Optimisation of genomic editing for application to gene therapy of monogenic diseases (Q3167757)
Jump to navigation
Jump to search
Project Q3167757 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Optimisation of genomic editing for application to gene therapy of monogenic diseases |
Project Q3167757 in Spain |
Statements
121,600.0 Euro
0 references
152,000.0 Euro
0 references
80.0 percent
0 references
1 January 2019
0 references
31 March 2022
0 references
FUNDACION PUBLICA ANDALUZA PROGRESO Y SALUD
0 references
37°10'24.60"N, 3°35'58.31"W
0 references
18087
0 references
El medicamento ideal para el tratamiento de las enfermedades monogénicas sería aquel que pudiera corregir las mutaciones que causan la patología. Este objetivo es algo que se está abordando recientemente gracias al desarrollo de diversos sistemas de edición genómica, especialmente aquellos basados en las nucleasas específicas (NE) como las ZFNs o el sistema CRISPR. Estas técnicas permiten re-escribir la secuencia de ADN de las células diana de una manera lo suficientemente eficaz y específica como para poder pensar en su utilización como herramienta terapéutica. En este proyecto nos centraremos en primer lugar en mejorar la eficacia y seguridad de la edición genómica ex vivo e in vivo para después diseñar estrategias terapéuticas para la enfermedad de Pompe, una glucogenosis causada por mutaciones en el gen que codifica para la enzima lisosomal alfa-glucosidasa ácida (GAA), responsable del catabolismo del glucógeno a glucosa. Para el abordaje ex vivo se procederá a comparar diferentes sistemas de entrega de las NE y los ADN donadores para conseguir editar el genoma de las células madre hematopoyéticas (HSCs) para que sobre-expresen GAA. Estas HSCs editadas serán utilizadas como caballo de Troja para hacer llegar GAA a los diferentes tejidos a la vez que permitiría evitar una respuesta inmune de los pacientes frente a esta proteína. Para mejorar la edición genómica in vivo se utilizarán diferentes serotipos de vectores adenoasociados (AAV) expresando las NE y/o conteniendo el ADN donador con la finalidad de reparar la expresión normal de GAA en hígado y músculo. Ambas estrategias se utilizarán por separado o combinadas en un modelo murino de la enfermedad de Pompe. En todas las estrategias estudiaremos la eficacia terapéutica, la generación de respuesta inmune frente a GAA, así como la seguridad de los procedimientos (Spanish)
0 references
The ideal medicine for the treatment of monogenic diseases would be one that could correct the mutations that cause the pathology. This objective is something that is recently being addressed thanks to the development of various genomic editing systems, especially those based on specific nucleases (NE) such as ZFNs or the CRISPR system. These techniques allow to rewrite the DNA sequence of target cells in a sufficiently effective and specific way to be able to think about its use as a therapeutic tool. In this project we will focus first on improving the effectiveness and safety of genomic editing ex vivo and in vivo and then design therapeutic strategies for Pompe’s disease, a glycogenosis caused by mutations in the gene that encodes for the enzyme lysosomal alpha-glucosidase acid (GAA), responsible for catabolism of glycogen to glucose. For the ex vivo approach, different delivery systems of NEs and donor DNA will be compared in order to edit the hematopoietic stem cell genome (HSCs) to over-express GAA. These edited HSCs will be used as a troja horse to get GAA to the different tissues while avoiding an immune response of patients to this protein. To improve genomic editing in vivo, different adenoassociated vector serotypes (AAVs) will be used by expressing NEs or containing donor DNA in order to repair the normal expression of GAA in liver and muscle. Both strategies will be used separately or combined in a murine model of Pompe’s disease. In all strategies we will study therapeutic efficacy, the generation of immune response to GAA, as well as the safety of procedures (English)
12 October 2021
0 references
Le médicament idéal pour le traitement des maladies monogènes serait celui qui pourrait corriger les mutations qui causent la pathologie. Cet objectif a été abordé récemment grâce au développement de divers systèmes d’édition génomique, en particulier ceux basés sur des nucléases spécifiques (NE) telles que les ZFN ou le système CRISPR. Ces techniques permettent de réécrire la séquence d’ADN des cellules cibles d’une manière suffisamment efficace et spécifique pour être en mesure de penser à son utilisation comme outil thérapeutique. Dans ce projet, nous nous concentrerons d’abord sur l’amélioration de l’efficacité et de la sécurité de l’édition génomique ex vivo et in vivo, puis sur la conception de stratégies thérapeutiques pour la maladie de Pompe, une glycogénose causée par des mutations dans le gène qui code pour l’enzyme alpha-glucosidase acide lysosomique (GAA), responsable du catabolisme du glycogène au glucose. En ce qui concerne l’approche ex vivo, on comparera différents systèmes d’administration d’azote et d’ADN donneur afin de modifier le génome des cellules souches hématopoïétiques (HSC) pour surexprimer la GAA. Ces HSC modifiés seront utilisés comme un cheval troja pour obtenir la GAA dans les différents tissus tout en évitant une réponse immunitaire des patients à cette protéine. Pour améliorer l’édition génomique in vivo, différents sérotypes vectoriels Adénoassociés (AAV) seront utilisés en exprimant des NE ou contenant de l’ADN donneur afin de réparer l’expression normale de la GAA dans le foie et le muscle. Les deux stratégies seront utilisées séparément ou combinées dans un modèle murin de la maladie de Pompe. Dans toutes les stratégies, nous étudierons l’efficacité thérapeutique, la génération de réponse immunitaire à la GAA, ainsi que la sécurité des procédures (French)
