Regulation of neutrophil and platelet function by miR-146a in NETosis; consequences on thrombogenesis and therapeutic potential (Q3157119)
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Project Q3157119 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Regulation of neutrophil and platelet function by miR-146a in NETosis; consequences on thrombogenesis and therapeutic potential |
Project Q3157119 in Spain |
Statements
89,600.0 Euro
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112,000.0 Euro
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80.0 percent
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1 January 2018
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31 March 2021
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FUNDACION PARA LA FORMACION E INVESTIGACION SANITARIAS DE LA REGION DE MURCIA (FFIS)
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37°59'32.57"N, 1°7'49.94"W
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30030
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Mir-146a, un miRNA expresado mayoritariamente en células inflamatorias, podría jugar un papel activo en el desarrollo de procesos aterotrombóticos. Los objetivos de este proyecto son (i) determinar el papel de miR-146a en el proceso de NETosis y cómo rs2431697, miR-SNP presente en el gen que codifica este miRNA y que reduce sus niveles, puede influir en el desarrollo de trombosis en pacientes con patologia pro-trombótica, (ii) investigar la contribución de miR-146a plaquetario como nexo entre NETosis y trombosis y finalmente (iii) evaluar la potencial acción terapéutica de miR-146a en aterotrombosis. Para ello, analizaremos el efecto de la deficiencia de mir-146a en la capacidad intrínseca de los neutrófilos para formar NET empleando un modelo murino deficiente para este miRNA y también un modelo celular humano deficiente en miR-146a generado por CRISPR-cas9. Valoraremos diferentes marcadores de NETosis (DNA, histona 3 citrulinada) tras activación de neutrófilos purificados con PMA. Estudiaremos el impacto de rs2431697 en la formación de NET en neutrófilos de pacientes con fibrilación auricular y pacientes con artritis reumatoide. Realizaremos estudios de asociación entre marcadores plasmáticos de NETosis (DNA, elastasa, mieloperoxidasa, ROS) y la presencia de rs2431697 en el desarrollo de eventos trombóticos en estas cohortes. Valoraremos la función plaquetaria en ratones deficientes en miR-146a y el impacto en la formación de NET in vivo en ratones miR-146a-/- y en pacientes. Investigaremos nuevas dianas de miR-146a en plaquetas y neutrófilos implicadas en la formación de NET por RNA-seq comparando la expresión de transcritos de muestras de ratones miR-146a-/- vs. WT. Finalmente, estudiaremos el efecto de la sobreexpresión sistémica de miR-146a en dos modelos de ratones: (i) modelo de aterosclerosis donde estudiaremos regresión de la placa tras 16 semanas de dieta grasa y (ii) reducción de la trombosis arterial en modelo trombosis carotídea inducida por FeCl3d (Spanish)
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Mir-146a, a miRNA expressed mostly in inflammatory cells, could play an active role in the development of atherothrombotic processes. The objectives of this project are (i) to determine the role of miR-146a in the NETosis process and how rs2431697, miR-SNP present in the gene that encodes this miRNA and which reduces its levels, can influence the development of thrombosis in patients with pro-thrombotic pathology, (ii) investigate the contribution of miR-146a platelet as a nexus between NETosis and thrombosis and finally evaluate the potential therapeutic action of miR-146a in atherothrombosis. To do this, we will analyse the effect of mir-146a deficiency on the intrinsic capacity of neutrophils to form NET using a deficient murine model for this miRNA and also a human cell model deficient in miR-146a generated by CRISPR-cas9. We will evaluate different markers of NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) after activation of neutrophils purified with PMA. We will study the impact of rs2431697 on the formation of NET in neutrophils in patients with atrial fibrillation and patients with rheumatoid arthritis. We will conduct association studies between plasma markers of NETosis (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) and the presence of rs2431697 in the development of thrombotic events in these cohorts. We will assess platelet function in miR-146a deficient mice and the impact on in vivo NET formation in miR-146a-/- mice and in patients. We will investigate new miR-146a targets in platelets and neutrophils involved in the formation of NET by RNA-seq by comparing the expression of transcripts from miR-146a-/- vs. WT mice samples. Finally, we will study the effect of systemic overexpression of miR-146a on two models of mice: (I) atherosclerosis model where we will study plaque regression after 16 weeks of fat diet and (ii) reduction of arterial thrombosis in FeCl3d-induced carotid thrombosis model (English)
12 October 2021
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Le MIR-146a, un miRNA exprimé principalement dans les cellules inflammatoires, pourrait jouer un rôle actif dans le développement des processus athérothrombotiques. Les objectifs de ce projet sont (i) de déterminer le rôle de miR-146a dans le processus de NETosis et comment rs2431697, miR-SNP présent dans le gène qui code ce miRNA et qui réduit ses niveaux, peut influencer le développement de la thrombose chez les patients atteints de pathologie prothrombotique, (ii) étudier la contribution de miR-146a plaquet comme un lien entre la NETosis et la thrombose et enfin évaluer l’action thérapeutique potentielle de miR-146a dans l’athérothrombose. Pour ce faire, nous allons analyser l’effet de la carence mir-146a sur la capacité intrinsèque des neutrophiles à former NET à l’aide d’un modèle murin déficient pour ce miRNA et aussi d’un modèle cellulaire humain déficient en miR-146a généré par CRISPR-cas9. Nous évaluerons différents marqueurs de NETosis (ADN, histone 3 cytrulinée) après activation des neutrophiles purifiés avec PMA. Nous étudierons l’impact de la rs2431697 sur la formation de NET dans les neutrophiles chez les patients atteints de fibrillation auriculaire et chez les patients atteints de polyarthrite rhumatoïde. Nous réaliserons des études d’association entre les marqueurs plasmatiques de la NETosis (ADN, élastase, myeloperoxydase, ROS) et la présence de rs2431697 dans le développement d’événements thrombotiques dans ces cohortes. Nous évaluerons la fonction plaquettaire chez les souris déficientes miR-146a et l’impact sur la formation in vivo de NET chez les souris miR-146a-/- et chez les patients. Nous étudierons de nouvelles cibles miR-146a dans les plaquettes et les neutrophiles impliqués dans la formation de NET par RNA-seq en comparant l’expression des transcriptions d’échantillons de souris miR-146a-/- vs WT. Enfin, nous étudierons l’effet de la surexpression systémique de miR-146a sur deux modèles de souris: (I) modèle d’athérosclérose où nous étudierons la régression de la plaque après 16 semaines de régime gras et (ii) la réduction de la thrombose artérielle dans le modèle de thrombose carotide induite par le FeCl3d (French)
4 December 2021
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MIR-146a, eine meist in entzündlichen Zellen ausgedrückte miRNA, könnte eine aktive Rolle bei der Entwicklung atherothrombotischer Prozesse spielen. Die Ziele dieses Projekts sind (i) die Rolle von miR-146a im NETosis-Prozess zu bestimmen und wie rs2431697, miR-SNP im Gen vorhanden ist, das diese miRNA kodiert und ihr Niveau reduziert, die Thromboseentwicklung bei Patienten mit prothrombotischer Pathologie beeinflussen kann, (ii) den Beitrag von miR-146a Thrombose als Nexus zwischen NETosis und Thrombose untersuchen und schließlich die mögliche therapeutische