New diagnostic kits for the best detection of classical swine fever virus: Dendro CHECK (Q3217173)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3217173 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | New diagnostic kits for the best detection of classical swine fever virus: Dendro CHECK |
Project Q3217173 in Spain |
Statements
10,000.0 Euro
0 references
20,000.0 Euro
0 references
50.0 percent
0 references
1 January 2019
0 references
30 June 2019
0 references
INSTITUTO DE INVESTIGACION Y TECNOLOGIA AGROALIMENTARIAS
0 references
8140
0 references
La peste porcina clásica (PPC), también conocida como Hog Cholera, es una enfermedad viral letal altamente contagiosa que causa enormes pérdidas económicas a la industria porcina en todo el mundo. Tiene un gran impacto en áreas endémicas, a menudo en países muy poblados, donde la carne de cerdo es una de las principales fuentes de proteína para la población. La PPC es reconocida por la FAO como un problema que agrava la seguridad alimentaria. La situación epidemiológica mundial generada por la peste porcina clásica es bastante compleja, y los brotes recientes en Europa del Este podrían traer pronto nuevamente la enfermedad a nuestro país. El diagnóstico serológico rápido y efectivo de animales infectados y / o vacunados utilizando una herramienta de diagnóstico DIVA (diferenciación vacunada de infectada) efectiva y económicamente viable es de gran relevancia para el control global de este problema, especialmente grave en países en desarrollo desde Asia y América Latina. Teniendo en cuenta la gran demanda de métodos serológicos para detectar este problema en áreas endémicas, y nuestra gran experiencia en el campo, hemos propuesto desarrollar un método de diagnóstico serológico factible de aplicar en las regiones afectadas. Las soluciones actuales en el mercado son al menos tres kits reconocidos de diferentes compañías, una de ellas teniendo una posición dominante en el mercado. Sin embargo, sus costes no son atractivos (alto coste) para la mayoría de los países endémicos en la actualidad. Asimismo, la mayoría de los kits actualmente comercializados se basan en proteínas recombinantes y anticuerpos monoclonales, lo que los hace sensibles a la temperatura. Por lo tanto, requieren que los sistemas de cadena de frío lleguen a los laboratorios regionales en áreas tropicales endémicas, lo que aumenta drásticamente sus costes logísticos. La falta de disponibilidad de estos kits en esos países endémicos significa que sus laboratorios usan sus propias pruebas "caseras". Esto dificulta la aplicación de una prueba estándar validada en estas áreas endémicas, con implicaciones para el control global de la enfermedad. Asimismo, ninguno de estos sistemas de diagnóstico disponibles en el mercado es capaz de diferenciar entre los anticuerpos generados por el virus de la vacuna y los anticuerpos generados por los virus de campo que circulan en estos países. Por todo ello, existe una gran oportunidad para un kit de diagnóstico más estable y económico para el virus de la peste porcina clásica, especialmente si es más sensible a cepas poco patógenas, ampliamente presentes en países endémicos (por ejemplo, China). Para superar estas limitaciones, recientemente hemos desarrollado un sistema ELISA basado en MAPS capaz de detectar anticuerpos generados por cepas virales de PPC de baja, moderada y alta virulencia. Los Sistemas de péptidos antigénicos múltiples (MAPS) están basados en un núcleo de oligolisina ramificado al cual están unidas varias copias del antígeno peptídico. Esos sistemas también se conocen como péptidos dendriméricos por su conformación. Al usar un péptido dendrimérico como antígeno de placa, logramos una gran estabilidad (incluida la termoestabilidad) y una gran capacidad para detectar anticuerpos contra el virus. Esos MAPS se han testado con diferentes combinaciones de epítopes antigénicos de las proteínas E2 del CSFV, pero no todos demostraron ser efectivos para el propósito del diagnóstico. Además de la mayor sensibilidad y estabilidad, los kits de ELISA basados en MAPS podrían disminuir en gran medida el coste del kit, ya que los costes de producción química del MAPS son menores que los costes biológicos de la proteína recombinante o los anticuerpos monoclonales. Además, la síntesis química permitiría una mayor reproducibilidad entre los diferentes lotes de producción de péptidos. En este proyecto, nuestro objetivo es validar el sistema con los diferentes MAPS probados y seleccionar el mejor candidato con la mayor sensibilidad y especificidad de diagnóstico. Esto se transferirá a una compañía farmacéutica después de su patente, con el fin de acelerar su entrada en el mercado. También pretendemos probar si el ensayo es capaz de diferenciar animales vacunados de animales infectados, hasta ahora no resuelto con los sistemas de detección actuales. El grupo de investigación tiene una sólida trayectoria de colaboración con la industria, y es el Laboratorio de Referencia de la OIE para la Peste porcina clásica. Por lo tanto, tiene fácil acceso a los usuarios finales de la tecnología, así como a las compañías farmacéuticas, asegurando una transferencia exitosa de la tecnología. (Spanish)
0 references
Classical swine fever (CSF), also known as Hog Cholera, is a highly contagious lethal viral disease causing huge economic losses to the pig industry worldwide. It has a high impact in endemic areas, often in high populated countries, where the pig meat is one of the main sources of protein intake to the population. CSF is recognized by FAO as a problem that aggravates food security. The global epidemiological situation generated by CSF is quite complex, and recent outbreaks in Eastern Europe might soon bring back the disease to our country. Rapid and effective serological diagnosis of infected and/or vaccinated animals by using an effective, economically feasible, DIVA (differentiation vaccinated from infected) and temperature stabile diagnostic tool is of great relevance for the global control of this problem, especially severe in developing countries from Asia and Latin America. Considering the high demand of serological methods to detect this problem in endemic areas, and our high experience in the field, we have proposed to develop a serological diagnostic method feasible to apply in the affected regions. Current solutions in the market involve at least three recognized kits of different companies, one of them being the market dominant. However, their costs are unattractive (high cost) for the majority of endemic countries at present. Likewise, most of the kits currently commercialized are based on recombinant proteins and monoclonal antibodies, which makes them sensitive to temperature. Therefore, they require cold chain systems to reach regional laboratories in tropical endemic areas, which dramatically increase their logistic costs. The lack of availability of these kits in those endemic countries means that their laboratories use their own ¿homemade¿ tests. This makes it difficult to apply a validated standard test in these endemic areas, with implications for the global control of the disease. Likewise, none of these diagnostic systems available on the market is capable of differentiating between the antibodies generated by the vaccine virus and the antibodies generated by the field viruses circulating in these countries. Overall, there is a great window of opportunity for a more stable and cheap diagnostic kit for CSFV, especially if it is more sensitive towards low-pathogenic strains, widely present in endemic countries (i.e: China). To overcome these constraints we have recently developed an ELISA system based on MAPS able to detect antibodies generated by viral strains of CSF of low, moderate and high virulence. Multiple antigenic peptide systems (MAPS) are based on a branched oligolysine core to which various copies of the peptide antigen are attached. Those systems are also named as dendrimeric peptides for its conformation. By using a dendrimeric peptide as a plaque antigen we achieved high stability (including thermostability) and great capacity for detecting antibodies against the virus. Those MAPS contained different combinations of antigenic epitopes in the CSFV E2 proteins, but not all of them proved to be effective for the diagnostic purpose. Aside from the higher sensibility and stability, MAPS-based ELISA kits could greatly decrease the cost of the kit, since the chemical production costs of the MAPS is lower than the biological costs for recombinant protein or monoclonal antibodies. Besides, the chemical synthesis would allow a higher reproducibility between the different batches of peptide production. In this project we aim to validate the system with the different MAPS tested, and to select the best candidate with the highest diagnostic sensitivity and specificity. This will be transferred to a pharmaceutical company after its patenting, in order to speed up its entry in the market. We also aim to test whether the assay is able to differentiate vaccinated animals from infected animals, until now not resolved with the current detection systems. The research group has a solid track record of collaboration with the industry, and is the OIE Reference Laboratory for Classical swine fever. Therefore, it has easy access to the end-users of the technology as well as to pharmaceutical companies, ensuring a successful transfer of the technology. (English)
0 references
La peste porcine classique, également connue sous le nom de Hog Cholera, est une maladie virale mortelle hautement contagieuse qui cause d’énormes pertes économiques à l’industrie porcine dans le monde entier. Il a un impact considérable sur les zones endémiques, souvent dans les pays très peuplés, où le porc est l’une des principales sources de protéines pour la population. La PCP est reconnue par la FAO comme un problème qui aggrave la sécurité alimentaire. La situation épidémiologique mondiale causée par la peste porcine classique est assez complexe, et les récentes épidémies en Europe de l’Est pourraient bientôt ramener la maladie dans notre pays. Le diagnostic sérologique rapide et efficace des animaux infectés ou vaccinés à l’aide d’un outil de diagnostic DIVA efficace et économiquement viable est d’une grande importance pour la lutte globale contre ce problème, particulièrement grave dans les pays en développement d’Asie et d’Amérique latine. Compte tenu de la forte demande de méthodes sérologiques pour détecter ce problème dans les zones endémiques et de notre vaste expérience sur le terrain, nous avons proposé de mettre au point une méthode de diagnostic sérologique réalisable à appliquer dans les régions touchées. Les solutions actuelles sur le marché sont au moins trois kits reconnus d’entreprises différentes, dont l’une détient une position dominante sur le marché. Cependant, leurs coûts ne sont pas attrayants (coût élevé) pour la plupart des pays endémiques aujourd’hui. De plus, la plupart des kits actuellement commercialisés sont à base de protéines recombinantes et d’anticorps monoclonaux, ce qui les rend sensibles à la température. Par conséquent, ils ont besoin de systèmes de chaîne du froid pour atteindre les laboratoires régionaux dans les zones tropicales endémiques, ce qui augmente considérablement leurs coûts logistiques. L’indisponibilité de ces trousses dans ces pays endémiques signifie que leurs laboratoires utilisent leurs propres tests «maison». Il est donc difficile d’appliquer un test standard validé dans ces régions endémiques, ce qui a des répercussions sur la lutte mondiale contre les maladies. En outre, aucun de ces systèmes de diagnostic disponibles sur le marché n’est capable de distinguer entre les anticorps produits par le virus vaccinal et les anticorps générés par les virus de terrain circulant dans ces pays. Par conséquent, il y a de grandes possibilités de disposer d’une trousse de diagnostic plus stable et plus économique pour le virus de la peste porcine classique, en particulier s’il est plus sensible aux souches faiblement pathogènes, largement présentes dans les pays endémiques (par exemple, la Chine). Pour surmonter ces limites, nous avons récemment mis au point un système ELISA basé sur MAPS capable de détecter les anticorps générés par des souches virales de PPC faible, modérée et élevée. Plusieurs systèmes peptides antigéniques (MAPS) sont basés sur un noyau d’oligolisine ramifié auquel sont attachées plusieurs copies de l’antigène peptidique. Ces systèmes sont également connus sous le nom de peptides dentrimériques en raison de leur conformation. En utilisant un peptide dentrimerique comme antigène plaque, nous obtenons une grande stabilité (y compris la thermostabilité) et une grande capacité à détecter les anticorps contre le virus. Ces MAPS ont été testés avec différentes combinaisons d’épitopes antigéniques de protéines CSFV E2 mais n’ont pas tous prouvé leur efficacité aux fins du diagnostic. En plus d’une plus grande sensibilité et stabilité, les kits ELISA basés sur le MAPS pourraient réduire considérablement le coût de la trousse, car les coûts de production chimique de MAPS sont inférieurs aux coûts biologiques des protéines recombinantes ou des anticorps monoclonaux. En outre, la synthèse chimique permettrait une plus grande reproductibilité entre les différents lots de production de peptides. Dans ce projet, notre objectif est de valider le système avec les différents MAPS testés et de sélectionner le meilleur candidat avec la sensibilité et la spécificité du diagnostic les plus élevées. Celui-ci sera transféré à une société pharmaceutique après son brevet, afin d’accélérer son entrée sur le marché. Nous avons également l’intention de vérifier si le test est capable de distinguer les animaux vaccinés des animaux infectés, jusqu’à présent non résolus avec les systèmes de détection actuels. Le groupe de recherche a une solide collaboration avec l’industrie et est le Laboratoire de référence de l’OIE pour la maladie du porc classique. Par conséquent, il a un accès facile aux utilisateurs finaux de la technologie ainsi qu’aux entreprises pharmaceutiques, ce qui garantit le succès du transfert de technologie. (French)