4 December 2021
0 references
Das ideale Arzneimittel für die Behandlung monogener Erkrankungen wäre eins, das die Mutationen, die die Pathologie verursachen, korrigieren könnte. Dieses Ziel wird kürzlich durch die Entwicklung verschiedener genomischer Bearbeitungssysteme, insbesondere solcher, die auf spezifischen Nukleasen (NE) basieren, wie ZFNs oder CRISPR-System, angesprochen. Diese Techniken ermöglichen es, die DNA-Sequenz von Zielzellen auf eine ausreichend effektive und spezifische Weise umzuschreiben, um über seine Verwendung als therapeutisches Werkzeug nachdenken zu können. In diesem Projekt konzentrieren wir uns zunächst auf die Verbesserung der Wirksamkeit und Sicherheit der genomischen Bearbeitung ex vivo und in vivo und dann entwickeln therapeutische Strategien für Pompes Krankheit, eine Glykogenose, die durch Mutationen im Gen verursacht wird, das für das Enzym lysosomal Alpha-Glucosidasesäure (GAA), verantwortlich für den Katabolismus von Glykogen zu Glukose, kodiert. Für den Ex-vivo-Ansatz werden verschiedene Trägersysteme von NEs und Spender-DNA verglichen, um das hämatopoetische Stammzellgenom (HSCs) zur Überexprimierung von GAA zu bearbeiten. Diese bearbeiteten HSCs werden als Trojapferd verwendet, um GAA in die verschiedenen Gewebe zu bekommen und gleichzeitig eine Immunantwort der Patienten auf dieses Protein zu vermeiden. Zur Verbesserung der genomischen Bearbeitung in vivo werden verschiedene Adenoassoziierte Vektorserotypen (AAVs) verwendet, indem sie NEs ausdrücken oder Spender-DNA enthalten, um die normale Expression von GAA in Leber und Muskeln zu reparieren. Beide Strategien werden getrennt oder in einem Murinmodell der Pompe-Krankheit verwendet. In allen Strategien werden wir die therapeutische Wirksamkeit, die Generierung der Immunantwort auf GAA sowie die Sicherheit von Prozeduren untersuchen. (German)
9 December 2021
0 references
Het ideale medicijn voor de behandeling van monogene ziekten zou er een zijn die de mutaties zou kunnen corrigeren die de pathologie veroorzaken. Deze doelstelling wordt onlangs aangepakt dankzij de ontwikkeling van verschillende genomische bewerkingssystemen, met name die gebaseerd op specifieke nucleasen (NE) zoals ZFN’s of het CRISPR-systeem. Deze technieken laten toe om de DNA-sequentie van doelcellen op een voldoende effectieve en specifieke manier te herschrijven om over het gebruik ervan als therapeutisch hulpmiddel te kunnen denken. In dit project zullen we ons eerst richten op het verbeteren van de effectiviteit en veiligheid van genomic editing ex vivo en in vivo en vervolgens therapeutische strategieën voor de ziekte van Pompe ontwerpen, een glycogenose veroorzaakt door mutaties in het gen die codeert voor het enzym lysosomale alfa-glucosidase zuur (GAA), verantwoordelijk voor katabolisme van glycogeen naar glucose. Voor de ex vivo benadering, zullen de verschillende leveringssystemen van NEs en donorDNA worden vergeleken om het hematopoietic stamcelgenoom (HSCs) aan over-express GAA te bewerken. Deze bewerkte HSCs zullen worden gebruikt als een troja paard om GAA naar de verschillende weefsels te krijgen, terwijl het vermijden van een immuunrespons van patiënten op dit eiwit. Om genomische bewerking in vivo te verbeteren, zullen verschillende Adenoassociated vector serotypes (AAV’s) worden gebruikt door NE’s uit te drukken of donor-DNA te bevatten om de normale expressie van GAA in lever en spier te herstellen. Beide strategieën zullen afzonderlijk worden gebruikt of gecombineerd in een murinemodel van de ziekte van Pompe. In alle strategieën zullen we de therapeutische werkzaamheid bestuderen, het genereren van immuunrespons op GAA, evenals de veiligheid van procedures (Dutch)
17 December 2021
0 references
