Q3202991 (Q3202991): Difference between revisions
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Revision as of 17:37, 11 October 2021
Project Q3202991 in Spain
| Language | Label | Description | Also known as |
|---|---|---|---|
| English | No label defined |
Project Q3202991 in Spain |
Statements
44,000.0 Euro
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55,000.0 Euro
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80.0 percent
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1 January 2016
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16 December 2018
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SECRETARIA GENERAL DEL SERVICIO DE SALUD DE CASTILLA-LA MANCHA
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40°44'24.00"N, 2°30'21.35"W
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19130
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Objetivos: 1) Cuantificar la frecuencia y capacidad efectora de linfocitos T citotóxicos (LTC) específicos contra antígenos asociados a hepatocarcinoma (AAH) en el compartimento periférico e intrahepático de pacientes con hepatocarcinoma (HC), 2) Analizar el fenotipo asociado a agotamiento y apoptosis en estas células y su relación con la expresión del cluster miR 17-92, 3) Analizar el efecto del bloqueo in-vitro con anti-miR del cluster miR 17-92 sobre la capacidad efectora de LTC específicos contra AAH. Metodología: En pacientes con HC HLA-A2+ se aislaran células mononucleares de sangre periférica (CMSP) e hígado (CMIH). Se cuantificará la frecuencia de LTC-AAH específicos (NY-ESO-1157, MAGE-A3271, Glypican3144) y LTC-citomegalovirus (CMV) específicos (pp65 495-504) [Grupo control], mediante marcaje de CMSP y CMIH con complejos multiméricos HLA-A2/epítopo y anticuerpos anti-CD8. Se utilizará la técnica TAME ( Tetramer associated magnetic enrichment ) que permite detectar células con frecuencia>10-7 respecto al total de CMSP. En estas células se analizará el fenotipo asociado a agotamiento (CD127, PD-1, TRAF1), apoptosis (Mcl-1, Bim) y se evaluarán las capacidades efectoras (proliferación antígeno específica, producción de interferón-? y citotoxicidad (CD107a)). Estos análisis se realizaran mediante citometría de flujo. Mediante técnica de sorting se aislaran LTC-AAH específicos para obtener su RNA y tras retro-transcripción a cDNA, se amplificará el cluster miR 17-92. Se corelacionará la expresión del cluster miR 17-92 con el fenotipo de agotamiento y apoptosis. En caso de observarse una corelación positiva entre estos fenotipos y el cluster miR 17-92, se bloqueará in-vitro el cluster miR 17-92 con anti-miR apropiados para restaurar la actividad efectora de los LTC-AAH específicos. (Spanish)
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Guadalajara
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Identifiers
PI15_00074
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