Development of a high-performance reprogramming platform based on oocyte extracts packaged in liposomes (Q3164493): Difference between revisions
Jump to navigation
Jump to search
(Changed label, description and/or aliases in nl, and other parts: Adding Dutch translations) |
(Changed label, description and/or aliases in it, and other parts: Adding Italian translations) |
||||||||||||||
| label / it | label / it | ||||||||||||||
Sviluppo di una piattaforma di riprogrammazione ad alte prestazioni basata su estratti di ovociti confezionati nei liposomi | |||||||||||||||
| Property / summary | |||||||||||||||
Sebbene sia relativamente facile generare cellule pluripotenziali indotte (iPSC), le sue aberrazioni genetiche e il potenziale oncogenico ne limitano l'uso nella medicina rigenerativa. D'altro canto, la generazione di cellule staminali embrionali (ESC) attraverso il trasferimento nucleare (NSTS) è molto inefficiente, richiede un gran numero di ovociti di buona qualità e, nell'uomo, è associata a limitazioni etiche e logistiche. In alternativa, diversi studi hanno dimostrato che la permeabilizzazione e l'incubazione di cellule somatiche con estratti di ovociti sia di specie inferiori (Xenopus, Drosophila) che di mammiferi (topo, maiale) inducono la loro riprogrammazione evidenziata dall'espressione di marcatori pluripotenze. Tuttavia, questo tipo di studio richiede anche l'uso di un numero molto elevato di ovociti, essendo impraticabile con campioni di origine umana. Proponiamo l'uso di un dispositivo microfluidico per generare liposomi da estratti di ovociti e dirigere la fusione controllata dei singoli liposomi alle cellule somatiche. La nostra ipotesi è che la fusione controllata di un volume critico di estratto di ovocita in ogni cellula somatica possa indurre la sua efficace riprogrammazione. Il profilo epigenetico e trascrittomico delle cellule trattate con ovociti deve essere confrontato con i profili cellulari somatici trattati con liposomi senza il corrispondente estratto, ESC e iPSC. Proponiamo di ottimizzare questo sistema utilizzando cellule del mouse e poi riprogrammare cellule di origine umana con ovociti omologhi. La riuscita attuazione di questa piattaforma ci permetterà di generare cellule staminali di origine umana e l'opportunità senza precedenti di studiare i fattori ovociti responsabili della riprogrammazione. (Italian) | |||||||||||||||
| Property / summary: Sebbene sia relativamente facile generare cellule pluripotenziali indotte (iPSC), le sue aberrazioni genetiche e il potenziale oncogenico ne limitano l'uso nella medicina rigenerativa. D'altro canto, la generazione di cellule staminali embrionali (ESC) attraverso il trasferimento nucleare (NSTS) è molto inefficiente, richiede un gran numero di ovociti di buona qualità e, nell'uomo, è associata a limitazioni etiche e logistiche. In alternativa, diversi studi hanno dimostrato che la permeabilizzazione e l'incubazione di cellule somatiche con estratti di ovociti sia di specie inferiori (Xenopus, Drosophila) che di mammiferi (topo, maiale) inducono la loro riprogrammazione evidenziata dall'espressione di marcatori pluripotenze. Tuttavia, questo tipo di studio richiede anche l'uso di un numero molto elevato di ovociti, essendo impraticabile con campioni di origine umana. Proponiamo l'uso di un dispositivo microfluidico per generare liposomi da estratti di ovociti e dirigere la fusione controllata dei singoli liposomi alle cellule somatiche. La nostra ipotesi è che la fusione controllata di un volume critico di estratto di ovocita in ogni cellula somatica possa indurre la sua efficace riprogrammazione. Il profilo epigenetico e trascrittomico delle cellule trattate con ovociti deve essere confrontato con i profili cellulari somatici trattati con liposomi senza il corrispondente estratto, ESC e iPSC. Proponiamo di ottimizzare questo sistema utilizzando cellule del mouse e poi riprogrammare cellule di origine umana con ovociti omologhi. La riuscita attuazione di questa piattaforma ci permetterà di generare cellule staminali di origine umana e l'opportunità senza precedenti di studiare i fattori ovociti responsabili della riprogrammazione. (Italian) / rank | |||||||||||||||
Normal rank | |||||||||||||||