La medicina ideale per il trattamento delle malattie monogeniche sarebbe quella che potrebbe correggere le mutazioni che causano la patologia. Questo obiettivo è un obiettivo che viene recentemente affrontato grazie allo sviluppo di vari sistemi di editing genomico, in particolare quelli basati su specifiche nucleasi (NE) come le ZFN o il sistema CRISPR. Queste tecniche permettono di riscrivere la sequenza di DNA delle cellule bersaglio in modo sufficientemente efficace e specifico per poter pensare al suo uso come strumento terapeutico. In questo progetto ci concentreremo prima sul miglioramento dell'efficacia e della sicurezza dell'editing genomico ex vivo e in vivo e poi progettiamo strategie terapeutiche per la malattia di Pompe, una glicogenosi causata da mutazioni nel gene che codifica per l'enzima lysosomal alfa-glucosidasi acido (GAA), responsabile del catabolismo del glicogeno al glucosio. Per l'approccio ex vivo, saranno confrontati diversi sistemi di somministrazione di NE e DNA donatore al fine di modificare il genoma delle cellule staminali ematopoietiche (HSC) per sovraesprimere il GAA. Questi HSC modificati saranno utilizzati come cavallo troja per ottenere GAA ai diversi tessuti, evitando nel contempo una risposta immunitaria dei pazienti a questa proteina. Per migliorare l'editing genomico in vivo, diversi sierotipi vettoriali Adenoassociati (AAV) saranno utilizzati esprimendo NE o contenenti DNA donatore al fine di riparare la normale espressione del GAA nel fegato e nei muscoli. Entrambe le strategie saranno utilizzate separatamente o combinate in un modello murino della malattia di Pompe. In tutte le strategie studieremo l'efficacia terapeutica, la generazione di risposta immunitaria al GAA, nonché la sicurezza delle procedure (Italian)
16 January 2022
0 references
Ideaalne ravim monogeensete haiguste raviks oleks selline, mis võiks parandada patoloogiat põhjustavaid mutatsioone. Seda eesmärki käsitletakse hiljuti tänu erinevate genoomiliste redigeerimissüsteemide väljatöötamisele, eriti neile, mis põhinevad konkreetsetel nukleaasidel, nagu ZFN-id või CRISPR-süsteem. Need meetodid võimaldavad sihtrakkude DNA järjestust ümber kirjutada piisavalt tõhusal ja konkreetsel viisil, et oleks võimalik mõelda selle kasutamisele ravivahendina. Selles projektis keskendume kõigepealt ex vivo ja in vivo genoomilise redigeerimise tõhususe ja ohutuse parandamisele ning seejärel kujundame terapeutilisi strateegiaid Pompe tõve jaoks, mis on põhjustatud mutatsioonidest geenis, mis kodeerib ensüümi lüsosomaalse alfa-glükosidaasi happe (GAA) jaoks, mis vastutab glükogeeni katabolismi eest glükoosiks. Ex vivo lähenemisviisi puhul võrreldakse neeste ja doonori DNA erinevaid manustamissüsteeme, et muuta vereloome tüvirakkude genoomi (HSC) GAA üleekspressiooniks. Neid toimetatud HSC-sid kasutatakse troja hobusena, et saada GAA erinevatesse kudedesse, vältides samal ajal patsientide immuunvastust sellele valgule. Genoomilise redigeerimise parandamiseks in vivo kasutatakse erinevaid adenoasseotud vektor serotüüpe (AAV), ekspresseerides NE-sid või mis sisaldavad doonori DNAd, et parandada GAA normaalset ekspressiooni maksas ja lihastes. Mõlemat strateegiat kasutatakse eraldi või kombineeritakse Pompe tõve hiiremudelis. Kõikides strateegiates uurime terapeutilist efektiivsust, immuunvastuse teket GAA-le ning protseduuride ohutust. (Estonian)
4 August 2022
0 references
Idealus vaistas monogeninių ligų gydymui būtų tas, kuris galėtų ištaisyti patologiją sukeliančias mutacijas. Šis tikslas pastaruoju metu sprendžiamas kuriant įvairias genominio redagavimo sistemas, ypač pagrįstas konkrečiais branduoliais (NE), pvz., ZFN ar CRISPR sistema. Šie metodai leidžia perrašyti tikslinių ląstelių DNR seką pakankamai veiksmingu ir specifiniu būdu, kad būtų galima galvoti apie jo naudojimą kaip terapinę priemonę. Šiame projekte mes pirmiausia sutelksime dėmesį į genomo redagavimo ex vivo ir in vivo veiksmingumo ir saugumo gerinimą ir tada sukursime Pompės ligos, glikogenozės, kurią sukelia mutacijos gene, kuris koduoja fermentą lizosominę alfa-gliukozidazės rūgštį (GAA), atsakingą už glikogeno katabolizmą į gliukozę, terapines strategijas. Taikant ex vivo metodą, bus palygintos skirtingos NE ir donoro DNR perdavimo sistemos, kad būtų galima pakeisti hematopoetinių kamieninių ląstelių genomą (HSC) ir per daug ekspresuoti GAA. Šie redaguoti HSC bus naudojami kaip troja arklys, norint gauti GAA į įvairius audinius, vengiant pacientų imuninio atsako į šį baltymą. Siekiant pagerinti genominį redagavimą in vivo, skirtingi su adenoasoze susiję vektoriniai serotipai (AAV) bus naudojami išreiškiant NE arba turinčius donoro DNR, kad būtų atkurta normali GAA ekspresija kepenyse ir raumenyse. Abi strategijos bus naudojamos atskirai arba kartu su Pompe ligos pelių modeliu. Visose strategijose mes tirsime terapinį veiksmingumą, imuninio atsako į GAA susidarymą, taip pat procedūrų saugumą (Lithuanian)
4 August 2022
0 references
Idealan lijek za liječenje monogenskih bolesti bio bi onaj koji bi mogao ispraviti mutacije koje uzrokuju patologiju. Ovaj cilj je nešto što se nedavno rješava zahvaljujući razvoju različitih genomskih sustava za uređivanje, posebno onih koji se temelje na specifičnim nukleazama (NE) kao što su ZFN ili CRISPR sustav. Ove tehnike omogućuju prepisivanje DNK slijeda ciljnih stanica na dovoljno učinkovit i specifičan način da se može razmišljati o njegovoj uporabi kao terapijskom alatu. U ovom projektu prvo ćemo se usredotočiti na poboljšanje učinkovitosti i sigurnosti genomskog uređivanja ex vivo i in vivo, a zatim osmisliti terapijske strategije za Pompeovu bolest, glikogenozu uzrokovanu mutacijama gena koji kodira enzim lizosomske alfa-glukozidazne kiseline (GAA), odgovorne za katabolizam glikogena na glukozu. Za ex vivo pristup uspoređivat će se različiti sustavi isporuke NE i darivatelja DNK kako bi se genom hematopoetskih matičnih stanica (HSC) uredio na pretjerano ekspresni GAA. Ovi uređivani HSC-ovi će se koristiti kao troja konj kako bi dobili GAA u različitim tkivima, uz izbjegavanje imunološkog odgovora bolesnika na ovaj protein. Za poboljšanje genomskog uređivanja in vivo, različiti adenopovezani vektorski serotipovi (AAV-ovi) koristit će se izražavanjem NE ili sadrže DNK donora kako bi se popravila normalna ekspresija GAA u jetri i mišićima. Obje će se strategije koristiti odvojeno ili kombinirati u modelu murina Pompeove bolesti. U svim strategijama proučavat ćemo terapijsku učinkovitost, stvaranje imunološkog odgovora na GAA, kao i sigurnost postupaka (Croatian)