5 December 2021
0 references
Die klassische Schweinepest (CSF), auch bekannt als Hog Cholera, ist eine hochansteckende tödliche Viruserkrankung, die der Schweineindustrie weltweit enorme wirtschaftliche Verluste verursacht. Es hat große Auswirkungen auf endemische Gebiete, oft in sehr besiedelten Ländern, wo Schweinefleisch eine der wichtigsten Proteinquellen für die Bevölkerung ist. Die GFP wird von der FAO als ein Problem anerkannt, das die Ernährungssicherheit verschärft. Die durch die klassische Schweinepest verursachte weltweite epidemiologische Lage ist recht komplex, und die jüngsten Ausbrüche in Osteuropa könnten die Krankheit bald wieder in unser Land bringen. Die schnelle und effektive serologische Diagnose infizierter oder geimpfter Tiere mit einem effektiven und wirtschaftlich tragfähigen DIVA-Diagnosewerkzeug ist für die allgemeine Kontrolle dieses Problems von großer Bedeutung, insbesondere in Entwicklungsländern aus Asien und Lateinamerika. Angesichts der hohen Nachfrage nach serologischen Methoden zur Erkennung dieses Problems in endemischen Gebieten und unserer umfangreichen Erfahrung auf diesem Gebiet haben wir vorgeschlagen, ein praktikables serologisches diagnostisches Verfahren zu entwickeln, das in den betroffenen Regionen angewendet werden soll. Die aktuellen Lösungen auf dem Markt sind mindestens drei anerkannte Kits verschiedener Unternehmen, von denen eines eine beherrschende Stellung auf dem Markt hat. Ihre Kosten sind jedoch für die meisten endemischen Länder heute nicht attraktiv (hohe Kosten). Darüber hinaus basieren die meisten der derzeit vermarkteten Kits auf rekombinanten Proteinen und monoklonalen Antikörpern, was sie temperaturempfindlich macht. Daher benötigen sie Kühlkettensysteme, um regionale Labore in endemischen tropischen Gebieten zu erreichen, was ihre logistischen Kosten drastisch erhöht. Die Nichtverfügbarkeit dieser Kits in diesen endemischen Ländern bedeutet, dass ihre Labors ihre eigenen „hausgemachten“ Tests verwenden. Dies erschwert die Anwendung eines validierten Standardtests in diesen endemischen Gebieten mit Auswirkungen auf die weltweite Seuchenbekämpfung. Darüber hinaus ist keines dieser auf dem Markt verfügbaren Diagnosesysteme in der Lage, zwischen Antikörpern, die durch das Impfstoffvirus erzeugt werden, und Antikörpern zu unterscheiden, die durch Feldviren entstehen, die in diesen Ländern zirkulieren. Daher besteht eine große Chance für ein stabileres und wirtschaftlicheres Diagnose-Kit für das klassische Schweinepestvirus, insbesondere wenn es empfindlicher auf niedrig pathogene Stämme ist, die in endemischen Ländern (z. B. China) weit verbreitet sind. Um diese Einschränkungen zu überwinden, haben wir vor kurzem ein ELISA-System entwickelt, das auf MAPS basiert, die in der Lage sind, Antikörper zu erkennen, die durch Virusstämme mit niedrigem, mäßigem und hoher Virulenz-PPC erzeugt werden. Mehrere antigene Peptidsysteme (MAPS) basieren auf einem verzweigten Oligolisinkern, an dem mehrere Kopien des Peptid-Antigens angebracht sind. Diese Systeme sind wegen ihrer Exterieurisierung auch als dentrimerische Peptide bekannt. Durch die Verwendung eines Dentrimer-Peptids als Plaque-Antigen erreichen wir eine große Stabilität (einschließlich Thermostabilität) und eine große Fähigkeit, Antikörper gegen das Virus zu erkennen. Diese MAPS wurden mit verschiedenen Kombinationen von antigenen Epitopen von CSFV-Proteinen E2 getestet, aber nicht alle erwiesen sich für die Diagnose als wirksam. Zusätzlich zu größerer Empfindlichkeit und Stabilität könnten MAPS-basierte ELISA-Kits die Kosten des Kits erheblich senken, da die Kosten für die chemische Produktion von MAPS niedriger sind als die biologischen Kosten von rekombinanten Proteinen oder monoklonalen Antikörpern. Darüber hinaus würde die chemische Synthese eine größere Reproduzierbarkeit zwischen verschiedenen Chargen der Peptidproduktion ermöglichen. In diesem Projekt ist es unser Ziel, das System mit den verschiedenen geprüften MAPS zu validieren und den besten Kandidaten mit höchster Empfindlichkeit und Spezifität der Diagnose auszuwählen. Dies wird nach dem Patent auf ein Pharmaunternehmen übertragen, um seinen Markteintritt zu beschleunigen. Wir wollen auch prüfen, ob der Test in der Lage ist, geimpfte Tiere von infizierten Tieren zu unterscheiden, die bisher nicht mit aktuellen Nachweissystemen gelöst sind. Die Forschungsgruppe hat eine solide Erfolgsbilanz der Zusammenarbeit mit der Industrie und ist das OIE Referenzlabor für klassische Schweinekrankheit. Daher hat es einfachen Zugang zu Technologie-Endanwendern sowie pharmazeutischen Unternehmen, um einen erfolgreichen Technologietransfer zu gewährleisten. (German)
10 December 2021
0 references
Klassieke varkenspest (CSF), ook bekend als Hog Cholera, is een zeer besmettelijke dodelijke virale ziekte die wereldwijd enorme economische verliezen veroorzaakt voor de varkensindustrie. Het heeft een grote impact op endemische gebieden, vaak in zeer bevolkte landen, waar varkensvlees een van de belangrijkste eiwitbronnen voor de bevolking is. Het GVB wordt door de FAO erkend als een probleem dat de voedselzekerheid verergert. De wereldwijde epidemiologische situatie als gevolg van klassieke varkenspest is vrij complex, en recente uitbraken in Oost-Europa kunnen de ziekte binnenkort terugbrengen naar ons land. De snelle en doeltreffende serologische diagnose van besmette of gevaccineerde dieren met behulp van een doeltreffend en economisch levensvatbaar DIVA-diagnostiekinstrument is van groot belang voor de algehele beheersing van dit probleem, met name in ontwikkelingslanden uit Azië en Latijns-Amerika. Gezien de grote vraag naar serologische methoden om dit probleem in endemische gebieden op te sporen en onze uitgebreide ervaring op dit gebied, hebben wij voorgesteld een haalbare serologische diagnostische methode te ontwikkelen die in de getroffen regio’s moet worden toegepast. De huidige oplossingen op de markt zijn ten minste drie erkende kits van verschillende ondernemingen, waarvan één een machtspositie op de markt heeft. Hun kosten zijn echter niet aantrekkelijk (hoge kosten) voor de meeste endemische landen vandaag de dag. Bovendien zijn de meeste kits die momenteel op de markt worden gebracht gebaseerd op recombinante eiwitten en monoklonale antilichamen, waardoor ze gevoelig zijn voor temperatuur. Daarom hebben ze koudeketensystemen nodig om regionale laboratoria in endemische tropische gebieden te bereiken, waardoor hun logistieke kosten dramatisch stijgen. De onbeschikbaarheid van deze kits in deze endemische landen betekent dat hun laboratoria hun eigen „zelfgemaakte” tests gebruiken. Dit maakt het moeilijk om in deze endemische gebieden een gevalideerde standaardtest toe te passen, met gevolgen voor de wereldwijde ziektebestrijding. Bovendien kan geen van deze diagnostische systemen die op de markt zijn, een onderscheid maken tussen antilichamen die door het vaccinvirus worden gegenereerd en antilichamen die worden gegenereerd door veldvirussen die in deze landen circuleren. Daarom is er een grote kans voor een stabielere en economischere diagnosekit voor het virus van klassieke varkenspest, vooral als het gevoeliger is voor laagpathogene stammen, die op grote schaal voorkomen in endemische landen (bv. China). Om deze beperkingen te overwinnen, hebben we onlangs een ELISA-systeem ontwikkeld op basis van MAPS dat antilichamen kan detecteren die worden gegenereerd door virale stammen van lage, matige en hoge virulentie PPC. Veelvoudige antigene peptidesystemen (MAPS) zijn gebaseerd op een vertakte oligolisinekern waaraan verscheidene kopieën van het peptideantigeen zijn gehecht. Deze systemen zijn ook bekend als dentrimeer peptiden vanwege hun conformatie. Door het gebruik van een dentrimeer peptide als plaque antigeen, bereiken we een grote stabiliteit (inclusief thermostabiliteit) en een groot vermogen om antilichamen tegen het virus te detecteren. Deze MAPS zijn getest met verschillende combinaties van antigene epitopen van CSFV-eiwitten E2 maar niet alle bleek effectief voor het doel van diagnose. Naast een grotere gevoeligheid en stabiliteit, zouden op MAPS gebaseerde ELISA-kits de kosten van de kit aanzienlijk kunnen verlagen, aangezien de kosten van de chemische productie van MAPS lager zijn dan de biologische kosten van recombinant eiwit of monoklonale antilichamen. Bovendien zou de chemische synthese grotere reproduceerbaarheid tussen verschillende partijen van peptideproductie toestaan. In dit project is ons doel om het systeem te valideren met de verschillende geteste MAPS en om de beste kandidaat te selecteren met de hoogste gevoeligheid en specificiteit van de diagnose. Dit zal na het octrooi aan een farmaceutisch bedrijf worden overgedragen om de toegang tot de markt te versnellen. We zijn ook van plan te testen of de test in staat is om gevaccineerde dieren te onderscheiden van besmette dieren, tot nu toe onopgelost met de huidige detectiesystemen. De onderzoeksgroep heeft een solide staat van dienst op het gebied van samenwerking met de industrie en is het OIE Reference Laboratory for Classical Swine Disease. Daarom heeft het een gemakkelijke toegang tot zowel de eindgebruikers van technologie als tot farmaceutische bedrijven, waardoor een succesvolle overdracht van technologie wordt gewaarborgd. (Dutch)
17 December 2021
0 references
La peste suina classica (CSF), nota anche come Hog Cholera, è una malattia virale letale altamente contagiosa che causa enormi perdite economiche all'industria suina in tutto il mondo. Ha un grande impatto sulle aree endemiche, spesso in paesi molto popolati, dove la carne suina è una delle principali fonti di proteine per la popolazione. La PCP è riconosciuta dalla FAO come un problema che aggrava la sicurezza alimentare. La situazione epidemiologica globale causata dalla peste suina classica è piuttosto complessa e i recenti focolai nell'Europa orientale potrebbero presto riportare la malattia nel nostro paese. La diagnosi sierologica rapida ed efficace degli animali infetti o vaccinati utilizzando uno strumento diagnostico DIVA efficace ed economicamente valido è di grande importanza per il controllo generale di questo problema, particolarmente grave nei paesi in via di sviluppo dell'Asia e dell'America latina. Data l'elevata domanda di metodi sierologici per individuare questo problema nelle zone endemiche e la nostra vasta esperienza nel settore, abbiamo proposto di sviluppare un metodo diagnostico sierologico fattibile da applicare nelle regioni colpite. Le soluzioni attuali sul mercato sono almeno tre kit riconosciuti da società diverse, una delle quali detiene una posizione dominante sul mercato. Tuttavia, i loro costi non sono attraenti (costo elevato) per la maggior parte dei paesi endemici oggi. Inoltre, la maggior parte dei kit attualmente commercializzati si basa su proteine ricombinanti e anticorpi monoclonali, rendendoli sensibili alla temperatura. Pertanto, essi richiedono sistemi di catena del freddo per raggiungere laboratori regionali in aree tropicali endemiche, aumentando drasticamente i loro costi logistici. L'indisponibilità di questi kit in questi paesi endemici significa che i loro laboratori utilizzano i propri test "fatti in casa". Ciò rende difficile l'applicazione di un test standard convalidato in queste zone endemiche, con implicazioni per il controllo globale delle malattie. Inoltre, nessuno di questi sistemi diagnostici disponibili sul mercato è in grado di distinguere tra anticorpi generati dal virus del vaccino e anticorpi generati da virus di campo che circolano in questi paesi. Pertanto, vi è una grande opportunità per un kit diagnostico più stabile ed economico per il virus della peste suina classica, soprattutto se è più sensibile ai ceppi a bassa patogenicità, ampiamente presenti nei paesi endemici (ad esempio la Cina). Per superare queste limitazioni, abbiamo recentemente sviluppato un sistema ELISA basato su MAPS in grado di rilevare anticorpi generati da ceppi virali di PPC bassa, moderata e ad alta virulenza. I sistemi multipli del peptide antigenico (MAPS) sono basati su un nucleo ramificato dell'oligolisine a cui sono attaccate parecchie copie dell'antigene del peptide. Questi sistemi sono noti anche come peptidi dentrimerici a causa della loro conformazione. Usando un peptide dentrimerico come antigene della placca, otteniamo grande stabilità (compresa la termostabilità) e una grande capacità di rilevare gli anticorpi contro il virus. Questi MAPS sono stati testati con diverse combinazioni di epitopi antigenici delle proteine CSFV E2, ma non tutti si sono dimostrati efficaci ai fini della diagnosi. Oltre a una maggiore sensibilità e stabilità, i kit ELISA basati su MAPS potrebbero ridurre notevolmente il costo del kit, in quanto i costi di produzione chimica di MAPS sono inferiori ai costi biologici delle proteine ricombinanti o degli anticorpi monoclonali. Inoltre, la sintesi chimica consentirebbe una maggiore riproducibilità tra diversi lotti di produzione di peptidi. In questo progetto, il nostro obiettivo è quello di convalidare il sistema con i diversi MAPS testati e selezionare il miglior candidato con la massima sensibilità e specificità della diagnosi. Ciò sarà trasferito a una società farmaceutica dopo il suo brevetto, al fine di accelerarne l'ingresso sul mercato. Intendiamo inoltre verificare se il test è in grado di distinguere gli animali vaccinati dagli animali infetti, finora irrisolti con i sistemi di rilevazione attuali. Il gruppo di ricerca ha una solida esperienza di collaborazione con l'industria ed è il laboratorio di riferimento dell'OIE per la malattia suina classica. Pertanto, ha un facile accesso agli utenti finali della tecnologia e alle aziende farmaceutiche, garantendo il successo del trasferimento tecnologico. (Italian)