| Property / summary: Sebbene sia relativamente facile generare cellule pluripotenziali indotte (iPSC), le sue aberrazioni genetiche e il potenziale oncogenico ne limitano l'uso nella medicina rigenerativa. D'altro canto, la generazione di cellule staminali embrionali (ESC) attraverso il trasferimento nucleare (NSTS) è molto inefficiente, richiede un gran numero di ovociti di buona qualità e, nell'uomo, è associata a limitazioni etiche e logistiche. In alternativa, diversi studi hanno dimostrato che la permeabilizzazione e l'incubazione di cellule somatiche con estratti di ovociti sia di specie inferiori (Xenopus, Drosophila) che di mammiferi (topo, maiale) inducono la loro riprogrammazione evidenziata dall'espressione di marcatori pluripotenze. Tuttavia, questo tipo di studio richiede anche l'uso di un numero molto elevato di ovociti, essendo impraticabile con campioni di origine umana. Proponiamo l'uso di un dispositivo microfluidico per generare liposomi da estratti di ovociti e dirigere la fusione controllata dei singoli liposomi alle cellule somatiche. La nostra ipotesi è che la fusione controllata di un volume critico di estratto di ovocita in ogni cellula somatica possa indurre la sua efficace riprogrammazione. Il profilo epigenetico e trascrittomico delle cellule trattate con ovociti deve essere confrontato con i profili cellulari somatici trattati con liposomi senza il corrispondente estratto, ESC e iPSC. Proponiamo di ottimizzare questo sistema utilizzando cellule del mouse e poi riprogrammare cellule di origine umana con ovociti omologhi. La riuscita attuazione di questa piattaforma ci permetterà di generare cellule staminali di origine umana e l'opportunità senza precedenti di studiare i fattori ovociti responsabili della riprogrammazione. (Italian) / qualifier | |||||||||||||||
point in time: 16 January 2022
| |||||||||||||||
Revision as of 13:24, 16 January 2022
Project Q3164493 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | Development of a high-performance reprogramming platform based on oocyte extracts packaged in liposomes |
Project Q3164493 in Spain |
Statements
24,000.0 Euro
0 references
48,000.0 Euro
0 references
50.0 percent
0 references
1 January 2015
0 references
31 March 2019
0 references
UNIVERSIDAD DE LERIDA
0 references
41°36'53.14"N, 0°37'36.41"E
0 references
25120
0 references
Aunque es relativamente fácil generar células pluripotenciales inducidas (iPSCs), sus aberraciones genéticas y potencial oncogenicidad limitan su uso en medicina regenerativa. Por otra parte, la generación de células madre embrionarias (ESCs) a través de la transferencia nuclear (SCNT) es muy ineficiente, requiere un gran número de ovocitos de buena calidad y, en humanos, se asocia a limitaciones éticas y logísticas. Como alternativa, varios estudios han demostrado que la permeabilización e incubación de células somáticas con extractos de ovocito tanto de especies inferiores (Xenopus, Drosophila) como de mamíferos (ratón, cerdo) induce su reprogramación evidenciada por la expresión de marcadores de pluripotencia. No obstante, este tipo de estudios también precisan de la utilización de un número muy elevado de ovocitos, siendo impracticable con muestras de origen humano. Proponemos la utilización de un dispositivo microfluídico para generar liposomas a partir de extractos de ovocito y dirigir la fusión controlada de liposomas individuales a células somáticas. Nuestra hipótesis es que la fusión controlada de un volumen crítico de extracto de ovocito a cada célula somática puede inducir su eficiente reprogramación. El perfil epigenético y transcriptómico de las células tratadas con ovocitos se comparará a los perfiles de células somáticas tratadas con liposomas sin el correspondiente extracto, ESCs y iPSCs. Proponemos optimizar este sistema usando células de ratón para luego reprogramar células de origen humano con ovocitos homólogos. La implementación de esta plataforma con éxito nos permitirá generar células madre de origen humano y la oportunidad sin precedentes de estudiar los factores del ovocito responsables de la reprogramación. (Spanish)
0 references