4 August 2022
0 references
Το ιδανικό φάρμακο για τη θεραπεία των μονογόνων ασθενειών θα ήταν ένα που θα μπορούσε να διορθώσει τις μεταλλάξεις που προκαλούν την παθολογία. Ο στόχος αυτός αντιμετωπίζεται πρόσφατα χάρη στην ανάπτυξη διαφόρων γονιδιωματικών συστημάτων επεξεργασίας, ιδίως εκείνων που βασίζονται σε συγκεκριμένους πυρήνες (NE) όπως τα ZFNs ή το σύστημα CRISPR. Οι τεχνικές αυτές επιτρέπουν την επανεγγραφή της αλληλουχίας DNA των κυττάρων-στόχων με επαρκώς αποτελεσματικό και συγκεκριμένο τρόπο ώστε να είναι σε θέση να σκεφτεί τη χρήση του ως θεραπευτικού εργαλείου. Σε αυτό το έργο θα επικεντρωθούμε πρώτα στη βελτίωση της αποτελεσματικότητας και της ασφάλειας της γονιδιωματικής επεξεργασίας ex vivo και in vivo και στη συνέχεια θα σχεδιάσουμε θεραπευτικές στρατηγικές για τη νόσο του Pompe, μια γλυκογένεση που προκαλείται από μεταλλάξεις στο γονίδιο που κωδικοποιεί το ένζυμο λυσοσωμική άλφα-γλυκοσιδάση οξύ (GAA), υπεύθυνο για τον καταβολισμό του γλυκογόνου στη γλυκόζη. Για την προσέγγιση ex vivo, θα συγκριθούν διαφορετικά συστήματα χορήγησης ΕΑ και DNA δότη προκειμένου να επεξεργαστείτε το γονιδίωμα των αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων (HSC) με την υπερέκφραση GAA. Αυτά τα επεξεργασμένα HSCs θα χρησιμοποιηθούν ως άλογο troja για να πάρει GAA στους διάφορους ιστούς, αποφεύγοντας παράλληλα την ανοσολογική απόκριση των ασθενών σε αυτή την πρωτεΐνη. Για τη βελτίωση της γονιδιωματικής επεξεργασίας in vivo, θα χρησιμοποιηθούν διαφορετικοί ορότυποι αδενοασθενούς φορείς (AAVs) εκφράζοντας NE ή περιέχοντα DNA δότη για την αποκατάσταση της φυσιολογικής έκφρασης του GAA στο ήπαρ και τους μυς. Και οι δύο στρατηγικές θα χρησιμοποιηθούν ξεχωριστά ή θα συνδυαστούν σε ένα μοντέλο μυελού της νόσου Pompe. Σε όλες τις στρατηγικές θα μελετήσουμε τη θεραπευτική αποτελεσματικότητα, τη δημιουργία ανοσολογικής απόκρισης στην GAA, καθώς και την ασφάλεια των διαδικασιών (Greek)
4 August 2022
0 references
Ideálny liek na liečbu monogénnych ochorení by mohol napraviť mutácie, ktoré spôsobujú patológiu. Tento cieľ sa nedávno rieši vďaka vývoju rôznych genómových editačných systémov, najmä tých, ktoré sú založené na špecifických nukleázach (NE), ako sú ZFN alebo systém CRISPR. Tieto techniky umožňujú prepísať sekvenciu DNA cieľových buniek dostatočne účinným a špecifickým spôsobom, aby bolo možné uvažovať o jej použití ako terapeutického nástroja. V tomto projekte sa zameriame najprv na zlepšenie účinnosti a bezpečnosti genómovej úpravy ex vivo a in vivo a potom navrhneme terapeutické stratégie pre Pompeho chorobu, glykogenózu spôsobenú mutáciami v géne, ktorý kóduje enzým lyzozomálnu kyselinu alfa-glukozidázu (GAA), zodpovedný za katabolizmus glykogénu na glukózu. Pokiaľ ide o prístup ex vivo, porovnajú sa rôzne systémy podávania NE a DNA darcu s cieľom upraviť genóm hematopoetických kmeňových buniek (HSC) na prílišnú expresiu GAA. Tieto upravené HSC sa použijú ako troja kôň na získanie GAA do rôznych tkanív, pričom sa zabráni imunitnej odpovedi pacientov na tento proteín. Na zlepšenie genómovej úpravy in vivo sa použijú rôzne Adenoassociované vektorové sérotypy (AAV) expresiou NE alebo obsahujúce DNA darcu s cieľom opraviť normálnu expresiu GAA v pečeni a svaloch. Obe stratégie sa budú používať samostatne alebo kombinované v myšom modeli Pompeho choroby. Vo všetkých stratégiách budeme študovať terapeutickú účinnosť, tvorbu imunitnej odpovede na GAA, ako aj bezpečnosť postupov (Slovak)
4 August 2022
0 references
Ihanteellinen lääke monogeenisten sairauksien hoitoon olisi sellainen, joka voisi korjata patologian aiheuttavat mutaatiot. Tähän tavoitteeseen on viime aikoina puututtu erilaisten genomisten editointijärjestelmien kehittämisen ansiosta, erityisesti sellaisten, jotka perustuvat tiettyihin nukleaseihin, kuten ZFN:iin tai CRISPR-järjestelmään. Näiden tekniikoiden avulla kohdesolujen DNA-sekvenssi voidaan kirjoittaa uudelleen riittävän tehokkaalla ja täsmällisellä tavalla, jotta voidaan ajatella sen käyttöä terapeuttisena välineenä. Tässä hankkeessa keskitymme ensin parantamaan genomisen editoinnin tehokkuutta ja turvallisuutta ex vivo ja in vivo ja sen jälkeen suunnittelemme terapeuttisia strategioita Pompen tautiin, joka on glykogenoosin aiheuttama geenimutaatioiden aiheuttama geeni, joka koodaa lysosomaalinen alfa-glukosidaasihappo (GAA), joka vastaa glykogeenin kataboliasta glukoosiin. Ex vivo -lähestymistavan osalta vertaillaan erilaisia NE:n ja luovuttaja-DNA:n annostelujärjestelmiä, jotta hematopoieettista kantasolujen genomia (HSC) voidaan muokata GAA:n yliilmaisuksi. Näitä muokattuja HSC: tä käytetään trojahevosena, jotta GAA saadaan eri kudoksiin ja vältetään potilaiden immuunivastetta tälle proteiinille. Genomisen editoinnin parantamiseksi in vivo käytetään erilaisia Adenoassociated vektoriserotyyppejä (AAV) ilmaisemalla NE:itä tai jotka sisältävät luovuttajan DNA:ta GAA:n normaalin ilmentymän korjaamiseksi maksassa ja lihaksessa. Molempia strategioita käytetään erikseen tai yhdistetään Pompen taudin hiiren malliin. Kaikissa strategioissa tutkimme terapeuttista tehoa, immuunivasteen muodostumista GAA: lle sekä toimenpiteiden turvallisuutta. (Finnish)