16 January 2022
0 references
Η κλασική πανώλη των χοίρων (ΚΠΧ), γνωστή και ως Hog Cholera, είναι μια εξαιρετικά μεταδοτική θανατηφόρα ιογενής νόσος που προκαλεί τεράστιες οικονομικές απώλειες στη βιομηχανία χοίρων παγκοσμίως. Έχει μεγάλο αντίκτυπο σε ενδημικές περιοχές, συχνά σε χώρες με υψηλό πληθυσμό, όπου το χοίρειο κρέας αποτελεί μία από τις κύριες πηγές πρόσληψης πρωτεϊνών στον πληθυσμό. Η ΚΠΣ αναγνωρίζεται από τον FAO ως πρόβλημα που επιδεινώνει την επισιτιστική ασφάλεια. Η παγκόσμια επιδημιολογική κατάσταση που δημιουργείται από την ΚΠΧ είναι αρκετά περίπλοκη και οι πρόσφατες εστίες στην Ανατολική Ευρώπη ενδέχεται σύντομα να επαναφέρουν τη νόσο στη χώρα μας. Η ταχεία και αποτελεσματική ορολογική διάγνωση των μολυσμένων και/ή εμβολιασμένων ζώων με τη χρήση ενός αποτελεσματικού, οικονομικά εφικτού, DIVA (διαφορετικός εμβολιασμός από μολυσμένα) και ανθεκτικό στη θερμοκρασία διαγνωστικού εργαλείου έχει μεγάλη σημασία για τον παγκόσμιο έλεγχο αυτού του προβλήματος, ιδιαίτερα σοβαρό στις αναπτυσσόμενες χώρες από την Ασία και τη Λατινική Αμερική. Λαμβάνοντας υπόψη την υψηλή ζήτηση ορολογικών μεθόδων για την ανίχνευση αυτού του προβλήματος στις ενδημικές περιοχές, καθώς και την υψηλή εμπειρία μας στον τομέα, προτείναμε την ανάπτυξη μιας ορολογικής διαγνωστικής μεθόδου που θα είναι εφικτή για τις πληγείσες περιοχές. Οι τρέχουσες λύσεις στην αγορά περιλαμβάνουν τουλάχιστον τρία αναγνωρισμένα πακέτα διαφορετικών εταιρειών, εκ των οποίων η μία είναι η κυρίαρχη αγορά. Ωστόσο, το κόστος τους δεν είναι ελκυστικό (υψηλό κόστος) για την πλειονότητα των ενδημικών χωρών επί του παρόντος. Ομοίως, τα περισσότερα από τα κιτ που διατίθενται σήμερα στο εμπόριο βασίζονται σε ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες και μονοκλωνικά αντισώματα, γεγονός που τα καθιστά ευαίσθητα στη θερμοκρασία. Ως εκ τούτου, απαιτούν συστήματα ψυκτικής αλυσίδας για την πρόσβαση σε περιφερειακά εργαστήρια σε τροπικές ενδημικές περιοχές, τα οποία αυξάνουν δραματικά το κόστος υλικοτεχνικής υποστήριξης. Η έλλειψη διαθεσιμότητας αυτών των κιτ σε αυτές τις ενδημικές χώρες σημαίνει ότι τα εργαστήριά τους χρησιμοποιούν τις δικές τους αυτοσχέδιες δοκιμές. Αυτό καθιστά δύσκολη την εφαρμογή μιας επικυρωμένης τυποποιημένης δοκιμής σε αυτές τις ενδημικές περιοχές, με επιπτώσεις στον παγκόσμιο έλεγχο της νόσου. Ομοίως, κανένα από αυτά τα διαγνωστικά συστήματα που διατίθενται στην αγορά δεν είναι ικανό να διαφοροποιήσει μεταξύ των αντισωμάτων που παράγονται από τον ιό του εμβολίου και των αντισωμάτων που παράγονται από τους άγριους ιούς που κυκλοφορούν στις χώρες αυτές. Συνολικά, υπάρχει μια μεγάλη ευκαιρία για ένα σταθερότερο και φθηνότερο διαγνωστικό κιτ για το CSFV, ιδίως εάν είναι πιο ευαίσθητο σε χαμηλά παθογόνα στελέχη, που είναι ευρέως παρόντα στις ενδημικές χώρες (δηλαδή: Κίνα). Για να ξεπεραστούν αυτοί οι περιορισμοί, αναπτύξαμε πρόσφατα ένα σύστημα ELISA βασισμένο σε MAPS ικανό να ανιχνεύει αντισώματα που παράγονται από ιικά στελέχη της CSF χαμηλής, μέτριας και υψηλής λοιμογόνου δύναμης. Τα πολλαπλά συστήματα αντιγονικών πεπτιδίων (MAPS) βασίζονται σε έναν διακλαδωμένο πυρήνα ολιγολυσίνης στον οποίο επισυνάπτονται διάφορα αντίγραφα του αντιγόνου πεπτιδίων. Τα συστήματα αυτά ονομάζονται επίσης μηδριμερικά πεπτίδια για τη διάπλασή τους. Χρησιμοποιώντας ένα μηδριμικό πεπτίδιο ως αντιγόνο πλάκας επιτύχαμε υψηλή σταθερότητα (συμπεριλαμβανομένης της θερμοσταθερότητας) και μεγάλη ικανότητα ανίχνευσης αντισωμάτων κατά του ιού. Οι εν λόγω MAPS περιείχαν διαφορετικούς συνδυασμούς αντιγονικών επιτόπων στις πρωτεΐνες CSFV E2, αλλά δεν αποδείχθηκαν όλες αποτελεσματικές για τον διαγνωστικό σκοπό. Εκτός από την υψηλότερη ευαισθησία και σταθερότητα, τα κιτ ELISA που βασίζονται σε MAPS θα μπορούσαν να μειώσουν σημαντικά το κόστος του κιτ, δεδομένου ότι το κόστος παραγωγής χημικών ουσιών των MAPS είναι χαμηλότερο από το βιολογικό κόστος για ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες ή μονοκλωνικά αντισώματα. Εξάλλου, η χημική σύνθεση θα επέτρεπε μεγαλύτερη αναπαραγωγιμότητα μεταξύ των διαφόρων παρτίδων της παραγωγής πεπτιδίων. Σε αυτό το έργο σκοπεύουμε να επικυρώσουμε το σύστημα με τις διάφορες ΕΓΧΠ που έχουν δοκιμαστεί, και να επιλέξουμε τον καλύτερο υποψήφιο με την υψηλότερη διαγνωστική ευαισθησία και εξειδίκευση. Αυτό θα μεταβιβαστεί σε φαρμακευτική εταιρεία μετά την κατοχύρωση με δίπλωμα ευρεσιτεχνίας, προκειμένου να επιταχυνθεί η είσοδό της στην αγορά. Στόχος μας είναι επίσης να ελέγξουμε κατά πόσον η δοκιμασία είναι σε θέση να διαφοροποιήσει τα εμβολιασμένα ζώα από τα μολυσμένα ζώα, τα οποία μέχρι τώρα δεν έχουν επιλυθεί με τα υφιστάμενα συστήματα ανίχνευσης. Η ερευνητική ομάδα έχει στέρεο ιστορικό συνεργασίας με τη βιομηχανία και είναι το Εργαστήριο Αναφοράς του ΟΙΕ για την κλασική πανώλη των χοίρων. Ως εκ τούτου, έχει εύκολη πρόσβαση στους τελικούς χρήστες της τεχνολογίας καθώς και στις φαρμακευτικές εταιρείες, διασφαλίζοντας την επιτυχή μεταφορά της τεχνολογίας. (Greek)
18 August 2022
0 references
Klassisk svinepest (CSF), også kendt som Hog Cholera, er en meget smitsom dødelig virussygdom, der forårsager enorme økonomiske tab for svineindustrien på verdensplan. Det har stor indvirkning i endemiske områder, ofte i tætbefolkede lande, hvor svinekødet er en af de vigtigste kilder til proteinindtagelse af befolkningen. FAO anerkender FSR som et problem, der forværrer fødevaresikkerheden. Den globale epidemiologiske situation, der genereres af klassisk svinepest, er ret kompleks, og nylige udbrud i Østeuropa kan snart bringe sygdommen tilbage til vores land. Hurtig og effektiv serologisk diagnose af inficerede og/eller vaccinerede dyr ved hjælp af en effektiv, økonomisk gennemførlig DIVA (differentiering vaccineret fra smittet) og temperaturstabilt diagnostisk værktøj er af stor betydning for den globale bekæmpelse af dette problem, især i udviklingslande fra Asien og Latinamerika. I betragtning af den store efterspørgsel efter serologiske metoder til påvisning af dette problem i endemiske områder og vores store erfaring på området har vi foreslået at udvikle en serologisk diagnostisk metode, der kan anvendes i de berørte regioner. De nuværende løsninger på markedet omfatter mindst tre anerkendte sæt af forskellige virksomheder, hvoraf den ene er markedsdominerende. Deres omkostninger er dog ikke attraktive (høje omkostninger) for de fleste endemiske lande på nuværende tidspunkt. Ligeledes er de fleste af de kits, der i øjeblikket markedsføres, baseret på rekombinante proteiner og monoklonale antistoffer, hvilket gør dem følsomme over for temperatur. De kræver derfor, at kølekædesystemer når frem til regionale laboratorier i tropiske endemiske områder, hvilket dramatisk øger deres logistiske omkostninger. Den manglende tilgængelighed af disse kits i disse endemiske lande betyder, at deres laboratorier bruger deres egne hjemmelavede test. Dette gør det vanskeligt at anvende en valideret standardtest i disse endemiske områder med konsekvenser for den globale bekæmpelse af sygdommen. På samme måde er ingen af disse diagnostiske systemer, der findes på markedet, i stand til at skelne mellem de antistoffer, der genereres af vaccinevirusset, og de antistoffer, der genereres af de feltvira, der cirkulerer i disse lande. Samlet set er der en stor mulighed for et mere stabilt og billigt diagnostisk kit til CSFV, især hvis det er mere følsomt over for lavpatogene stammer, der er udbredt i endemiske lande (dvs.: Kina). For at overvinde disse begrænsninger har vi for nylig udviklet et ELISA-system baseret på MAPS, der er i stand til at påvise antistoffer genereret af virusstammer af CSF med lav, moderat og høj virulens. Flere antigene peptidsystemer (MAPS) er baseret på en forgrenet oligolysinkerne, som forskellige kopier af peptidantigenet er fastgjort til. Disse systemer er også navngivet som dendrimeriske peptider for sin kropsbygning. Ved at bruge et dendrimerisk peptid som plakantigen opnåede vi høj stabilitet (herunder termostabilitet) og stor kapacitet til påvisning af antistoffer mod virusset. Disse MAPS indeholdt forskellige kombinationer af antigene epitoper i CSFV E2-proteinerne, men ikke alle af dem viste sig at være effektive til det diagnostiske formål. Bortset fra den højere følsomhed og stabilitet kan MAPS-baserede ELISA-sæt i høj grad reducere omkostningerne til sættet, da MAPS' kemiske produktionsomkostninger er lavere end de biologiske omkostninger ved rekombinante proteiner eller monoklonale antistoffer. Desuden ville den kemiske syntese tillade en højere reproducerbarhed mellem de forskellige batcher af peptidproduktion. I dette projekt sigter vi mod at validere systemet med de forskellige MAPS testet, og at vælge den bedste kandidat med den højeste diagnostiske følsomhed og specificitet. Dette vil blive overført til en medicinalvirksomhed efter patenteringen for at fremskynde dens indtræden på markedet. Vi sigter også mod at teste, om assayet er i stand til at skelne vaccinerede dyr fra inficerede dyr, indtil nu ikke løst med de nuværende detektionssystemer. Forskningsgruppen har en solid erfaring med samarbejde med industrien og er OIE's referencelaboratorium for klassisk svinepest. Det har derfor let adgang til teknologiens slutbrugere og lægemiddelvirksomheder, hvilket sikrer en vellykket overførsel af teknologien. (Danish)
18 August 2022
0 references
Klassinen sikarutto (CSF), joka tunnetaan myös nimellä Hog Cholera, on erittäin tarttuva tappava virustauti, joka aiheuttaa valtavia taloudellisia tappioita sikateollisuudelle maailmanlaajuisesti. Sillä on suuri vaikutus kotoperäisillä alueilla, usein asutuissa maissa, joissa sianliha on yksi tärkeimmistä proteiinin saannin lähteistä väestölle. FAO tunnustaa yhteisen strategiakehyksen ongelmaksi, joka pahentaa elintarviketurvaa. YTK:n aiheuttama maailmanlaajuinen epidemiologinen tilanne on varsin monimutkainen, ja Itä-Euroopan viimeaikaiset taudinpurkaukset saattavat pian tuoda taudin takaisin maahamme. Tartunnan saaneiden ja/tai rokotettujen eläinten nopea ja tehokas serologinen diagnosointi käyttämällä tehokasta, taloudellisesti toteuttamiskelpoista DIVA-menetelmää (ero rokotettu tartunnan saaneista) ja lämpötilasta sabiili diagnostiikka on erittäin tärkeää tämän ongelman maailmanlaajuisen valvonnan kannalta, erityisesti Aasian ja Latinalaisen Amerikan kehitysmaissa. Kun otetaan huomioon serologisten menetelmien suuri kysyntä tämän ongelman havaitsemiseksi endeemisillä alueilla ja korkea kokemus alalta, olemme ehdottaneet sellaisen serologisen diagnostisen menetelmän kehittämistä, jota voidaan soveltaa tartunta-alueilla. Markkinoiden nykyisiin ratkaisuihin kuuluu vähintään kolme eri yritysten tunnustettua sarjaa, joista yksi on määräävä markkina-asema. Niiden kustannukset eivät kuitenkaan ole houkuttelevia (korkeat kustannukset) suurimmassa osassa kotoperäisiä maita. Samoin useimmat tällä hetkellä kaupalliset sarjat perustuvat rekombinanttiproteiineihin ja monoklonaalisiin vasta-aineisiin, mikä tekee niistä herkkiä lämpötilalle. Siksi ne tarvitsevat kylmäketjujärjestelmiä päästäkseen alueellisiin laboratorioihin trooppisilla endeemisillä alueilla, mikä lisää dramaattisesti niiden logistiikkakustannuksia. Koska näitä sarjoja ei ole saatavilla kyseisissä kotoperäisissä maissa, niiden laboratoriot käyttävät omia kotitekoisia testejään. Tämän vuoksi näillä endeemisillä alueilla on vaikea soveltaa validoitua standarditestiä, jolla on vaikutuksia taudin maailmanlaajuiseen torjuntaan. Mikään näistä markkinoilla olevista diagnostisista järjestelmistä ei myöskään pysty erottamaan rokoteviruksen tuottamia vasta-aineita ja näissä maissa liikkuvien kenttävirusten tuottamia vasta-aineita. Yleisesti ottaen CSFV:tä varten on suuri mahdollisuus vakaampaan ja edullisempaan diagnostiseen sarjaan, varsinkin jos se on herkempi matalapatogeenisille kannoille, joita esiintyy laajalti endeemisissä maissa (eli Kiina). Näiden rajoitusten poistamiseksi olemme äskettäin kehittäneet MAPS-järjestelmään perustuvan ELISA-järjestelmän, jolla pystytään havaitsemaan vasta-aineita, joita syntyy CSF:n viruskannoista, joiden virulenssi on alhainen, kohtalainen ja korkea. Useat antigeeniset peptidijärjestelmät (MAPS) perustuvat haarautuneeseen oligolysiiniytimeen, johon on liitetty erilaisia peptidiantigeenin kopioita. Nämä järjestelmät on myös nimetty dendrimeerisiksi peptideiksi sen muodon vuoksi. Käyttämällä dendrimeeristä peptidiä plakki-antigeenina saavutimme korkean stabiiliuden (mukaan lukien termostabiliteetti) ja suuren kyvyn havaita vasta-aineita virusta vastaan. Nämä MAPS-yhdisteet sisälsivät erilaisia antigeenisten epitooppien yhdistelmiä CSFV E2-proteiineissa, mutta kaikki niistä eivät osoittautuneet tehokkaiksi diagnostiseen tarkoitukseen. Suuremman herkkyyden ja stabiilisuuden lisäksi MAPS-pohjaiset ELISA-pakkaukset voisivat alentaa huomattavasti pakkausten kustannuksia, koska MAPS:n kemikaalien tuotantokustannukset ovat pienemmät kuin rekombinanttiproteiinin tai monoklonaalisten vasta-aineiden biologiset kustannukset. Lisäksi kemiallinen synteesi mahdollistaisi suuremman toistettavuuden peptidin tuotantoerien välillä. Tässä hankkeessa pyrimme validoimaan järjestelmän eri MAPS-testillä ja valitsemaan parhaan mahdollisen ehdokkaan, jolla on suurin diagnostinen herkkyys ja spesifisyys. Tämä siirretään lääkeyhtiölle patentoinnin jälkeen, jotta voidaan nopeuttaa sen markkinoille tuloa. Pyrimme myös testaamaan, pystyykö määrityksellä erottamaan rokotetut eläimet tartunnan saaneista eläimistä, mutta tähän asti niitä ei ole ratkaistu nykyisillä havaitsemisjärjestelmillä. Tutkimusryhmällä on vankka kokemus yhteistyöstä teollisuuden kanssa, ja se on OIE:n klassisen sikaruton vertailulaboratorio. Sen vuoksi teknologian loppukäyttäjien ja lääkeyritysten on helppo käyttää sitä, mikä varmistaa teknologian onnistuneen siirron. (Finnish)