Although it is relatively easy to generate induced pluripotential cells (iPSCs), its genetic aberrations and oncogenic potential limit its use in regenerative medicine. On the other hand, the generation of embryonic stem cells (ESCs) through nuclear transfer (NSTS) is very inefficient, requires a large number of good quality oocytes and, in humans, is associated with ethical and logistical limitations. Alternatively, several studies have shown that permeabilisation and incubation of somatic cells with oocyte extracts from both lower species (Xenopus, Drosophila) and mammals (mouse, pig) induce their reprogramming evidenced by the expression of pluripotence markers. However, this type of study also requires the use of a very high number of oocytes, being impracticable with samples of human origin. We propose the use of a microfluidic device to generate liposomes from oocyte extracts and direct the controlled fusion of individual liposomes to somatic cells. Our hypothesis is that the controlled fusion of a critical volume of oocyte extract into each somatic cell can induce its efficient reprogramming. The epigenetic and transcriptomic profile of oocyte-treated cells shall be compared to somatic cell profiles treated with liposomes without the corresponding extract, ESCs and iPSCs. We propose to optimise this system using mouse cells and then reprogram cells of human origin with homologous oocytes. The successful implementation of this platform will allow us to generate stem cells of human origin and the unprecedented opportunity to study the oocyte factors responsible for reprogramming. (English)
12 October 2021
0 references
Bien qu’il soit relativement facile de générer des cellules pluripotentielles induites (iPSC), ses aberrations génétiques et son potentiel oncogénique limitent son utilisation en médecine régénérative. D’autre part, la production de cellules souches embryonnaires (CSE) par transfert nucléaire (NSTS) est très inefficace, nécessite un grand nombre d’ovocytes de bonne qualité et, chez l’homme, est associée à des limitations éthiques et logistiques. Par ailleurs, plusieurs études ont montré que la perméabilisation et l’incubation de cellules somatiques avec des extraits d’ovocytes provenant d’espèces inférieures (Xenopus, Drosophila) et de mammifères (souris, porcs) induisent leur reprogrammation démontrée par l’expression de marqueurs de pluripotence. Cependant, ce type d’étude nécessite également l’utilisation d’un très grand nombre d’ovocytes, étant impraticable avec des échantillons d’origine humaine. Nous proposons l’utilisation d’un dispositif microfluidique pour générer des liposomes à partir d’extraits d’ovocytes et diriger la fusion contrôlée des liposomes individuels vers des cellules somatiques. Notre hypothèse est que la fusion contrôlée d’un volume critique d’extrait d’ovocyte dans chaque cellule somatique peut induire sa reprogrammation efficace. Le profil épigénétique et transcriptomique des cellules traitées aux ovocytes doit être comparé aux profils cellulaires somatiques traités avec des liposomes sans l’extrait, les ESC et les iPSC correspondants. Nous proposons d’optimiser ce système en utilisant des cellules de souris, puis de reprogrammer des cellules d’origine humaine avec des ovocytes homologues. La mise en œuvre réussie de cette plateforme nous permettra de générer des cellules souches d’origine humaine et l’occasion sans précédent d’étudier les facteurs d’ovocytes responsables de la reprogrammation. (French)
4 December 2021
0 references
Obwohl es relativ einfach ist, induzierte pluripotenzielle Zellen (iPSCs) zu erzeugen, beschränken seine genetischen Aberrationen und das onkogene Potenzial seine Verwendung in der regenerativen Medizin. Andererseits ist die Erzeugung embryonaler Stammzellen (ESC) durch Kerntransfer (NSTS) sehr ineffizient, erfordert eine große Anzahl von hochwertigen Oozyten und ist beim Menschen mit ethischen und logistischen Einschränkungen verbunden. Alternativ haben mehrere Studien gezeigt, dass die Permeabilisation und Inkubation von somatischen Zellen mit Oozytenextrakten aus beiden unteren Arten (Xenopus, Drosophila) und Säugetieren (Maus, Schwein) ihre Neuprogrammierung durch die Expression von Pluripotenzmarkern beweist. Diese Art von Studie erfordert jedoch auch die Verwendung einer sehr hohen Anzahl von Oozyten, die mit Proben menschlichen Ursprungs undurchführbar ist. Wir schlagen die Verwendung eines mikrofluidischen Geräts vor, um Liposomen aus Oozytenextrakten zu erzeugen und die kontrollierte Fusion einzelner Liposomen zu somatischen Zellen zu lenken. Unsere Hypothese ist, dass die kontrollierte Fusion eines kritischen Volumens von Oozytenextrakt in jede somatische Zelle ihre effiziente Neuprogrammierung induzieren kann. Das epigenetische und transkriptomische Profil der mit Oozyten behandelten Zellen ist mit somatischen Zellprofilen, die mit Liposomen behandelt werden, ohne den entsprechenden Extrakt, ESCs und iPSCs zu vergleichen. Wir schlagen vor, dieses System mit Mauszellen zu optimieren und dann Zellen menschlichen Ursprungs mit homologen Oozyten neu zu programmieren. Die erfolgreiche Umsetzung dieser Plattform ermöglicht es uns, Stammzellen menschlicher Herkunft zu generieren und die beispiellose Gelegenheit zu untersuchen, die für die Neuprogrammierung verantwortlichen Oozytenfaktoren zu untersuchen. (German)