4 August 2022
0 references
Idealnym lekiem do leczenia chorób monogennych byłby taki, który mógłby skorygować mutacje, które powodują patologię. Cel ten jest ostatnio realizowany dzięki rozwojowi różnych systemów edycji genomowej, w szczególności opartych na konkretnych jądrach (NE), takich jak ZFN czy system CRISPR. Techniki te pozwalają na zmianę sekwencji DNA komórek docelowych w wystarczająco skuteczny i konkretny sposób, aby móc myśleć o jej wykorzystaniu jako narzędzia terapeutycznego. W tym projekcie skupimy się przede wszystkim na poprawie skuteczności i bezpieczeństwa edycji genomowej ex vivo i in vivo, a następnie zaprojektujemy strategie terapeutyczne dla choroby Pompego, glikogenozy spowodowanej mutacjami genu, która koduje kwas alfa-glukozydazy enzymu lizosomalnego (GAA), odpowiedzialny za katabolizm glikogenu na glukozę. W przypadku podejścia ex vivo porównywane będą różne systemy dostarczania NE i DNA dawcy, aby edytować genom hematopoetycznych komórek macierzystych (HSC) do nadekspresji GAA. Te edytowane HSC będą używane jako koń troja, aby uzyskać GAA do różnych tkanek, unikając jednocześnie odpowiedzi immunologicznej pacjentów na to białko. W celu poprawy edycji genomicznej in vivo, różne serotypy wektorowe związane z adenoassociated (AAVs) będą stosowane przez ekspresję NE lub zawierające DNA dawcy w celu naprawy normalnej ekspresji GAA w wątrobie i mięśniach. Obie strategie będą stosowane oddzielnie lub połączone w modelu morskim choroby Pompego. WE wszystkich strategiach będziemy badać skuteczność terapeutyczną, generowanie odpowiedzi immunologicznej na GAA, a także bezpieczeństwo procedur (Polish)
4 August 2022
0 references
A monogén betegségek kezelésére ideális gyógyszer lenne az, amely korrigálhatja a patológiát okozó mutációkat. Ez a célkitűzés a közelmúltban a különböző genomikus szerkesztési rendszerek – különösen a specifikus nukleázokon (NE) alapuló rendszerek, például a ZFN-ek vagy a CRISPR rendszer – fejlesztésének köszönhetően valósul meg. Ezek a technikák lehetővé teszik a célsejtek DNS-szekvenciájának oly módon történő újraírását, hogy kellően hatékony és specifikus módon gondolkodhassanak annak terápiás eszközként való használatáról. Ebben a projektben először az ex vivo és in vivo genomszerkesztés hatékonyságának és biztonságosságának javítására összpontosítunk, majd megtervezzük a Pompe-kór terápiás stratégiáit, amely a glikogén glükóz katabolizmusáért felelős lizoszomális alfa-glükozidázsav (GAA) enzimet kódoló gén mutációi által okozott glikogenózis. Az ex vivo megközelítés esetében a hematopoetikus őssejtgenom (HSC-k) szerkesztése érdekében össze kell hasonlítani az NE-k és a donor DNS különböző hordozórendszereit a GAA túl expresszálásával. Ezeket a szerkesztett HSC-ket troja lóként használják, hogy GAA-t kapjanak a különböző szövetekbe, elkerülve ugyanakkor a betegek immunválaszát erre a fehérjére. A genomikus szerkesztés in vivo javítása érdekében különböző adenoasszociált vektor szerotípusokat (AAV-k) használnak NE-k expresszálásával vagy donor DNS tartalommal a GAA normál expressziójának javítása érdekében a májban és az izomban. Mindkét stratégiát külön-külön vagy kombináltan alkalmazzák a Pompe-kór egérmodelljében. Minden stratégiában tanulmányozzuk a terápiás hatékonyságot, a GAA-ra adott immunválasz kialakulását, valamint az eljárások biztonságosságát (Hungarian)
4 August 2022
0 references
Ideální lék pro léčbu monogenních onemocnění by byl ten, který by mohl opravit mutace, které způsobují patologii. Tento cíl je v poslední době řešen díky vývoji různých genomových editačních systémů, zejména systémů založených na specifických nukleázách (NE), jako jsou ZFN nebo CRISPR systém. Tyto techniky umožňují přepsat sekvenci DNA cílových buněk dostatečně účinným a specifickým způsobem, aby bylo možné uvažovat o jejím použití jako terapeutického nástroje. V tomto projektu se nejprve zaměříme na zlepšení účinnosti a bezpečnosti genomové editace ex vivo a in vivo a poté navrhneme terapeutické strategie pro Pompeho chorobu, glykogenózu způsobenou mutacemi v genu, které kódují enzym lysosomální alfa-glukosidázovou kyselinu (GAA), zodpovědnou za katabolismus glykogenu na glukózu. V případě přístupu ex vivo budou porovnány různé systémy pro podávání nových a dárcovských DNA za účelem úpravy genomu hematopoetických kmenových buněk (HSC) na přílišnou expresi GAA. Tyto upravené HSC budou použity jako trojský kůň dostat GAA do různých tkání a zároveň se vyhnout imunitní odpovědi pacientů na tento protein. Pro zlepšení genomové editace in vivo budou použity různé Adenoassociované vektorové sérotypy (AAV) vyjádřením NE nebo obsahem dárcovské DNA za účelem opravy normální exprese GAA v játrech a svalech. Obě strategie budou použity samostatně nebo v kombinaci s myším modelem Pompeovy nemoci. Ve všech strategiích budeme studovat terapeutickou účinnost, generování imunitní odpovědi na GAA, stejně jako bezpečnost postupů (Czech)