18 August 2022
0 references
Id-deni klassiku tal-ħnieżer (CSF), magħruf ukoll bħala Hog Cholera, huwa marda virali letali li tittieħed ħafna li tikkawża telf ekonomiku enormi għall-industrija tal-ħnieżer madwar id-dinja. Dan għandu impatt kbir f’żoni endemiċi, ħafna drabi f’pajjiżi b’popolazzjoni għolja, fejn il-laħam tal-majjal huwa wieħed mis-sorsi ewlenin ta’ teħid ta’ proteini fil-popolazzjoni. Il-QSK huwa rikonoxxut mill-FAO bħala problema li taggrava s-sigurtà tal-ikel. Is-sitwazzjoni epidemjoloġika globali ġġenerata mill-QSK hija pjuttost kumplessa, u tifqigħat riċenti fl-Ewropa tal-Lvant jistgħu dalwaqt iġibu lura l-marda f’pajjiżna. Dijanjosi seroloġika rapida u effettiva ta’ annimali infettati u/jew imlaqqma bl-użu ta’ DIVA (differenzjazzjoni mlaqqma mill-infezzjoni) u għodda dijanjostika ta’ stabiliment tat-temperatura effettiva, ekonomikament fattibbli, hija ta’ rilevanza kbira għall-kontroll globali ta’ din il-problema, speċjalment severa fil-pajjiżi li qed jiżviluppaw mill-Asja u l-Amerika Latina. Meta wieħed iqis id-domanda għolja ta’ metodi seroloġiċi biex tiġi skoperta din il-problema f’żoni endemiċi, u l-esperjenza għolja tagħna fil-qasam, ipproponejna li niżviluppaw metodu dijanjostiku seroloġiku fattibbli biex jiġi applikat fir-reġjuni affettwati. Is-soluzzjonijiet attwali fis-suq jinvolvu mill-inqas tliet kitts rikonoxxuti ta’ kumpaniji differenti, li wieħed minnhom huwa s-suq dominanti. Madankollu, l-ispejjeż tagħhom mhumiex attraenti (spiża għolja) għall-maġġoranza tal-pajjiżi endemiċi fil-preżent. Bl-istess mod, il-biċċa l-kbira tal-kitts attwalment kummerċjalizzati huma bbażati fuq proteini rikombinanti u antikorpi monoklonali, li jagħmilhom sensittivi għat-temperatura. Għalhekk, jeħtieġu li s-sistemi tal-katina tal-kesħa jilħqu laboratorji reġjonali f’żoni endemiċi tropikali, li jżidu b’mod drammatiku l-ispejjeż loġistiċi tagħhom. In-nuqqas ta’ disponibbiltà ta’ dawn il-kitts f’dawk il-pajjiżi endemiċi jfisser li l-laboratorji tagħhom jużaw it-testijiet tagħhom stess. Dan jagħmilha diffiċli biex jiġi applikat test standard ivvalidat f’dawn iż-żoni endemiċi, b’implikazzjonijiet għall-kontroll globali tal-marda. Bl-istess mod, l-ebda waħda minn dawn is-sistemi dijanjostiċi disponibbli fis-suq ma hija kapaċi tiddistingwi bejn l-antikorpi ġġenerati mill-virus tal-vaċċin u l-antikorpi ġġenerati mill-virusis fuq il-post li jiċċirkolaw f’dawn il-pajjiżi. B’mod ġenerali, hemm tieqa kbira ta’ opportunità għal sett dijanjostiku aktar stabbli u rħis għas-CSFV, speċjalment jekk ikun aktar sensittiv għal razez patoġeniċi baxxi, preżenti b’mod wiesa’ f’pajjiżi endemiċi (jiġifieri: Iċ-Ċina). Biex negħlbu dawn ir-restrizzjonijiet dan l-aħħar żviluppajna sistema ELISA bbażata fuq MAPS li kapaċi tidentifika antikorpi ġġenerati minn razez virali ta’ CSF ta’ virulenza baxxa, moderata u għolja. Sistemi multipli ta’ peptidi antiġeniċi (MAPS) huma bbażati fuq qalba ta’ oligolysine ramifikata li magħha hemm mehmuża diversi kopji tal-antiġen tal-peptide. Dawk is-sistemi huma msemmija wkoll bħala peptidi dendrimeriċi għall-konformazzjoni tagħhom. Bl-użu ta’ peptide dendrimeriku bħala antiġen tal-plakka, aħna ksibna stabbiltà għolja (inkluż termostabbiltà) u kapaċità kbira biex jinstabu antikorpi kontra l-virus. Dawk il-MAPS kien fihom kombinazzjonijiet differenti ta’ epitopi antiġeniċi fil-proteini CSFV E2, iżda mhux kollha wrew li kienu effettivi għall-iskop dijanjostiku. Minbarra s-sensibilità u l-istabbiltà ogħla, il-kittijiet ELISA bbażati fuq il-MAPS jistgħu jnaqqsu ħafna l-ispiża tal-kitt, peress li l-ispejjeż tal-produzzjoni kimika tal-MAPS huma aktar baxxi mill-ispejjeż bijoloġiċi għall-proteina rikombinanti jew għall-antikorpi monoklonali. Barra minn hekk, is-sinteżi kimika tippermetti riproduċibbiltà ogħla bejn il-lottijiet differenti tal-produzzjoni tal-peptidi. F’dan il-proġett għandna l-għan li nivvalidaw is-sistema bil-MAPS differenti ttestjati, u li nagħżlu l-aħjar kandidat bl-ogħla sensittività u speċifiċità dijanjostika. Dan se jiġi trasferit lil kumpanija farmaċewtika wara l-privattiva tagħha, sabiex jitħaffef id-dħul tagħha fis-suq. Aħna għandna wkoll l-għan li nittestjaw jekk l-assaġġ huwiex kapaċi jiddistingwi l-annimali mlaqqma minn annimali infettati, s’issa ma ġiex solvut bis-sistemi ta’ detezzjoni attwali. Il-grupp ta’ riċerka għandu rekord sod ta’ kollaborazzjoni mal-industrija, u huwa l-Laboratorju ta’ Referenza tal-OIE għad-deni klassiku tal-ħnieżer. Għalhekk, għandu aċċess faċli għall-utenti finali tat-teknoloġija kif ukoll għall-kumpaniji farmaċewtiċi, u b’hekk jiżgura trasferiment b’suċċess tat-teknoloġija. (Maltese)
18 August 2022
0 references
Klasiskais cūku mēris (CSF), pazīstams arī kā Hog Cholera, ir ļoti lipīga nāvējoša vīrusu slimība, kas cūkkopības nozarei visā pasaulē rada milzīgus ekonomiskus zaudējumus. Tam ir liela ietekme endēmiskos apgabalos, bieži vien augsti apdzīvotās valstīs, kur cūkgaļa ir viens no galvenajiem olbaltumvielu uzņemšanas avotiem iedzīvotājiem. FAO ir atzinusi CSF par problēmu, kas pasliktina nodrošinātību ar pārtiku. Globālā epidemioloģiskā situācija, ko rada CSF, ir diezgan sarežģīta, un nesenie uzliesmojumi Austrumeiropā drīz varētu atjaunot šo slimību mūsu valstī. Ātra un efektīva inficēto un/vai vakcinēto dzīvnieku seroloģiskā diagnostika, izmantojot efektīvu, ekonomiski realizējamu DIVA (no inficētās diferenciācijas vakcinēto) un temperatūras stabilitātes diagnostikas instrumentu, ir ļoti svarīga šīs problēmas globālajai kontrolei, jo īpaši Āzijas un Latīņamerikas jaunattīstības valstīs. Ņemot vērā lielo pieprasījumu pēc seroloģiskām metodēm, lai atklātu šo problēmu endēmiskos apgabalos, un mūsu lielo pieredzi šajā jomā, mēs esam ierosinājuši izstrādāt seroloģiskās diagnostikas metodi, ko iespējams piemērot skartajos reģionos. Pašreizējie risinājumi tirgū ietver vismaz trīs atzītus dažādu uzņēmumu komplektus, no kuriem viens ir dominējošais tirgus. Tomēr pašlaik to izmaksas nav pievilcīgas (augstas izmaksas) vairumam endēmisko valstu. Tāpat lielākā daļa pašlaik komercializēto komplektu ir balstīti uz rekombinantajām olbaltumvielām un monoklonālajām antivielām, kas padara tās jutīgas pret temperatūru. Tāpēc tām ir vajadzīgas aukstuma ķēdes sistēmas, lai sasniegtu reģionālās laboratorijas tropu endēmiskos apgabalos, kas ievērojami palielina to loģistikas izmaksas. Šo komplektu trūkums šajās endēmiskajās valstīs nozīmē, ka to laboratorijas izmanto savus mājas testus. Tas apgrūtina validēta standarta testa piemērošanu šajās endēmiskajās zonās, kas ietekmē slimības vispārējo kontroli. Tāpat neviena no šīm tirgū pieejamajām diagnostikas sistēmām nespēj atšķirt vakcīnas vīrusa radītās antivielas no antivielām, ko rada šajās valstīs cirkulējošie lauka vīrusi. Kopumā ir lieliska iespēja stabilākam un lētākam CSFV diagnostikas komplektam, jo īpaši, ja tas ir jutīgāks pret zemu patogēnu celmiem, kas plaši sastopami endēmiskās valstīs (t. i., Ķīna). Lai pārvarētu šos ierobežojumus, mēs nesen esam izstrādājuši ELISA sistēmu, kuras pamatā ir MAPS un kura spēj noteikt antivielas, ko rada zemas, mērenas un augstas virulences CSF vīrusu celmi. Vairāku antigēnu peptīdu sistēmu (MAPS) pamatā ir sazarots oligolizīna kodols, kuram pievienotas dažādas peptīdu antigēna kopijas. Šīs sistēmas tiek sauktas arī par dendrimēru peptīdiem to uzbūves dēļ. Izmantojot dendrimēru peptīdu kā perēkļveida antigēnu, mēs panākām augstu stabilitāti (ieskaitot termostabilitāti) un lielu spēju noteikt antivielas pret vīrusu. Šie MAPS saturēja dažādas antigēnu epitopu kombinācijas CSFV E2 olbaltumvielās, bet ne visas no tām izrādījās efektīvas diagnostikas nolūkā. Papildus lielākai jutībai un stabilitātei uz MAPS bāzes veidotie ELISA komplekti varētu ievērojami samazināt komplekta izmaksas, jo MAPS ķīmiskās ražošanas izmaksas ir zemākas par rekombinanto olbaltumvielu vai monoklonālo antivielu bioloģiskajām izmaksām. Turklāt ķīmiskā sintēze nodrošinātu lielāku reproducējamību starp dažādām peptīdu ražošanas partijām. Šajā projektā mūsu mērķis ir validēt sistēmu ar dažādiem pārbaudītajiem MAPS un izvēlēties labāko kandidātu ar visaugstāko diagnostisko jutību un specifiku. Pēc patentēšanas tas tiks nodots farmācijas uzņēmumam, lai paātrinātu tā ienākšanu tirgū. Mūsu mērķis ir arī pārbaudīt, vai tests spēj atšķirt vakcinētos dzīvniekus no inficētiem dzīvniekiem, līdz šim tas nav atrisināts ar pašreizējām noteikšanas sistēmām. Pētniecības grupa ir guvusi stabilus panākumus sadarbībā ar nozari, un tā ir OIE references laboratorija klasiskā cūku mēra noteikšanai. Tāpēc tai ir viegla piekļuve tehnoloģijas galalietotājiem, kā arī farmācijas uzņēmumiem, nodrošinot veiksmīgu tehnoloģijas nodošanu. (Latvian)
18 August 2022
0 references
Klasický mor ošípaných (CSF), tiež známy ako Hog Cholera, je vysoko nákazlivé smrteľné vírusové ochorenie, ktoré spôsobuje obrovské hospodárske straty pre odvetvie chovu ošípaných na celom svete. Má veľký vplyv na endemické oblasti, často vo vysoko osídlených krajinách, kde je bravčové mäso jedným z hlavných zdrojov príjmu bielkovín v populácii. Organizácia FAO uznáva CSF ako problém, ktorý zhoršuje potravinovú bezpečnosť. Celosvetová epidemiologická situácia vyvolaná CSF je dosť zložitá a nedávne vypuknutia nákazy vo východnej Európe by mohli čoskoro vrátiť túto chorobu do našej krajiny. Rýchla a účinná sérologická diagnostika infikovaných a/alebo očkovaných zvierat pomocou účinného, ekonomicky uskutočniteľného DIVA (diferenciácia očkovaná od infikovaných) a stabilná teplotná diagnostika má veľký význam pre globálnu kontrolu tohto problému, najmä v rozvojových krajinách Ázie a Latinskej Ameriky. Vzhľadom na vysoký dopyt po sérologických metódach na zistenie tohto problému v endemických oblastiach a naše bohaté skúsenosti v tejto oblasti sme navrhli vypracovať sérologickú diagnostickú metódu, ktorá by sa dala použiť v postihnutých regiónoch. Súčasné riešenia na trhu zahŕňajú najmenej tri uznávané zostavy rôznych spoločností, z ktorých jedna má dominantné postavenie na trhu. Ich náklady sú však v súčasnosti pre väčšinu endemických krajín neatraktívne (vysoké náklady). Podobne, väčšina súprav, ktoré sú v súčasnosti komercializované, je založená na rekombinantných proteínoch a monoklonálnych protilátkach, čo ich robí citlivými na teplotu. Preto vyžadujú, aby sa systémy chladiarenských reťazcov dostali do regionálnych laboratórií v tropických endemických oblastiach, ktoré dramaticky zvyšujú ich logistické náklady. Nedostatočná dostupnosť týchto súprav v týchto endemických krajinách znamená, že ich laboratóriá používajú svoje vlastné testy. To sťažuje použitie validovaného štandardného testu v týchto endemických oblastiach, čo má vplyv na globálnu kontrolu choroby. Podobne ani jeden z týchto diagnostických systémov dostupných na trhu nie je schopný rozlišovať medzi protilátkami vytvorenými vakcinačným vírusom a protilátkami vytvorenými terénnymi vírusmi cirkulujúcimi v týchto krajinách. Celkovo existuje veľká príležitosť na stabilnejšiu a lacnejšiu diagnostickú súpravu pre CSFV, najmä ak je citlivejšia na nízkopatogénne kmene, ktoré sú široko prítomné v endemických krajinách (t. j.: Čína). Na prekonanie týchto obmedzení sme nedávno vyvinuli systém ELISA založený na MAPS schopný zistiť protilátky generované vírusovými kmeňmi CSF s nízkou, strednou a vysokou virulenciou. Mnohopočetné antigénne peptidové systémy (MAPS) sú založené na rozvetvenom jadre oligolyzínu, ku ktorému sú pripojené rôzne kópie peptidového antigénu. Tieto systémy sú tiež pomenované ako dendrimerické peptidy pre ich mäsitosť. Použitím dendrimerického peptidu ako plakuového antigénu sme dosiahli vysokú stabilitu (vrátane termostability) a veľkú kapacitu na detekciu protilátok proti vírusu. Tieto MAPS obsahovali rôzne kombinácie antigénnych epitopov v proteínoch CSFV E2, ale ukázalo sa, že nie všetky z nich sú účinné na diagnostické účely. Okrem vyššej citlivosti a stability by súpravy ELISA založené na MAPS mohli výrazne znížiť náklady na súpravu, pretože náklady na chemickú výrobu MAPS sú nižšie ako biologické náklady na rekombinantné bielkoviny alebo monoklonálne protilátky. Chemická syntéza by okrem toho umožnila vyššiu reprodukovateľnosť medzi rôznymi šaržami výroby peptidov. V tomto projekte sa snažíme overiť systém s rôznymi testovanými MAPS a vybrať najlepšieho kandidáta s najvyššou diagnostickou citlivosťou a špecifickosťou. Prevedie sa na farmaceutickú spoločnosť po jej patentovaní s cieľom urýchliť jej vstup na trh. Naším cieľom je tiež otestovať, či je test schopný odlíšiť očkované zvieratá od infikovaných zvierat, a to až doteraz nevyriešené súčasnými systémami detekcie. Výskumná skupina má dobré výsledky spolupráce s odvetvím a je referenčným laboratóriom OIE pre klasický mor ošípaných. Má preto jednoduchý prístup ku koncovým používateľom technológie, ako aj k farmaceutickým spoločnostiam, čím zabezpečuje úspešný transfer technológie. (Slovak)