9 December 2021
0 references
Hoewel het relatief gemakkelijk is om geïnduceerde pluripotentiële cellen (iPSC’s) te genereren, beperken de genetische afwijkingen en oncogene potentie het gebruik ervan in regeneratieve geneeskunde. Anderzijds is de generatie van embryonale stamcellen (ESC’s) door middel van nucleaire overdracht (NSTS) zeer inefficiënt, vereist een groot aantal oöcyten van goede kwaliteit en wordt bij mensen geassocieerd met ethische en logistieke beperkingen. Als alternatief hebben verscheidene studies aangetoond dat permeabilisatie en incubatie van somatische cellen met oöcytenextracten van zowel lagere soorten (Xenopus, Drosophila) als zoogdieren (muis, varken) hun herprogrammering induceren, aangetoond door de expressie van pluripotentiemarkers. Dit type studie vereist echter ook het gebruik van een zeer groot aantal oöcyten, die onuitvoerbaar zijn bij monsters van menselijke oorsprong. Wij stellen het gebruik van een microfluidic apparaat voor om liposomen van oöcytenextracten te genereren en de gecontroleerde fusie van individuele liposomen aan somatische cellen te leiden. Onze hypothese is dat de gecontroleerde fusie van een kritisch volume van oöcytenextract in elke somatische cel zijn efficiënte herprogrammering kan induceren. Het epigenetische en transcriptomische profiel van oöcytenbehandelde cellen moet worden vergeleken met somatische celprofielen die met liposomen worden behandeld zonder het overeenkomstige extract, ESCs en iPSC’s. We stellen voor om dit systeem te optimaliseren met behulp van muiscellen en vervolgens cellen van menselijke oorsprong te herprogrammeren met homologe oöcyten. De succesvolle implementatie van dit platform zal ons in staat stellen om stamcellen van menselijke oorsprong te genereren en de ongekende kans om de oöcyten factoren die verantwoordelijk zijn voor de herprogrammering te bestuderen. (Dutch)
17 December 2021
0 references
Sebbene sia relativamente facile generare cellule pluripotenziali indotte (iPSC), le sue aberrazioni genetiche e il potenziale oncogenico ne limitano l'uso nella medicina rigenerativa. D'altro canto, la generazione di cellule staminali embrionali (ESC) attraverso il trasferimento nucleare (NSTS) è molto inefficiente, richiede un gran numero di ovociti di buona qualità e, nell'uomo, è associata a limitazioni etiche e logistiche. In alternativa, diversi studi hanno dimostrato che la permeabilizzazione e l'incubazione di cellule somatiche con estratti di ovociti sia di specie inferiori (Xenopus, Drosophila) che di mammiferi (topo, maiale) inducono la loro riprogrammazione evidenziata dall'espressione di marcatori pluripotenze. Tuttavia, questo tipo di studio richiede anche l'uso di un numero molto elevato di ovociti, essendo impraticabile con campioni di origine umana. Proponiamo l'uso di un dispositivo microfluidico per generare liposomi da estratti di ovociti e dirigere la fusione controllata dei singoli liposomi alle cellule somatiche. La nostra ipotesi è che la fusione controllata di un volume critico di estratto di ovocita in ogni cellula somatica possa indurre la sua efficace riprogrammazione. Il profilo epigenetico e trascrittomico delle cellule trattate con ovociti deve essere confrontato con i profili cellulari somatici trattati con liposomi senza il corrispondente estratto, ESC e iPSC. Proponiamo di ottimizzare questo sistema utilizzando cellule del mouse e poi riprogrammare cellule di origine umana con ovociti omologhi. La riuscita attuazione di questa piattaforma ci permetterà di generare cellule staminali di origine umana e l'opportunità senza precedenti di studiare i fattori ovociti responsabili della riprogrammazione. (Italian)
16 January 2022
0 references
Lleida
0 references
Identifiers
PI14_02184
0 references