4 August 2022
0 references
Ideālas zāles monogēnu slimību ārstēšanai būtu tādas, kas varētu labot mutācijas, kas izraisa patoloģiju. Šis mērķis nesen tiek risināts, pateicoties dažādu genomu rediģēšanas sistēmu attīstībai, jo īpaši tām, kuru pamatā ir īpašas kodolvielas (NE), piemēram, ZFN vai CRISPR sistēma. Šīs metodes ļauj pietiekami efektīvi un konkrēti pārrakstīt mērķa šūnu DNS sekvenci, lai varētu domāt par tās izmantošanu kā terapeitisku līdzekli. Šajā projektā mēs vispirms pievērsīsimies genomiskās rediģēšanas efektivitātes un drošuma uzlabošanai ex vivo un in vivo un pēc tam izstrādāsim Pompe slimības terapeitiskas stratēģijas — glikogenozi, ko izraisa mutācijas gēnā, kas kodē fermentu lizosomālo alfa-glikozidāzi (GAA), kas ir atbildīga par glikogēna katabolismu glikozē. Attiecībā uz ex vivo pieeju tiks salīdzinātas dažādas NE un donoru DNS piegādes sistēmas, lai asinsrades cilmes šūnu genomu (HSC) rediģētu par pārmērīgu GAA ekspresiju. Šie rediģētie HSC tiks izmantoti kā trojas zirgs, lai iegūtu GAA dažādos audos, vienlaikus izvairoties no pacientu imūnās atbildes reakcijas uz šo proteīnu. Lai uzlabotu genomisko rediģēšanu in vivo, tiks izmantoti dažādi ar adenoassociēto vektoru serotipi (AAV), izsakot NE vai saturot donora DNS, lai atjaunotu normālu GAA ekspresiju aknās un muskuļos. Abas stratēģijas tiks izmantotas atsevišķi vai apvienotas Pompe slimības peļu modelī. Visās stratēģijās mēs pētīsim terapeitisko efektivitāti, imūnreakcijas veidošanos pret GAA, kā arī procedūru drošumu. (Latvian)
4 August 2022
0 references
Is é an leigheas idéalach chun galair monaigineacha a chóireáil ná ceann a d’fhéadfadh na sócháin a chruthaíonn an paiteolaíocht a cheartú. Is rud é an cuspóir sin a bhfuiltear ag tabhairt aghaidh air le déanaí a bhuí le córais éagsúla eagarthóireachta géanómaíocha a fhorbairt, go háirithe iad siúd atá bunaithe ar nucleases sonracha (NE) amhail ZFNs nó an córas CRISPR. Ceadaíonn na teicnící seo seicheamh DNA na spriocchealla a athscríobh ar bhealach atá éifeachtach agus sonrach go leor chun a bheith in ann smaoineamh ar a úsáid mar uirlis theiripeach. Sa tionscadal seo beimid ag díriú ar dtús ar éifeachtacht agus sábháilteacht eagarthóireacht géanómaíoch ex vivo agus in vivo agus ansin straitéisí teiripeacha a dhearadh do ghalar Pompe, gliocóis de bharr sócháin sa ghéine a ionchódaíonn don aigéad lysosomal alfa-glúcósidase einsím (GAA), atá freagrach as catabolism glycogen go glúcós. Maidir leis an gcur chuige ex vivo, cuirfear córais seachadta éagsúla de NNanna agus deontóirí DNA i gcomparáid chun an ghéanóm gascheall hematopoietic (HSCanna) a chur in eagar go CLG ró-luath. Bainfear úsáid as na HSCanna eagarthóireachta seo mar chapall troja chun CLG a chur ar fáil do na fíocháin éagsúla agus ag an am céanna freagairt imdhíonachta na n-othar ar an bpróitéin seo a sheachaint. Chun eagarthóireacht ghéanómaíoch a fheabhsú in vivo, bainfear úsáid as séiritíopaí veicteoirí éagsúla (AAVanna) trí NEanna a chur in iúl nó trí DNA deontóra a bheith iontu chun gnáthléiriú CLG san ae agus sna matáin a dheisiú. Úsáidfear an dá straitéis ar leithligh nó le chéile i múnla murine de ghalar Pompe. I ngach straitéis déanfaimid staidéar ar éifeachtúlacht theiripeach, giniúint freagra imdhíonachta ar CLG, chomh maith le sábháilteacht nósanna imeachta (Irish)
4 August 2022
0 references
Idealno zdravilo za zdravljenje monogenih bolezni bi bilo tisto, ki bi lahko odpravilo mutacije, ki povzročajo patologijo. Ta cilj je v zadnjem času obravnavan zaradi razvoja različnih genomskih sistemov za urejanje, zlasti tistih, ki temeljijo na posebnih jedrah (NE), kot so ZFN ali sistem CRISPR. Te tehnike omogočajo preoblikovanje zaporedja DNK ciljnih celic na dovolj učinkovit in specifičen način, da bi lahko razmislili o njegovi uporabi kot terapevtskem orodju. V tem projektu se bomo najprej osredotočili na izboljšanje učinkovitosti in varnosti genomskega urejanja ex vivo in in vivo ter nato oblikovali terapevtske strategije za Pompejevo bolezen, glikogenozo, ki jo povzročajo mutacije v genu, ki kodira encim lizosomsko alfa-glukozidazo (GAA), odgovorno za katabolizem glikogena v glukozo. Za pristop ex vivo se bodo primerjali različni sistemi za dostavo NE in DNK darovalca, da bi uredili genom hematopoetskih matičnih celic (HSC) s prekomerno izraženim GAA. Ti urejeni HSC se bodo uporabljali kot troja konj, da bi dobili GAA v različnih tkivih, hkrati pa se izognili imunskemu odzivu bolnikov na to beljakovino. Za izboljšanje genomske montaže in vivo se uporabljajo različni adenoassociirani vektorski serotipi (AAV – Adenoassociated vektorski serotipi) z izražanjem NE ali vsebujejo DNK darovalca, da se popravi normalen izraz GAA v jetrih in mišicah. Obe strategiji se bosta uporabljali ločeno ali v kombinaciji z mišjim modelom Pompejeve bolezni. V vseh strategijah bomo preučevali terapevtsko učinkovitost, nastanek imunskega odziva na GAA in varnost postopkov. (Slovenian)