18 August 2022
0 references
Is galar víreasach marfach an-tógálach é fiabhras clasaiceach na muc (CSF), ar a dtugtar Hog Cholera freisin, a chruthaíonn caillteanais mhóra eacnamaíocha do thionscal na muc ar fud an domhain. Tá tionchar mór aige ar limistéir eindéimeacha, go minic i dtíortha ina bhfuil daonra ard, áit a bhfuil an mhuiceoil ar cheann de na príomhfhoinsí iontógála próitéine don daonra. Aithníonn FAO CCS mar fhadhb a chuireann leis an tslándáil bia. Tá an staid eipidéimeolaíoch dhomhanda a ghineann CS casta go leor, agus d’fhéadfadh ráigeanna a tharla le déanaí in Oirthear na hEorpa an galar a thabhairt ar ais go dtí ár dtír go luath. Tá diagnóis shéireolaíoch thapa agus éifeachtach ainmhithe ionfhabhtaithe agus/nó vacsaínithe trí úsáid a bhaint as DIVA (difreáil a vacsaíníodh ó ionfhabhtaithe) agus as uirlis dhiagnóiseach stabile teochta éifeachtach, éifeachtach, thar a bheith ábhartha maidir le rialú domhanda na faidhbe seo, go háirithe i dtíortha atá i mbéal forbartha ón Áise agus ó Mheiriceá Laidineach. I bhfianaise an éilimh mhóir ar mhodhanna séireolaíocha chun an fhadhb seo a bhrath i gceantair eindéimeacha, agus an taithí ard atá againn sa réimse, mholamar modh diagnóiseach séireolaíoch a fhorbairt a d’fhéadfaí a chur i bhfeidhm sna réigiúin atá buailte. Tá trí fhearas aitheanta de chuideachtaí éagsúla i gceist leis na réitigh atá ann faoi láthair sa mhargadh, agus ceann amháin acu an ceann is mó sa mhargadh. Mar sin féin, tá a gcostais neamhtharraingteach (ardchostas) i gcás fhormhór na dtíortha eindéimeacha faoi láthair. Mar an gcéanna, tá an chuid is mó de na fearais a dhéantar a thráchtálú faoi láthair bunaithe ar phróitéiní athchuingreacha agus antasubstaintí monoclonal, rud a fhágann go bhfuil siad íogair don teocht. Dá bhrí sin, éilíonn siad córais slabhra fuara chun teacht ar shaotharlanna réigiúnacha i gceantair eindéimeacha trópaiceacha, rud a chuireann go mór lena gcostais lóistíochta. Ciallaíonn easpa infhaighteacht na bhfearas seo sna tíortha endemic sin go n-úsáideann a gcuid saotharlanna a gcuid tástálacha baile féin. Fágann sé sin go bhfuil sé deacair tástáil chaighdeánach bhailíochtaithe a chur i bhfeidhm sna réimsí eindéimeacha seo, le himpleachtaí do rialú domhanda an ghalair. Ar an gcaoi chéanna, níl aon cheann de na córais dhiagnóiseacha seo atá ar fáil ar an margadh in ann idirdhealú a dhéanamh idir na hantasubstaintí a ghineann an víreas vacsaíne agus na antasubstaintí a ghineann na víris allamuigh a scaiptear sna tíortha sin. Tríd is tríd, tá deis iontach ann do threalamh diagnóiseach níos cobhsaí agus níos saor le haghaidh CSFV, go háirithe má tá sé níos íogaire i leith tréithchineálacha ísealphataigineacha, go forleathan i dtíortha eindéimeacha (i.e: An tSín). Chun na srianta sin a shárú, tá córas ELISA forbartha againn le déanaí bunaithe ar MAPS atá in ann antasubstaintí a ghintear trí thréithchineálacha víreasacha CSF de nimhneacht íseal, measartha agus ard a bhrath. Tá ilchórais pheiptíde antigenic (MAPS) bunaithe ar chroí oligolysine brainseach a bhfuil cóipeanna éagsúla den antigen peptide ceangailte leis. Ainmnítear na córais sin freisin mar pheiptídí dendrimeric chun é a dhéanamh. Trí úsáid a bhaint as peiptíd dendrimeric mar antaigin phlaic, bhaineamar ardchobhsaíocht amach (lena n-áirítear teirmeastaracht) agus bhaineamar cumas mór amach chun antasubstaintí i gcoinne an víris a bhrath. Bhí teaglamaí éagsúla d’eipeatóipí antaigineacha i bpróitéiní CSV E2 sna MAPS sin, ach níor léiríodh go raibh siad go léir éifeachtach chun na críche diagnóisí. Chomh maith leis an íogaireacht agus cobhsaíocht níos airde, d’fhéadfadh fearais ELISA atá bunaithe ar MAPS costas an trealaimh a laghdú go mór, ós rud é go bhfuil costais táirgthe cheimiceacha an MAPS níos ísle ná na costais bhitheolaíocha le haghaidh próitéine athchuingreach nó antasubstaintí monacónacha. Thairis sin, cheadódh an sintéis cheimiceach in-atáirgtheacht níos airde idir na baisceanna éagsúla de tháirgeadh peptide. Sa tionscadal seo tá sé mar aidhm againn an córas a bhailíochtú leis an MAPS éagsúla a tástáladh, agus an t-iarrthóir is fearr a roghnú a bhfuil an íogaireacht agus an sainiúlacht dhiagnóiseach is airde aige. Aistreofar é sin chuig cuideachta chógaisíochta tar éis a phaitinnithe, chun dlús a chur lena hiontráil ar an margadh. Tá sé mar aidhm againn freisin a thástáil an bhfuil an mheasúnacht in ann idirdhealú a dhéanamh idir ainmhithe vacsaínithe ó ainmhithe ionfhabhtaithe, go dtí seo nach réitítear iad leis na córais bhraite atá ann faoi láthair. Tá cuntas teiste láidir ag an ngrúpa taighde ar chomhoibriú leis an tionscal, agus is í an tSaotharlann Tagartha OIE um fhiabhras Clasaiceach na muc é. Dá bhrí sin, tá rochtain éasca aige ar úsáideoirí deiridh na teicneolaíochta agus ar chuideachtaí cógaisíochta, rud a áirithíonn aistriú rathúil na teicneolaíochta. (Irish)
18 August 2022
0 references
Klasický mor prasat (CSF), známý také jako Hog Cholera, je vysoce nakažlivá smrtelná virová choroba způsobující obrovské ekonomické ztráty pro vepřový průmysl na celém světě. Má velký dopad v endemických oblastech, často ve vysoce osídlených zemích, kde je vepřové maso jedním z hlavních zdrojů příjmu bílkovin pro populaci. Organizace FAO uznává SSR jako problém, který zhoršuje zajišťování potravin. Celosvětová epizootologická situace generovaná CSF je poměrně složitá a nedávná ohniska ve východní Evropě by mohla brzy tuto chorobu vrátit do naší země. Rychlá a účinná sérologická diagnóza infikovaných a/nebo očkovaných zvířat pomocí účinného, ekonomicky proveditelného nástroje DIVA (rozlišení očkovaného od infikovaného) a teplotního stabilizačního diagnostického nástroje má velký význam pro globální kontrolu tohoto problému, zejména v rozvojových zemích z Asie a Latinské Ameriky. Vzhledem k vysoké poptávce po sérologických metodách k odhalení tohoto problému v endemických oblastech a k našim vysokým zkušenostem v této oblasti jsme navrhli vyvinout sérologickou diagnostickou metodu proveditelnou pro použití v postižených oblastech. Současná řešení na trhu zahrnují nejméně tři uznávané sady různých společností, z nichž jedna je dominantní na trhu. Jejich náklady jsou však pro většinu endemických zemí v současnosti neatraktivní (vysoké náklady). Stejně tak většina souprav, které jsou v současné době komercializovány, jsou založeny na rekombinantních proteinech a monoklonálních protilátek, což je činí citlivými na teplotu. Proto vyžadují systémy chladírenských řetězců, aby se dostaly do regionálních laboratoří v tropických endemických oblastech, což dramaticky zvyšuje jejich logistické náklady. Nedostatečná dostupnost těchto sad v těchto endemických zemích znamená, že jejich laboratoře používají vlastní domácí testy. To ztěžuje uplatňování validovaného standardního testu v těchto endemických oblastech, což má důsledky pro globální tlumení nákazy. Stejně tak žádný z těchto diagnostických systémů dostupných na trhu není schopen rozlišovat mezi protilátky vytvářenými očkovacím virem a protilátky vytvářenými terénními viry, které v těchto zemích kolují. Celkově existuje velká příležitost pro stabilnější a levnější diagnostickou soupravu pro CSFV, zejména pokud je citlivější na nízkopatogenní kmeny, které jsou široce přítomny v endemických zemích (tj.: Čína). K překonání těchto omezení jsme nedávno vyvinuli systém ELISA založený na MAPS schopný detekovat protilátky generované virovými kmeny CSF s nízkou, střední a vysokou virulencí. Více antigenních peptidových systémů (MAPS) je založeno na rozvětveném jádru oligolyzinu, k němuž jsou připojeny různé kopie peptidového antigenu. Tyto systémy jsou také pojmenovány jako dendrimerické peptidy pro jeho konformaci. Použitím dendrimerického peptidu jako plaku antigen jsme dosáhli vysoké stability (včetně termostability) a velké kapacity pro detekci protilátek proti viru. Tyto MAPS obsahovaly různé kombinace antigenních epitopů v proteinech CSFV E2, ale ne všechny se ukázaly být účinné pro diagnostický účel. Kromě vyšší citlivosti a stability by sady ELISA založené na MAPS mohly výrazně snížit náklady na soupravu, protože náklady na chemickou výrobu MAPS jsou nižší než biologické náklady na rekombinantní protein nebo monoklonální protilátky. Kromě toho by chemická syntéza umožnila vyšší reprodukovatelnost mezi různými šaržemi výroby peptidů. Cílem tohoto projektu je validovat systém s různými testovanými MAPS a vybrat nejlepšího kandidáta s nejvyšší diagnostickou citlivostí a specifičností. To bude převedeno na farmaceutickou společnost po jejím patentování, aby se urychlil její vstup na trh. Naším cílem je také testovat, zda je test schopen odlišit očkovaná zvířata od infikovaných zvířat, až dosud nebyla vyřešena stávajícími detekčními systémy. Výzkumná skupina má spolehlivé výsledky spolupráce s průmyslem a je referenční laboratoří OIE pro klasický mor prasat. Proto má snadný přístup ke koncovým uživatelům technologie i farmaceutickým společnostem, což zajišťuje úspěšný přenos technologie. (Czech)
18 August 2022
0 references
A peste suína clássica (PSC), também conhecida como Hog Cholera, é uma doença viral letal altamente contagiosa, causando enormes perdas econômicas para a indústria suinícola em todo o mundo. Tem um grande impacto em áreas endêmicas, muitas vezes em países de alta densidade populacional, onde a carne de suíno é uma das principais fontes de ingestão de proteínas para a população. O QCA é reconhecido pela FAO como um problema que agrava a segurança alimentar. A situação epidemiológica global gerada pela PSC é bastante complexa, e surtos recentes na Europa Oriental podem em breve trazer de volta a doença para o nosso país. O diagnóstico serológico rápido e eficaz de animais infetados e/ou vacinados por meio de uma ferramenta de diagnóstico eficaz, economicamente viável, DIVA (diferenciação vacinada de infetados) e de estabilização da temperatura é de grande relevância para o controle global deste problema, especialmente nos países em desenvolvimento da Ásia e América Latina. Considerando a alta necessidade de métodos sorológicos para detetar esse problema em áreas endêmicas, e nossa alta experiência no campo, propusemos desenvolver um método de diagnóstico sorológico viável para aplicação nas regiões afetadas. As soluções atuais no mercado envolvem pelo menos três kits reconhecidos de diferentes empresas, sendo uma delas dominante no mercado. No entanto, os seus custos são pouco atrativos (custo elevado) para a maioria dos países endémicos atualmente. Da mesma forma, a maioria dos kits atualmente comercializados são ganzas em proteínas recombinantes e anticorpos monoclonais, o que os torna sensíveis à temperatura. Portanto, eles exigem sistemas de cadeia de frio para chegar a laboratórios regionais em áreas tropicais endêmicas, o que aumenta drasticamente seus custos logísticos. A falta de disponibilidade destes kits nesses países endémicos significa que os seus laboratórios utilizam os seus próprios testes caseiros. Isso dificulta a aplicação de um teste padrão validado nessas áreas endêmicas, com implicações para o controle global da doença. Da mesma forma, nenhum desses sistemas diagnósticos disponíveis no mercado é capaz de diferenciar entre os anticorpos gerados pelo vírus vacinal e os anticorpos gerados pelos vírus de campo que circulam nesses países. Em geral, há uma grande janela de oportunidade para um kit de diagnóstico mais estável e barato para o VCRC, especialmente se for mais sensível a cepas de baixa patogenicidade, amplamente presentes em países endêmicos (i.e.: China). Para superar essas restrições, desenvolvemos recentemente um sistema ELISA ganza na MAPS capaz de detetar anticorpos gerados por cepas virais de LCR de baixa, moderada e alta virulência. Os sistemas de peptídeos antigênicos múltiplos (MAPS) são ganzas em um núcleo de oligolisina ramificado ao qual várias cópias do antígeno peptídeo são unidas. Esses sistemas também são chamados de peptídeos dendrâmicos por sua conformação. Usando um peptídeo dendrâmico como um antígeno de placa, conseguimos alta estabilidade (incluindo termoestabilidade) e grande capacidade de deteção de anticorpos contra o vírus. Essas MAPS continham diferentes combinações de epítopos antigênicos nas proteínas E2 do CSFV, mas nem todas elas se mostraram eficazes para o propósito diagnóstico. Além da maior sensibilidade e estabilidade, os kits ELISA ganzas em MAPS poderiam diminuir consideravelmente o custo do kit, uma vez que os custos de produção química da MAPS são menores do que os custos biológicos de proteína recombinante ou anticorpos monoclonais. Além disso, a síntese química permitiria uma maior reprodutibilidade entre os diferentes lotes de produção de peptídeos. Neste projeto pretendemos validar o sistema com as diferentes MAPS testadas e selecionar o melhor candidato com maior sensibilidade e especificidade diagnóstica. Isto será transferido para uma empresa farmacêutica após a sua patenteação, a fim de acelerar a sua entrada no mercado. Pretendemos também testar se o ensaio é capaz de diferenciar os animais vacinados dos animais infetados, até agora não resolvidos com os atuais sistemas de deteção. O grupo de pesquisa tem um histórico sólido de colaboração com a indústria, e é o Laboratório de Referência da OIE para a peste suína clássica. Por conseguinte, tem fácil acesso aos utilizadores finais da tecnologia, bem como às empresas farmacêuticas, garantindo uma transferência bem sucedida da tecnologia. (Portuguese)
