Study of sST2 as a therapeutic target to prevent adverse cardiac remodeling after acute myocardial infarction (Q3179275)

Hipótesis: La identificación de los elementos que participan en la modulación del sST2 en el IAM nos permitirá desarrollar estrategias para disminuir la expresión de sST2 y frenar la progresión del remodelado miocardiaco adverso tras IAM. Objetivos y Métodos: 1) Determinar los tejidos y tipos celulares responsables de la síntesis de sST2 en respuesta al IAM, mediante (a) la medida del gradiente trascardiaco de sST2 entre sangre arterial y seno coronario en pacientes con IAM y (b) el estudio diferencial de la expresión génica de sST2 en muestras tisulares, obtenidas a partir de un modelo experimental de IAM en ratón, usando técnicas de RT-PCR a tiempo real, transferencia Western así como la identificación y colocalización in situ del sST2 ARNm en el tejido, con diferentes marcadores celulares. 2) Identificar los factores de transcripción y los elementos de regulación de splicing alternativo implicados en la sobre-expresión de sST2, mediante el uso de líneas celulares y cultivos primarios obtenidos a partir de tejido fresco, sometidos a estrés biomecánico simulado. Se emplearán técnicas de RT-PCR a tiempo real, ELISA, así como modelos Knockdown mediante el uso de siRNAs específicos. 3) Evaluar la inhibición de la expresión de sST2 como terapia frente al remodelado miocárdico post-IAM, mediante el uso de un modelo animal de IAM y técnicas de silenciamiento génico con ARN interferente. (Spanish)

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Scenario: The identification of the elements involved in sST2 modulation in AMI will allow us to develop strategies to decrease the expression of sST2 and slow progression of adverse myocardiac remodeling after AMI. Objectives and Methods: 1) Determine the tissues and cell types responsible for the synthesis of sST2 in response to AMI, by (a) measuring the transcardiac gradient of sST2 between arterial blood and coronary sinus in patients with AMI and (b) differential study of the gene expression of sST2 in tissue samples, obtained from an experimental model of mouse AMI, using real-time RT-PCR techniques, Western transfer as well as the identification and placement in situ of sST2 mRNA in the tissue, with different cell markers. 2) Identify the transcription factors and the elements of regulation of alternative splicing involved in the over-expression of sST2, using cell lines and primary cultures obtained from fresh tissue, subjected to simulated biomechanical stress. Real-time RT-PCR techniques, ELISA, as well as Knockdown models will be used using specific siRNAs. 3) Evaluate inhibition of sST2 expression as therapy against post-AMI myocardial remodeling, using an animal model of AMI and gene silencing techniques with interfering RNA. (English)

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12 October 2021

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Scénario: L’identification des éléments impliqués dans la modulation sST2 dans l’IMA nous permettra de développer des stratégies pour diminuer l’expression de sST2 et la progression lente du remodelage myocardique indésirable après l’IMA. Objectifs et méthodes: 1) Déterminer les tissus et les types de cellules responsables de la synthèse de sST2 en réponse à l’IMA, en a) mesurant le gradient transcardiaque de sST2 entre le sang artérielle et le sinus coronaire chez les patients atteints d’IMA et b) l’étude différentielle de l’expression génique du sST2 dans des échantillons de tissus, obtenu à partir d’un modèle expérimental d’IMA de souris, en utilisant des techniques RT-PCR en temps réel, le transfert occidental ainsi que l’identification et le placement in situ de l’ARNm sST2 dans le tissu, avec différents marqueurs cellulaires. 2) Déterminer les facteurs de transcription et les éléments de régulation de l’épissage alternatif impliqués dans la surexpression du sST2, en utilisant des lignées cellulaires et des cultures primaires obtenues à partir de tissus frais, soumises à un stress biomécanique simulé. Les techniques RT-PCR en temps réel, ELISA, ainsi que les modèles Knockdown seront utilisés en utilisant des siRNA spécifiques. 3) Évaluer l’inhibition de l’expression sST2 en tant que thérapie contre le remodelage du myocarde post-AMI, à l’aide d’un modèle animal d’IMA et de techniques de silencieux de gènes avec l’ARN interférent. (French)

point in time

4 December 2021

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Szenario: Die Identifizierung der Elemente, die an der SST2-Modulation im AMI beteiligt sind, wird es uns ermöglichen, Strategien zu entwickeln, um die Expression von sST2 und das langsame Fortschreiten des widrigen Myokardumbaus nach dem AMI zu verringern. Ziele und Methoden: 1) Bestimmen Sie die Gewebe und Zelltypen, die für die Synthese von SST2 als Reaktion auf AMI verantwortlich sind, durch (a) Messung des Transkardialen Gradientens von SST2 zwischen arteriellen Blut und koronaren Sinus bei Patienten mit AMI und b) Differentialstudie der Genexpression von SST2 in Gewebeproben, die aus einem experimentellen Modell der Maus AMI unter Verwendung von Echtzeit-RT-PCR-Techniken, Westerntransfer sowie der Identifizierung und Platzierung von sST2 mRNA im Gewebe mit verschiedenen Zellmarkern gewonnen wurde. 2) Identifizieren Sie die Transkriptionsfaktoren und die Elemente der Regulierung von alternativen Spleißen, die an der Überexpression von sST2 beteiligt sind, unter Verwendung von Zelllinien und Primärkulturen, die aus frischem Gewebe gewonnen werden und einem simulierten biomechanischen Stress ausgesetzt sind. Echtzeit-RT-PCR-Techniken, ELISA sowie Knockdown-Modelle werden mit spezifischen siRNAs verwendet. 3) Inhibieren Sie die Hemmung der SST2-Expression als Therapie gegen post-AMI-Myokardumgestaltung unter Verwendung eines Tiermodells von AMI und Gensilencing-Techniken mit störender RNA. (German)

point in time

9 December 2021

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location (string)

Murcia

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Identifiers

Spanish Kohesio ID

PI14_01637

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Study of sST2 as a therapeutic target to prevent adverse cardiac remodeling after acute myocardial infarction (Q3179275)

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