4 August 2022
0 references
Идеалното лекарство за лечение на моногенни заболявания би било това, което може да коригира мутациите, които причиняват патологията. Тази цел е нещо, което напоследък се разглежда благодарение на разработването на различни системи за геномно редактиране, особено тези, които се основават на специфични нуклеази (NE) като ZFN или системата CRISPR. Тези техники позволяват да се пренапише ДНК последователността на целевите клетки по достатъчно ефективен и специфичен начин, за да може да се мисли за използването ѝ като терапевтичен инструмент. В този проект ще се съсредоточим първо върху подобряване на ефективността и безопасността на геномното редактиране ex vivo и in vivo и след това ще разработим терапевтични стратегии за болестта на Помп, гликогеноза, причинена от мутации в гена, който кодира ензимната лизозомна алфа-глюкозидазна киселина (GAA), отговорна за катаболизма на гликогена към глюкоза. За подхода ex vivo ще бъдат сравнени различните системи за доставяне на НЕО и ДНК донора, за да се редактира геномът на хематопоетичните стволови клетки (HSCs) до свръхекспресиране на GAA. Тези редактирани HSC ще се използват като кон троха, за да се получи GAA до различните тъкани, като същевременно се избягва имунния отговор на пациентите към този протеин. За подобряване на геномното редактиране in vivo ще се използват различни аденоасоциирани векторни серотипове (AAVs) чрез експресиране на НЕО или съдържащи донорна ДНК, за да се възстанови нормалната експресия на GAA в черния дроб и мускулите. И двете стратегии ще се използват поотделно или ще се комбинират в миши модел на болестта на Помп. Във всички стратегии ще изследваме терапевтичната ефикасност, генерирането на имунен отговор към GAA, както и безопасността на процедурите (Bulgarian)
4 August 2022
0 references
Il-mediċina ideali għat-trattament ta ‘mard monoġeniku tkun waħda li tista’ tikkoreġi l-mutazzjonijiet li jikkawżaw il-patoloġija. Dan l-objettiv huwa xi ħaġa li dan l-aħħar qed tiġi indirizzata bis-saħħa tal-iżvilupp ta’ diversi sistemi ta’ editjar ġenomiku, speċjalment dawk ibbażati fuq nucleases speċifiċi (NE) bħaż-ZFNs jew is-sistema CRISPR. Dawn it-tekniki jippermettu li s-sekwenza tad-DNA taċ-ċelloli fil-mira tinkiteb mill-ġdid b’mod effettiv u speċifiku biżżejjed biex wieħed ikun jista’ jaħseb dwar l-użu tiegħu bħala għodda terapewtika. F’dan il-proġett se niffukaw l-ewwel fuq it-titjib tal-effikaċja u s-sigurtà tal-editjar ġenomiku ex vivo u in vivo u mbagħad niddisinjaw strateġiji terapewtiċi għall-marda ta’ Pompe, glikoġenożi kkawżata minn mutazzjonijiet fil-ġene li jikkodifika għall-enzima lysosomal alpha-glucosidase acid (GAA), responsabbli għall-kataboliżmu tal-glikoġen għall-glukożju. Għall-approċċ ex vivo, sistemi differenti ta’ twassil tal-NEs u d-DNA tad-donatur se jitqabblu sabiex jeditjaw il-ġenoma ematopojetika taċ-ċelloli staminali (HSCs) għal GAA esprimi żżejjed. Dawn l-HSCs editjati se jintużaw bħala żiemel tat-troja biex il-GAA jasal għand it-tessuti differenti filwaqt li jiġi evitat rispons immunitarju tal-pazjenti għal din il-proteina. Biex jittejjeb l-editjar ġenomiku in vivo, se jintużaw serotipi differenti ta’ vettur Adenoassoċjat (AAVs) billi jiġu espressi NEs jew ikun fihom DNA tad-donatur sabiex tissewwa l-espressjoni normali ta’ GAA fil-fwied u l-muskoli. Iż-żewġ strateġiji se jintużaw separatament jew ikkombinati f’mudell murine tal-marda ta’ Pompe. Fl-istrateġiji kollha se nistudjaw l-effikaċja terapewtika, il-ġenerazzjoni ta’ rispons immuni għal GAA, kif ukoll is-sigurtà tal-proċeduri (Maltese)
4 August 2022
0 references
O medicamento ideal para o tratamento de doenças monogênicas seria aquele que poderia corrigir as mutações que causam a patologia. Este objetivo é algo que está sendo abordado recentemente graças ao desenvolvimento de vários sistemas de edição genômica, especialmente aqueles ganzas em nucleases específicas (NE) como ZFNs ou o sistema CRISPR. Estas técnicas permitem reescrever a sequência de ADN das células-alvo de uma forma suficientemente eficaz e específica para poder pensar na sua utilização como uma ferramenta terapêutica. Neste projeto vamos nos concentrar primeiro em melhorar a eficácia e segurança da edição genômica ex vivo e in vivo e, em seguida, projetar estratégias terapêuticas para a doença de Pompe, uma glicogenose causada por mutações no gene que codifica para a enzima ácido alfa-glucosidase lisossômica (GAA), responsável pelo catabolismo do glicogênio à glicose. Para a abordagem ex vivo, diferentes sistemas de entrega de NEs e DNA doador serão comparados a fim de editar o genoma de células estaminais hematopoiéticas (HSCs) para exagerar GAA. Estes HSCs editados serão usados como um cavalo troja para obter GAA para os diferentes tecidos, evitando uma resposta imune dos pacientes a esta proteína. Para melhorar a edição genômica in vivo, diferentes serótipos vetores adenoassociados (AAVs) serão usados expressando NEs ou contendo DNA doador, a fim de reparar a expressão normal de GAA no fígado e no músculo. Ambas as estratégias serão usadas separadamente ou combinadas em um modelo murino da doença de Pompe. Em todas as estratégias estudaremos a eficácia terapêutica, a geração de resposta imune ao GAA, bem como a segurança dos procedimentos (Portuguese)