18 August 2022
0 references
Sigade klassikaline katk, tuntud ka kui Hog Cholera, on väga nakkav surmav viirushaigus, mis põhjustab suurt majanduslikku kahju seatööstusele kogu maailmas. Sellel on suur mõju endeemilistele piirkondadele, sageli suure asustusega riikides, kus sealiha on üks peamisi elanikkonna valgutarbimise allikaid. FAO on tunnistanud ühise strateegilise raamistiku probleemiks, mis suurendab toiduga kindlustatust. Sigade klassikalise katku tekitatud ülemaailmne epidemioloogiline olukord on üsna keeruline ja hiljutised puhangud Ida-Euroopas võivad peagi haiguse meie riiki tagasi tuua. Nakatunud ja/või vaktsineeritud loomade kiire ja tõhus seroloogiline diagnoos, kasutades tõhusat, majanduslikult teostatavat DIVA-d (infektsioonist vaktsineeritud diferentseerimine) ja temperatuuri stabiliseerimise vahend, on selle probleemi ülemaailmseks kontrolliks väga oluline, eriti raske Aasia ja Ladina-Ameerika arengumaades. Arvestades suurt nõudlust seroloogiliste meetodite järele selle probleemi avastamiseks endeemilistes piirkondades ja meie kõrget kogemust valdkonnas, oleme teinud ettepaneku töötada välja seroloogiline diagnostiline meetod, mida saaks kasutada mõjutatud piirkondades. Praegused turulahendused hõlmavad vähemalt kolme tunnustatud komplekti eri ettevõtetest, millest üks on turgu valitsev seisund. Kuid nende kulud ei ole praegu enamiku endeemiliste riikide jaoks atraktiivsed (suured kulud). Samuti põhineb enamik praegu turustatavaid komplekte rekombinantsetel valkudel ja monoklonaalsetel antikehadel, mis muudab need temperatuuri suhtes tundlikuks. Seetõttu on vaja külmaahela süsteeme, et jõuda piirkondlike laboriteni troopilistes endeemilistes piirkondades, mis suurendab märkimisväärselt nende logistikakulusid. Nende komplektide puudumine nendes endeemilistes riikides tähendab, et nende laborid kasutavad oma koduseid teste. Seetõttu on neil endeemilistel aladel raske kohaldada valideeritud standardtesti, mis mõjutab haiguse üldist tõrjet. Samuti ei ole ükski turul kättesaadav diagnostikasüsteem võimeline eristama vaktsiiniviiruse tekitatud antikehasid nendes riikides ringlevate väliviiruste tekitatud antikehadest. Üldiselt on olemas suurepärane võimalus stabiilsemaks ja odavamaks CSFV diagnostikakomplektiks, eriti kui see on tundlikum madala patogeensete tüvede suhtes, mida endeemilistes riikides laialdaselt esineb (st: Hiina). Nende piirangute ületamiseks oleme hiljuti välja töötanud MAPSil põhineva ELISA süsteemi, mis on võimeline tuvastama madala, mõõduka ja kõrge virulentsusega tserebrospinaalvedeliku viirusetüvede tekitatud antikehasid. Mitmed antigeensed peptiidisüsteemid (MAPS) põhinevad hargnenud oligolüsiini südamikul, millele on kinnitatud mitmesugused peptiidiantigeeni koopiad. Neid süsteeme nimetatakse ka kehaehituse tõttu dendrimeerseteks peptiidideks. Kasutades dendrimeerset peptiid naastu antigeenina saavutasime kõrge stabiilsuse (sealhulgas termostabiilsus) ja suure võime viirusevastaste antikehade avastamiseks. Need MAPSid sisaldasid CSFV E2 valkudes erinevaid antigeensete epitoopide kombinatsioone, kuid mitte kõik need ei osutunud diagnostilistel eesmärkidel efektiivseks. Lisaks suuremale tundlikkusele ja stabiilsusele võivad MAPSil põhinevad ELISA komplektid oluliselt vähendada komplekti maksumust, kuna MAPSi keemiatootmise kulud on väiksemad kui rekombinantse valgu või monoklonaalsete antikehade bioloogilised kulud. Lisaks võimaldaks keemiline süntees peptiidtootmise eri partiide vahel suuremat reprodutseeritavust. Selle projekti eesmärk on valideerida süsteem erinevate testitud MAPSidega ning valida välja parim kandidaat, kellel on kõige suurem diagnostiline tundlikkus ja spetsiifilisus. See läheb üle farmaatsiaettevõttele pärast selle patentimist, et kiirendada tema turuletulekut. Samuti püüame testida, kas testiga on võimalik eristada vaktsineeritud loomi nakatunud loomadest, kuid seni ei ole see praeguste tuvastussüsteemidega lahendatud. Uurimisrühm on teinud tööstusharuga head koostööd ja see on OIE sigade klassikalise katku referentlabor. Seetõttu on sellel lihtne juurdepääs nii tehnoloogia lõppkasutajatele kui ka farmaatsiaettevõtetele, tagades tehnoloogia eduka edasiandmise. (Estonian)
18 August 2022
0 references
A klasszikus sertéspestis (CSF), más néven Hog Cholera egy rendkívül fertőző, halálos vírusos betegség, amely világszerte hatalmas gazdasági veszteségeket okoz a sertésiparnak. Jelentős hatást fejt ki az endémiás területeken, gyakran a nagy népsűrűségű országokban, ahol a sertéshús a lakosság fehérjebevitelének egyik fő forrása. A FAO a CSF-et olyan problémaként ismeri el, amely súlyosbítja az élelmezésbiztonságot. A fertőző szivacsos agyvelőbántalmak által előidézett globális járványügyi helyzet meglehetősen összetett, és a kelet-európai járványok hamarosan visszahozhatják a betegséget hazánkba. A fertőzött és/vagy vakcinázott állatok gyors és hatékony szerológiai diagnózisa hatékony, gazdaságilag megvalósítható DIVA (a fertőzötttől vakcinázott differenciálás) és hőmérséklet-stabil diagnosztikai eszköz alkalmazásával nagy jelentőséggel bír e probléma globális ellenőrzése szempontjából, különösen az ázsiai és latin-amerikai fejlődő országokban. Figyelembe véve a szerológiai módszerek iránti nagy igényt a probléma endémiás területeken való kimutatására, valamint a területen szerzett magas tapasztalatunkat, javasoltuk egy olyan szerológiai diagnosztikai módszer kidolgozását, amely az érintett régiókban alkalmazható. A jelenlegi piaci megoldások a különböző vállalatok legalább három elismert készletét foglalják magukban, amelyek közül az egyik a domináns. Költségeik azonban nem vonzóak (magas költségek) a jelenlegi endémiás országok többsége számára. Hasonlóképpen, a jelenleg forgalomba hozott készletek többsége rekombináns fehérjéken és monoklonális antitesteken alapul, ami érzékenysé teszi őket a hőmérsékletre. Ezért megkövetelik, hogy a hideglánc-rendszerek eljussanak a trópusi őshonos területeken található regionális laboratóriumokhoz, ami jelentősen növeli logisztikai költségeiket. Az, hogy ezekben az endémiás országokban nem állnak rendelkezésre ilyen készletek, azt jelenti, hogy laboratóriumaik saját otthoni tesztjeiket használják. Ez megnehezíti a validált standard vizsgálat alkalmazását ezeken az endémiás területeken, ami hatással van a betegség elleni globális védekezésre. Hasonlóképpen, a piacon elérhető diagnosztikai rendszerek egyike sem képes különbséget tenni a vakcinavírus által termelt antitestek és az ezekben az országokban keringő szabadföldi vírusok által termelt antitestek között. Összességében nagyszerű lehetőség kínálkozik a CSFV stabilabb és olcsóbb diagnosztikai készletére, különösen akkor, ha érzékenyebb az endémiás országokban széles körben jelen lévő, alacsony patogén törzsekre (azaz: Kína). E korlátok leküzdése érdekében a közelmúltban kifejlesztettünk egy MAPS-on alapuló ELISA rendszert, amely képes kimutatni az alacsony, közepes és magas vírusos CSF vírustörzsek által termelt antitesteket. Több antigén peptid rendszer (MAPS) egy elágazó oligolizin magon alapul, amelyhez a peptid antigén különböző másolatai kapcsolódnak. Ezeket a rendszereket is nevezik dendrimer peptidek a konformáció. A dendrimer peptid plakk antigénként történő felhasználásával nagy stabilitást (többek között termosztabilitást) és a vírus elleni antitestek kimutatására alkalmas nagy kapacitást értünk el. Ezek a MAPS különböző antigén epitópokat tartalmaztak a CSFV E2 fehérjékben, de nem mindegyik bizonyult hatásosnak a diagnosztikai célra. A nagyobb érzékenység és stabilitás mellett a MAPS-alapú ELISA-készletek jelentősen csökkenthetik a készlet költségét, mivel a MAPS kémiai előállítási költségei alacsonyabbak, mint a rekombináns fehérje vagy monoklonális antitestek biológiai költségei. Emellett a kémiai szintézis nagyobb reprodukálhatóságot tenne lehetővé a különböző peptidgyártási tételek között. Ebben a projektben arra törekszünk, hogy a rendszert a különböző tesztelt MAPS-szal validáljuk, és a legmagasabb diagnosztikai érzékenységű és specificitású legjobb jelöltet válasszuk ki. Ezt a szabadalmaztatást követően egy gyógyszeripari vállalatra ruházzák át a piacra lépésének felgyorsítása érdekében. Arra is törekszünk, hogy teszteljük, hogy a vizsgálat képes-e megkülönböztetni a vakcinázott állatokat a fertőzött állatoktól, mindeddig nem oldódott meg a jelenlegi kimutatási rendszerrel. A kutatócsoport szilárd eredményeket ért el az iparággal való együttműködés terén, és az OIE klasszikus sertéspestissel foglalkozó referencialaboratóriuma. Ezért könnyű hozzáférést biztosít a technológia végfelhasználóihoz és a gyógyszeripari vállalatokhoz, biztosítva a technológia sikeres átadását. (Hungarian)
18 August 2022
0 references
Класическата чума по свинете (CSF), известна също като Hog Cholera, е силно заразно смъртоносно вирусно заболяване, причиняващо огромни икономически загуби за свиневъдната промишленост в световен мащаб. То оказва силно въздействие върху ендемичните райони, често в високо населените държави, където свинското месо е един от основните източници на прием на протеини за населението. ОСР е призната от ФАО като проблем, който влошава продоволствената сигурност. Глобалната епидемиологична обстановка, предизвикана от КЧС, е доста сложна, а скорошните огнища в Източна Европа могат скоро да върнат болестта в нашата страна. Бързото и ефективно серологично диагностициране на заразени и/или ваксинирани животни чрез използване на ефективен и икономически осъществим DIVA (диференциация, ваксинирана от инфектираните) и средство за диагностициране на температурата е от голямо значение за глобалния контрол на този проблем, особено в развиващите се страни от Азия и Латинска Америка. Като се има предвид голямото търсене на серологични методи за откриване на този проблем в ендемичните области и високият ни опит в тази област, предложихме да се разработи серологичен диагностичен метод, който да може да се прилага в засегнатите райони. Настоящите решения на пазара включват най-малко три признати комплекта от различни дружества, единият от които е доминиращ на пазара. Разходите за тях обаче са непривлекателни (високи разходи) за повечето ендемични държави в момента. По същия начин повечето от предлаганите понастоящем комплекти се основават на рекомбинантни протеини и моноклонални антитела, което ги прави чувствителни към температурата. Поради това те изискват системите за студена верига да достигнат до регионалните лаборатории в тропическите ендемични райони, което драстично увеличава техните логистични разходи. Липсата на такива комплекти в тези ендемични страни означава, че техните лаборатории използват свои собствени домашни тестове. Това затруднява прилагането на валидиран стандартен тест в тези ендемични области с последици за глобалния контрол на болестта. По същия начин нито една от наличните на пазара диагностични системи не може да направи разграничение между антителата, генерирани от ваксиналния вирус, и антителата, генерирани от разпространяващите се в тези страни полеви вируси. Като цяло има голяма възможност за по-стабилен и евтин диагностичен комплект за CSFV, особено ако той е по-чувствителен към нископатогенни щамове, широко разпространени в ендемичните държави (т.е.: Китай). За да преодолеем тези ограничения, наскоро разработихме система ELISA, базирана на MAPS, способна да открива антитела, генерирани от вирусни щамове на CSF с ниска, умерена и висока вирулентност. Множествените антигенни пептидни системи (MAPS) се основават на разклонено ядро на олиголизин, към което са прикрепени различни копия на пептидния антиген. Тези системи също са наречени дендримерни пептиди за тяхното конформация. Използвайки дендримен пептид като антиген на плаката, постигнахме висока стабилност (включително термоустойчивост) и голям капацитет за откриване на антитела срещу вируса. Тези MAPS съдържат различни комбинации от антигенни епитопи в протеините на CSFV E2, но не всички от тях се оказват ефективни за диагностичната цел. Освен по-високата чувствителност и стабилност, базираните на MAPS комплекти за ELISA могат значително да намалят разходите за комплекта, тъй като разходите за химическо производство на MAPS са по-ниски от биологичните разходи за рекомбинантен протеин или моноклонални антитела. Освен това химичният синтез би позволил по-голяма възпроизводимост между различните партиди пептидно производство. В този проект се стремим да валидираме системата с различните тествани MAPS и да изберем най-добрия кандидат с най-висока диагностична чувствителност и специфичност. Това ще бъде прехвърлено на фармацевтично дружество след патентоването му, за да се ускори навлизането му на пазара. Ние също така се стремим да проверим дали изследването е в състояние да разграничи ваксинираните животни от заразените животни, досега не е решено с настоящите системи за откриване. Научноизследователската група има солидни резултати в сътрудничеството с промишлеността и е референтната лаборатория на OIE за класическа чума по свинете. Следователно тя има лесен достъп до крайните потребители на технологията, както и до фармацевтичните дружества, като гарантира успешен трансфер на технологията. (Bulgarian)
