNIKÓW W WYNIKU ICH WYSTĘPOWANIA W ROŚLINACH UPRAWNYCH. PONADTO MSZYCE MAJĄ SZEREG CECH CHARAKTERYSTYCZNYCH W ICH CYKLACH ŻYCIOWYCH, KTÓRE SPRAWIAJĄ, ŻE SĄ SZCZEGÓLNIE INTERESUJĄCE DO STUDIOWANIA RÓŻNYCH ASPEKTÓW SWOJEJ BIOLOGII, TAKICH JAK RÓŻNE WYŚWIETLANE POLIFENIZMY. OD 2010 R. GENOM MODELU MSZYCA ACYRTHOSIPHON PISUM JEST DOSTĘPNY DLA ŚRODOWISKA NAUKOWEGO. DOSTĘPNOŚĆ TEGO I INNYCH GENOMÓW MA KLUCZOWE ZNACZENIE DLA BADANIA MECHANIZMÓW MOLEKULARNYCH, KTÓRE KONTROLUJĄ RÓŻNE ASPEKTY BIOLOGII TYCH OWADÓW. W WYNIKU NASZYCH POPRZEDNICH BADAŃ ZIDENTYFIKOWALIŚMY I SCHARAKTERYZOWALIŚMY BATERIĘ GENÓW KANDYDUJĄCYCH DO UDZIAŁU W KONTROLI INDUKCJI FAZY SEKSUALNEJ (RÓWNOWAŻNEJ DIAPAUZIE INNYCH OWADÓW) U MSZYC. ZIDENTYFIKOWALIŚMY RÓWNIEŻ GENY POZORNIE ZAMIESZANE W POLIFENIZM ZWIĄZANY Z MYRMECOFILIA W MSZYCY PARACLETUS CIMICIFORMIS. JEDNAK UDZIAŁ NIEKTÓRYCH Z TYCH GENÓW W WYMIENIONYCH POLIFENIZMACH NIE ZOSTAŁ JESZCZE WYKAZANY BRAKIEM SOLIDNEJ METODY, KTÓRA UMOŻLIWIAŁABY BADANIE FUNKCJI GENOWYCH MSZYC, CO WARUNKUJE POSTĘP W TYCH BADANIACH. UŻYTECZNYM NARZĘDZIEM DO CHARAKTERYSTYKI FUNKCJI GENOWYCH, KTÓRE Z POWODZENIEM ZASTOSOWANO W INNYCH OWADACH, JEST WYCISZANIE GENÓW POPRZEZ INTERFERENCJĘ RNA (RNAI). NIEKTÓRE BADANIA WYKAZAŁY TRUDNOŚCI Z WDROŻENIEM RNAI W MSZYCACH PRZY UŻYCIU STANDARDOWYCH TECHNIK OPARTYCH NA DOSTARCZANIU DSRNA UZUPEŁNIAJĄCEGO FRAGMENT DOCELOWEGO GENU ZA POMOCĄ SZTUCZNEJ DIETY LUB MIKROIZOLACJI. METODOLOGIA CRISPR/CAS JEST RÓWNIEŻ Z POWODZENIEM STOSOWANA W BADANIACH NAD FUNKCJAMI GENOWYMI RÓŻNYCH OWADÓW. W TYM PROJEKCIE PROPONUJEMY OPRACOWANIE DWÓCH RODZAJÓW NARZĘDZI DO BADANIA FUNKCJI GENOWYCH U MSZYC. Z JEDNEJ STRONY W PROJEKCIE PROPONUJE SIĘ ALTERNATYWNĄ METODOLOGIĘ RNAI, KTÓRA POLEGA NA ZAPEWNIENIU CIĄGŁEJ PODAŻY DSRNA WYMAGANEJ DO WYWOŁANIA RNAI POPRZEZ WŁĄCZENIE GO DO WIRUSA ROŚLIN, KTÓRY ZAKAŻA ROŚLINĘ MSZYCĄ NATURALNIE KARMIONĄ. TECHNIKA TA, O NAZWIE VIGS (WIRUS INDUKOWANE WYCISZANIE GENÓW), JEST NARZĘDZIEM Z POWODZENIEM STOSOWANYM W TŁUMIENIU GENÓW ROŚLINNYCH. PO DRUGIE, ZAMIERZAMY OPRACOWAĆ METODOLOGIĘ CRISPR/CAS W MSZYCACH. OPRÓCZ ZBADANIA ROZSZERZENIA TYCH TECHNIK NA MSZYCE, ZBADAMY ROLĘ GENÓW KANDYDUJĄCYCH, KTÓRE DOTYCHCZAS ZIDENTYFIKOWALIŚMY W PROCESACH, W KTÓRYCH RZEKOMO UCZESTNICZĄ. W SPOSÓB UBOCZNY ZAMIERZAMY OCENIĆ PRZYDATNOŚĆ GENÓW TŁUMIĄCYCH ZAANGAŻOWANYCH W SYNTEZĘ KAROTENOIDÓW, KTÓRE SĄ WYŁĄCZNIE DLA MSZYC, W KONTROLI ICH POPULACJI. SUKCES PROJEKTU ZAPEWNI NARZĘDZIE DO BADANIA WIELU INTERESUJĄCYCH GENÓW MSZYC ORAZ NOWĄ I BEZPIECZNĄ STRATEGIĘ ZWALCZANIA SZKODNIKÓW OPARTĄ NA ROŚLINACH TRANSGENICZNYCH DLA FRAGMENTÓW GENÓW MSZYC. (Polish)
    18 August 2022
    0 references
    Paterna
    0 references
    20 December 2023
    0 references

    Identifiers

    PGC2018-100691-B-I00
    0 references