4 August 2022
0 references
Den ideelle medicin til behandling af monogene sygdomme ville være en, der kunne korrigere de mutationer, der forårsager patologien. Dette mål behandles for nylig takket være udviklingen af forskellige genomredigeringssystemer, især dem, der er baseret på specifikke nukleaser (NE) som f.eks. ZFN'er eller CRISPR-systemet. Disse teknikker gør det muligt at omskrive DNA-sekvensen af målcellerne på en tilstrækkelig effektiv og specifik måde til at kunne tænke på dens anvendelse som et terapeutisk værktøj. I dette projekt vil vi først fokusere på at forbedre effektiviteten og sikkerheden af genomisk redigering ex vivo og in vivo og derefter designe terapeutiske strategier for Pompes sygdom, en glycogenose forårsaget af mutationer i genet, der koder for enzymet lysosomal alfa-glucosidasesyre (GAA), der er ansvarlig for katabolisme af glykogen til glukose. Med henblik på ex vivo-tilgangen vil der blive sammenlignet forskellige leveringssystemer for NE'er og donor-DNA for at redigere det hæmatopoietiske stamcellegenom (HSC) for at overudtrykke GAA. Disse redigerede HSC'er vil blive brugt som en trojahest for at få GAA til de forskellige væv og samtidig undgå immunrespons hos patienter på dette protein. For at forbedre genomredigeringen in vivo vil forskellige adenoassocierede vektorserotyper (AAV'er) blive anvendt ved at udtrykke NE'er eller indeholde donor-DNA for at reparere det normale udtryk af GAA i lever og muskler. Begge strategier vil blive anvendt separat eller kombineret i en murine model af Pompes sygdom. I alle strategier vil vi studere terapeutisk effekt, generering af immunrespons på GAA, samt sikkerhed af procedurer (Danish)
4 August 2022
0 references
Medicamentul ideal pentru tratamentul bolilor monogenice ar fi unul care ar putea corecta mutațiile care cauzează patologia. Acest obiectiv este abordat recent datorită dezvoltării diferitelor sisteme de editare genomică, în special a celor bazate pe nucleaze specifice (NE), cum ar fi ZFN sau sistemul CRISPR. Aceste tehnici permit rescrierea secvenței ADN a celulelor țintă într-un mod suficient de eficient și specific pentru a putea gândi la utilizarea sa ca instrument terapeutic. În acest proiect ne vom concentra mai întâi pe îmbunătățirea eficacității și siguranței editării genomice ex vivo și in vivo și apoi pe proiectarea strategiilor terapeutice pentru boala Pompe, o glicogenoză cauzată de mutații ale genei care codifică acidul alfa-glucozidază lizozomal (GAA), responsabil pentru catabolismul glicogenului la glucoză. Pentru abordarea ex vivo, vor fi comparate diferite sisteme de transmitere a NE și a ADN-ului donator pentru a edita genomul celulelor stem hematopoietice (HSC) cu GAA supraexprimată. Aceste HSC editate vor fi utilizate ca un cal troja pentru a obține GAA la diferite țesuturi evitând în același timp un răspuns imun al pacienților la această proteină. Pentru a îmbunătăți editarea genomică in vivo, diferite serotipuri de vectori adenoassociați (AAV) vor fi utilizate prin exprimarea NE-urilor sau a ADN-ului donator pentru a repara expresia normală a GAA în ficat și mușchi. Ambele strategii vor fi utilizate separat sau combinate într-un model murine al bolii Pompe. În toate strategiile vom studia eficacitatea terapeutică, generarea de răspuns imun la GAA, precum și siguranța procedurilor (Romanian)
4 August 2022
0 references
Den idealiska medicinen för behandling av monogena sjukdomar skulle vara en som skulle kunna korrigera de mutationer som orsakar patologin. Detta mål är något som nyligen åtgärdas tack vare utvecklingen av olika genomiska redigeringssystem, särskilt de som bygger på specifika nukleaser (NE) som ZFNs eller CRISPR-systemet. Dessa tekniker gör det möjligt att skriva om DNA-sekvensen av målceller på ett tillräckligt effektivt och specifikt sätt för att kunna tänka på dess användning som ett terapeutiskt verktyg. I detta projekt kommer vi först att fokusera på att förbättra effektiviteten och säkerheten hos genomisk redigering ex vivo och in vivo och sedan utforma terapeutiska strategier för Pompes sjukdom, en glykogenos orsakad av mutationer i genen som kodar för enzymet lysosomal alfa-glukosidassyra (GAA), ansvarig för katabolism av glykogen mot glukos. För ex vivo-metoden kommer olika leveranssystem för NE:er och donator-DNA att jämföras för att redigera hematopoetiskt stamcellsgenom (HSC) för att överuttrycka GAA. Dessa redigerade HSCs kommer att användas som en troja häst för att få GAA till de olika vävnaderna samtidigt som man undviker ett immunsvar från patienter på detta protein. För att förbättra genomisk redigering in vivo kommer olika Adenoassocierade vektorserotyper (AAV) att användas genom att uttrycka NE:er eller innehålla donator-DNA för att reparera det normala uttrycket av GAA i lever och muskler. Båda strategierna kommer att användas separat eller kombineras i en murin modell av Pompes sjukdom. I alla strategier kommer vi att studera terapeutisk effekt, generering av immunsvar mot GAA, samt säkerheten i förfaranden (Swedish)
4 August 2022
0 references
Granada
0 references
Identifiers
PI18_00337
0 references