18 August 2022
0 references
Klasikinis kiaulių maras, dar vadinamas Hog Cholera, yra labai užkrečiama mirtina virusinė liga, sukelianti didžiulius ekonominius nuostolius kiaulių pramonei visame pasaulyje. Jis daro didelį poveikį endeminėse vietovėse, dažnai tankiai apgyvendintose šalyse, kur kiauliena yra vienas iš pagrindinių baltymų suvartojimo gyventojams šaltinių. Jungtinių Tautų Maisto ir žemės ūkio organizacija (FAO) pripažįsta BSP kaip problemą, dėl kurios didėja apsirūpinimo maistu saugumas. Pasaulinė epidemiologinė padėtis, susidariusi dėl KKM, yra gana sudėtinga, o pastarojo meto protrūkiai Rytų Europoje netrukus gali sugrąžinti ligą į mūsų šalį. Greitas ir veiksmingas serologinis užkrėstų ir (arba) vakcinuotų gyvūnų diagnozavimas naudojant veiksmingą, ekonomiškai įmanomą DIVA (nuo užkrėstos diferenciacijos) ir temperatūros stabilios diagnostikos priemonę yra labai svarbus siekiant pasaulio mastu kontroliuoti šią problemą, ypač sunkią besivystančiose Azijos ir Lotynų Amerikos šalyse. Atsižvelgdami į didelę šios problemos aptikimo endeminėse vietovėse serologinių metodų paklausą ir didelę patirtį šioje srityje, pasiūlėme sukurti serologinį diagnostikos metodą, kurį būtų galima taikyti nukentėjusiuose regionuose. Dabartiniai rinkos sprendimai apima ne mažiau kaip tris pripažintus skirtingų bendrovių rinkinius, iš kurių viena yra dominuojanti rinka. Tačiau jų sąnaudos šiuo metu yra nepatrauklios (didelės išlaidos) daugumai endeminių šalių. Be to, dauguma šiuo metu parduodamų rinkinių yra pagrįsti rekombinantiniais baltymais ir monokloniniais antikūnais, todėl jie jautrūs temperatūrai. Todėl joms reikia šaltųjų grandinių sistemų, kad jos pasiektų regionines laboratorijas tropinėse endeminėse vietovėse, o tai labai padidina jų logistikos išlaidas. Šių rinkinių trūkumas tose endeminėse šalyse reiškia, kad jų laboratorijos naudoja savo „homemade“ testus. Dėl to šiose endeminėse srityse sunku taikyti patvirtintą standartinį tyrimą, kuris turi įtakos bendrai ligos kontrolei. Be to, nė viena iš šių rinkoje esančių diagnostikos sistemų nėra pajėgi atskirti antikūnus, kuriuos sukelia vakcinos virusas, ir antikūnus, kuriuos sukelia šiose šalyse cirkuliuojantys lauko virusai. Apskritai yra puiki galimybė sukurti stabilesnį ir pigesnį CSFV diagnostikos rinkinį, ypač jei jis yra jautresnis mažai patogeniškoms padermėms, plačiai paplitusioms endeminėse šalyse (t. y. Kinija). Norėdami įveikti šiuos apribojimus, neseniai sukūrėme ELISA sistemą, pagrįstą MAPS, galinčia aptikti mažo, vidutinio ir didelio virulentiškumo virusinių padermių KKM antikūnus. Kelios antigeninių peptidų sistemos (MAPS) yra pagrįstos šakota oligolizino šerdimi, prie kurios pridedamos įvairios peptido antigeno kopijos. Šios sistemos taip pat vadinamos dendrimeriniais peptidais dėl jo raumeningumo. Naudojant dendrimerinį peptidą kaip apnašinį antigeną, pasiekėme didelį stabilumą (įskaitant termostabilumą) ir didelį pajėgumą aptikti antikūnus prieš virusą. Šie MAPS turėjo skirtingus antigeninių epitopų derinius CSFV E2 baltymuose, tačiau ne visi iš jų buvo veiksmingi diagnostikos tikslais. Be didesnio jautrumo ir stabilumo, MAPS pagrindu pagaminti ELISA rinkiniai gali labai sumažinti rinkinio sąnaudas, nes MAPS cheminės gamybos sąnaudos yra mažesnės už biologines rekombinantinių baltymų arba monokloninių antikūnų sąnaudas. Be to, cheminė sintezė leistų užtikrinti didesnį įvairių peptidų gamybos partijų atkuriamumą. Šiame projekte mes siekiame patvirtinti sistemą su skirtingais MAPS išbandytais ir atrinkti geriausią kandidatą, pasižymintį didžiausiu diagnostiniu jautrumu ir specifiškumu. Tai bus perduota farmacijos bendrovei po jos patentavimo, kad būtų paspartintas jos patekimas į rinką. Mes taip pat siekiame patikrinti, ar atliekant tyrimą galima atskirti vakcinuotus gyvūnus nuo užsikrėtusių gyvūnų, iki šiol taikant dabartines aptikimo sistemas nebuvo išspręsta. Mokslinių tyrimų grupė turi tvirtus bendradarbiavimo su pramone rezultatus ir yra OIE klasikinio kiaulių maro etaloninė laboratorija. Todėl ji turi lengvą prieigą prie technologijos galutinių naudotojų ir farmacijos bendrovių, užtikrindama sėkmingą technologijos perdavimą. (Lithuanian)
18 August 2022
0 references
Klasična svinjska kuga (CSF), poznata i kao Hog Cholera, vrlo je zarazna smrtonosna virusna bolest koja uzrokuje velike gospodarske gubitke u industriji svinja diljem svijeta. Ima velik utjecaj na endemska područja, često u vrlo naseljenim zemljama, u kojima je svinjsko meso jedan od glavnih izvora unosa bjelančevina u stanovništvo. FAO je prepoznao KSK kao problem koji pogoršava sigurnost opskrbe hranom. Globalna epidemiološka situacija uzrokovana KSK-om vrlo je složena, a nedavne epidemije u istočnoj Europi uskoro bi mogle vratiti bolest u našu zemlju. Brza i učinkovita serološka dijagnoza zaraženih i/ili cijepljenih životinja upotrebom učinkovite, ekonomski izvedive DIVA (diferencijacije cijepljene od zaraženih) i temperaturno stabilnog dijagnostičkog alata od velike je važnosti za globalnu kontrolu tog problema, posebno teškog u zemljama u razvoju iz Azije i Latinske Amerike. S obzirom na veliku potražnju za serološkim metodama za otkrivanje ovog problema u endemskim područjima i naše veliko iskustvo u tom području, predložili smo razvoj serološke dijagnostičke metode koja se može primijeniti u pogođenim područjima. Postojeća rješenja na tržištu uključuju najmanje tri priznata kompleta različitih poduzeća, od kojih je jedan dominantan na tržištu. Međutim, njihovi troškovi trenutačno nisu privlačni (visoki troškovi) za većinu endemskih zemalja. Isto tako, većina kompleta koji su trenutno komercijalizirani temelji se na rekombinantnim proteinima i monoklonskim antitijelima, što ih čini osjetljivima na temperaturu. Stoga su im potrebni sustavi hladnog lanca kako bi došli do regionalnih laboratorija u tropskim endemskim područjima, što dramatično povećava njihove logističke troškove. Nedostupnost tih kompleta u tim endemskim zemljama znači da njihovi laboratoriji koriste vlastite domaće testove. To otežava primjenu validiranog standardnog testa u tim endemskim područjima, što utječe na globalnu kontrolu bolesti. Isto tako, nijedan od tih dijagnostičkih sustava dostupnih na tržištu ne može razlikovati protutijela dobivena virusom cjepiva i protutijela koja stvaraju terenski virusi koji cirkuliraju u tim zemljama. Sveukupno, postoji velika prilika za stabilniji i jeftiniji dijagnostički komplet za CSFV, posebno ako je osjetljiviji na niskopatogene sojeve, široko prisutan u endemskim zemljama (tj. Kina). Kako bismo prevladali ta ograničenja nedavno smo razvili sustav ELISA koji se temelji na MAPS-u i koji može otkriti protutijela generirana virusnim sojevima KSK-a niske, umjerene i visoke virulencije. Višestruki antigeni peptidni sustavi (MAPS) temelje se na razgranatoj jezgri oligolizina na koju su pričvršćene različite kopije peptidnog antigena. Ti su sustavi također imenovani kao dendrimerički peptidi za njihovu konformaciju. Korištenjem dendrimeričkog peptida kao plak antigena postigli smo visoku stabilnost (uključujući termostabilnost) i veliki kapacitet za otkrivanje protutijela protiv virusa. Ti MAPS sadržavali su različite kombinacije antigenskih epitopa u proteinima CSFV E2, ali nisu se svi pokazali učinkovitima u dijagnostičke svrhe. Osim veće osjetljivosti i stabilnosti, kompleti ELISA koji se temelje na MAPS-u mogli bi znatno smanjiti troškove kompleta jer su troškovi proizvodnje kemikalija MAPS-a niži od bioloških troškova rekombinantnih proteina ili monoklonskih protutijela. Osim toga, kemijska sinteza omogućila bi veću obnovljivost između različitih serija proizvodnje peptida. U ovom projektu nastojimo potvrditi sustav s različitim MAPS testiranim i odabrati najboljeg kandidata s najvećom dijagnostičkom osjetljivošću i specifičnošću. To će se nakon patentiranja prenijeti na farmaceutsko poduzeće kako bi se ubrzao njegov ulazak na tržište. Također nastojimo testirati je li test u stanju razlikovati cijepljene životinje od zaraženih životinja, do sada nije riješen s trenutnim sustavima detekcije. Istraživačka skupina ima solidne rezultate u suradnji s industrijom, te je OIE Referentni laboratorij za klasičnu svinjsku kugu. Stoga ima jednostavan pristup krajnjim korisnicima tehnologije, kao i farmaceutskim poduzećima, čime se osigurava uspješan prijenos tehnologije. (Croatian)
18 August 2022
0 references
Klassisk svinpest (CSF), även känd som Hog Cholera, är en mycket smittsam dödlig virussjukdom som orsakar enorma ekonomiska förluster för svinindustrin i hela världen. Det har stor inverkan i endemiska områden, ofta i högbefolkade länder, där fläskköttet är en av de viktigaste källorna till proteinintag för befolkningen. GSR erkänns av FAO som ett problem som förvärrar livsmedelstryggheten. Den globala epidemiologiska situation som orsakas av klassisk svinpest är ganska komplex, och den senaste tidens utbrott i Östeuropa kan snart föra tillbaka sjukdomen till vårt land. Snabb och effektiv serologisk diagnos av smittade och/eller vaccinerade djur med hjälp av ett effektivt, ekonomiskt genomförbart, DIVA (differentiering vaccinerat från smittade) och temperaturstabila diagnosverktyg är av stor betydelse för den globala kontrollen av detta problem, särskilt i utvecklingsländer från Asien och Latinamerika. Med tanke på den stora efterfrågan på serologiska metoder för att upptäcka detta problem i endemiska områden, och vår stora erfarenhet på området, har vi föreslagit att utveckla en serologisk diagnostisk metod som är genomförbar i de drabbade regionerna. De nuvarande lösningarna på marknaden omfattar minst tre erkända byggsatser från olika företag, varav ett är den dominerande marknaden. Deras kostnader är dock för närvarande oattraktiva (höga kostnader) för de flesta endemiska länder. På samma sätt är de flesta av de kit som för närvarande kommersialiseras baserade på rekombinanta proteiner och monoklonala antikroppar, vilket gör dem känsliga för temperatur. Därför kräver de kylkedjesystem för att nå regionala laboratorier i tropiska endemiska områden, vilket dramatiskt ökar deras logistiska kostnader. Bristen på tillgång till dessa kit i dessa endemiska länder innebär att deras laboratorier använder sina egna hemgjorda tester. Detta gör det svårt att tillämpa ett validerat standardtest i dessa endemiska områden, vilket får konsekvenser för den globala bekämpningen av sjukdomen. På samma sätt kan inget av dessa diagnostiska system som finns på marknaden skilja mellan antikroppar som genereras av vaccinviruset och antikroppar som genereras av fältvirus som cirkulerar i dessa länder. På det hela taget finns det en stor möjlighet för ett mer stabilt och billigt diagnoskit för CSFV, särskilt om det är mer känsligt för lågpatogena stammar, som är allmänt närvarande i endemiska länder (dvs. Kina). För att övervinna dessa begränsningar har vi nyligen utvecklat ett ELISA-system baserat på MAPS som kan detektera antikroppar som genereras av virusstammar av CSF av låg, måttlig och hög virulens. Multipla antigeniska peptidsystem (MAPS) är baserade på en grenad oligolysinkärna till vilken olika kopior av peptidantigenet är fästa. Dessa system kallas också dendrimera peptider för dess konformation. Genom att använda en dendrimerisk peptid som ett plackantigen uppnådde vi hög stabilitet (inklusive termostabilitet) och stor kapacitet att upptäcka antikroppar mot viruset. Dessa MAPS innehöll olika kombinationer av antigen epitoper i CSFV E2-proteiner, men inte alla av dem visade sig vara effektiva för det diagnostiska syftet. Bortsett från den högre känsligheten och stabiliteten skulle MAPS-baserade ELISA-kit avsevärt kunna minska kostnaden för satsen, eftersom de kemiska produktionskostnaderna för MAPS är lägre än de biologiska kostnaderna för rekombinant protein eller monoklonala antikroppar. Dessutom skulle den kemiska syntesen möjliggöra en högre reproducerbarhet mellan de olika tillverkningssatserna av peptider. I detta projekt strävar vi efter att validera systemet med de olika MAPS-testade, och att välja den bästa kandidaten med den högsta diagnostiska känsligheten och specificiteten. Detta kommer att överföras till ett läkemedelsföretag efter patenteringen för att påskynda dess inträde på marknaden. Vi strävar också efter att testa om testet kan skilja vaccinerade djur från smittade djur, hittills inte löst med de nuvarande detektionssystemen. Forskargruppen har goda resultat när det gäller samarbete med industrin och är OIE:s referenslaboratorium för klassisk svinpest. Den har därför enkel tillgång till teknikens slutanvändare och till läkemedelsföretag, vilket säkerställer en framgångsrik överföring av tekniken. (Swedish)
