HLA-G: GASTRIC CANCER AND ITS EVOLUTION (Q3166003)

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Project Q3166003 in Spain
Language Label Description Also known as
English
HLA-G: GASTRIC CANCER AND ITS EVOLUTION
Project Q3166003 in Spain

    Statements

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    51,500.0 Euro
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    103,000.0 Euro
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    50.0 percent
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    1 January 2019
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    31 March 2022
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    UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID
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    40°25'0.12"N, 3°42'12.89"W
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    28079
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    Se pretenden estudiar las variantes polimórficas del gen que codifica para la molécula HLA-G, implicado en la modulación de la respuesta inmunitaria contra tumores, en un grupo de pacientes con adenocarcinoma gástrico, y comparar la frecuencia de los polimorfismos con un grupo control, así como determinar la presencia de mutaciones somáticas que modifiquen estas variantes polimórficas en el tejido tumoral de cada paciente. Además, se correlacionarán las variantes con los niveles de expresión (soluble y de membrana) de la proteína, así como con la evolución clínica de los pacientes. Si la respuesta del sistema inmunitaria frente al tumor se ve limitada, se prevé que el tumor progrese de una forma más rápida, poniendo en peligro la vida del paciente. Para ello, se obtendrán muestras de tejido (tumoral y sano) así como muestras de sangre de los pacientes. Se extraerá ADN mediante el kit Nucleon BACC ( GE Healthcare) y se analizarán los polimorfismos relevantes mediante técnicas de PCR y secuenciación Sanger, y se analizarán sus frecuencias a través de software especializado (ARLEQUIN, SNPStats). Se determinarán los niveles de mRNA y proteína en los tejido sano y tumoral de cada paciente, empleando técnicas de qPCR, inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, así como los niveles solubles de la misma y de citocinas mediante ELISA y citometría de flujo, en ambos casos utilizando anticuerpos monoclonales específicos. Se determinará el efecto de la molécula de HLA-G en los fenómenos de activación linfocitaria en respuesta a tumores. Finalmente, se correlacionarán estos parámetros con la clínica y supervivencia de los pacientes con programas de análisis estadístico (SPSS, GraphPad). (Spanish)
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    The aim is to study the polymorphic variants of the gene encoding for the HLA-G molecule, involved in modulating the immune response against tumors, in a group of patients with gastric adenocarcinoma, and to compare the frequency of polymorphisms with a control group, as well as to determine the presence of somatic mutations that modify these polymorphic variants in the tumor tissue of each patient. In addition, variants will be correlated with the levels of expression (soluble and membrane) of the protein, as well as with the clinical evolution of patients. If the immune system’s response to the tumor is limited, the tumor is expected to progress faster, endangering the patient’s life. To do this, samples of tissue (tumoral and healthy) as well as blood samples from patients will be obtained. DNA will be extracted using the Nucleon BACC (GE Healthcare) kit and the relevant polymorphisms will be analysed using PCR and Sanger sequencing techniques, and their frequencies will be analysed through specialised software (ARLEQUIN, SNPStats). The levels of mRNA and protein in each patient’s healthy and tumor tissue shall be determined using qPCR, immunohistochemistry and immunofluorescence techniques, as well as soluble levels of it and cytokines using ELISA and flow cytometry, in both cases using specific monoclonal antibodies. The effect of the HLA-G molecule on lymphocyte activation phenomena in response to tumors will be determined. Finally, these parameters will be correlated with the clinical and survival of patients with statistical analysis programs (SPSS, GraphPad). (English)
    12 October 2021
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    Madrid
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    Identifiers

    PI18_00626
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