Wirkung von miR-146a in der Atherothrombose untersuchen. Um dies zu tun, werden wir die Wirkung von Mir-146a-Mangel auf die intrinsische Fähigkeit von Neutrophilen, NET zu bilden, mit einem mangelhaften Murinmodell für diese miRNA und auch ein menschliches Zellmodell analysieren, das in miR-146a von CRISPR-cas9 erzeugt wurde. Wir werden verschiedene Marker von NETosis (DNA, Histon 3 cytrulinated) nach Aktivierung von Neutrophilen, die mit PMA gereinigt wurden, bewerten. Wir werden die Auswirkungen von rs2431697 auf die Bildung von NET bei Neutrophilen bei Patienten mit Vorhofflimmern und Patienten mit rheumatoider Arthritis untersuchen. Wir werden Assoziationsstudien zwischen Plasmamarkern von NETosis (DNA, Elastase, Myeloperoxidase, ROS) und dem Vorhandensein von rs2431697 in der Entwicklung thrombotischer Ereignisse in diesen Kohorten durchführen. Wir werden die Thrombozytenfunktion bei miR-146a mangelhaften Mäusen und den Einfluss auf die in vivo NET-Formation bei miR-146a-/- Mäusen und bei Patienten bewerten. Wir werden neue miR-146a-Ziele in Thrombozyten und Neutrophilen untersuchen, die an der Bildung von NET durch RNA-seq beteiligt sind, indem wir den Ausdruck von Transkripten aus miR-146a-/- vs. WT Mäusenproben vergleichen. Schließlich werden wir die Auswirkungen der systemischen Überexpression von miR-146a auf zwei Modelle von Mäusen untersuchen: (I) Atherosklerose-Modell, bei dem wir Plaque-Regression nach 16 Wochen Fettdiät und (ii) Reduktion der arteriellen Thrombose im FeCl3d-induzierten Carotisthrombose-Modell untersuchen (German)
9 December 2021
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MIR-146a, een miRNA die meestal in ontstekingscellen wordt uitgedrukt, kan een actieve rol spelen in de ontwikkeling van atherotrombotische processen. De doelstellingen van dit project zijn (i) de rol van miR-146a in het NETosis-proces te bepalen en hoe rs2431697, miR-SNP aanwezig is in het gen dat dit miRNA codeert en de niveaus ervan verlaagt, de ontwikkeling van trombose kan beïnvloeden bij patiënten met pro-trombotische pathologie, (ii) de bijdrage van miR-146a bloedplaatjes als een nexus tussen NETosis en trombose kan onderzoeken en ten slotte de mogelijke therapeutische werking van miR-146a in atherothrombosis kan evalueren. Om dit te doen, zullen we het effect van mir-146a-deficiëntie analyseren op de intrinsieke capaciteit van neutrofielen om NET te vormen met behulp van een gebrekkig murinemodel voor dit miRNA-model en ook een menselijk celmodel dat tekortschiet in miR-146a dat wordt gegenereerd door CRISPR-cas9. We zullen verschillende markers van NETosis (DNA, histone 3 cytrulinated) evalueren na activering van neutrofielen gezuiverd met PMA. We zullen de impact van rs2431697 op de vorming van NET in neutrofielen onderzoeken bij patiënten met atriumfibrilleren en patiënten met reumatoïde artritis. We zullen associatiestudies uitvoeren tussen plasmamarkers van NETosis (DNA, elastase, myeloperoxidase, ROS) en de aanwezigheid van rs2431697 in de ontwikkeling van trombotische voorvallen in deze cohorten. We zullen de bloedplaatjesfunctie bij miR-146a-deficiënte muizen en de impact op in vivo NET-vorming bij miR-146a-/- muizen en bij patiënten beoordelen. We zullen nieuwe miR-146a doelen in bloedplaatjes en neutrofielen die betrokken zijn bij de vorming van NET door RNA-seq onderzoeken door vergelijking van de expressie van transcripten van miR-146a-/- versus WT muizen monsters. Tot slot zullen we het effect van systemische overexpressie van miR-146a op twee modellen van muizen bestuderen: (I) atherosclerose model waarbij we plaque regressie zullen bestuderen na 16 weken vet dieet en (ii) vermindering van arteriële trombose in FeCl3d-geïnduceerde carotide trombose model (Dutch)
17 December 2021
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Murcia
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Identifiers
PI17_00051
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