18 August 2022
0 references
Pesta porcină clasică (CSF), cunoscută și sub numele de Hog Cholera, este o boală virală letală extrem de contagioasă, cauzând pierderi economice uriașe industriei porcinelor din întreaga lume. Aceasta are un impact puternic în zonele endemice, adesea în țările cu o populație ridicată, în care carnea de porc este una dintre principalele surse de aport de proteine pentru populație. PPC este recunoscut de FAO ca o problemă care agravează securitatea alimentară. Situația epidemiologică globală generată de PPC este destul de complexă, iar focarele recente din Europa de Est ar putea în curând să readucă boala în țara noastră. Diagnosticarea serologică rapidă și eficace a animalelor infectate și/sau vaccinate prin utilizarea unui instrument eficace, fezabil din punct de vedere economic, DIVA (diferențierea vaccinată de infectate) și de diagnosticare a stabilității temperaturii este deosebit de relevantă pentru controlul global al acestei probleme, în special în țările în curs de dezvoltare din Asia și America Latină. Având în vedere cererea mare de metode serologice de detectare a acestei probleme în zonele endemice și experiența noastră ridicată în domeniu, am propus dezvoltarea unei metode serologice de diagnostic care să poată fi aplicată în regiunile afectate. Soluțiile actuale de pe piață implică cel puțin trei seturi recunoscute de companii diferite, una dintre ele fiind dominantă pe piață. Cu toate acestea, costurile acestora sunt neatractive (costuri ridicate) pentru majoritatea țărilor endemice în prezent. De asemenea, majoritatea kiturilor comercializate în prezent se bazează pe proteine recombinante și anticorpi monoclonali, ceea ce le face sensibile la temperatură. Prin urmare, acestea necesită sisteme de lanțuri frigorifice pentru a ajunge la laboratoarele regionale din zonele endemice tropicale, ceea ce duce la creșterea dramatică a costurilor logistice ale acestora. Lipsa disponibilității acestor kituri în aceste țări endemice înseamnă că laboratoarele lor utilizează propriile teste de casă. Acest lucru face dificilă aplicarea unui test standard validat în aceste zone endemice, cu implicații pentru controlul global al bolii. De asemenea, niciunul dintre aceste sisteme de diagnostic disponibile pe piață nu este capabil să diferențieze între anticorpii generați de virusul vaccinal și anticorpii generați de virusurile de câmp care circulă în aceste țări. În general, există o mare oportunitate pentru un kit de diagnosticare mai stabil și mai ieftin pentru PPCV, mai ales dacă este mai sensibil la tulpinile slab patogene, prezente pe scară largă în țările endemice (și anume: China). Pentru a depăși aceste constrângeri, am dezvoltat recent un sistem ELISA bazat pe MAPS capabil să detecteze anticorpii generați de tulpini virale de LCR cu virulență scăzută, moderată și ridicată. Sistemele peptide antigenice multiple (MAPS) se bazează pe un nucleu ramificat de oligolizină la care sunt atașate diferite copii ale antigenului peptidic. Aceste sisteme sunt, de asemenea, numite ca peptide dendrimerice pentru conformația sa. Folosind o peptidă dendrimerică ca antigen al plăcii, am obținut o stabilitate ridicată (inclusiv termostabilitate) și o capacitate mare de detectare a anticorpilor împotriva virusului. Aceste MAPS conțineau diferite combinații de epitopi antigenici în proteinele E2 ale CSFV, dar nu toate s-au dovedit a fi eficace în scopul diagnosticului. Pe lângă sensibilitatea și stabilitatea mai ridicate, kiturile ELISA bazate pe MAPS ar putea reduce considerabil costul kitului, deoarece costurile de producție chimică ale MAPS sunt mai mici decât costurile biologice pentru proteinele recombinante sau anticorpii monoclonali. În plus, sinteza chimică ar permite o reproductibilitate mai mare între diferitele loturi de producție de peptide. În acest proiect ne propunem să validăm sistemul cu diferitele MAPS testate și să selectăm cel mai bun candidat cu cea mai mare sensibilitate și specificitate diagnostică. Aceasta va fi transferată unei societăți farmaceutice după brevetare, pentru a accelera intrarea sa pe piață. De asemenea, dorim să testăm dacă testul este capabil să diferențieze animalele vaccinate de animalele infectate, până în prezent nerezolvate cu sistemele de detectare actuale. Grupul de cercetare are o experiență solidă de colaborare cu industria și este Laboratorul de Referință al OIE pentru pesta porcină clasică. Prin urmare, are acces ușor la utilizatorii finali ai tehnologiei, precum și la companiile farmaceutice, asigurând un transfer de succes al tehnologiei. (Romanian)
18 August 2022
0 references
Klasična prašičja kuga (CSF), znana tudi kot Hog Cholera, je zelo nalezljiva smrtna virusna bolezen, ki povzroča velike gospodarske izgube za prašičjo industrijo po vsem svetu. Ima velik vpliv na endemična območja, pogosto v visoko poseljenih državah, kjer je prašičje meso eden glavnih virov vnosa beljakovin za prebivalstvo. FAO priznava, da je skupni strateški okvir problem, ki povečuje prehransko varnost. Globalne epidemiološke razmere, ki jih povzroča KPK, so precej zapletene in nedavni izbruhi v vzhodni Evropi bi lahko bolezen kmalu vrnili v našo državo. Hitra in učinkovita serološka diagnoza okuženih in/ali cepljenih živali z uporabo učinkovitega, ekonomsko izvedljivega DIVA (diferenciacija cepljenih od okuženih) in stabilizacijskega orodja je zelo pomembna za svetovni nadzor tega problema, zlasti v državah v razvoju iz Azije in Latinske Amerike. Glede na veliko povpraševanje po seroloških metodah za odkrivanje tega problema na endemičnih območjih in naše izkušnje na tem področju smo predlagali razvoj serološke diagnostične metode, ki bi jo bilo mogoče uporabiti v prizadetih regijah. Trenutne rešitve na trgu vključujejo vsaj tri priznane sklope različnih podjetij, od katerih je eden prevladujoč na trgu. Vendar so njihovi stroški trenutno neprivlačni (visoki stroški) za večino endemičnih držav. Prav tako večina kompletov, ki se trenutno tržijo, temelji na rekombinantnih beljakovinah in monoklonskih protitelesih, zaradi česar so občutljivi na temperaturo. Zato potrebujejo sisteme hladne verige, da dosežejo regionalne laboratorije na tropskih endemičnih območjih, kar dramatično poveča njihove logistične stroške. Pomanjkanje razpoložljivosti teh kompletov v teh endemičnih državah pomeni, da njihovi laboratoriji uporabljajo svoje domače teste. To otežuje uporabo validiranega standardnega testa na teh endemičnih območjih, kar vpliva na globalni nadzor bolezni. Prav tako noben od teh diagnostičnih sistemov, ki so na voljo na trgu, ne more razlikovati med protitelesi, ki jih tvori virus cepiva, in protitelesi, ki jih tvorijo poljski virusi, ki krožijo v teh državah. Na splošno obstaja velika priložnost za stabilnejši in cenejši diagnostični komplet za CSFV, še posebej, če je bolj občutljiv na nizkopatogene seve, ki so široko prisotni v endemičnih državah (tj. Kitajska). Za premagovanje teh omejitev smo pred kratkim razvili sistem ELISA, ki temelji na MAPS in lahko zazna protitelesa, ki jih povzročajo virusni sevi KPK z nizko, zmerno in visoko virulenco. Več antigenskih peptidnih sistemov (MAPS) temelji na razvejanem oligolizinskem jedru, na katerega so pritrjene različne kopije peptidnega antigena. Ti sistemi so zaradi konformacije imenovani tudi kot dendrimerni peptidi. Z uporabo dendrimernega peptida kot antigena v plakih smo dosegli visoko stabilnost (vključno s termostabilnostjo) in veliko sposobnost za odkrivanje protiteles proti virusu. Ti MAPS so vsebovali različne kombinacije antigenskih epitopov v beljakovinah CSFV E2, vendar se niso vse izkazale za učinkovite za diagnostične namene. Poleg večje občutljivosti in stabilnosti bi lahko kompleti ELISA, ki temeljijo na MAPS, močno zmanjšali stroške kompleta, saj so stroški kemične proizvodnje MAPS nižji od bioloških stroškov za rekombinantne beljakovine ali monoklonska protitelesa. Poleg tega bi kemična sinteza omogočila večjo ponovljivost med različnimi serijami proizvodnje peptidov. V tem projektu želimo potrditi sistem z različnimi testiranimi MAPS in izbrati najboljšega kandidata z največjo diagnostično občutljivostjo in specifičnostjo. To se bo po patentiranju preneslo na farmacevtsko družbo, da bi pospešili vstop na trg. Prav tako si prizadevamo preveriti, ali je mogoče s preskusom razlikovati cepljene živali od okuženih živali, kar do zdaj ni bilo rešeno s sedanjimi sistemi odkrivanja. Raziskovalna skupina ima dobre rezultate pri sodelovanju z industrijo in je referenčni laboratorij OIE za klasično prašičjo kugo. Zato ima enostaven dostop do končnih uporabnikov tehnologije in farmacevtskih podjetij, kar zagotavlja uspešen prenos tehnologije. (Slovenian)
18 August 2022
0 references
Klasyczny pomór świń (CSF), znany również jako Hog Cholera, jest wysoce zakaźną śmiertelną chorobą wirusową powodującą ogromne straty gospodarcze dla przemysłu trzody chlewnej na całym świecie. Ma on duży wpływ na obszary endemiczne, często w krajach o dużej gęstości zaludnienia, gdzie mięso wieprzowe jest jednym z głównych źródeł spożycia białka dla ludności. Wspólne ramy strategiczne są uznawane przez FAO za problem pogarszający bezpieczeństwo żywnościowe. Globalna sytuacja epidemiologiczna wywołana przez CSF jest dość skomplikowana, a niedawne ogniska w Europie Wschodniej mogą wkrótce przywrócić tę chorobę do naszego kraju. Szybka i skuteczna diagnostyka serologiczna zakażonych i/lub zaszczepionych zwierząt przy użyciu skutecznego, ekonomicznie wykonalnego DIVA (zróżnicowania szczepionego od zakażonego) i narzędzia do diagnostyki stabilnej temperatury ma ogromne znaczenie dla globalnej kontroli tego problemu, szczególnie w krajach rozwijających się z Azji i Ameryki Łacińskiej. Biorąc pod uwagę duże zapotrzebowanie na metody serologiczne w celu wykrycia tego problemu w obszarach endemicznych oraz nasze bogate doświadczenie w tej dziedzinie, zaproponowaliśmy opracowanie serologicznej metody diagnostycznej, którą można zastosować w regionach dotkniętych chorobą. Obecne rozwiązania na rynku obejmują co najmniej trzy uznane zestawy różnych przedsiębiorstw, z których jeden jest dominujący na rynku. Ich koszty są jednak nieatrakcyjne (wysokie koszty) dla większości krajów endemicznych w chwili obecnej. Podobnie większość obecnie sprzedawanych zestawów opiera się na rekombinowanych białkach i przeciwciałach monoklonalnych, co sprawia, że są wrażliwe na temperaturę. W związku z tym wymagają one systemów łańcucha chłodniczego, aby dotrzeć do regionalnych laboratoriów na obszarach endemicznych tropikalnych, co znacznie zwiększa ich koszty logistyczne. Brak dostępności tych zestawów w tych krajach endemicznych oznacza, że ich laboratoria stosują własne ¿homemade¿testy. Utrudnia to stosowanie zatwierdzonego standardowego testu na tych obszarach endemicznych, co ma wpływ na globalną kontrolę choroby. Podobnie żaden z tych systemów diagnostycznych dostępnych na rynku nie jest w stanie odróżnić przeciwciał wytwarzanych przez wirusa szczepionkowego od przeciwciał wytwarzanych przez wirusy polowe krążące w tych krajach. Ogólnie rzecz biorąc, istnieje duża szansa na bardziej stabilny i tani zestaw diagnostyczny do CSFV, zwłaszcza jeśli jest bardziej wrażliwy na szczepy o niskiej patogenności, szeroko obecne w krajach endemicznych (tj.: Chiny). Aby przezwyciężyć te ograniczenia, niedawno opracowaliśmy system ELISA oparty na MAPS zdolny do wykrywania przeciwciał generowanych przez wirusowe szczepy CSF o niskiej, umiarkowanej i wysokiej zjadliwości. Wiele antygenowych systemów peptydowych (MAPS) opiera się na rozgałęzionym rdzeniu oligolizyny, do którego dołączone są różne kopie antygenu peptydowego. Systemy te są również nazywane peptydami dendrimeric dla jego budowy. Używając peptydu dendrimeric jako antygenu nazębnego osiągnęliśmy wysoką stabilność (w tym termostabilność) i dużą zdolność do wykrywania przeciwciał przeciwko wirusowi. Te MAPS zawierały różne kombinacje antygenowych epitopów w białkach CSFV E2, ale nie wszystkie z nich okazały się skuteczne w celach diagnostycznych. Oprócz większej wrażliwości i stabilności zestawy ELISA oparte na MAPS mogą znacznie obniżyć koszty zestawu, ponieważ koszty produkcji chemicznej MAPS są niższe niż koszty biologiczne dla rekombinowanego białka lub przeciwciał monoklonalnych. Ponadto synteza chemiczna umożliwiłaby większą odtwarzalność między różnymi partiami produkcji peptydów. W tym projekcie staramy się zweryfikować system z różnymi testami MAPS oraz wybrać najlepszego kandydata o najwyższej czułości diagnostycznej i swoistości. Zostanie on przeniesiony do firmy farmaceutycznej po jej opatentowaniu w celu przyspieszenia jej wejścia na rynek. Dążymy również do sprawdzenia, czy test jest w stanie odróżnić zaszczepione zwierzęta od zakażonych zwierząt, do tej pory nie rozwiązano ich z obecnymi systemami wykrywania. Grupa badawcza ma solidne doświadczenie we współpracy z przemysłem i jest laboratorium referencyjnym OIE ds. klasycznego pomoru świń. W związku z tym ma łatwy dostęp do użytkowników końcowych tej technologii, a także do firm farmaceutycznych, zapewniając udany transfer technologii. (Polish)
18 August 2022
0 references
12 June 2023
0 references
Cerdanyola del Vallès
0 references
Identifiers
IU68-010023
0 references